以钙色素线性扫描极谱法测定血清白蛋白的研究及分析应用

在pH4．0的Britton-Robinson(B—R)缓冲溶液中钙色素与蛋白质能够发生相互作用,生成一种非电活性的超分子复合物,使钙色素在溶液中的游离浓度降低,从而造成钙色素于-0．31V处产生的二阶导数极谱还原峰电流下降而峰电位不变。在优化的结合反应条件和电化学测定条件下,峰电流的下降值同人血清白蛋白(HSA)的浓度在4．0—70．0mg／L范围内呈线性关系,其线性回归方程为△Ip““／nA=69．93c(mg／L)-192．90,(r=0．992)。将该方法应用于实际人血清样品的测定,结果与经典的考马斯亮蓝G-250光度法一致,回收率令人满意。此方法还可应用于牛血红蛋白、卵清白蛋白等蛋白质的测定。     

吡啰红B作为电化学探针线扫极谱法测定透明质酸

在pH 3.5的Britton-Robinson(B-R)缓冲溶液中,吡啰红B在-1.01 V(vs.SEE)处有一个灵敏的线性扫描二阶导数极谱还原峰,当加入一定量的透明质酸后,由于此条件下吡啰红B带正电荷,而透明质酸带负电荷,两者之间通过静电引力作用形成一种生物超分子复合物,导致溶液中吡啰哕红B的游离浓度降低,相应的还原峰电流降低而峰电位基本保持不变.优化了结合反应条件和电化学测定条件,考察了常见干扰物质对测定的影响.在最佳实验条件下,还原峰电流的降低值与透明质酸的浓度在30.0～1000. mg/L范围内呈线性关系,线性回归方程为△ip"(nA)=10.42 c(mg//L)-224.69(n=11,r=0.993),将该方法应用于透明质酸模拟样品的测定,结果令人满意.     

偶氮胭脂红G结合共振光散射法测定人血清样品中的总蛋白

研究了在pH为2.5的BR缓冲酸性介质中,偶氮胭脂红G与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)、鸡蛋白蛋白(OVA)及免疫球蛋白(γ-IgG)等蛋白质作用产生共振光散射(RLS)增强信号,最大散射峰位于594nm处。在最佳实验条件下,增强RLS强度在594 nm处与蛋白质浓度呈线性关系,检出限在0.025~0.406μg/mL之间,生物体液中大部分常见物质均不产生干扰。该法应用于人血清样品测定,测定结果与考马斯亮蓝法一致。     

不同pH条件下槲皮素与牛血清白蛋白相互作用的电化学研究

应用线性扫描伏安法讨论了牛血清白蛋白(BSA)等电点pI4.8两侧,即:pH 6.2KH2PO4-NaOH缓冲液及pH4.1 HAc-NaAc缓冲液中,槲皮素(QUE)、QUE-BSA体系的电化学行为,研究了不同pH条件下QUE与BSA的相互作用。在NaOH活化玻碳电极上,QUE均产生一灵敏氧化峰,峰电流较裸玻碳电极增加显著,加入BSA后峰电流降低,峰电位移动不明显,且QUE、QUE-BSA体系的电极反应均为扩散控制的不可逆过程。计算了两种介质条件下,QUE与BSA的结合数均为2,结合常数分别为2.82×1010L/mol、7.94×107L/mol,结果表明介质条件对相互作用有很大影响。     

DBM-偶氮胂分光光度法测定血清白蛋白

研究了DBM-偶氮胂(DBM-ASA)与血清白蛋白(BSA)的反应。在室温下,于pH 2.9的Britton-Robinson缓冲溶液中及乳化剂OP存在下,DBM-ASA与血清白蛋白复合物最大吸收峰位于530 nm处,复合物表观摩尔吸光系数εmax=5.73×105L/(mol.cm),BSA在浓度10.0~75.0 mg/L范围内呈良好线性关系。加入乳化剂OP可显著提高体系灵敏度与稳定性。加入少量乙醇能提高反应灵敏度。用本法测定了人血清样品中的蛋白质含量,结果满意。     

锌（Ⅱ）-2,2′-联吡啶络合吸附波法测定血清白蛋白

在pH值6.3的HAc-NaAc介质中,血清白蛋白使锌(Ⅱ)-2,2′-联吡啶络合物在-1.20 V(vs.SCE)处的络合吸附波还原峰电流降低,峰电流降低值与加入的牛血清白蛋白(BSA)或人血清白蛋白(HSA)的浓度在一定范围内呈线性关系。BSA和HSA的线性范围分别为0.5-40.0 mg.L-1、0.5-50.0 mg.L-1,检出限均为0.2 mg.L-1。应用该法测定了人血清样品中总蛋白含量,结果令人满意。     

结晶紫与蛋白质相互作用的电化学行为的研究

结晶紫(CV)是一种三苯甲烷类染料,常用作生物染色剂和无机离子的显色剂,在pH4.5的NaAc-HAc缓冲液中结晶紫与蛋白质能够相互作用形成复合物,使结晶紫在-0.82 V(vsSCE)处的极谱还原峰峰电流下降,在最佳条件下,峰电流的下降值同牛血清白蛋白(BSA)的浓度在0.5~35mg/L范围内呈线性关系,其线性回归方程为Δip=38.7 728.84CBSA,相关系数r=0.998(n=10),检出限为0.2 mg/L。可将该方法应用于血清样品的测定,结果满意。     

锌(Ⅱ) - 2,2''-联吡啶络合吸附波法测定血清白蛋白

在pH值6.3的HAc-NaAc介质中,血清白蛋白使锌(Ⅱ) - 2,2′-联吡啶络合物在-1.20 V(vs.SCE)处的络合吸附波还原峰电流降低,峰电流降低值与加入的牛血清白蛋白(BSA)或人血清白蛋白(HSA)的浓度在一定范围内呈线性关系.BSA和HSA的线性范围分别为0.5～40.0 mg·L-1、0.5～50.0 mg·L-1,检出限均为0.2 mg·L-1.应用该法测定了人血清样品中总蛋白含量,结果令人满意.     

孔雀石绿与蛋白质相互作用的电化学行为的研究

在pH 4.7的NaAc-HAc缓冲液中,孔雀石绿(MG)能与牛血清白蛋白相互作用形成复合物,使孔雀石绿在-0.72 V(vsSCE)处有一极谱还原峰峰电流下降,在最佳条件下,峰电流的下降值同牛血清白蛋白(BSA)的浓度在0.5～20 mg/L范围内呈线性关系,其线性回归方程为Δip(nA)=-4.78+41cBSA(mg/L),相关系数r=0.996(n=10),检出限为0.4 mg/L.可将该方法应用于血清样品的测定,结果满意.     

单扫描极谱法快速测定蛋白质的研究

在pH 4.7的HAc-NaAc缓冲溶液中,邻二氮菲与蛋白质相互作用,使邻二氮菲在-0.99 V(vs.SCE)处的还原峰电流下降,电流降低值与所加的蛋白质(人血清白蛋白、牛血清白蛋白、溶菌酶)的量在一定范围内呈线性关系,线性范围分别为2.0~22 mg/L,2.0~20 mg/L和4.0~26 mg/L;检测限分别为1.0 mg/L,1.0 mg/L,2.0mg/L。运用该方法测定了人血清中白蛋白的含量,结果满意。     

Studies of double layer capacitance and electron transfer at a gold electrode exposed to protein solutions

Electrochemical impedance spectroscopy (EIS) was used to investigate the electrochemical behaviour of a gold electrode exposed to proteins prepared in phosphate buffer. Exposure to solutions of human serum albumin (HSA) and immunoglobulin G (Ig.G) resulted in a decrease of the double layer capacitance (C_dl) and an increase in the charge transfer resistance (R_ct) at the gold electrode solution interface. The greatest capacitance decrease for both proteins was observed when exposure occurred at or more positive to the electrode open circuit potential (OCP). Exposure to Ig.G resulted in a greater decrease in capacitance as compared to HSA under identical conditions. These capacitance and charge transfer resistance variations were attributed to the formation of a proteinaceous layer on the electrode surface during exposure.     

中性红循环伏安法测定肝素

在pH 6.0的Britton-Robinson(B-R)缓冲溶液中,用循环伏安法研究了中性红(NR)与肝素(Hep)的相互作用。在最佳实验条件下,NR与Hep通过静电作用形成复合物,导致溶液的还原峰电流明显降低,其峰电流差值(Δip)与Hep的浓度成正比,据此建立了一种测定Hep浓度的新方法,测定的线性范围为2~20μg/mL,相关系数r=0.998 3,检测限(3σ)为1.05μg/mL。该法应用于注射液中肝素舍量的测定,结果满意。     

苦胺酸偶氮变色酸与血清蛋白质相互作用的分光光度研究

在 p H1 .2的 Clark- Lubs缓冲介质中 ,苦胺酸偶氮变色酸与血清蛋白质作用在室温下能迅速结合形成紫色的复合物 ,其最大吸收波长为 62 5 nm,比苦胺酸偶氮变色酸本身红移了 1 0 0 nm。用分光光度法研究了该结合反应的最佳条件 ,建立了一个测定蛋白质的新方法 ,测定的表观摩尔吸光系数 ε62 5达 2 .72 8× 1 0 5L/mol·cm(牛血清白蛋白 ) ,线性范围为 1 0～ 1 5 0 mg/L。所拟方法简便、快速、选择性好、灵敏度高 ,应用于人血清中总蛋白的测定 ,结果与考马斯亮蓝 G- 2 5 0法一致。     

Cu(Ⅱ)-SCN~-二元配合物与蛋白质的相互作用的电化学研究

用电化学方法对Cu(Ⅱ)-SCN-二元配合物与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用进行了研究,发现在0.04 mol/L的高氯酸介质中,Cu(Ⅱ)-SCN-二元配合物能与牛血清白蛋白生成一种非电活性的复合物,导致Cu(Ⅱ)-SCN-二元配合物的还原峰电流降低,峰电流降低值Δip如在一定范围内与BSA的浓度成线性关系,线性范围为0.5~5.5 mg/L,相关系数为0.994,检测限为0.5mg/L,所以该法可用于蛋白质含量的测定。     

Aqueous Biphasic Hydroformylation Catalysed by Protein‐Rhodium Complexes

The water‐soluble complex derived from Rh(CO)₂(acac) and human serum albumin (HSA) proved to be efficient in the hydroformylation of several olefin substrates. The chemoselectivity and regioselectivity were generally higher than those obtained by using the classic catalytic systems like TPPTS‐Rh(I) (TPPTS=triphenylphosphine‐3,3′,3″‐trisulfonic acid trisodium salt). Styrene and 1‐octene, for instance, were converted in almost quantitative yields into the corresponding oxo‐aldehydes at 60 °C and 70 atm (CO/H₂=1) even at very low Rh(CO)₂(acac)/HSA catalyst concentrations. The possibility of easily recovering the Rh(I) compound makes the system environmentally friendly. The circular dichroism technique was useful for demonstrating the Rh(I) binding to the protein and to give information on the stability in solution of the catalytic system. Some other proteins have been used to replace HSA as complexing agent for Rh(I). The results were less impressive than those obtained using HSA and their complexes with Rh(I) were much less stable.     

紫外分光光度法测定鞣花酸含量的研究

研究了用紫外分光光度法测定鞣花酸含量的一种新方法。其技术关键是将鞣花酸试样溶于适量稀碱配制分析试液,从而解决了鞣花酸不溶于水和难溶于多数有机溶剂的难题。确定了鞣花酸的紫外特征吸收峰的测定波长为 357 nm;验证了新方法在测定条件下试液浓度与吸光度之间的线性关系,并测算了测量误差;进行了新方法测定值的稳定性试验。研究结果表明,该方法具有操作较为简便、耗用溶剂少、分析成本较低、测定结果误差小等特点,适用于鞣花酸工业生产质量监控的产品含量分析。     

焦性没食子酸含量测定方法的研究

研究了用紫外分光光度法测定焦性没食子酸含量的一种新方法。通过加入甲酸作为焦性没食子酸试液的抗氧化保护剂,解决了由于试样的氧化而导致测定值不稳定的问题。确定了配制试液时甲酸溶液(0.1 mol/L)的适宜加入量为10 mL;试液的紫外吸收测定波长为266nm。验证了新方法在测定条件下试液浓度与其吸光度之间的线性关系,并测算了测量误差。研究结果表明,新方法具有操作简便、成本低廉、测定值稳定等特点,适用于焦性没食子酸工业生产的产品含量分析。     

A new sensor for the simultaneous determination of paracetamol and mefenamic acid in a pharmaceutical preparation and biological samples using copper(II) doped zeolite modified carbon paste electrode

A new chemically modified electrode is constructed based on a copper(II) doped zeolite modified carbon paste electrode (Cu²⁺Y/ZMCPE). It is demonstrated that this novel sensor could be used for the simultaneous determination of the pharmaceutically important compounds paracetamol (PAR) and mefenamic acid (MEF). The measurements were carried out using the differential pulse voltammetry (DPV) method. The prepared modified electrode shows voltammetric responses of high sensitivity, selectivity and stability for PAR and MEF under optimal conditions, which makes it a suitable sensor for simultaneous submicromolar detection of PAR and MEF in solution. The oxidation peak current for PAR in Briton Robinson buffer (pH = 10) was measured at various concentrations between 0.25 and 900 μM. (The detection limit was 0.1 μM and S/N was 3.) It proved linear (the correlation coefficient was 0.9987). For the MEF a linear correlation between oxidation peak current and concentration of MEF over the range 0.3–100 μM, with a correlation coefficient of 0.9991 and a detection limit of 0.04 μM, was obtained. The analytical performance of this sensor has been evaluated for the detection of PAR and MEF in human serum, human urine and a pharmaceutical preparation.