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壳聚糖涂层亲和层析在超氧化物歧化酶纯化中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
1前言亲和层析是蛋白质纯化中分离效率最高的技术之一。亲和配基有多种形式如单机、底物、活性染料、金属离子等。固定化金属离子亲和层析(Immobilizedmetalionaffinitychromatog’“PhyIMAC)是Porath在1975年首先研究的一种高效分离技术[‘3。IMAC和普通的亲和层析相比,具有一些优点,如亲和配基Cu’”、Zn’“价廉;可在高盐浓度下操作;稳定,容易再生。Sulkowke曾用IMAC技术分离纯化干扰素,一步可纯化产品几十倍【“,收率达90%。目前IMAC介质制备是先在软基质SePharose或SePhadex上用化学交联法弓卜螫合剂IDA(Imino… 相似文献
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《中国生物制品学杂志》2014,(5)
目的比较应用于抗体药物捕获的耐碱的4种蛋白A亲和层析介质和2种小分子亲和层析介质的性能,为单抗纯化工艺的选择提供参考。方法利用两种单抗纯品(mAb1和mAb2)测定4种蛋白A亲和层析介质MabSelectSuRe、POROS MabCaptureA、Absolute High Cap、TOYOPEARL AF-rProtein A-650F和2种小分子亲和层析介质Mabsorbent A2P HF、Fabsorbent F1P HF在停留时间分别为4、6、8 min时的动态载量;利用含mAb2的发酵液,从回收率和杂质去除方面比较6种亲和层析介质的纯化效果。结果在5%穿透点,各介质对mAb1和mAb2的动态载量在35~73 g/L之间。小分子亲和层析介质Mabsorbent A2P HF纯化mAb2的回收率为89%,其他5种介质纯化mAb2的回收率均≥96%;6种介质纯化mAb2的宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)在2 000 ppm之内,蛋白A残留量在20 ppm之内。结论结合流速、动态载量、回收率和杂质去除效果等指标,可从6种亲和层析介质中挑选适用于抗体类药物下游纯化工艺的耐碱型蛋白A或小分子亲和介质。 相似文献
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壳聚糖凝胶的制备及其性质的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以甲醛和乙酸酐为交联剂,壳聚糖为母体制备的壳聚糖凝胶LCM-X(LCM-1、LCM-2)既不溶于水、稀酸和碱溶液,也不溶于一般的有机溶剂。LCM-X的透光率、机械强度、溶解率和吸水率等性质的测定结果:LCM-1分别为85.5%、41.1 mg/mm~3、133.3%和223.5%;LCM-2分别为95.2%、352.0 mg/mm~3、225.0%和286.5%。红外光谱分析证明,LCM-1含有—NH_2(668 cm~(-1))、N—H(1558 cm~(-1))、—NH—C—CH_3(1653~1558 cm~(-1))、C—N(1420 cm~(-1))和—OH、—NH_2(3448 cm~(-1))等基团;LCM-2含有—NH—C—CH_3(1670~1558cm~(-1))、—OH、N—H(3373~3268 cm~(-1))、—NH_2(3490~3400 cm~(-1))等基因,因此LCM-X是具有活性基因(—NH_2)的凝胶。 相似文献
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从虾蟹壳制备甲壳素及壳聚糖的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
本文以云南出产的蟹、虾的外壳为原料,制备出粘度高、色泽洁白的甲壳素和壳聚糖产品。同时,对制备过程中酸、碱的浓度、反应温度和时间,配料比以及氧化还原的条件等对产品质量和收率的影响进行了研究。找出了较好的生产工艺条件。 相似文献
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亲和色谱技术研究进展 总被引:4,自引:0,他引:4
亲和色谱具有高选择、高活性回收率和高纯度等特点,已成为生物工程中分离纯化最有效的技术之一,是生物化工研究的重要方向。综述了亲和色谱技术及其发展趋势。 相似文献
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羧甲基壳聚糖的制备及在水处理中的应用研究进展 总被引:4,自引:0,他引:4
主要介绍了壳聚糖水溶性衍生物—羧甲基壳聚糖的制备方法及在水处理中的应用研究,羧甲基壳聚糖在水处理方面有广泛的应用前景。 相似文献
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使用M9培养基,以大肠杆菌BL21为宿主菌、pET32a(+)为载体,在15℃、IPTG浓度为0.8 mmol.L-1、150 r.min-1、诱导时间为4 d的条件下,SPA能够得到高效表达;在SPA∶Sepharose 4B=1∶1(质量体积比)、偶联时间为14 h时,SPA偶联率为89.67%,对IgG的纯化效果最好。 相似文献
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重组G145R HBsAg亲和纯化方法的建立及其应用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的建立重组乙型肝炎病毒G145R变异HBsAg抗体亲和纯化方法。方法用抗-HBs单克隆抗体(D12- McAb)制备亲和层析胶,对2A8细胞(分泌G145R变异HBsAg)培养上清盐析物进行亲和纯化。采用SDS-PAGE、Western blot及ELISA,对纯化产物的纯度、特异性、含量和回收率进行鉴定,并与同法纯化的HBsAg阳性血清及r-wHBsAg提取物进行比较。结果D12-McAb对重组真核表达G145R变异HBsAg、HBsAg阳性血清及r-wHBsAS三者具有相似的亲和性,产物纯度分别为90.3%、95.2%和93.1%,回收率分别为43.3%、72.0%和66.4%。结论已成功地建立了重组G145R变异HBsAg抗体亲和纯化方法,为G145R变异以及其他HBV免疫逃逸变异感染的深入研究奠定了重要的技术基础。 相似文献
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Diffusion coefficients of different sugars and the sugar alcohol sorbitol have been determined by two different experimental setups: mass transfer through a flat membrane in a diffusion cell and effusion experiments with beads in a batch stirred vessel. Diffusion experiments show highly consistent data with low uncertainties and high regression coefficients, while effusion experiments suffer from larger experimental uncertainties. For the diffusion through a chitosan membrane at 25 °C, typically one‐third of the free molecular diffusion coefficient is found, whereas at 40 °C only one‐quarter of it is reached. The influence of molecular size, structure, and temperature on the transport properties is discussed in detail. 相似文献