酶解鱼鳔蛋白制备胶原蛋白肽饮品

通过酶解鱼鳔蛋白制备分子量低于2000 Da的胶原蛋白肽液,并配制成胶原蛋白肽饮品.采用木瓜蛋白酶对鱼鳔蛋白进行酶解,利用响应面优化方法分析酶解温度、酶解时间、加酶量对酶解液中胶原蛋白肽分子量的影响,以相对分子质量低于2000 Da的胶原蛋白肽所占比例为考察指标,确定最优酶解条件,并添加低聚果糖将其配制成胶原蛋白肽饮品...     

乌鸡低聚肽亚铁螯合物的分离纯化与结构鉴定（英文）

从乌鸡中酶解得到乌鸡低聚肽,然后与亚铁螯合制备乌鸡低聚肽亚铁螯合物,螯合率为84.76±0.12%。乌鸡低聚肽亚铁螯合物具有较高的蛋白质含量,高达54.64±1.03%。并且分子量较低,其中分子量小于1000 u的占85.50%。通过扫描电镜、红外光谱对乌鸡低聚肽亚铁螯合物的结构进行分析,结果表明乌鸡低聚肽亚铁螯合物是一种新型的铁螯合物。体外稳定性研究表明乌鸡低聚肽亚铁螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和体外消化稳定性。通过反相高效液相色谱对乌鸡低聚肽亚铁螯合物进行分离纯化,选择一个主要的组分进行收集,然后利用质谱仪进行质谱分析。从乌鸡低聚肽亚铁螯合物的主要组分中鉴定出一个五肽,氨基酸序列为Thr-Ser-Gly-Met-Pro。乌鸡低聚肽亚铁螯合物可作为一种铁补充剂用于食品添加剂、营养物及医药制品中。     

石金钱龟低聚肽制备工艺优化及其抑制新冠病毒的潜能

为了探究石金钱龟低聚肽作为新冠肺炎病毒（SARS-CoV-2）药物开发原料的可能性,该研究用“风味蛋白酶+木瓜蛋白酶”组合对龟肉进行酶解,通过不同酶配比、加酶量、pH和酶解时间的单因素实验和正交实验确定最优工艺条件,制备出石金钱龟低聚肽。再通过HPLC-MS分离、Peak Studio解析、Peptide Ranker活性预测逐步筛选出活性较高的低聚肽,最后进行各低聚肽序列与SARS-COV-2棘突蛋白（S蛋白）的分子对接。结果显示,最佳工艺参数为风味蛋白酶:木瓜蛋白酶=7:3、加酶量7%、pH 5.5、酶解时间4 h,此时的水解度为42.56%;Peak Studio解析出可信度（ALC）>90%的肽共510条,经Peptide Ranker生物活性评估后筛选出6条低聚肽与S蛋白分子对接,低聚肽序列分别为：LDFFK、LDFFKAL、FRVL、AFRVL、AGGKPFQ、SPFRVT,其Docking Score 在-138.50~-169.68之间,其中LDFFKAL的Docking Score最低,为-169.68,说明该低聚肽抑制新冠肺炎病毒的潜能最强。总的来说,经工艺优化后石金钱龟龟肉的水解度大大增加,且制得的石金钱龟低聚肽有较强的抑制新冠肺炎病毒的潜能。     

4种大孔吸附树脂对阿胶低聚肽的脱苦效果研究

阿胶水解所得阿胶低聚肽具有极强的苦味严重影响其口感。为降低阿胶低聚肽苦味,采用AB-8、DA201-C、DA-201C和D101等4种不同规格大孔吸附树脂对阿胶低聚肽进行脱苦研究,经静态、动态吸附和解吸试验考察4种树脂对阿胶低聚肽的吸附、解吸和脱苦效果,并研究分离前后样品氨基酸组成和分子量分布的差别。结果表明:DA201-C型大孔吸附树脂对阿胶低聚肽的脱苦效果优于其他3种树脂,且用体积分数为25%的乙醇洗脱组分苦味较分离前显著降低,洗脱组分得率为91.07%;且分离后的阿胶低聚肽组分中疏水性氨基酸的百分含量与分离前相比降低,分子质量分布在87.56 Da~1 874.85 Da之间。综合评价DA201-C大孔吸附树脂综合对阿胶低聚肽苦味脱除性能较好,适合阿胶低聚肽的脱苦。     

酪蛋白酶解物的分离及其抗氧化活性

采用胃蛋白酶和胰蛋白酶(P+T)先后连续水解酪蛋白,采用001阳离子交换树脂分离该酶解液得到多肽;以酪蛋白的单一胃蛋白酶(P)和单一胰蛋白酶(T)酶解液为对照,系统评价酪蛋白不同酶解液及分离所获得的酪蛋白多肽的抗氧化活性。结果表明,阳离子交换树脂对(P+T)酶解液具有较好的分离作用,洗脱曲线共有4个峰,分别为P1、P2、P3、P4,收集冻干制得4个多肽。抗氧化性评价显示,P1、P2、P3、P4的还原力和DPPH自由基清除能力远高于未经分离的P、T和(P+T)酶解液。多肽P4表现出极高的Fe²⁺螯合能力,螯合率高达94.95%;P、T和(P+T)酶解液的Fe²⁺螯合力相当,螯合率达31%~33%,而P1、P2、P3不具备Fe²⁺螯合能力。在脂质过氧化抑制方面,P酶解液表现出较好的抑制力,其次为T酶解液,多肽P1、P2、P3、P4及(P+T)不具有脂质过氧化抑制力。由此可见,(P+T)连续水解液经阳离子交换树脂分离可制备具有较高自由基清除力及Fe²⁺螯合力的肽段,研究结论可为酪蛋白抗氧化肽的制备及分离提供参考依据。     

乌鸡低聚肽亚铁螯合物的分离纯化与结构鉴定

从乌鸡中酶解得到乌鸡低聚肽,然后与亚铁螯合制备乌鸡低聚肽亚铁螯合物,螯合率为84.76±0.12%。乌鸡低聚肽亚铁螯合物具有较高的蛋白质含量,高达54.64±1.03%。并且分子量较低,其中分子量小于1000 u的占85.50%。通过扫描电镜、红外光谱对乌鸡低聚肽亚铁螯合物的结构进行分析,结果表明乌鸡低聚肽亚铁螯合物是一种新型的铁螯合物。体外稳定性研究表明乌鸡低聚肽亚铁螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和体外消化稳定性。通过反相高效液相色谱对乌鸡低聚肽亚铁螯合物进行分离纯化,选择一个主要的组分进行收集,然后利用质谱仪进行质谱分析。从乌鸡低聚肽亚铁螯合物的主要组分中鉴定出一个五肽,氨基酸序列为Thr-Ser-Gly-Met-Pro。乌鸡低聚肽亚铁螯合物可作为一种铁补充剂用于食品添加剂、营养物及医药制品中。     

响应曲面法优化驼血多肽酶解工艺研究

试验以驼血为原料,利用响应曲面法(RSM)对驼血多肽的制备工艺进行优化。以酶解产物中低聚肽所占比例为响应值,考察蛋白酶A的加入量、酶解时间和酶解温度3个因素对驼血多肽酶解工艺的影响。在单因素试验的基础上,选取试验因素与水平,根据中心组合(Box-Behnken)试验设计原理,采用三因素三水平的响应曲面法对各个因素的显著性和交互作用进行分析。结果表明:驼血多肽酶解的最佳工艺条件为:蛋白酶A的加入量2.47%,酶解时间3 h,酶解温度60℃,该条件下酶解液中低聚肽所占比例为98.51%。试验可为从驼血中分离制备驼血多肽提供技术支持。     

大孔树脂对酶解大豆肽脱盐效果影响及其最佳条件研究

本文旨在研究不同种类大孔树脂对酶解大豆肽吸附和解吸过程中脱盐效果的影响及其最佳条件。以酶解大豆肽为研究对象,首先以DA201-C、AB-8、D3520、D4006和NAX-Ⅱ5种不同的大孔吸附树脂进行酶解大豆肽的脱盐效果研究,得出DA201-C树脂对酶解液的脱盐效果最好;并对DA201-C树脂进行静态吸附解析工艺的优化并测定其动态吸附解吸实验,得出最佳条件为:pH4.5,酶解液浓度为60mg/mL,75%乙醇洗脱,脱盐率达到93.23%,肽回收率为88.5%。     

大孔树脂对酶解大豆肽脱盐效果影响及其最佳条件研究

本文旨在研究不同种类大孔树脂对酶解大豆肽吸附和解吸过程中脱盐效果的影响及其最佳条件。以酶解大豆肽为研究对象,首先以DA201-C、AB-8、D3520、D4006和NAX-Ⅱ5种不同的大孔吸附树脂进行酶解大豆肽的脱盐效果研究,得出DA201-C树脂对酶解液的脱盐效果最好;并对DA201-C树脂进行静态吸附解析工艺的优化并测定其动态吸附解吸实验,得出最佳条件为:pH4.5,酶解液浓度为60mg/mL,75%乙醇洗脱,脱盐率达到93.23%,肽回收率为88.5%。      

堇叶碎米荠低聚肽制备工艺优化及结构特征、氧化活性研究

目的：制备堇叶碎米荠低聚肽,并拓展其应用范围。方法：以堇叶碎米荠为原料,使用碱性蛋白酶酶解,采用超滤膜进行分离浓缩,冷冻干燥后获取堇叶碎米荠低聚肽粉末,并对该低聚肽的结构和抗氧化活性进行分析。结果：堇叶碎米荠蛋白水解的最佳工艺条件为酶解温度50 ℃、酶解pH 10、加酶量4%、底物质量分数2%,此条件下水解度为17.9%;堇叶碎米荠低聚肽的蛋白质和多肽含量分别为49.01%和42.87%;该低聚肽在200~220 nm有较强的吸收带,具有酰胺键的特征吸收峰,二级结构以β-转角为主,相对分子质量＜1 000的约占90%;当堇叶碎米荠低聚肽质量浓度为20 mg/mL时,其羟自由基、ABTS自由基、DPPH自由基清除率分别为84.54%,98.22%,60.33%。结论：试验优化的堇叶碎米荠低聚肽制备工艺合理可行,堇叶碎米荠低聚肽具有抗氧化活性。