产壳聚糖酶菌株的筛选及其发酵产酶条件的研究

从采集的土样中分离得到一株产壳聚糖酶的菌株,对该菌株发酵产酶条件进行了初步研究.确定其最适的产酶培养基为(%):壳聚糖1.0,葡萄糖0.1,酵母提取物0.5,(NH4)2SO4 1.0,K2HPO4 0.07,KH2PO4 0.03,NaCl 0.5,MgSO4·7H2O 0.05,起始pH值6.0;最适产酶培养条件为:装液量为70 mL/250 mL,接种量3%,30℃、150 r·min-1培养72 h.在最适产酶条件下,该菌株发酵液中壳聚糖酶活力最高达到1.96 U·mL-1.     

产壳聚糖酶微生物的筛选及产酶条件的优化

目的 从土壤中筛选能降解壳聚糖的微生物,并优化其产酶条件。方法利用平板筛选法对采集的土壤中的微生物进行富集培养、初筛和复筛,得到能降解壳聚糖的菌株,并对降解壳聚糖能力最强的菌株进行发酵培养,优化产酶条件。结果筛选出3株产壳聚糖酶菌株,编号为C-01、C-02和C-03,其中,C-01、C-02为细菌,C-03为霉菌。C-01菌株产酶能力最强,其最适产酶条件为:以1%粉末壳聚糖+0.1%葡萄糖为碳源,0.5%(NH4)2SO4+0.5%蛋白胨为氮源,培养基初始pH值8.0,培养温度30℃,菌株接种量2.0%,培养时间48 h。在最适条件下,壳聚糖酶活力可达7.78 U/ml。结论已筛选出1株高产壳聚糖酶的菌株,并优化了其产酶条件,为壳寡糖的生产及应用奠定了基础。     

响应面法优化壳聚糖酶产生菌Mitsuaria sp.K1的产酶发酵条件

壳聚糖（chitosan）及其降解产物因具有优良的物理特性和生物活性而被广泛关注。通过平板透明圈初筛、摇瓶复筛方法,从青岛海岸土壤中分离筛选到1株产壳聚糖酶活性较高的细菌Mitsuaria sp.K1,并对其产酶发酵条件进行了单因素试验和响应面优化分析试验。结果表明：在最适培养基组成（1%粉末壳聚糖、0.5%硝酸钾、0.22%KH2PO4、0.1%Na2HPO4、0.15%KCl、0.05%MgSO4?7H2O）和最佳培养条件（培养温度25.2 ℃,培养时间25.4 h,起始pH值6.5,接种量3%,装液量100 mL/500 mL摇瓶,160 r/min）下,Mitsuaria sp.K1的发酵粗酶液最高酶活平均达11.56 U/mL,比优化前的2.17 U/mL提高了4.32倍。与前人研究结果相比,该菌发酵产酶温度降低了5～10 ℃,产酶周期缩短了23～47 h,因此具有工业发酵应用价值。     

产壳聚糖酶菌种的选育和产酶条件的优化

从自然界中采集土壤样品,经筛选获得了一株产高活性壳聚糖酶的菌种,经初步鉴定属于青霉属。对该菌种进行紫外光诱变提高了它的产酶能力。通过Ｐｌａｃｋｅｔｔ－Ｂｕｒｍａｎ设计初步优化了产酶条件,并研究了培养温度、摇床转速、培养基组成和装液量等培养条件对菌种产酶能力的影响,确定了该菌种的最佳产酶条件。在最佳培养条件下,壳聚精酶活最高可达２１６．６Ｕ／ｍｌ．     

AS1.398中性蛋白酶的固定化研究

利用壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂，对AS1．398中性蛋白酶进行了固定化研究，固定化反应的最佳条件是采用1％的戊二醛浓度，壳聚糖和戊二醛的交联反应时间为4h，加入酶固定化反应12h，固定化酶的最适温度35℃，最适pH值8．0。得到的固定化酶的活力回收平均为82．5％，固定化酶的稳定性能好于游离酶。     

普鲁兰酶产生菌的筛选、鉴定及其发酵条件优化

从土壤中分离出一株产普鲁兰酶活性较高的菌株Z1,初步鉴定为盐球菌（Halococcus sp．）。研究了其产酶最适条件,确定产酶最适碳源为糯米淀粉、最适氮源为酵母膏＋蛋白胨,优化的培养条件如下：发酵初始pH值为6．0,接种量为14％,500mL摇瓶装液量为150mL,转速为180r·min^-1,培养温度为30℃,培养时间为52h。在优化条件下产酶量达到最高峰,酶活力可达5．06U·mL^-1。     

酶催化合成L-半胱氨酸产酶培养基及产酶条件的研究

假单胞菌(Pseudomonas sp.)TS1138经DL-2-氨基-△2-噻唑啉-4-羧酸(DL-ATC)的诱导,在菌体内能产生催化该诱导物生成L-半胱氨酸的酶系.对产酶培养基及产酶条件进行了研究,得出DL-ATC的最适添加量为0.5%,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为尿素,最适培养温度为27～29℃,最适摇瓶装液量为40mL.根据摇瓶优化结果,进行了7 L罐试验,酶活力最高达1 780 U/mL.     

卷枝毛霉发酵产壳聚糖酶的条件优化

以壳聚糖为诱导物,诱导卷枝毛霉产生壳聚1糖酶,并对产酶备件进行了优化。通过单因素实验确定最佳产酶条件为：壳聚糖浓度0．8g·L-1、培养温度40℃、培养基pH值5．5、培养时间84h、摇床转速180r·min-1。     

海洋源Bacillus cereus CAMT2377产葡萄糖氧化酶过程分析及优化

目的提高海洋细菌Bacillus cereus CAMT2377产葡萄糖氧化酶活力。方法对碳源、氮源、无机盐等培养基组成及装液量、接种量、培养温度、发酵时间、转速等培养条件进行筛选,通过单因素分析和统计优化提升菌株产酶性能。结果 Bacillus cereus CAMT2377产葡萄糖氧化酶适宜培养基成分为1%麦芽糖、0. 5%鱼粉蛋白胨、0. 05%CaCl_2,在此培养基中接种8%体积比的种子液后,于31℃,20%装液量,200 r/min条件下培养60 h,产葡萄糖氧化酶活力可在10 U/mL以上;响应面优化产酶过程获得最适参数为温度35℃,时间82 h,转速247 r/min,优化条件下产酶活力提高至15 U/mL以上,较优化前提高了50%。结论通过单因素分析和响应面优化,提高了海洋细菌Bacillus cereus CAMT2377产葡萄糖氧化酶的活力。     

精氨酸脱亚胺酶发酵条件研究

对一种新型肿瘤增殖抑制酶类一精氨酸脱亚胺酶的发酵生产工艺进行了研究。运用单因子扫描方法,考察了不同碳源、氮源等影响因子对粪肠球菌（Enterococcus faecalis）NJ402产精氨酸脱亚胺酶的影响。优选出其较佳培养基组分为（g／L）;蔗糖15,蛋白胨5,酵母膏5,牛肉膏2．5,NaCl3,KH2PO42,MgSO40．01,MnSO40．0025,L-精氨酸15;接种量以4％～5％为宜,最佳培养温度是37℃,最适起始pH为7．5。100L发酵罐实验表明,发酵到10h时,菌量与比酶活量均为最大,分别为40mg／mL和2．57U／mL。     

Antifungal activity of chitosan against Fusarium oxysporum f. sp. cubense

The in vitro antifungal activity of chitosan against Fusarium oxysporum f. sp. cubense Race 4 (FocR4) the causal agent of banana wilt was investigated. Chitosan at all concentrations tested reduced the hyphal growth of FocR4 on potato dextrose agar media and recording maximum inhibition of 76.36% at 8 mg/mL. The inhibitory effect was found to increase as chitosan concentration increases. The 50% effective concentration value was estimated by probit analysis, and it was 1.4 mg/mL. Chitosan was more effective in potato dextrose broth where it completely inhibited the mycelial growth of FocR4 at all concentrations tested. Chitosan inhibited the sporulation of FocR4 by a maximum of 96.53% at 8 mg/mL chitosan, and 100% inhibition for spore germination was recorded at all concentrations tested. Chitosan at concentrations of more than 1.6 mg/mL was also found to induce morphological changes in FocR4 characterized by agglomeration of hyphae, abnormal shapes, vesicles, or empty cells devoid of cytoplasm in the mycelia. © 2010 Wiley Periodicals, Inc. J Appl Polym Sci, 2011     

用丝状真菌制备壳聚糖的研究

对采用生物发酵法以雅致放射毛霉为原料制备壳聚糖进行了研究。结果发现在反应温度2 8℃、摇床转速 2 5 0r/min、pH =7 4～ 7 6、培养时间 45h的条件下壳聚糖对其菌丝体产率为1 5 6 8% ,产品结构经IR和XRD确认 ,脱乙酰度可达 85 %～ 90 %。     

反相高效液相色谱法直接测定离子液体中咪唑杂质含量

研究了高效液相色谱法测定离子液体中的杂质(4-甲基咪唑)含量的测定方法。在不同色谱条件下,分离效果不同。在AllsphereODSC18色谱柱上,以水-甲醇为流动相,两者流速比为水∶甲醇=1∶9,流速为1.0mL/min,在215nm处进行紫外检测,离子液体能与4-甲基咪唑很好的分离。另外,在HypersilBDSC18色谱柱上用类似的条件分离效果也较好。采用该法的线性范围,检出限分析考察,结果表明,其灵敏度高、定量准确、重现性好,适合于离子液体中4-甲基咪唑这种杂质含量的测定。     

粗叠合汽油生产柴油催化剂催化性能研究

以粗叠合汽油为原料,采用自制的催化剂,进行叠合生产柴油实验室研究.确定的催化剂载体为中孔γ-Al2O3,考察了金属负载量、助催化剂对催化性能的影响,同时,进行了催化剂制备条件的研究.实验结果表明,在Ni质量分数为8％、助催化剂Sn质量分数为1.0％,催化剂浸渍时间为6h,焙烧温度和焙烧时间分别为500℃、4h的条件下,所制备得到的催化剂的催化性能、稳定性和再生性能最佳.通过实验室运转证明,在反应压力1.0 MPa、反应温度200℃、空速1.0 h-1的条件下,所得叠合柴油的体积收率为45.3％,且符合-35#柴油质量标准.     

微波助离子液体中TiO_2/PEMA复合材料的制备及性能

在离子液体([Bmim]BF_4)中采用微波辐射加热法合成了TiO_2/PEMA复合材料,用XRD、SEM和IR对其进行表征。通过测试复合材料在乙酸乙酯中的吸光度及对甲基橙溶液的降解率,考察离子液体用量、微波功率、反应温度和反应时间等因素对复合材料分散性和光催化活性的影响。结果表明,制备TiO_2/PEMA复合材料的最佳条件:离子液体2.0 mL,钛酸丁酯3.4 mL,甲基丙烯酸乙酯1.0 mL,微波功率600 W,反应温度70℃,反应时间45 min。制备的复合材料亲油性大大提高,在乙酸乙酯中有较好的分散性,该复合材料不需要高温焙烧就具有较高的光催化活性,紫外光照射1.5 h,甲基橙降解率为99.4%。     

纳豆激酶液体发酵条件的优化

以纳豆枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)为出发菌,研究了其液体发酵产生纳豆激酶(Nattokinase,NK)的培养基组成(碳源、氮源、碳氮比和金属离子组成)和培养条件(温度、初始pH值、发酵时间、接种量和装液量)对产酶量的影响.结果表明,液体发酵培养基的最佳碳源为麦芽糖,浓度为1.0%;最...     

一株耐NMMO纤维素酶菌株的筛选及发酵优化

在常规筛选方法的基础上,利用在富集培养基中加入10 g/L NMMO,从土壤中筛选获得一株耐NMMO的高活性纤维素酶菌株Galactomyces sp. CCZU11-1。经研究,最适产酶培养条件为：碳源为甘蔗渣（5 g/L）,氮源为(NH4)2SO4（5 g/L）,表面活性剂为Tween-80（8 g/L）,培养温度为30 ℃,初始培养pH值为5.5。在此条件下菌株培养7天后,FPA及CMCase分别为13.5 IU/mL和24.6 IU/mL。在培养体系和反应体系中分别加入200 g/L NMMO,Galactomyces sp. CCZU11-1纤维素酶仍具有良好的活性,表明其具有较高的耐NMMO性能及应用前景。     

5-甲基吡嗪-2-羧酸的HPLC分析研究

建立了利用阴离子交换柱高效液相色谱法分析5-甲基吡嗪-2-羧酸的方法。色谱柱为Hyper-sail SAX强阴离子交换柱,以0.020mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH值=2.50):乙腈=95:5为流动相,流速为:1.0 mL/min,紫外检测器波长为276nm,外标法定量。结果表明:5-甲基吡嗪-2-羧酸在0.016~0.16g/L范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系(R2=0.9995),加标回收率为98.12%~102.19%。此法具有灵敏度高、准确可靠、操作简便、快速,可用于5-甲基吡嗪-2-羧酸产品的检测和中间控制分析。     

2-甲基-3-喹啉甲酸的酯化反应研究

以2－甲基－3-喹啉甲酸为原料,在浓硫酸作为催化剂的条件下与乙醇发生酯化反应合成了标题化合物。对它的合成工艺条件进行了探索和优化,优化的最佳反应条件是2－甲基－3－喹啉甲酸,乙醇和浓硫酸的投料比为1．0mmol：1mL：0．2mL;反应时间为2h,收率为68．1％。优化后的合成方法具有反应时间短、产率较高等优点。