大豆球蛋白酶解物清除DPPH自由基活性的研究

以7S和11S大豆球蛋白为原料,用Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶制备大豆球蛋白酶解产物,分别测定其DPPH(1,1-二苯基苦酰基苯肼)自由基清除活力和水解度,从5种蛋白酶中筛选出碱性内切蛋白酶酶解物的清除活力最高,且相同水解时间的水解度最大.选择碱性蛋白酶为最佳水解酶,利用正交试验优化了其最佳水解条件,碱性内切蛋白酶水解7S和11S大豆球蛋白的最佳条件为:温度55℃,pH 8.0,酶用量5%,底物浓度4%.结果表明:在最佳水解条件下,7S大豆球蛋白酶解物的DPPH自由基清除活力比11S大豆球蛋白酶解物的高.     

牡蛎酶解产物的ACE抑制活性和清除自由基活性研究

研究了牡蛎蛋白质分别经537酸性蛋白酶和Alcalase碱性蛋白酶作用所得酶解产物的ACE抑制活性以及对DPPH·、·OH、O2·三种自由基的清除作用。结果表明,两种酶的作用产物都具有一定的ACE抑制活性和清除自由基活性。综合评价工艺条件以及功能实验结果得出,采用537酸性蛋白酶可以简化工艺,对于水解度为16％的酸性蛋白酶酶解产物,蛋白浓度为1mg/mL时,对ACE的抑制率为71.71％;20mg/mL时,对DPPH·、O2·自由基的清除率分别为76.23％、24.36％;8mg/mL时,对·OH自由基的清除率为8947％。相对分子质量分布结果表明,体系主要存在2肽到5肽的多肽类物质,HPLC图谱中对应峰面积约占总面积的76.99％。     

牡蛎酶解产物的ACE抑制活性和清除自由基活性研究

研究了牡蛎蛋白质分别经537酸性蛋白酶和Alcalase碱性蛋白酶作用所得酶解产物的ACE抑制活性以及对DPPH·、·OH、O2·三种自由基的清除作用。结果表明,两种酶的作用产物都具有一定的ACE抑制活性和清除自由基活性。综合评价工艺条件以及功能实验结果得出,采用537酸性蛋白酶可以简化工艺,对于水解度为16％的酸性蛋白酶酶解产物,蛋白浓度为1mg/mL时,对ACE的抑制率为71.71％;20mg/mL时,对DPPH·、O2·自由基的清除率分别为76.23％、24.36％;8mg/mL时,对·OH自由基的清除率为8947％。相对分子质量分布结果表明,体系主要存在2肽到5肽的多肽类物质,HPLC图谱中对应峰面积约占总面积的76.99％。      

野马追类黄酮清除DPPH自由基活性研究

2,2-二苯基-1-苦肼基自由基(2,2-diphenyl-1-picry-hydrazyl radical,DPPH)分析法是一种筛选自由基清除剂的简便方法,本实验首先采用超声提取野马追类黄酮后,然后采用DPPH自由基分析法测定了野马追类黄酮清除自由基作用的强弱,用以评价实验样品的抗氧化能力。结果表明,野马追类黄酮对DPPH自由基有很强的清除活性且清除率与浓度之间有量效关系。在反应的前5m in,清除效果较快,之后变缓,30~50m in后达到平衡。DPPH自由基半清除剂量IC50为10.922μg/mL。     

恒顺香醋DPPH自由基清除活性成分研究

用DPPH法初步研究了恒顺香醋的抗氧化活性。恒顺香醋乙酸乙酯萃取物具有弱自由基清除活性 ,主要清除活性成分为酚性和酸性化合物。与日本黑醋不同 ,恒顺香醋乙酸乙酯萃取物中自由基清除活性物含量相对较低 ,它并不是恒顺香醋主要抗氧化活性部位。恒顺香醋乙醇沉淀上清液DPPH自由基清除活性较强 ,0 .5mg/mL时DPPH自由基清除率为 6 2 .6 7%。     

南瓜子粕蛋白酶解物的制备及清除DPPH活性的研究

以南瓜子粕蛋白为底物,选取碱性蛋白酶为水解酶进行水解反应,制备酶解产物。方法:以水解度DH为指标,通过单因素试验及正交试验确定最佳酶解工艺条件;以DPPH自由基清除率为指标,测定酶解物的抗氧化活性。结果表明,碱性蛋白酶水解工艺条件为:酶解温度55℃,加酶量5%,pH值8.0,料液比4%,反应时间4 h;经6 h酶解后,DPPH.清除率可达到58.89%。     

Alcalase降解水不溶性鸡肉蛋白规律及其产物清除DPPH活性研究

研究了Alcalase降解水不溶性鸡肉蛋白的规律及其产物清除DPPH自由基活性。结果表明,随酶解时间延长,可溶性蛋白质、氨基酸含量不断增加,而肽含量则在水解前8h达到最大,随后不断降低;肽的分子量分布趋势总体表现为大分子量的肽逐渐减少,小分子量肽的含量逐渐增多,肽分子量分布图中肽峰值不断向后推移;Alcalase对分子量在3000～15000Da间的肽段降解能力较弱,水解24h后,这部分肽占总肽量的比值仍为89.93%。水不溶性鸡肉蛋白Alcalase酶解产物有明显的清除DPPH活性,其清除DPPH活性在酶解4h时达到最大,随后不断下降;对于同一酶解时间的产物,浓度越大,其清除DPPH活性越强,但其清除DPPH能力并不与酶解液浓度成倍数关系。      

马氏珠母贝肉酶解产物清除自由基活性的研究

对马氏珠母贝肉的风味酶酶解产物对超氧阴离子自由基、羟自由基及DPPH·的清除效果进行了研究。结果表明,马氏珠母贝肉酶解产物对三种自由基均有一定的清除活性,量效关系明显;其清除O2-·、·OH、DPPH·三种自由基的IC50分别为1·513、1·423、2·618mg/mL,清除自由基能力总体高于牡蛎和海湾扇贝提取物。      

马氏珠母贝肉酶解产物清除自由基活性的研究

对马氏珠母贝肉的风味酶酶解产物对超氧阴离子自由基、羟自由基及DPPH·的清除效果进行了研究.结果表明,马氏珠母贝肉酶解产物对三种自由基均有一定的清除活性,量效关系明显;其清除O2-·、·OH、DPPH·三种自由基的IC50分别为1.513、1.423、2.618mg/mL,清除自由基能力总体高于牡蛎和海湾扇贝提取物.     

马氏珠母贝酶解产物清除自由基活性的研究

利用胰酶、枯草杆菌中性蛋白酶,在50℃、pH为7.0～8.0、料水比1:3的条件下,对马氏珠母贝肉双酶水解4 h制备得到酶解产物及残渣.利用Alcatase 2.4 L、胃蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶对残渣进行再次酶解.结果表明:Alcalase 2.4 L、复合蛋白酶对残渣的酶解效果较好;残渣的复合蛋白酶酶解产物自由基清除活性较强;马氏珠母贝肉酶解产物清除自由基活性较强的组分分子量在1910 u～944 u之间,残渣复合蛋白酶酶解产物清除自由基活性较强的组分分子量在3 472u～834u之间.     

邻二氮菲-Fe~(2+)法测定牦牛乳酪蛋白酶解产物的抗氧化性

采用邻二氮菲-Fe2+法测定牦牛乳酪蛋白酶解产物的抗氧化性。通过单因素分析,确定了试剂的用量及反应条件对样品吸光度及羟自由基清除率的影响。优化得到的反应条件为:1 mL 1.5 mmol/L邻二氮菲,2 mLpH7.4磷酸盐缓冲液,1 mL抗氧化剂,充分摇匀后,加入1 mL 0.5 mmol/L FeSO4溶液,混匀,加1 mL 0.1%H2O2,具塞于38℃反应50 min,于波长536 nm处测定其吸光度。结果表明,改良的邻二氮菲-Fe2+法测定结果重现性好,适于酪蛋白酶解产物抗氧化性的测定。     

不同因素对酪蛋白酶解产物与锌盐螯合效果的影响

本研究采用酶解法制得酪蛋白酶解产物,分析了不同锌源、酶解产物浓度、酶解产物与Zn2+质量比、反应体系pH值、反应温度、螯合时间等因素对酶解产物与锌盐螯合效果的影响,确定了酪蛋白酶解产物与Zn2+螯合的适宜反应条件。研究表明,ZnSO4·7H2O与酪蛋白酶解产物的螯合能力显著高于醋酸锌或氯化锌与酪蛋白酶解产物的螯合能力(p<0.05)。当酶解产物浓度为0.04g/ml、酶解产物与Zn2+质量比为4:1、反应pH值为6.0、反应温度为40℃、螯合时间为20min时螯合效果较好。     

不同因素对酪蛋白酶解产物螯合亚铁盐能力的影响

本研究以干酪素酪蛋白为原料,对影响酪蛋白酶解产物螯合Fe 2 反应的因素进行了初步研究,为获得高效生物补铁剂以预防缺铁性贫血提供理论依据.研究表明,FeSO 4与酪蛋白酶解产物的螯合能力显著高于(NH4)2Fe(SO4)2或FeCl 2与酪蛋白酶解产物的螯合能力(p＜0.05);不同酶解时间获得的酪蛋白酶解产物与FeSO 4的螯合能力不同,7h时获得的酶解产物螯合FeSO4的能力最强;当酪蛋白酶解产物与FeSO 4共同作用10min、硫酸亚铁与酪蛋白酶解产物的质量比为1:2、反应体系pH为6.0,反应温度为40℃时螯合效果较好.     

海湾扇贝酶解产物清除自由基活性的研究

利用双酶(胰酶0.3%和枯草杆菌中性蛋白酶0.8%)。在50℃、pH值7.0～8.0、料水比1:3的条件下,对海湾扇贝肉酶解4h后制备得到产物.该酶解产物对羟自由基的清除活性IC_(50)为2.01 mg/mL,对超氧阴离子的清除活性IC_(50)为9.54 mg/mL,对DPPH自由基的清除活性IC_(50)为5.90 mg/mL。Sephadex G-15(1.6 cm×68 cm)凝胶色谱结果表明,该酶解产物中分子质量分布在1450～288 u,肽链长度在13.2～2.6的组分具有较强的清除羟自由基和DPPH自由基活性。     

辣木籽酶解产物的蛋白回收率及DPPH·清除能力的研究

以辣木籽为原料,采用水酶法制备辣木籽酶解产物;选用酶解产物的蛋白回收率和DPPH·清除能力为指标,通过单因素和响应面试验优化水酶法酶解辣木籽的工艺条件。首先通过单因素试验筛选辣木籽酶解的最佳用酶和酶解时间,单因素试验结果发现:Alcalas2.4L和Ns37071两种酶酶解得到的辣木籽酶解产物具有最佳的蛋白回收率和DPPH·清除能力,其蛋白回收率分别为45.65%和47.65%,DPPH·清除能力分别为99.88和93.89μmol Trolox equiv/100 g;在次基础上进一步采用响应面优化酶解工艺,得其最佳酶解条件为:总加酶量为2.60%,Ns37071占总加酶量的46.00%,酶解24 h,此时辣木籽酶解产物的蛋白回收率为63.69±2.94%,DPPH·清除能力为139.38±0.96μmol Trolox equiv/100 g。上述研究表明:水酶法可以高效酶解辣木籽,酶解产物具有较高的蛋白回收率和较强的DPPH·清除能力。     

荔枝多酚的分离制备及清除DPPH活性

本文对荔枝壳中多酚类物质的分离制备条件及其清除DPPH活性进行研究。荔枝壳用8倍体积(V/W)50%的丙酮溶液室温下浸提2次,每次浸提2h,回收溶剂,荔枝多酚粗提物得率为34.2%。粗提物经AB-8型树脂柱层析纯化,30%乙醇洗脱组分的多酚回收率为86.8%,纯度为30.0%,该组分清除DPPH的IC50值为4.17μg/ml。     

顺磁共振测定姜油树脂的DPPH 自由基清除率

应用电子顺磁共振(ESR)方法测定姜油树脂对DPPH 自由基的清除效果,结果表明：当姜油树脂中姜辣素与DPPH 自由基的物质的量比达到2.0 时,5min 后就检测不出DPPH 自由基;姜辣素与DPPH 自由基物质的量比为0.25 时,可以清除50% 的DPPH 自由基。     

具有DPPH自由基抑制活性的蚕蛹蛋白酶解液脱色工艺优化

利用木瓜蛋白酶水解的蚕蛹蛋白酶解液作为研究原料,根据响应面试验设计方法,以脱色率和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除保持率作为响应面指标,得最佳脱色工艺条件为：活性白土、碱性钙基膨润土和膨润土按照质量比1∶1∶1混合为脱色剂、脱色剂用量1.9%、酶解液质量浓度9.61 mg/mL、pH 7.2、水浴温度60 ℃、振荡转速150 r/min、脱色时间1.0 h。在此条件下实验,得出DPPH自由基清除保持率84.5%、脱色率94.5%,与预测值相比误差值均小于5%,说明采用响应面试验设计方法对蚕蛹蛋白酶解液脱色体系进行优化具有较好的可靠性。最后再对脱色前后酶解液中各氨基酸含量进行比较,发现经脱色处理后酶解液中对DPPH自由基抑制有显著作用的疏水性氨基酸和芳香族氨基酸含量减少。     

Effects of Ultrasonic Treatment on the Physicochemical Properties and DPPH Radical Scavenging Activity of Polysaccharides from Mushroom Inonotus obliquus

ABSTRACT: An ultrasonic technique was employed to extract polysaccharides from Inonotus obliquus (UPS). The effects of ultrasonic conditions on the recovery and 1, 1-diphenyl -2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity of UPS were evaluated. The physicochemical properties of UPS were analyzed by differential scanning calorimetry (DSC), scanning electron microscopy (SEM), and UV-visible spectrophotometry. Molecular weights of UPS were determined by gel permeation chromatography (GPC). The optimal ultrasonic conditions to obtain the highest recovery of polysaccharides were 80 min, 75 °C, and 100 w. While the optimal ultrasonic conditions to obtain the strongest DPPH scavenging activity of polysaccharide were 80 min, 95 °C, and 160 w. The differences were found by DSC, SEM, GPC analysis and no apparent differences were found from the UV-vis spectra of the polysaccharides after the ultrasonic treatment, which indicated that ultrasonic treatment might cause the physicochemical changes in UPS conformation and degradation of UPS chain but not the main groups. Ultrasonic technique was an effective method to extract bioactive polysaccharides from I. obliquus (UPS). Practical Application: Polysaccharides from Inonotus obliquus exhibited many biological activities including antitumor, antioxidant, hypoglycemic, immune-stimulating effects, and so on. Ultrasonic treatment is now an usual proceeding technique for the extraction of some bioactive constituents. But there was no information about the effects of ultrasonic treatment on the physicochemical properties and DPPH radical scavenging activity of polysaccharides from I. obliquus until now. Ultrasonic technique was an effective method to extract bioactive polysaccharides from I. obliquus (UPS) according to this study.