六妹羊肚菌原生质体单核化再生菌株的杂交分析

该研究在对六妹羊肚菌（Morchella sextelata）原生质体单核化再生菌株分离及交配型鉴定的基础上,对单交配型原生质体再生菌株进行对峙培养杂交实验制备杂交菌株。以菌株交配型、生长势、抗鞣酸能力和菌核产生能力为技术指标,对单核化再生菌株及杂交菌株的多态性进行分析,并对杂交菌株的交配型进行检测。结果表明,20株MAT1-1-1单交配型及17株MAT1-2-1原生质体再生菌株表现较好,其菌丝带宽度均≤10 mm,褐变圈直径分别为25～34 mm、23～34 mm;从63组杂交菌株中得到40株（占63.50%）双交配型（MAT1-2-1/MAT1-2-1）杂交菌株,杂交菌株的菌丝带宽度均≥10 mm,褐变圈直径为32～54 mm,杂交菌株的交配型电泳结果表明,成功获得40株具有双交配型的杂交菌株（两条扩增带）。因此,双交配型杂交菌株在生长势、抗鞣酸能力方面存在杂交优势,而菌核产生能力与菌株交配型没有相关性。     

粗柄羊肚菌原生质体制备和再生条件研究

对粗柄羊肚菌(Morchella crassipes)原生质体形成、再生条件进行了研究.原生质体形成的合适条件:酶解系统为4%蜗牛酶、5%溶壁酶、4%纤维素酶;缓冲系统为0.6 mol/L KCl的磷酸缓冲液(pH 6.98),酶解时间4h,酶解温度30℃,菌龄56h;原生质体产量为5.3×104个/mg.经0.3mol/L KCl 0.3mol/L环己六醇的PSA再生培养基培养,再生率为9%.     

羊肚菌生产菌株栽培适宜性评价系统

羊肚菌是世界知名的食药兼用真菌。自2012年以来,我国羊肚菌人工栽培的规模不断扩大,然而生产不稳定一直困扰着羊肚菌产业的发展。造成羊肚菌生产不稳定的重要原因是菌株栽培适宜性评价技术不完善、栽培菌株质量不稳定等。与分类学属于担子菌门的多数食用菌相比,属于子囊菌门的羊肚菌在物种多样性、交配型基因丢失、快速老化等方面表现突出,因而关于其栽培菌株相关性状的检测要求更高。基于长期理论研究和生产实践经验,提出了包括菌株身份(Identity)识别、交配型(Mating Type)基因检测和菌株活力(Vitality)测定的羊肚菌生产菌株栽培适宜性IMV评价系统,叙述了该评价系统的技术必要性和具体操作方法。两个产季的大田栽培实际应用情况表明,该评价系统可以实现对羊肚菌生产菌株的科学、系统的筛选与评估,以确保适宜菌株用于人工栽培,增加羊肚菌人工栽培的稳定性,进而推动羊肚菌产业的持续和稳定发展。     

NaCl胁迫下六妹羊肚菌菌丝的生理响应及主成分分析

为探究NaCl胁迫对六妹羊肚菌（Morchella sextelata）菌丝生长及生理指标的影响,以六妹羊肚菌作为实验材料,通过设置不同浓度（0、100、200、300、400和500 mmol/L）的NaCl固体培养基和液体培养基对六妹羊肚菌菌丝进行培养,并测定各组的菌丝生长指标、菌丝外观形态、生物量、菌丝质膜透性、渗透调节物质含量以及抗氧化酶活性等参数,分析不同程度NaCl胁迫对六妹羊肚菌菌丝生长和抗性生理的影响,并采用相关性分析和主成分分析的方法筛选不同NaCl浓度下六妹羊肚菌菌丝生长过程中的关键生理指标。结果表明,随着培养基中NaCl浓度的增加,六妹羊肚菌菌丝生长速度、生物量、菌丝直径和胞内多糖的含量呈现下降趋势,而渗透压和电导率则呈上升趋势;可溶性蛋白含量、丙二醛（MDA）含量、脯氨酸（Pro）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（POD）活性和过氧化氢酶（CAT）活性都随NaCl浓度的增加呈先升高后降低的趋势。200 mmol/L NaCl浓度下,丙二醛（MDA）含量、过氧化物酶（POD）活性和过氧化氢酶（CAT）活性出现峰值,脯氨酸（Pro）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性的峰值出现在300 mmol/L NaCl浓度,而可溶性蛋白含量的峰值出现在400 mmol/L NaCl浓度下。通过主成分分析发现,前3个主成分的累计贡献率为96.611%。其中,NaCl浓度在0~100 mmol/L时,指示性生理指标为生长速度、菌丝直径、干重、鲜重和胞内多糖;NaCl浓度在100~200 mmol/L时,指示性生理指标为丙二醛（MDA）含量、可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（POD）活性和过氧化氢酶（CAT）活性;NaCl浓度在200~400 mmol/L时,指示性生理指标为脯氨酸（Pro）含量、可溶性蛋白含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。     

利用原生质体再生技术选育内切型菊粉酶高产菌株

利用原生质体制备与再生技术选育内切型菊粉酶高产菌株,以I200913作为出发菌株(酶活为0.413 u/m L),研究了在不同酶配比酶解液、不同酶解温度、不同酶解时间的条件下,对原生质体制备、再生以及内切型菊粉酶酶活的影响。研究结果表明,在酶配比为:纤维素酶0.7%+蜗牛酶0.2%+溶菌酶0.1%=1%,酶解温度为30℃,酶解时间为2.5h条件下,原生质体形成率最高,为22.32%。在酶配比为:纤维素酶0.7%+蜗牛酶0.2%+溶菌酶0.1%=1%,酶解温度为30℃,酶解时间为2.5h条件下,原生质体再生率最高,为16.02%。在酶配比为:纤维素酶0.7%+蜗牛酶0.2%+溶菌酶0.1%=1%,酶解温度为30℃,酶解时间为2.5h条件下,原生质体再生菌株内切型菊粉酶酶活最高为0.598 u/m L,比出发菌株提高了28%。     

酿造白云边酒优良菌株的分离鉴定

高温堆积是酿造白云边酒的关键工序之一,它不仅仅是网罗、筛选、扩大培养某些微生物的过程,而且也是形成白云边酒某些香味成份及其前体物质的过程。实践证明,高温堆积管理得好,酒醅的香气就好,出酒率也高。为了了解这个关键工序中究竟是哪些微生物起主要作用,我们对堆积后的酒醅进行了单细胞分离,现将初步鉴定结果报告如下: 材料和方法一菌株来源按无菌操作法,自白云边酒厂酿造车间取高温堆积3天后的酒醅5g,加至盛有玻璃珠和95ml生理盐水的三角瓶内,在室温下振荡15分钟(120次/分,旋转式摇床),制成     

正负交配型担孢子接种法鉴定重要甘蔗品种(系)对黑穗病的抗性

以正负交配型担孢子菌株组成的混合菌液作为接种体,对30个重要甘蔗品种(系)进行浸泡接种,鉴定其对黑穗病的抗性。结果表明,抗性水平为高抗(HR)的材料有CP84-1198、CP89-2143等9份;抗性水平为抗(R)的材料有粤糖99-66、粤糖06-581和Q190;抗性水平为中抗(MR)的有HoCP93-746、ROC22和ROC24;CP63-588、ROC25和NCo310这3份材料表现为中感(MS);CP72-1210和F134等9份材料表现为感(S),而CP85-384、HoCP95-988和粤糖63-237则高感(HS)黑穗病。此外,还初步推断广东省湛江遂溪蔗区存在不同于台湾报导的小种1、2和3的甘蔗黑粉菌生理小种。     

羊肚菌胞内多糖MEP-II的分离纯化及其性质分析

从羊肚菌发酵的菌丝体中提取粗多糖,经DEAE-Sepharose F.F和Superdex 200柱层析纯化得到MEP-Ⅱ,琼脂糖电泳法和HPLC法鉴定其为均一组分.凝胶过滤法测得其分子质量为2.8×104u,比色法测其总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量分别为87.5%、8.4%和23.2%.红外光谱呈现多糖的特征吸收峰,含有β-吡喃糖苷键.气相色谱法得其单糖组分为鼠李糖(Rha)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、甘露糖(Man),它们的摩尔比为2.111.335.61.0,β-消去反应初步表明其存在O-糖肽键.     

蚕茧霉变菌株的分离、纯化及鉴定

为鉴定蚕茧霉变菌株种类和防止霉菌危害的发生,从霉变蚕茧中分离纯化得到3株霉菌.采用点植法观察霉菌在察氏培养基上的生长特性、菌落形态及显微结构特征,结合ITS序列测定等分子生物学方法,对蚕茧霉变菌株进行鉴定.结果表明:3株霉菌分别属于曲霉属(Aspergillus),节孢霉属(Arthrinium),黑孢霉属(Nigro...     

产酸菌株的分离及初步鉴定

以实验室自制的柑橘、苹果、猕猴桃、柿子四种果醋为筛选原料,经过菌种的富集培养,采用稀释涂布法分离菌株,最终从柿子醋中分离到8株产醋酸优势菌株,对8株优势菌株进行传代培养,筛选出了在传代培养过程中,产醋酸酸度高且产量稳定的菌株F9,其产算量高达56.26g/L,酒精转化率为78.12%.根据菌株F9形态观察,以及生理生化特征初步确定菌株F9为醋杆菌属菌种.     

Structure,conformation and immunomodulatory activity of a polysaccharide from Morchella sextelata

Fungal polysaccharides are novel ingredients in functional foods with diverse medicinal properties. Here, a polysaccharide, MSP2-1, was isolated from Morchella sextelata fruiting bodies and purified using column chromatography. MSP2-1 (371.5 kDa) is a branched (1 → 4)-α-D-glucan with the O-6 or O-3 position occupied by α-D-Glcp. Light scattering analysis revealed that MSP2-1 has a spherical conformation in 0.9% NaCl solution; this was confirmed using transmission electron microscopy. Finally, MPS2-1 was found to promote proliferation, NO release and cytokine secretion in RAW264.7 cells through a mechanism involving Toll-like receptor 4. Collectively, these results highlight the potential application of MSP2-1 as an immunoenhancing compound for hypoimmunity.     

羊肚菌胞内多糖MEP-Ⅱ的分离纯化及其性质分析

从羊肚菌发酵的菌丝体中提取粗多糖,经DEAE-Sepharose F.F和Superdex 200柱层析纯化得到MEP-Ⅱ,琼脂糖电泳法和HPLC法鉴定其为均一组分。凝胶过滤法测得其分子质量为2.8×10~4u,比色法测其总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量分别为87.5%、8.4%和23.2%。红外光谱呈现多糖的特征吸收峰,含有β-吡喃糖苷键。气相色谱法得其单糖组分为鼠李糖(Rha)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、甘露糖(Man),它们的摩尔比为2.1:11.3:35.6:1.0,β-消去反应初步表明其存在O-糖肽键。     

1株酸浆豆腐中产蛋白酶菌种的分离与鉴定

以市售酸浆豆腐为样品,首先筛选样液适宜的稀释倍数,将样品稀释液接种于马铃薯葡萄糖平板和MRS平板进行纯培养,然后接种于脱脂牛奶培养基,以产透明圈为指标,再以酪蛋白为底物测定酶活,筛选分离产蛋白酶菌种,继而通过肉眼观察菌落形态、光学显微镜和电镜、显微镜观察菌体形态,进一步通过各种生理生化反应、ITS测序方法进行菌种鉴定。结果表明:25 g样品稀释至10^-5浓度适宜,在脱脂牛奶培养基中,温度28 ℃、有氧培养72 h后产生透明圈,酶活为9.6 U/mL;肉眼观察菌落为乳白色,呈绒毛状,有同心圈并呈放射线状,显微镜下节孢子呈单个或链状,扫描电镜观察菌丝体宽4~5.5 μm,孢子大小多数为(3.3~5.7) μm×(7.0~17.1) μm;根据生理生化反应结果,查阅《真菌鉴定手册》,鉴定为白地霉(Geotrichum candidum);ITS测序显示与白地霉同源性达100%。根据生长曲线可知,0~8 h,菌株处于延迟期;8~40 h,菌株处于对数期;40~68 h,菌株处于稳定期;68 h以后,菌株处于衰亡期。     

一株葡聚糖酶产生菌的分离选育及鉴定

利用葡聚糖平板初筛,三角摇瓶复筛,从土壤样品中中分离得到一株葡聚糖酶高产菌株P5,发酵酶活力可以达到2.5U/mL。菌株呈长杆状、革兰氏染色阳性、产芽孢;生理生化实验结果表明该菌株与枯草芽孢杆菌最为相近;16S rDNA基因序列包含1510个碱基对,同源性分析显示该菌株与枯草芽孢杆菌菌株最为相近,最高相似性为99%,基于16S rDNA基因序列的系统发育分析显示,该菌株与枯草芽孢杆菌菌株CD-6及YPM8的亲缘关系最近,根据以上多相分类结果鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌。     

羊肚菌多糖的提取分离纯化及保健功效研究进展

该文在查阅国内外关于羊肚菌(Morchella)多糖提取分离纯化及保健功效研究的相关文献基础上,针对已报道的羊肚菌多糖的提取、分离纯化、理化性质、结构组成及保健功效,综述近年来羊肚菌多糖研究方面的最新进展,为更好的开发和利用该药食资源提供参考和借鉴。     

海洋氨肽酶菌株的筛选鉴定及其酶学特性研究

从大连渤海海域海泥海水样品中分离出一株高产海洋氨肽酶(aminopeptidase)菌株YZ1-2,对其进行形态学、生理生化、分子生物学(16S rDNA)鉴定,确定该菌株为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。并对其产海洋氨肽酶进行酶学特性研究,结果表明,最适作用温度为30 ℃;最适作用pH值为8.5;Co2+、Zn2+等能较强地激活氨肽酶的活性,Ni2+、Ca2+等对酶的抑制性较强;乙二胺四乙酸(EDTA)可以有效地抑制氨肽酶活性。     

一株植物乳杆菌的分离鉴定及应用

从湖南自然发酵的酸豇豆中分离出一株疑似乳酸菌菌株L4,提取其16S rDNA,并经测序、同源性分析和系统发育树构建等,对其属种进行鉴定。结果表明,菌株L4为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。通过耐盐、耐酸和降解亚硝酸盐实验发现,菌株L4可在10%食盐含量条件下生长,耐受pH 2.5,对亚硝酸盐的降解率高达99%。接种菌株L4发酵萝卜干,以自然发酵萝卜干为对照,对发酵萝卜干进行感官评定初步探究该菌株发酵萝卜干的特性。结果表明,菌株L4可以缩短萝卜干发酵周期,提高发酵萝卜干感官评分。     

一株产壳聚糖酶芽孢杆菌的分离及鉴定

采用透明圈法,从黄河三角洲地区的腐败落叶分离出9株产壳聚糖酶的菌株。再经菌株分离纯化、液体发酵复筛及酶活研究,确定其中1株为壳聚糖酶高产菌株,命名为XHT-0903。通过形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析进行菌株鉴定,确定XHT-0903为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）。其液体发酵酶活力达20 U/mL,具有较好的开发及应用价值。