酶联免疫吸附法直接测定乳制品中雌二醇残留

建立了测定乳制品中雌二醇残留的酶联免疫吸附分析(ELISA)竞争法,其重现性好、特异性强,测定线性范围0.01mg/L～1000.0mg/L,最低检出浓度为9.714mg/L,乳制品的加标实验回收率为87.2%～120.8%。     

酶联免疫吸附法(ELISA)在乳制品检测中的应用

简单介绍了酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）,并且就其在乳制品检测中的应用进行了较详细的评述,主要包括ＥＬＩＳＡ用于乳制品中的免疫球蛋白、乳铁蛋白和其他成分的测定。     

直接竞争酶联免疫吸附法检测食品中三聚氰胺残留

采用酶标抗原建立了高效、高灵敏的三聚氰胺直接竞争的ELISA（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测方法。方法 以三聚氰胺单克隆抗体包被作为固相抗体,辣根过氧化酶（Horseradish Peroxidase,HRP）标记的抗原与标准品（或样品）中三聚氰胺竞争结合抗体,建立了直接竞争酶联免疫检测体系。结果 以三聚氰胺为标准品建立标准曲线,得到方法的IC50为8.84μg/L,灵敏度为0.65μg/L,线性范围0.9-35μg/L;检测样品的回收率为70.0%-127.9%,与三聚氰酸交叉反应率为60%,其他结构类似物基本无交叉反应。结论 本方法灵敏度高、特异性强、检测快速, 可以满足实际样品的检测需求。     

间接竞争酶联免疫吸附测定水产品中的组胺残留

本文通过制备特异性识别组胺衍生物的多克隆抗体,建立了针对水产品中组胺的间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA)。以组胺等为反应原料经三步化学反应合成组胺半抗原,采用活泼酯法将组胺半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联作为包被原和免疫原,用紫外扫描法进行鉴定,结果显示组胺半抗原与载体蛋白偶联成功。通过免疫新西兰大白兔制备组胺抗血清,采用辛酸-硫酸铵方法纯化血清获得了相应的特异性多克隆抗体。通过对ic ELISA系列反应条件的摸索,确定了各组分的最适工作条件。试验结果表明:该方法对于组胺的IC50为0.91 ng/mL,与组氨酸、N-酰基组氨酸、3-甲基组胺等多种类似物及其衍生物均无交叉反应,方法特异性良好;线性检测范围为0.1～8.1 ng/mL,检出限为0.10 ng/mL;按照10、20、30 ng/g的添加量添加组胺至鱼、虾和贝类样品中,测得其回收率为98.9%～130.1%。方法检测的准确性好灵敏度高,适用于实际水产样品中组胺的检测。     

酶联免疫吸附法快速检测储存粮食中的污染曲霉

以曲霉属特异性抗体为材料,运用酶联免疫吸附法对稻谷、小麦、玉米等几种储存粮食中 胞外多糖含量进行了检测,并和平板计数法的曲霉菌落数进行比较,结果表明,两者间有很好的线性相关性。因此酶联免疫吸附法可用于储存粮食中污染曲霉的快速检测。     

酶联免疫吸附法检测动物源性食品中氨苯砜残留

应用间接竞争酶联免疫吸附技术,建立了一种快速检测动物源性食品中氨苯砜残留的方法,并对其各项技术参数进行了评价。结果显示,该方法的半数抑制浓度IC50为0.369μg/L,对鸡肉、猪肉样本的检测限为0.2μg/kg,对鸡蛋、蜂蜜样本的检测限为2μg/kg,对牛奶样本的检测限为0.6μg/L;样本添加回收率为78.2%~104.0%,变异系数为5.2%~13.5%;对实际样本的检测结果与液相色谱-串联质谱法基本一致。该方法操灵敏度高、快速准确,适用于动物源性食品中氨苯砜残留的快速检测。     

酶联免疫吸附法测定水产品中甲基睾酮残留

建立了测定水产品中甲基睾酮(MT)残留的间接竞争酶联免疫吸附法(ic ELISA)。采用琥珀酸酐法衍生化制备半抗原MT17,进一步偶联钥孔血蓝蛋白(KLH)制备免疫原MT17-KLH,经动物免疫成功获取特异性识别MT的多克隆抗体(与其它结构类似物交叉反应小于1%)。优化确立了ic ELISA最佳检测条件:包被原浓度100μg/L,MT多克隆抗体稀释度1/1.2×105,抗体反应时间40 min,药物稀释液为PBS,水产样品经乙腈提取,N-丙基乙二胺吸附剂(PSA)分散固相萃取(DSPE)净化后用于ic ELISA测定。本方法的抑制中浓度IC50为3.48μg/L,检测线性范围为0.77~13.06μg/L。水产样品加标回收率为81.02~103.19%,相对标准偏差为4.46%~13.14%,测定结果与液相色谱-质谱联用法具有良好的相关性(R=0.9971)。本方法可用于水产品中甲基睾酮残留的快速测定。     

酶联免疫吸附方法测定酱油中黄曲霉毒素B1

到目前为止,食品中黄曲霉毒素Ｂ１的测定方法主要有薄层色谱法〔１〕,气相色谱（ＧＣ）及高级液相色谱（ＨＰＬＣ）法等。国标中食品黄曲霉毒素Ｂ１的测定方法为薄层层析法,该法不仅样品处理繁琐,试剂消耗大,而且在检出阳性或假阳性样品时需在多块薄层板上经反复分离...     

酶联免疫吸附测定法检测淡水鱼中孔雀石绿残留

目的：了解武汉市常青花园小区在售淡水鱼产品的孔雀石绿污染情况。方法：利用酶联免疫吸附测定法对常青花园周边地区的3个菜市场和3个超市所售卖的常见淡水鱼进行检测。结果：共检测组织样本39份,其中检测出孔雀石绿的样本有21份,孔雀石绿检出率为53.8%;超出国家标准的样本有13份,不合格率为33.3%。结论：该区域在售淡水鱼中孔雀石绿的残留情况比较突出。由于试验样本的来源难以进一步追溯,确定孔雀石绿违规添加的环节难度较大,亟需市场监管部门对市售淡水鱼产品从养殖、运输到售卖全链条建立起清晰可查的溯源体系,以便更好地保障市民的食品安全。     

酶联免疫吸附法测定乳粉中IgG含量

母乳化乳粉中添加保健功能因子人Ig G.用饱和硫酸铵法从健康人血清中制备粗Ig G,经Sephadex G-100柱制备纯Ig G;用纯人Ig G作为抗原,免疫兔子制备兔抗人Ig G抗体.建立乳制品中人Ig G含量酶联免疫吸附测定,最佳包板物浓度为5.25μg/ml,最佳血清效价为11 600,抗血清亲和力为2.40×107,回收率为88%～94%,测定Ig G浓度范围为5.0～160 ng/ml,最小检测限为3.25 ng/ml.     

水产品中氯霉素的残留状况

用酶联免疫试剂盒检测水产品中氯霉素的残留,试验结果表明,氯霉素标准半对数曲线为Y=-30.05X+37.35,R2=0.995,加样回收率≥70.09%,所检测的113份水产品中,除少数样品外,绝大多数样品在饲喂过程中未添加氯霉素。     

酶联免疫检测法测定水产品中残留氯霉素的研究

研究了水产品中残留氯霉素的检测方法。采用酶联免疫检测法(ELISA)测定鱼、虾类水产品中残留氯霉素含量,结果表明:检出限为0.009ng/mL,变异系数为3.0%,样品测定的相对偏差为3.4%～7.1%,回收率为92.5%～102.0%。在0.025～2.00ng/mL测定范围内呈良好的线性关系,相关系数R=0.9993。用ELISA测定水产品中氯霉素残留量,实验结果令人满意。     

HPLC法测定乳制品中二氢槲皮素含量

本研究旨在建立高效液相色谱法测定乳制品中新型食品添加剂二氢槲皮素含量。二氢槲皮素经乙腈/水溶液提取,含亲水基团的二乙烯基苯/聚苯乙烯共聚物萃取小柱（HLB或PLS）净化,C₁₈反向色谱柱分离后紫外检测器进行检测。方法学结果表明,二氢槲皮素线性范围为0.5~20.0 μg/mL,线性相关系数为0.9997,不同类别样品回收率范围为86.0%~101.0%,精密度RSD为2.06%（n=6）。本方法重现性好,准确度高,可以为食品中二氢槲皮素的检测研究及国家标准的建立提供参考依据。     

高效液相色谱-串联质谱法测定乳制品中的莫奈太尔及其代谢物

建立测定乳制品中莫奈太尔及其代谢物的高效液相色谱-串联质谱法。试样加水-饱和氯化钠-乙腈溶液提取,正己烷净化,经Inertsil C8（2.1 mm×100 mm,3 μm）色谱柱分离,以甲醇-0.5 mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源串联质谱,在负离子扫描方式下以多反应监测模式检测,外标法定量。结果表明：莫奈太尔及其代谢物在0.1～5.0 μg/L范围内线性关系良好,定量限为2.0 μg/kg。在3 个加标水平下的平均回收率为79.5%～102.9%,相对标准偏差为2.0%～5.3%。该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高、抗干扰能力强、回收率和重复性良好,适合于乳制品中莫奈太尔及其代谢物的测定。     

养殖水产品中氯霉素残留量的高效液相色谱测定方法

本文建立了高效液相色谱(HPLC)检测养殖水产品中氯霉素残留量的方法。采用乙酸乙酯提取样品中的残留氯霉素，经净化和浓缩处理，以甲醇．水(35：65，V／V)为流动相，流速1ml／min，氯霉素组分峰能与杂质峰完全分开，检测波长为278nm。在50～1000μg／ml范围内，峰面积与氯霉素浓度呈良好的线性关系(r^2=0．9994)，以测量的3倍标准偏差计算方法的检出限为0．014μg／g。平均加标回收率为93．2％，精密度(RSD)小于5％。实验检测了几种常见养殖水产品样品的氯霉素残留量，发现在本检出水平下被检测的几种鱼和虾样品大多含有氯霉素，且其残留量远超过国家规定的残留标准(≤0．3μg/kg)。     

固相萃取-高效液相色谱法测定水产品中的苯巴比妥

建立水产品中苯巴比妥残留量测定的固相萃取-高效液相色谱方法。样品经乙酸乙酯提取,正己烷脱脂,通过C18固相萃取小柱富集和净化,高效液相色谱仪进行检测。苯巴比妥在0.05～4.0μg/mL内线性范围良好,相关系数为0.9999。当添加量在30～200μg/kg时,加标回收率在80.49%～102.42%,相对标准偏差为1.52%～10.15%,方法检出限10μg/kg,定量限30μg/kg。研究结果表明本方法操作简单、准确度高,能满足水产品中苯巴比妥残留量的测定及确证工作的需要。     

酶联免疫法检测克伦特罗残留量的质量控制

对酶联免疫法检测克伦特罗残留量的质量控制方法进行了探讨.应用酶联免疫法检测克伦特罗残留量可从克伦特罗试剂盒的检测下限、校正曲线的线性检验、精密度验证、以及添加克伦特罗标准品做回收率试验等方面来进行质量控制.结果表明,本方法的样品检测下限(定性检出)为0.03ng/mL,定量检测下限为0.1ng/mL;克伦特罗标准校正曲线Y=-0.1884X 0.4159在0.1～8.1ng/mL范围内具有良好的线性相关关系,相关系数为-0.9913;克伦特罗标准液的浓度分别为0.1、0.3、0.9、2.7、8.1ng/mL时,变异系数分别为3.7%、5.3%、9.7%、9.2%、8.7%,在3.7%～9.7%的范围内;当克伦特罗标准品添加水平分别为0.5、1.0ng/mL时,平均回收率分别为84%、90%,在80%～100%的范围内.上述指标均符合残留分析质量控制的要求.     

氨基酸自动分析仪对乳制品中羟脯氨酸的测定方法研究

本文用氨基酸自动分析仪测定乳制品中羟脯氨酸的含量,研究了样品预处理方法和仪器色谱分离条件,测得样品中羟脯氨酸的含量,可作为乳粉中是否添加动物胶原水解蛋白的依据,此方法灵敏度高,具有较好的准确度和重现性,添加标准的回收率为94.9%～105%.     

低乳糖乳制品中乳糖含量测定方法

采用碘量法和酶法相结合来测定低乳糖乳制品中乳糖含量,其加嘏率为９６．１４％￣１００．９６％,变异系数为１．９３％。实验表明该法操作简单,结果准确。