嗜酸乳杆菌的微胶囊化研究

应用质量分数为1%海藻酸钠和3%明胶作为包埋材料对嗜酸乳杆菌NCFM菌株进行微胶囊化处理,包埋后的微胶囊在36min内完全崩解,释放出的活菌数最多,可达1.15×109g-1。经人工胃液及人工肠液处理3h后,微胶囊化的活菌数分别为3.85(109mL-1和2.53×109mL-1,显著高于两种条件的对照处理(P<0.05)的活菌数(分别为2.80×109mL-1和2.01×109mL-1)。与对照处理的发酵酸度(39°T)和氨基酸质量浓度(2.03g/L)相比,经胃液处理3h后的菌株在灭菌脱脂乳中发酵48h后,其酸度、氨基酸含量明显提高(P<0.01),分别为123°T和2.59g/L。经肠液处理24h后的菌株,在同样条件下发酵灭菌脱脂乳48h后的酸度(114°T)和氨基酸质量浓度(2.24g/L)显著高于对照(P<0.01)处理(酸度为69°T,氨基酸质量浓度为1.79g/L)。经人工胃液处理3h和肠液处理24h后的菌株,在MRS培养基中培养16h后,其细胞!-半乳糖苷酶活力较对照处理明显提高(P<0.01),分别为1.14mmol/(g·min)和0.58mmol/(g·min),而同样条件下对照处理的!-半乳糖苷酶活力分别为0.66mmol/(g·min)和0.32mmol/(g·min)。显然,微胶囊化处理能明显提高嗜酸乳杆菌在极端环境下的存活能力。     

微胶囊化的嗜酸乳杆菌在极端环境下的生理特性研究

研究了嗜酸乳杆菌NCFM菌株经胶囊化处理后对逆境的抵抗能力。结果表明,经pH值为2.5的酸处理后,微胶囊化菌株的活菌数(6.4×108 mL-1)、酸度(95oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.127 mmol/g.min),明显高于对照菌株(P<0.01)的活菌数(2.3×108 mL-1)、酸度(56 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.078 mmol/g.min);经质量浓度为14 g/L的胃蛋白酶处理后,与对照菌株的活菌数(7.8×108 mL-1)、酸度(70 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.01 mmol/g.min)相比,微胶囊化菌株的活菌数、酸度、!-半乳糖苷酶活力明显提高(P<0.01),分别为1.41×109 mL-1,119 oT和0.075 mmol/g.min;经质量分数为0.4%胆盐处理后,微胶囊化菌株的活菌数(4.8×108 mL-1)、酸度(98 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.97 mmol/g.min),明显高于对照菌株(P<0.01)的活菌数(2.9×108 mL-1)、酸度(52 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.43 mmol/g.min);经质量浓度为3 g/L胰蛋白酶处理后,与对照菌株的活菌数(0.2×107 mL-1)、酸度(48 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.017 mmol/g.min)相比,微胶囊化菌株的活菌数、酸度、!-半乳糖苷酶活力显著提高(P<0.01),分别为3.5×108 mL-1,90.8 oT和0.1 mmol/g.min;经质量分数为18%的NaCl溶液处理后,微胶囊化菌株的活菌数(11.7×108 mL-1)、酸度(102 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.52 mmol/g.min),明显高于对照菌株(P<0.01)的活菌数(0.37×108 mL-1)、酸度(38 oT)和!-半乳糖苷酶活力(0.18 mmol/g.min)。显然,微胶囊化处理能明显提高嗜酸乳杆菌在极端环境下的存活能力。     

嗜酸乳杆菌的培养条件及其生物学特性

对嗜酸乳杆菌的培养条件及其生物量、产酸、耐酸、抗胆盐、世代繁殖和抑菌特性的影响做了初步研究。结果表明,最适生长温度为36～38℃,最适起始pH为5 5～6 2 ,静置培养比振荡培养好,最高生物量和滴定酸度分别可达10 10 CFU/mL和2 19°T。同时嗜酸乳杆菌具有强耐酸性和耐胆盐性,对大肠杆菌和沙门氏菌有很强的抑菌作用。     

菊粉寡糖促进嗜酸乳杆菌生长的研究

对菊粉可促进嗜酸乳杆菌的生长进行了初步研究。结果表明 ,用菊粉代替培养基中部分葡萄糖 ,嗜酸乳杆菌的生长得到明显的促进 ,当MRS培养基中葡萄糖与菊粉的质量比为 1∶1时 ,嗜酸乳杆菌的生物量及酸度得到提高 ,在 3 7℃下培养 48h ,活菌的数量及酸度比对照组分别提高 1 0 10CFU/mL和 1 0°T。     

嗜酸乳杆菌高密度培养时的化学去胁迫

采用向发酵液中添加适当的碱或碱性盐等物质的方法,消除了影响嗜酸乳杆菌生长的有机酸的胁迫作用,达到单位体积的发酵液内含有更多活菌体的目的。结果表明,在发酵过程中,添加一定量的柠檬酸钠可减少乳酸对嗜酸乳杆菌的胁迫作用,从而提高了活菌密度。     

瑞士乳杆菌和嗜酸乳杆菌的益生免疫特性的研究

以瑞士乳杆菌KLDS 1.8701和嗜酸乳杆菌KLDS AD1、KLDS AD2为研究对象,详细研究了它们对体外模拟人工胃肠道的耐受性,并评估了三株乳杆菌对小鼠脾淋巴细胞增殖活性的影响,初步探讨了三株乳杆菌的免疫活性。结果表明,三株乳杆菌对人工胃液、人工肠液、胆汁盐环境具有很好的耐受性,瑞士乳杆菌KLDS 1.8701和嗜酸乳杆菌KLDS AD1较强于嗜酸乳杆菌KLDS AD2。乳杆菌对脾淋巴细胞增殖活性的作用表现出明显的量效关系,活菌数为107CFU/mL时,对脾淋巴细胞活性影响大小为KLDS AD1>KLDS 1.8701>KLDS AD2;KLDS 1.8701对脾淋巴细胞的增殖具有很好的促进作用,只有当KLDS AD1的活菌数达到107CFU/mL时才具有促进作用,而KLDS AD2没有促进作用。      

嗜酸乳杆菌促生因子的研究

以11%的脱脂乳为基础培养基,研究了加入几种不同类型、不同比例的促生因子对嗜酸乳杆菌产酸及凝乳的影响。结果表明,葡萄糖0.75%、吡哆醛0.09%、半胱氨酸1%、酪蛋白水解物0.5%对嗜酸乳杆菌生长促生作用的影响较大。     

乳铁蛋白及乳铁素对嗜酸乳杆菌生长影响的研究

本实验主要针对乳铁蛋白和乳铁素对嗜酸乳杆菌的生长影响进行研究。结果表明,在37℃恒温培养下,添加一定浓度的乳铁蛋白或乳铁素,可促进嗜酸乳杆菌生长繁殖。乳铁蛋白的最适添加浓度为2.5mg/ml,乳铁素的最适添加浓度为0.15mg/ml,培养26h后活菌数分别达到6.7×108CFU/ml和8.0×108CFU/ml。     

嗜酸乳杆菌冻干菌粉保护剂选择的研究

为了开发以嗜酸乳杆菌为基础的各类制品,本文以嗜酸乳杆菌存活率为指标,对保护剂进行了单一和复合的筛选及配方的研究,并进行了验证实验。结果表明,单一及复合保护剂均对菌体存活率具有一定的保护作用,但复合保护剂的效果明显高于单一保护剂。最终确定出配方:脱脂乳(16.0%)、麦芽糊精(10.0%)、海藻糖(10.0%)、L-谷氨酸(1.0%)、维生素C(2.0%)、甘油(2.0%)、MnSO4(0.8%)对嗜酸乳杆菌的保护效果最佳;保护剂与细胞悬浮液最佳比例是2∶1,利用此保护剂,经真空冷冻技术可制得活菌水平在1010cfu/g的嗜酸乳杆菌冻干菌粉。     

嗜酸乳杆菌发酵乳保藏性的研究

对嗜酸乳杆菌发酵乳在冷藏条件下保藏性进行了研究. 结果表明, 7 ℃条件下 14 d两株嗜酸乳杆菌发酵乳中细菌的存活率分别为 3.43% 和 2.20%, 且活菌数仍在 108 mL 1以上, 酸度为 90 ° T和 107 ° T, 双乙酰分别增加了 11.80% 和 56.41%, 乙醛含量分别为 2.993 mmol/ mL和 2.561 mmol/ mL, 使发酵乳具有良好风味.     

双歧杆菌和嗜酸乳杆菌二联活菌微胶囊的研制

目的 制备长双歧杆菌和嗜酸乳杆菌二联活菌微胶囊,以期提高口服时的存活率和常温下的保存期.方法 根据微胶囊在人工胃液中的耐酸性和在人工肠液中的崩解性,确定空气悬浮法制备微胶囊的最佳工艺条件.扫描电镜观察微胶囊形态与大小.根据恒温37℃、相对湿度60%～65%条件下贮存3个月后菌体存活率,考察其贮存稳定性.结果 制备的微胶囊具有良好的耐酸性和肠溶性.微胶囊包囊产率56.49%,包囊效率87.45%.微胶囊表面覆盖着一层光滑平整的囊膜,粒径大小基本在400～500μm.加保护剂的微胶囊菌体存活率高于10%,且远远高于冻干菌粉和无保护剂微胶囊组.结论 确定了空气悬浮法制备长双歧杆菌和嗜酸乳杆菌二联活菌微胶囊的最佳工艺条件,微胶囊化有利于提高活菌的稳定性.     

乳清蛋白酶解物促嗜酸乳杆菌增殖作用研究

利用胃蛋白酶水解乳清蛋白,获得酶解产物的优化工艺条件是pH 值为2.2,水解温度为65℃,底物质量浓度为2g/100mL,酶与底物比为7%,其蛋白水解度为12.51%。乳清蛋白水解物与经过超滤和凝胶过滤后的分离物对嗜酸乳杆菌B 有较好的增殖作用,其中分子量1000D 以下的酶解产物增殖效果最为显著。质谱分析证实该段水解产物是分子量集中在213.2～956.9D 之间的寡肽和氨基酸复合物,可使嗜酸乳杆菌B 活细胞数量提高一个对数级。显然,应用廉价乳清蛋白水解产物作为培养基质可以提高嗜酸乳杆菌B 的细胞数量。     

热激处理对嗜酸乳杆菌耐热性的影响

研究了以MRS为培养基的嗜酸乳杆菌在不同培养时间段的耐热性,并选取不同的温度对嗜酸乳杆菌进行热激处理,测定热激处理对其耐热性的影响。研究表明,嗜酸乳杆菌本身具有良好的耐热能力,并且在培养11 h时,耐热能力尤其突出。最适的热激温度是45℃,最适热激时间是30 min。热激处理后的嗜酸乳杆菌在经80℃水浴5 min的热处理后活菌数达到1.56×105,比原来可提高一个数量级,并且热激处理后在进行热处理的嗜酸乳杆菌的发酵能力明显优于未热激直接进行致死处理的嗜酸乳杆菌。     

嗜酸乳杆菌粉末发酵剂的研制

研究了来自动物、植物及微生物的天然复合有机营养物对嗜酸乳杆菌在高温下的保护作用。结果表明,植物寡聚糖和动物多肽,植物寡聚糖和藻类浸提物,植物寡聚糖和动物多肽和真菌多糖,植物寡聚糖和真菌多糖和藻类浸提物,植物寡聚糖和动物多肽和藻类浸提物分别与脱脂乳混合使用,其抗热效果显著,菌存活率分别为32.8％、25.6％、41.8％、29.9％和72.2％,而对照组只有1.21％。以植物寡聚糖和动物多肽和藻类浸提物和质量分数为15％牛乳的混合物为培养基,培养菌体,经喷雾干燥,制得的嗜酸乳杆菌发酵剂,经检测,质量指标均符合发酵剂要求,其中嗜酸乳杆菌活菌数达8.7×108g-1。     

Effect of packaging materials and dissolved oxygen on the survival of probiotic bacteria in yoghurt

The effects of packaging materials on the dissolved oxygen and the survival of the probiotic bacteria in yoghurt were studied. Oxygen adapted and non‐oxygen adapted strains of Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium spp. were incorporated in yoghurts, which were packaged in oxygen permeable high‐impact polystyrene (HIPS), oxygen‐barrier material (Nupak^TM) and Nupak^TM with an oxygen scavenging film (Zero₂^TM). During storage the dissolved oxygen increased steadily in HIPS packaged yoghurt whereas it remained low in yoghurts packaged in Nupak^TM and Zero₂^TM. In all yoghurts, no significant decreases were observed in the viability of either oxygen adapted or non‐oxygen adapted cells of L. acidophilus and Bifidobacterium spp. Thus, although the dissolved oxygen in yoghurt can be influenced by the type of packaging material, it may not affect the survival of probiotic bacteria in yoghurts.     

双歧杆菌和嗜酸乳杆菌二联活菌微胶囊的研制

目的制备长双歧杆菌和嗜酸乳杆菌二联活菌微胶囊,以期提高口服时的存活率和常温下的保存期。方法根据微胶囊在人工胃液中的耐酸性和在人工肠液中的崩解性,确定空气悬浮法制备微胶囊的最佳工艺条件。扫描电镜观察微胶囊形态与大小。根据恒温37℃、相对湿度60%~65%条件下贮存3个月后菌体存活率,考察其贮存稳定性。结果制备的微胶囊具有良好的耐酸性和肠溶性。微胶囊包囊产率56.49%,包囊效率87.45%。微胶囊表面覆盖着一层光滑平整的囊膜,粒径大小基本在400~500μm。加保护剂的微胶囊菌体存活率高于10%,且远远高于冻干菌粉和无保护剂微胶囊组。结论确定了空气悬浮法制备长双歧杆菌和嗜酸乳杆菌二联活菌微胶囊的最佳工艺条件,微胶囊化有利于提高活菌的稳定性。     

嗜酸乳杆菌增菌培养研究

对培养嗜酸乳杆菌的基础培养基进行筛选,确定为11％NFM培养基。采用正交试验对增殖因子进行优化,得到最优增菌培养基:基础培养基+5％番茄汁+10％萝卜汁+0.1％肝浸汁+5％啤酒。以最优增菌培养基测定生长曲线、pH值和滴定酸度的变化,确定增菌培养终止时间为10hr,此时活菌数达7.49×10~9cfu/ml。     

酸奶中嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌检测方法的研究

根据嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌对不同碳水化合物的选择性利用，设计了适合上述4种乳酸菌的选择性计数培养基，并对其效果进行了验证。结果表明，利用MRS培养基、麦芽糖-MRS培养基和山梨醇-MRS培养基(两种培养基共同使用)能满足选择性计数的要求。以所设计的选择性培养基，研究了含有4种乳酸菌的酸奶中不同乳酸菌在产品货架期内活菌数的变化规律。     

改善嗜酸乳杆菌酸乳风味的研究

本论文采用正交实验设计优选乳清粉、低聚果糖、蔗糖对嗜酸乳杆菌酸乳风味改善的最佳配比,并研究酸乳凝固时、成熟时和贮存期酸乳中酸度、感官特征和乳酸菌数变化情况.试验结果表明,当乳清粉、低聚果糖和蔗糖的比例分别为3%、5%和4%,培养温度为38℃,凝固后冷藏24h后,酸乳在贮藏期间中酸度(70～90°T)、乳酸菌计数(108)达到最佳水平,酸乳的组织状态细腻,香气浓郁,风味纯正,酸度适口,品质最佳.     

蒺藜和嗜酸乳杆菌相互作用的研究

研究了不同浓度蒺藜药液及离心与否对嗜酸乳杆菌生长的影响以及嗜酸乳杆菌对蒺藜甾体皂苷的利用情况。结果表明：蒺藜药液培养嗜酸乳杆菌的最佳浓度为0．111g／mL，药液离心对嗜酸乳杆菌的生长和药液的pH几乎没有影响。嗜酸乳杆菌能利用蒺藜药液的甾体皂苷，培养5d后，其吸光度由1．6378T降到0．4617。