酶转化在淫羊藿苷提取中的应用

目前生产淫羊藿苷的过程中,其副产物朝藿定A、B、C等黄酮未被利用好。筛选出了将淫羊藿苷废渣中朝藿定A、B、C等黄酮转化成淫羊藿苷的A.sp.y39菌酶,将其应用于以淫羊藿提取物为原料制备淫羊藿苷的工艺。将150 g西安岳达淫羊藿提取物,溶解于60%乙醇、经D-280脱色柱脱色、结晶得到30.5 g淫羊藿苷;其废渣朝藿定A、B、C混合黄酮,经A.sp.y39菌酶转化,又得到16.6 g淫羊藿苷。共得到纯度90%以上的淫羊藿苷47.1 g;淫羊藿苷的提取率由传统的20.3%提高到31.4%;相比于传统方法,淫羊藿苷的提取率提高了50%以上。本文为节约淫羊藿资源提供了依据。      

川产淫羊藿属植物中淫羊藿苷的提取分离工艺研究

对四川产地的不同淫羊藿属植物中淫羊藿苷的含量进行测定,筛选出含量较高的原料为宣汉产巫山淫羊藿,含量达2.67%,最佳提取分离工艺为:80%乙醇70℃下以10倍、8倍、6倍量(v/w)分别提取2.0、1.5、1.0h。总收率达1.8%以上,含量超过98%。     

淫羊藿苷糖苷酶的纯化及其酶学性质的研究

对由菌株Absidiasp.E9r在发酵培养中产生的淫羊藿苷糖苷酶进行了分离纯化并对其酶性质进行了研究。结果表明,该酶的分子质量约为65ku,酶反应的最适温度和pH值分别为50℃和4.0,在20～60℃,pH3.0～6.0条件下稳定性较好;金属离子Na+、K+、Mg2+、Zn2+、Ca2+对酶反应的影响不大,而Fe3+、Cu2+对其有很明显的抑制作用;酶反应动力学研究,Vmax=3.012mmol/(L.h),km=58.59mmol/L。     

淫羊藿苷及其衍生物的抗氧化活性研究

目的:以淫羊藿苷为原料,对其进行水解和磺化分别得到淫羊藿苷元及水溶性苷元衍生物,研究淫羊藿苷、淫羊藿苷元及苷元衍生物对2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH·)、羟自由基(OH·)和超氧自由基的清除能力。结果:淫羊藿苷对OH·和超氧自由基均具有较强的清除能力,对DPPH·也有一定的清除能力。而淫羊藿苷元及苷元衍生物对DPPH·、OH·和超氧自由基均具有较强的清除能力,清除率随着浓度的增大而增大,且淫羊藿苷元的清除能力均略高于淫羊藿苷元衍生物。结论:淫羊藿苷及其衍生物对DPPH·、OH·和超氧自由基均具有较强的清除能力,且其活性对浓度有一定的依赖性。     

植物乳杆菌和发酵乳杆菌发酵对蓝莓花色苷的影响

选用植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）FM-LP-9和发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum）FM-LP-SR6分别对蓝莓花色苷进行发酵,考察发酵过程中菌落总数、pH值、色差、总黄酮含量、总糖含量、总花色苷含量、单体花色苷含量、有机酸含量等指标的变化规律。结果表明,经48 h发酵后,两种乳杆菌的菌落总数均能达到9.0 lg（CFU/mL）以上,发酵液的pH值降至3.6,总糖含量相较于发酵前分别降低了48.65%和58.97%,总黄酮含量分别增加至11.4、11.8 mg/L,总花色苷含量分别降低了48.63%和46.06%,色差值升高,颜色变暗。两株乳杆菌均能代谢花色苷和转化酚类物质,发酵过程中花色苷含量呈下降趋势,主成分分析得出两株乳杆菌发酵花色苷后的单体花色苷组分差异较大,主要来自飞燕草素-3-O-葡萄糖苷和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷。此外,两株菌发酵后,发酵液中的乳酸、乙酸含量升高,草酸、苹果酸、柠檬酸含量降低。     

不同地区商品淫羊藿中朝藿定、淫羊藿苷、总黄酮含量变异及抗氧化活性分析

为了了解我国商品淫羊藿的质量现状,为淫羊藿功能性食品的生产提供依据,采用高效液相色谱法测定了33批市售淫羊藿中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C与淫羊藿苷的含量,采用紫外分光光度法测定了总黄酮的含量,采用DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）与ABTS（2,2’-连氨-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二氨盐）方法分析了淫羊藿醇提物的抗氧化活性。结果发现,朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷与总黄酮的含量分别在0.37³.01、0.25⁵.22、0.46¹9.27、0.41¹3.40、18.29⁶8.73mg/g范围内,淫羊藿醇提物清除DPPH自由基与ABTS+自由基的EC50值分别在0.27³.51、4.71²1.96μg/mL范围内,所有淫羊藿样品的DPPH自由基清除率均高于抗坏血酸（VC）。不同地区商品淫羊藿中黄酮类化合物含量及抗氧化活性差异较大。淫羊藿醇提物的抗氧化活性与朝藿定C、总黄酮之间具有较高的相关性（相关系数在0.5648⁰.8626之间）,与朝藿定A、朝藿定B、淫羊藿苷的相关性较低（相关系数在0.3550⁰.6395之间）。      

膜分离纯化药酒中淫羊藿总黄酮的工艺研究

本文利用膜分离和浓缩的科学方法和手段,研究和探讨分离一种药酒主要成分淫羊藿总黄酮的工艺参数,为以淫羊藿黄酮为主要成分的药酒的规模化生产提供一种新工艺,也为进一步提取与分离其他有效成分提供理论数据。     

淫羊藿提取液对NO_2~-的清除作用

在单因素试验的基础上,采用响应面法的BBD组合设计,对淫羊藿提取液清除亚硝酸盐的参数进行优化。淫羊藿中清除亚硝酸盐有效成分的提取工艺条件为:提取时间176 min,乙醇体积分数58%,提取温度78℃,液料比37∶1(mL∶g),此时提取液对亚硝酸盐的最大清除率为75.64%。     

淫羊藿药渣多糖体外抗氧化活性研究

以提取过黄酮的淫羊藿药渣为原材料,热水法提取多糖,测定淫羊藿药渣多糖的总糖含量、糖醛酸含量和蛋白质含量,并对多糖结构进行红外光谱分析。通过体外抗氧化实验研究其对DPPH自由基、超氧阴离子和羟基自由基的清除能力。结果表明,淫羊藿药渣多糖的总糖质量分数为73.39%,糖醛酸质量分数为6.33%,蛋白质质量分数为1.87%,对DPPH自由基、超氧阴离子和羟基自由基的最大清除率分别为79.96%、92.77%和69.12%,其IC50值分别为0.26、0.03、0.76mg/mL。      

淫羊藿药渣多糖体外抗氧化活性研究

以提取过黄酮的淫羊藿药渣为原材料,热水法提取多糖,测定淫羊藿药渣多糖的总糖含量、糖醛酸含量和蛋白质含量,并对多糖结构进行红外光谱分析。通过体外抗氧化实验研究其对DPPH自由基、超氧阴离子和羟基自由基的清除能力。结果表明,淫羊藿药渣多糖的总糖质量分数为73.39%,糖醛酸质量分数为6.33%,蛋白质质量分数为1.87%,对DPPH自由基、超氧阴离子和羟基自由基的最大清除率分别为79.96%、92.77%和69.12%,其IC50值分别为0.26、0.03、0.76mg/mL。     

植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)8-6产细菌素发酵条件的优化

对植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)8-6产细菌素的发酵条件进行了优化,分别研究了培养时间、温度、接种量、培养基起始pH值、培养基碳源、氮源等因素对细菌素产生的影响,通过单因素水平试验和正交试验,确定产细菌素的最佳培养基组合和最佳发酵条件为葡萄糖3%,胰蛋白胨2%,蛋白胨1%,酵母膏1%,硫酸镁0.058%,吐温-80 0.2%,30℃培养24h,培养基起始pH值为6.5,接种量2%。乳杆菌8-6优化后效价为1825.56IU/mL,比优化前提高了373.15%。     

植物乳杆菌C88发酵特性研究

对一株本实验室筛选的益生菌植物乳杆菌C88的发酵特性进行了研究,以一株商业化益生菌L.rhamnosus GG为参照。结果表明,菌株C88的凝乳活性较弱,蛋白水解活性较高;4℃贮28 d,该菌株表现出良好的存活能力,活菌数高于L.rhamnosus GG。菌株C88对金黄色葡萄球菌的抑制作用较强;丙酸钙对其生长无显著影响;药敏实验表明该菌株对所选10种抗生素均表现出一定的耐药性;本研究对植物乳杆菌C88发酵特性的研究为其进一步应用于益生性发酵乳的研究开发提供实验依据。     

植物乳杆菌发酵紫薯饮料的研制

以紫薯为原料,利用植物乳杆菌为发酵剂,对紫薯乳酸发酵饮料的加工工艺进行研究。结果表明:紫薯用5倍水打浆,加入6U/100m L薯浆α-淀粉酶于60℃条件下酶解20min,再添加55U/100m L薯浆的糖化酶在p H4.5条件下糖化90min,可得理想的淀粉水解效果。通过正交实验,确定产品的最佳发酵工艺条件为接种量4%,发酵温度37℃,发酵时间14h;实验最佳配方为蔗糖8%,柠檬酸0.1%,黄原胶0.02%,CMC-Na 0.02%,PGA 0.02%。      

植物乳酸菌M616对发酵酸面团发酵特性的影响

本文研究了在酸面团发酵过程中,植物乳酸菌M616(Lactobacillus plantarum M616)对面团p H、TTA以及糖类含量变化的影响,并利用F3流变式发酵仪和吹泡仪对面团发酵力及流变特性的变化进行了研究。结果表明植物乳酸菌M616不仅对酵母菌的生长具有一定抑制作用,而且在面团p H和TTA的变化过程中起主导作用;另外,乳酸菌对淀粉的降解作用大于对还原糖的吸收,从而使面团中还原糖的含量增加,增加面团的甜味。在发酵后期,面团p H降低至3.73,这在一定程度上抑制了体系中霉菌和其它杂菌的生长。植物乳酸菌的生长代谢不仅显著提高了面团黏度、筋力,而且减缓了面团在发酵过程中韧性的降低。其中发酵酸面团对面团黏度和筋力影响最大,发酵过程中酸面团的最大黏度和筋力可以达到酵母发酵面团的2倍。     

枸杞对泡菜植物乳杆菌生长及抗氧化性能影响的研究

为了探索枸杞在泡菜发酵中的作用,以菜汁为基础,添加不同溶剂和不同浓度的枸杞提取液测定泡菜植物乳杆菌生长曲线及其发酵液的抗氧化性能。结果显示,枸杞提取液浓度与促进植物乳杆菌的生长呈正向相关;添加0.2 g/m L枸杞水提取液的发酵液总酚和总黄酮含量分别达45和35μg/m L,且发酵液对铁还原能力最高;添加枸杞乙醇提取液的发酵液对DPPH自由基清除率可达80%左右,0.2 g/m L醇提取液的发酵液总酚量可达45μg/m L。添加枸杞提取液,尤其是水提取液和乙醇提取液,能够显著促进泡菜植物乳杆菌的生长和发酵液抗氧化能力的提高。      

植物乳杆菌纯种半固态发酵泡菜工艺条件的研究

对产细菌素植物乳杆菌P158纯种半固态发酵泡菜工艺条件进行了研究。采用正交试验设计,并应用模糊数学综合评判法进行感官评价,确定泡菜产品的最佳工艺参数。结果表明,产细菌素植物乳杆菌纯种半固态发酵泡菜的最佳工艺参数为:盐4%、糖3%、接种量0.1%、发酵温度34℃。在该工艺条件下,制备的泡菜产品口味纯正,品质良好,为泡菜发酵生产探索了一条新路。     

发酵条件对植物乳杆菌叶酸合成的影响

选择1株高产叶酸的植物乳杆菌4-3,探讨在脱脂奶和豆浆两种发酵基质中,不调节pH值和使pH值稳定在6.0对其生长状况和叶酸合成的影响。结果显示,以豆浆为发酵基质时叶酸含量更高;控制培养基pH 6.0,植物乳杆菌4-3在其生长对数期后仍然可以保持较高的活细胞密度,且促进叶酸的积累。实时荧光定量聚合酶链式反应结果显示,控制pH 6.0能促进叶酸合成相关基因的表达。     

产细菌素植物乳杆菌纯种半固态发酵对泡菜品质的影响

以产细菌素植物乳杆菌纯种半固态发酵制作什锦泡菜,同时以其纯种液态发酵泡菜和传统自然发酵泡菜为对照,比较三种泡菜在发酵过程和贮藏期间感官、理化指标与微生物菌相变化规律,评价半固态发酵对泡菜品质的影响.结果表明,该菌株纯种发酵制作的泡菜感官品质优于自然发酵泡菜,细菌、酵母菌、霉菌、大肠菌群数量均显著低于自然发酵泡菜;其中,纯种半固态发酵泡菜发酵过程pH值下降最迅速、泡菜中乳酸菌活菌数量高(108cfu/g)、亚硝酸盐含量低且无明显“亚硝峰”出现;说明产细菌素植物乳杆菌纯种半固态发酵制作什锦泡菜品质优于纯种液态发酵和自然发酵泡菜.     

植物乳杆菌ZJ316高密度发酵条件优化

以1株植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）ZJ316为研究对象,在MRS液体培养基的基础上,以吸光度值（OD600 nm值）为响应值,通过单因素试验及响应面试验对其高密度发酵培养基组分和培养条件进行优化。结果表明,L. plantarum ZJ316高密度发酵的最优培养基组成为蔗糖43 g/L、玉米浆干粉60 g/L、Na2HPO4-柠檬酸0.12 mol/L、MgSO4·7H2O 0.20 g/L、MnSO4·H2O 0.10 g/L、吐温80 1 mL/L;最优发酵条件为接种量4%、发酵温度30 ℃、初始pH值6.5。在此优化条件下,采用发酵罐静置发酵24 h,植物乳杆菌ZJ316的OD600 nm值为5.13,活菌数可达8.01×109 CFU/mL,较优化前分别提高1.65倍、3.44倍。