一株降解石油烃假单胞菌的鉴定及降解特性

从松原油田石油污染土壤中筛选、分离出一株降解石油烃的菌株,观察其菌落形态,通过16S rDNA 序列分析对其进行鉴定。结果表明：该菌株的菌落呈白色不规则状、表面粗糙、边缘不整齐。16S rDNA序列分析鉴定为类产碱假单胞菌（Pseudomonas pseudoalcaligenes strain）。在温度为35℃、pH值为8时菌株对石油烃降解效果最好,降解率为75.4%。     

交替假单胞杆菌RS-2培养基优化

用响应面法对交替假单胞杆菌RS-2(pseudoalteromonas paragorgicola)的液体培养基进行优化.首先,采用了Plackett-Burman实验设计研究,确定了对菌体浓度主要影响组分蛋白胨、酵母粉、NaCl.第二步,通过最陡爬坡实验逼近以上三种因素最优水平,最后用响应面设计法对培养基进行了优化,实验结果表明培养基最佳组分为蛋白胨0.6698g/100 mL,酵母粉0.3296g/100 mL,NaCl24.38g/L,Fe2(PO4)3 0.01g/L,MgSO4·7H2O 6.92g/L,MgCl2·6 H2O5.51g/L,CaCl2·H2O 1.45g/L,KCl0.67g/L,在此条件下发酵,得到菌体浓度为1.067×109 cfu/mL.而原始2116E培养基达到8.7×108 cfu/mL,优化后提高1.22倍.     

荧光假单胞菌RB5产嗜铁素的发酵条件

荧光假单胞菌RB5是从土壤中分离得到的一株对禾谷丝核菌有拮抗作用的细菌.通过CAS法检测分析,发现RB5菌株能产生嗜铁素.为明确荧光假单胞菌RB5产嗜铁素的发酵条件,采用摇瓶培养发酵,利用特异光谱吸收法,研究了不同培养条件对RB5菌株嗜铁素产量的影响.最终得出RB5产嗜铁素的最佳发酵条件:起始pH 7.0,接种量2％,瓶装量90 mL/250 mL,发酵时间48 h,Fe3+质量浓度为0.8 mg/L.抑菌试验表明,优化发酵条件后的RB5发酵液(OD400值2.35)有很显著的抑菌效果,抑制率达65.28％.     

球红假单胞菌原生质体的微波诱变及其煤炭降解转化

球红假单胞菌对煤炭具有降解转化效果,进行了原生质体的微波诱变育种以及煤炭降解转化试验研究,采用扫描电镜、热分析及红外光谱等分析测试技术分别对球红假单胞菌原生质体、煤炭及其降解转化产物进行测试分析.结果表明:球红假单胞菌原生质体的微波诱变菌株遗传性状稳定,在蔗糖浓度为20%,溶菌酶浓度为0.5mg/mL,EDTA浓度为0.2%,反应时间为40min的条件下,球红假单胞菌原生质体形成率为76.6%,再生率为9.8%,其原生质体再生菌对义马褐煤及经硝酸处理义马褐煤的最大降解转化率分别从7.82%和78.05%提高到38.68%和80.65%,取得了明显的效果.     

表达荧光假单胞菌鞭毛蛋白工程菌的构建及其对黑松的毒性

构建了组成分泌表达载体pUC18ompA,将荧光假单胞菌Pf-5鞭毛蛋白的编码基因fliC克隆到pUC18ompA构建pUC18ompA-fliC,重组质粒转化E.coliBL21(DE3)构建了工程菌。工程菌与无菌松材线虫混合接种黑松无菌苗,研究其对无菌苗的致病能力。接种试验结果表明,工程菌与无菌松材线虫混合接种同样可以引起黑松无菌苗的萎蔫。进一步验证了体内荧光假单胞菌鞭毛蛋白在松材线虫病致病过程中的作用。     

一株假单胞菌对活性艳红X-3B的脱色研究

从常州清潭污水处理厂处理池的污泥中分离到-株活性艳红X-3B脱色菌WLY,具有较高的脱色活性,经生理生化实验初步鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas.sp).本实验考察了温度、培养时间、pH、染料浓度、培养方式和接种量等因素对WLY脱色能力的影响.结果表明,菌株WLY在24 h和48 h内对30mg/L活性艳红X-3B的脱色率分别为86.29%和93.16%;且接种量在1-3 mL,(OD600为1.2)范围内,脱色效果最好;最适温度为35-40℃,最佳pH为7,且静置培养较振荡培养条件下的脱色率高;在本实验应用上,随染料质量浓度的增加,脱色率降低,500 mg/L的活性艳红X-3B在24 h内并无脱色.     

海洋假单胞菌胞外多糖的抗氧化性

利用海洋假单胞菌PT-8发酵胞外多糖,对其发酵液进行乙醇沉淀,Sevag法除蛋白,透析、冷冻干燥后得到纯化的胞外多糖(EPSs)。用分光光度法测定多糖的还原力以及在不同体系中对羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除能力。结果表明,多糖具有较强的还原力、羟自由基和超氧阴离子的清除能力,多糖对DPPH的清除作用较弱,低于同等条件下的维生素C。     

一株菲降解细菌的分离、鉴定及其降解特性研究

从胜利油田附近石油污染土壤采集土样,以菲为唯一碳源的选择性培养基分离筛选到一株菲高效降解菌SLY-3,根据形态、生理生化特性及16S rDNA比对初步鉴定该菌株为芽孢杆菌属,并对其降解菲的特性进行了研究。结果表明,菌株SLY-3在菲浓度为80 mg·L-1条件下,28℃振荡培养96 h,对菲的降解率达到93.73%;在菲浓度为200 mg·L-1时,培养96 h后的菲降解率为98.36%。同时发现菲的降解程度与细菌数量的增长呈正相关关系。     

荧光假单胞菌GcM5-1A重组鞭毛蛋白的表达及其对黑松细胞的毒性研究

针对松萎蔫病的早期诊断及生物防治,本文利用PCR技术从荧光假单胞菌GcM5-1A的基因组中克隆了鞭毛蛋白编码基因fliC,再将该基因克隆到表达载体pET-15b的NcoI和XhoI位点,构建重组质粒pET-15b-fliC,再将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),构建工程菌,IPTG诱导工程菌高效表达C-末端具有多聚组氨酸标签的重组鞭毛蛋白,重组蛋白主要以包涵体的形式存在,包涵体经8mol/L尿素溶解,复性并经Ni2+螯合柱亲和层析得到了电泳纯的重组鞭毛蛋白。生测结果表明,重组鞭毛蛋白可引起黑松细胞的大量死亡,与天然鞭毛蛋白对黑松愈伤组织细胞有相似的毒性。该研究为松萎蔫病致病机理的研究奠定了基础。     

尼古丁降解菌的分离鉴定和初步特性研究

从浙江省某农药厂的活性污泥中分离得到一株尼古丁高效降解细菌,根据表型特征、生理生 化特性和１６ＳｒＤＮＡ序列系统发育分析,将其鉴定为假单胞菌属,命名为ＴＷ５．该菌株能以尼古丁 为唯一碳源、氮源和能源生长,当接种量为５％时,菌株ＴＷ５在含５００ｍｇ／Ｌ尼古丁的基础盐液体 培养基中降解尼古丁,１２ｈ后降解率约为１００％．该菌株降解尼古丁的最适ｐＨ 为６．５～７．０,最适 温度为３０℃．研究表明,该菌株具有很强的尼古丁降解能力,可用于处理含尼古丁废弃物．     

高效氯氰菊酯降解菌的分离与鉴定及其降解条件优化

从长期施用高效氯氰菊酯农药的菜园土壤中,分离到一株能降解高效氯氰菊酯的细菌GCN019.经生理生化和16S rDNA分析,将菌株GCN019鉴定为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens).应用Plackett-Burman试验设计确定了影响该菌株降解高效氯氰菊酯的主要因素,利用响应面分析法优化了其降解条件.结果表明,降解体系中高效氯氰菊酯浓度和接种量及初始pH是影响其降解的主要因素;优化条件下高效氯氰菊酯的降解率可达到73.94％,与所建立的模型预测值(74.30％)相吻合.     

施氏假单胞菌菌株的脱氮特性

对一株具有异养硝化-好氧反硝化功能的施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)菌株WIT-1进行研究,初步探讨了菌株WIT-1的脱硝态氮能力、对硝态氮的最高耐受性及在未灭菌生活污水的实际脱氨氮效果.结果表明,在初始化学需氧量(Chemical Oxygen Demand,COD)为500 mg/L时,48 h对硝态氮的去除率为96.38%.在相同COD条件下,菌株WIT-1对脱硝态氮耐受性为800 mg/L.当菌株WIT-1的接种量为2%时,12 h对生活污水中的氨氮去除率为32.741%.当初始COD含量增加到500 mg/L或者菌株的接种量提高为8%时,12 h对生活污水中的氨氮去除率分别为52.765%和100%.但48 h对氨氮的去除率都只有20%左右.     

黄单胞菌的筛选及其降解烷烃性能

从受石油污染的海水筛选了一株能降解烃类的菌株黄单胞菌(Pseudomonas Xanthomonsa)。并实验研究了它的降解性能。结果表明，该菌株能降解庚烷和甲苯，在48h内对1．5％庚烷的利用率达到30．06％，且能在氯化钠浓度为10～90g／L的培养基中生长。     

黄单胞菌的筛选及其降解烷烃性能

从受石油污染的海水筛选了一株能降解烃类的菌株黄单胞菌(PseudomonasXanthomonas),并实验研究了它的降解性能。结果表明,该菌株能降解庚烷和甲苯,在48h内对1.5%庚烷的利用率达到30.06%,且能在氯化钠浓度为10～90g/L的培养基中生长。     

一株低温碱性脂肪酶产生菌TS182的分离与鉴定研究

通过Tween-80平板初筛和摇瓶发酵复筛,从连云港海域海水及海泥样品中分离的菌株中筛选获得一株低温碱性脂肪酶高产菌株TS182。通过形态学、生理生化以及分子生物学鉴定菌株TS182为荧光假单孢菌（Pseudomonas fluorescens）。菌株TS182所产脂肪酶最适温度和最适pH分别为15℃和9．0。     

除草剂二甲戊乐灵降解真菌Qsun-6的分离及其特性

从土壤中分离出并鉴定了二甲戊乐灵降解真菌菌株Qsun-6,研究了不同培养条件对二甲戊乐灵降解和真菌生长的影响。结果表明,所分离的6株真菌中有5株在5d内对100mg/L二甲戊乐灵的降解率在50%以上,其中Qsun-6菌株达到75.21%,经鉴定为塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)。在培养液中加入适量速效碳源有利于菌株生长和对二甲戊乐灵的降解;当二甲戊乐灵质量浓度低于100mg/L,菌株的生长量和对二甲戊乐灵的降解率较大;在pH 6和30℃的培养条件下,生长量和对二甲戊乐灵的降解率都达到最大。     

苯酚高效降解菌的筛选及其降解特性研究

从某焦化厂处理废水的活性污泥中筛选到一株苯酚高效降解菌（Wust-C）,该菌属革兰氏阴性菌。对Wust-C降解苯酚的特性进行试验研究。结果表明,在初始苯酚浓度为1 000 mg/L的试样中,培养24 h后,Wust-C对苯酚的降解率可达98%;初始苯酚浓度为300 mg/L试样中的苯酚可在8 h内完全降解。采用海藻酸钠对菌体进行固定化后,Wust-C的降酚效率进一步得到提高。培养24 h后,固定化Wust-C对初始苯酚浓度为1 200 mg/L试样中的苯酚降解率达到100%,初始苯酚浓度为300 mg/L试样中的苯酚可在4 h内完全降解。Wust-C的加入对混合菌群降解苯酚起到了促进作用。     

胶质红假单胞菌的摄磷能力

研究了富磷培养基中胶质红假单胞菌的摄磷能力以及光照、pH、外加碳源和缺磷环境对胶质红假单胞菌摄磷能力的影响。结果表明,该菌在富磷培养基中具有较强的摄磷能力,在光照、微好氧条件下有较好的摄磷能力,其生长的最适pH在7.2左右,缺磷环境可导致该菌的过量摄磷现象发生。     

胶质红假单胞菌的摄磷能力

研究了富磷培养基中胶质红假单胞菌的摄磷能力以及光照、pH、外加碳源和缺磷环境对胶质红假单胞菌摄磷能力的影响。结果表明,该菌在富磷培养基中具有较强的摄磷能力,在光照、微好氧条件下有较好的摄磷能力,其生长的最适pH在7.2左右,缺磷环境可导致该菌的过量摄磷现象发生。