125I-TOC和125I-F-PGA放射化学纯度的测定

为比较3种测定¹²⁵I标记的奥曲肽（TOC）和叶酸-青霉素酰化酶复合物（F-PGA）的放射化学纯度（RCP）的方法是否具有一致性，采用Iodogen法对TOC和F-PGA进行放射性碘标记，并用高效液相色谱法（HPLC）、三氯醋酸（TCA）沉淀法和纸层析法测定标记物的放射化学纯度（RCP），其中TCA沉淀法设4种蛋白浓度以观察其对RCP测定的影响。结果表明，HPLC和纸层析法均能有效分离标记物和游离碘，且HPLC测定这种标记物的RCP最为精确可信。在TCA沉淀法中，用0.2%的小牛血清白蛋白（BSA）测得的RCP最低,而用其它3个BSA浓度测得的RCP则无明显差异（P＞0.05）；当RCP＜10%时，TCA沉淀法与纸层析法测得的RCP间无明显差异（P＞0.05），而要高于HPLC（P＜0.01）；当RCP＞10%时，对¹²⁵I-TOC而言，TCA沉淀法要略低于HPLC和纸层析（P＜0.05），但后2种方法无明显差异（P＞0.05），且对¹²⁵I-F-PGA而言，3种方法无明显差异（P＞0.05）。3种方法两两之间显著相关（r=0.996～0.999，P＜0.001）。     

125I示踪法检测西夫韦肽在生物体内的代谢过程

采用 Iodogen法标记了西夫韦肽(sifuvirtide)，并用S-100 HR凝胶柱分离纯化标记物。125I-sifuvirtide放化纯度＞99.0%，比活为3.9 GBq•g-1；标记后的蛋白仍具有一定生物活性。三氯醋酸(TCA)沉淀法测定125I-sifuvirtide在生物样品中含量，血浆中125I-sifuvirtide 的放射性活度为286.5-26125.5 Bq•mL-1时，线性为0.9998±0.0005，回收率为72.3%±6.9%。猕猴静脉和皮下推注125I-sifuvirtide后，血浆TCA酸沉放射性浓度时间曲线符合二房室模型；皮下给药后平均消除半衰期为95.83 h，达峰时间平均为3.35 h，平均绝对生物利用度为85.2%。     

外周苯二氮卓受体示踪剂131I-CLINDE的合成和标记

本文报道CLINDE改进的合成方法及其同位素131I-标记.标记前体由5-氯-2-氨基吡啶与溴代酮酰胺缩合制得.标记产物经三烷基锡化、过氧化氢-碘脱锡化而得.产物经反向HPLC分离纯化.结果显示,标记前体总收率30.8%,标记物放化得率80%,TLC和HPLC检测放化纯度大于98%.表明该法简便易行,放化得率好,产物纯度(包括放射化学纯度)高.     

Iodogen法~(125)I标记单克隆抗体10D9

采用Iodogen法,选择最佳标记条件进行12525I标记单克隆抗体10D9.标记产物用Sephadex G-50分离纯化,三氯醋酸(TCA)法测定标记率和放化纯,并对标记物的免疫活性及稳定性进行分析.结果显示,125I标记10D9的最佳条件为Iodogen用量10μg、10D9用量20μg、加入Na125I22.2MBq、室温反应8min,125I-10D9的标记率为(84.10±3.18)%,放化纯为(98.49±1.14)%,比活度为933.51 MBq/mg;125I-10D9与Daudi细胞的特异性结合率为(23.21±1.14)%;标记物加到含1%BSA的PBS中放置3W后放化纯度仍>90%.结果表明:Iodogen法125I标记10D9标记率和放化纯高,方法简便,标记物的稳定性好且能较好地保持其免疫活性.     

125I标记紫杉醇的方法

摘要:采用改良的氯胺T法,先用稳定的NaI与紫杉醇作用,再以放射性Na125I标记紫杉醇(paclitaxel),建立了125I标记紫杉醇的方法。采用纸层析及HPLC测定标记产物的标记率、纯化后放射化学纯度,采用纸层析测定标记产物在不同温度、储存溶剂条件下的体外稳定性,红外光谱鉴定产物。改良Ch-T法所得标记产物的标记率与硝酸氧化法和传统氯胺T法相比较。结果显示,采用改良氯胺T法标记率约63.1%±5.7%,放射化学纯度约96.3%±1.3%;标记物储存于4℃生理盐水或乙醇储存体系中24h、120h,放化纯度分别＞95%和约90%;在血浆中稳定性也较好,在4℃ 、37℃放置24h,放化纯度分别为92.3%±0.4%、89.5%±0.6% 。以上结果表明,改良氯胺T法标记紫杉醇方法简便,标记率高,标记产物稳定性较好,能够满足放射性示踪实验的要求。     

聚乙二醇化重组人白细胞介素-6的放射性碘标记条件探讨

采用双相氯胺-T法对聚乙二醇化重组人白细胞介素-6(PEG-rhIL-6)进行碘化标记,比较了双相氯胺-T法碘化标记PEG-rhIL-6在不同反应条件下的标记效果.用三氯乙酸沉淀法和γ计数探测仪测定标记物的标记率、超滤离心法对标记物进行分离纯化、三氯乙酸沉淀法鉴定标记物的放化纯度、SDS-PAGE电泳分析标记蛋白断链损伤情况.结果表明,采用该方法标记PEG-rhIL-6,在100μL、pH值7.4的反应体系中,控制反应蛋白量为25μg、浓度20g/L的氧化剂15μL、室温反应时间40-50 min,可获得较高的标记率和放化纯度,比放射性适中,标记效果比较理想.     

125I标记重组L-天冬酰胺酶

重组L－天冬酰胺酶样品经SDS－PAGE和反相HPLC检测分别为单一蛋白带和单一峰，采用氯胺T法对重组L－天冬酰胺酶进行125I标记，再经Sephadex G-25柱分离纯化，收集第一峰放射活性最高的溶液，经反相HLPC分离，γ－计数器检测，125I重组L－天冬酰胺酶的放化纯度为95％，双向免疫扩散法检测结果表明，标记物具有与重组L－天冬酰胺酶一样的生物活性。     

14C-绿磺隆的多方法鉴定

本文采用反相高效液相色谱法（HPLC）测定了^14C-绿磺隆的化学纯度，并分别用高效液相色谱与液体闪烁测量仪联用法（HPLC-LSC）以及薄层层析-同位素成像分析法（TLC-Isotopeimaging analysis,TLC-IIA)测定了^14C-绿磺隆的放射化学纯度。实验结果显示，合成的^14C-绿磺隆的化学纯度为94.4%，HPLC-LSC和TLC-IIA法测到的放射化学纯分别为94.7%和94.9-95.2%，所得结果较一致。合成的^14C-绿磺隆的化学结构用LC-MS法进行了验证，结果表明，该^14C-绿磺隆样品与绿磺隆标样的HPLC保留时间相同，总正负分子离子峰和选择离子检测推断的分子量均为357，与绿磺隆的分子量相同。     

3′-125I-BTA-0的直接标记法及其晶体结构

为了研制123I标记的、诊断阿尔茨海默病的苯并噻唑类Aβ斑块显像剂,采用直接标记法合成了3′-125I-BTA-0,并探索了125I直接标记BTA-0的实验条件,最佳条件为:反应时间25 min, pH值约为2.5,反应温度约为60 ℃, 配体最佳用量为0.1 mL 0.6 g/L BTA-0溶液(含50%乙醇),氧化剂H2O2的质量浓度为0.4 kg/L.在最佳标记条件下,3′-125I-BTA-0的标记率为72%,放射化学纯度大于95%.通过亲电反应制备了3′-I-BTA-0的单晶,晶体结构测定结果表明,标记物分子中I原子与S原子同侧.     

直接亲核放射氟化法合成O-(2-[18F]氟乙基)-L-酪氨酸

本文利用一种方便易得的前体N-叔丁氧羰基-(O-(2-对甲苯乙氧基))-L-酪氨酸甲酯,采用"一步法"直接亲核放射氟化法合成了O-(2-[18F]氟乙基)-L-酪氨酸.采用易于自动化的固相萃取法代替比较耗时的高压液相色层法分离目标产物,简化了制备过程,缩短了总合成时间.放射化学产率约为40%(未经衰变校正),放射化学纯度大于97%,合成时间小于50 min.     

Experimental study of triplex-forming oligonucleotide targeted to the initiator of S gene of HBV labeled with 125Ⅰ

This study is used to investigate the feasibility of employing the Iodogen method to label triplex-forming oligonucleotide (TFO) targeted to the initiator of the S gene of HBV with 125Ⅰ. A 17-mer oligonucleotides sequence was synthesized and grafted at the 5' terminal with a tyramine group. Radioiodination of the tyramine-TFO with 125Ⅰwas then performed using the Iodogen method. After TFO was labeled with 125Ⅰ using the Iodogen method, the labeling rate, the radiochemical purity, stability and bioactivity were determined, respectively. The results show that the radiolabeling rate and the radiochemical purity were 93% and 99%, respectively; and the radiochemical purity is more than 90% in vitro at -20℃ on the 5th day after labeling; and the rate of 125Ⅰ-tyramine-TFO binding to HepG2.2.15cells was (37.2±1.4) % and statistically different from the rate of HepG2 (p＜0.5). Hence, it is concluded that the labeling of oligonucleotides conjugated with tyramine using the Iodogen method is successful and is characterized with a high labeling rate, high stability, and a low loss of bioactivity of the labeled agent.     

肿瘤坏死因子突变体的碘标记及其质量的检测

用Ｉｏｄｏｇｅｎ法对肿瘤坏死因子突变体进行磺标记用放射纸层析法及自身取代分析法对产物的放化纯度及比放射性活度进行了计算。结果表明，碘的利用率为７２．７５，纯化后标记物的游离碘为２．１２％，放化纯度为９３．１４％，比放射性活度为１．２ＴＢｑ／ｇ。标记后的肿瘤坏死因子突变体的细胞毒效应只下降４．３８％，提示Ｉｏｄｏｇｅｎ法标记肿瘤坏死因子突变体可获良好效果。     

C_(60)衍生物的放射性碘标记

富勒烯Ｃ6 0 是由 60个碳原子组成的球型分子 ,包含 1 2个五元环和 2 0个六元环 ,直径为0 .71ｎｍ。独特的结构赋予了它特殊的物理、化学和生物性质。Ｃ6 0 是一个优良的电子接受体 ,通过光诱导产生单重态氧的效率高达 1 0 0 % ,被喻为“单重态氧的发生器”。它极易与游离基反应 ,又被喻为“吸收游离基的海绵”。它具有 3 0个双键 ,可以发生许多有机反应 ,连接各种化学药物 ,是药物设计的理想载体[1] 。Ｃ6 0 仅溶于一些非极性和弱极性的有机溶剂 ,在水等极性溶剂中不溶。富勒烯作为药物载体 ,首先要制成水溶性衍生物。更为重要的是还必须了…     

3-三甲基硅苄胍的合成及其125I标记

以3-溴甲苯为起始物，通过5步反应合成可用于放射性碘（砹）标记的3-三甲基硅苄胍，并用核磁共振（NMR）、质谱（MS）、高效液相（HPLC）等对产物进行了表征。以此化合物为前体，对其进行了¹²⁵I标记。¹²⁵I MIBG的标记率达66.7%，放化纯度＞98%。标记物在室温下放置3d后，放化纯度无明显变化，表明¹²⁵I MIBG具有较高的体外稳定性。     

125I标记重组人血小板生成素的分布和代谢特征

摘要：目的: 建立125I标记重组人血小板生成素（rhTPO）的分析方法并研究小鼠尾静脉注射125I- rhTPO后的体内分布及药动学特征。方法: Iodogen法制备125I- rhTPO，经Sephadex-G25凝胶柱分离纯化，纸层析法检测放化纯度。按1g.kg-1剂量经尾静脉给药，于不同时间检测血浆中的放射性变化，并计算相应的血药浓度及药动学参数。同时于各时间点观察125I- rhTPO在各组织器官的分布情况。结果和结论: 制备的125I- rhTPO标记率为96.25%，放化纯度95.85%。尾静脉注射125I- rhTPO 1g.kg-1在小鼠体内可以二室模型拟合血药浓度的动态变化，T1/2为0.30h，T1/2为6.20h。125I- rhTPO在小鼠体内主要经肾脏排泄，部分可经肝胆系统代谢。在各骨组织中以富含骨髓细胞的胸骨放射性计数最高，股骨次之，而乏骨髓的胫骨放射性计数最低，提示骨髓是TPO作用的靶组织。     

Experimental study of triplex-forming oligonucleotide targeted to the initiator of S gene of HBV labeled with 125^I

1Introduction Antigen radiotherapy(AR)is based on targeting localized radiodamage to specific sites in the genome using sequence-specific triplex-forming oligonucleo-tides(TFO)to carry Auger-electron-emitters(A-Ettr)such as iodine-125(125I)to the target gene sequence[1].The decay of125I that releases a shower of low energy electrons that produce DNA strand breaks mostly within10bp from the decay site[2,3]with an efficiency close to1break/decay[4].125I,delivered by a TFO,should produce do…     

~(125)I-白蛋白融合干扰素α2b大鼠体内分布研究

采用氯胺-T法对白蛋白融合干扰素α2b进行125I标记,PD-10柱纯化,三氯醋酸沉淀法测定放化纯;体外以WISH/VSV系统比较白蛋白融合干扰素α2b和125I-白蛋白融合干扰素α2b的抗病毒活性;SD大鼠皮下注射125I-白蛋白融合干扰素α2b,分别于给药后0.5、2、6、24、48、90、180、300 h放血处死,取血和相关脏器,称重并测定放射性,计算每克脏器放射性占注入量的百分率(%ID·g-1).结果显示,氯胺-T法制备的125I-自蛋白融合干扰素α2b标记率为82.72%,放化纯95.53%,放射性比活度为0.26 MBq/gg;抗病毒活性比较结果表明标记前后的生物学活性几乎无变化;皮下注射大鼠体内分布研究表明,125I-白蛋白融合干扰素α2b在血中于6 h达高峰,消除缓慢,未见特异性组织或器官的浓聚.     

双功能偶联剂5-(三正丁基锡)-3-吡啶甲酸-N-琥珀酰亚胺酯的优化合成及其碘标记

为了改善碘标记生物分子在体内的脱碘问题,在无水无氧条件下合成了碘标记前体5-(三正丁基锡)-3-吡啶甲酸-N-琥珀酰亚胺酯（SPC）,并优化了合成条件,产率达到45%,并用核磁共振、质谱法进行了表征。在此基础上,合成了5-碘-3-吡啶甲酸-N-琥珀酰亚胺酯（SIPC）。对标记前体SPC的¹²⁵I 标记条件进行了摸索,最终标记率达到80%以上,经高效液相色谱（HPLC）分离后,放化纯度达到97％。标记后的¹²⁵I-SIPC在4℃保存24h,放化纯度仍在92％以上,稳定性良好。