黑曲霉植酸酶的纯化及性质研究

对黑曲霉液态发酵植酸酶的纯化及其性质进行了初步探讨.采用葡聚糖凝胶过滤及纤维素离子交换层析对粗酶液进行纯化,电泳显示为单一谱带,该酶的相对分子质量为63000.研究显示其性质为:37℃的条件下以植酸钠为底物的米氏常数为0 31mmol/L,该酶最适pH为5 5,最适作用温度为55℃.研究了金属离子对植酸酶活力的影响.     

一株高产细胞表面植酸酶酵母的产酶性质

对一株高产细胞表面植酸酶酵母突变株WZ 4菌的细胞植酸酶性质进行了研究,结果表明:该酶的最适pH为5,最适温度为50℃,Km为0.666mmol/L。此外,WZ 4菌产植酸酶受控于培养基中的磷的质量浓度,最大产酶磷的质量浓度为50mg/L,当磷的质量浓度大于0.1g/L时产酶被完全阻遏。     

基因工程重组酵母植酸酶性质研究

对基因工程重组酵母所产的植酸酶进行分离和纯化 ,并考察纯化酶的酶学性质。该植酸酶酶蛋白分子量为 85 .2kD ;有 2个pH活力峰 :pH 2 .0和 pH 5 .0 ;最适温度为 5 0℃ ;在 3 7℃下以植酸钠为底物的反应初速度为 3 3 .5 μmol/(min·mL) ,米氏常数Km 为 0 .71mmol/L ;Ca2 +对此酶有较强的激活作用 ,Zn2 +、Fe2 +、Cu2 +、Al3+和Fe2 +对其有较强的抑制作用 ,而K+、Na+和Mg2 +对酶活性影响不大。     

基因工程重组酵母植酸酶性质研究

对基因工程重组酵母所产的植酸酶进行分离和纯化 ,并考察纯化酶的酶学性质。该植酸酶酶蛋白分子量为 85 .2kD ;有 2个pH活力峰 :pH 2 .0和 pH 5 .0 ;最适温度为 5 0℃ ;在 3 7℃下以植酸钠为底物的反应初速度为 3 3 .5 μmol/(min·mL) ,米氏常数Km 为 0 .71mmol/L ;Ca2 +对此酶有较强的激活作用 ,Zn2 +、Fe2 +、Cu2 +、Al3+和Fe2 +对其有较强的抑制作用 ,而K+、Na+和Mg2 +对酶活性影响不大。     

海参肠中溶菌酶的分离纯化及其酶学性质

从海参肠中分离纯化溶菌酶,并测定其酶学性质及抑菌作用。在4℃下将海参肠打浆,用Tris-HCl缓冲液抽提。上清液经浊点萃取法（CPE）浓缩、阳离子交换柱（CM52纤维素）层析和SephadexG-75凝胶过滤层析分步纯化,得到电泳纯的溶菌酶。该酶的比活力达到3026．1U／mg,纯化倍数为18．7,活力回收为46．0％。对纯化的溶菌酶性质研究表明,该酶相对分子质量约为16000,对溶壁微球菌的最适作用温度为35℃,最适作用pH6．5,在45℃以下和pH4．O～8．0都有较好的稳定性,并与常见金属离子和化学试剂有良好的配伍性。与通常从蛋清中提取的溶菌酶相比较,从海参中分离纯化的溶菌酶具有广谱杀菌功能,即对常见的革兰氏阴性菌和阳性菌细胞壁均有溶解作用。     

黑曲霉β—D甘露聚糖酶酶学性质及化学组成

在纯化研究的基础上对土壤中筛选诱变得到的黑曲霉菌株所产的β－Ｄ甘露聚糖酶进行了部分酶学性质的研究。该酶的最适温度为５５℃,最适ｐＨ为５．５,酸碱稳定区域为４．５￣８．０,以魔芋精粉和瓜儿豆胶为底物分别测得该酶米氏常数为１４．２ｇ／Ｌ,１０．２ｇ／Ｌ,发现Ａｇ＾＋、Ｐｂ＾２＋离子对该酶有较强的抑制作用,Ｃａ＾２＋离子有一定的激活作用。纯化酶的氨基酸组成分析表明,天门冬氨酸和谷氨酸（包括酰胺）含量为２     

黑曲霉496-1菌株植酸酶的分离纯化及酶学性质

黑曲霉(A.niger)496-1菌株所产胞外植酸酶，经透析浓缩、DEAE-cellulose离子交换层析及Sephadex G-75，Sephacryl 100凝胶过滤，获得了2个植酸酶，其相对分子质量分别为64200及41100该2个植酸酶的最适pH分别为6．0和3．0，最适温度分别为55℃和40℃．初步确定一个是中性植酸酶，另一个为酸性植酸酶．     

黑曲霉糖化酶基因在酿酒酵母中的表达

从黑曲霉eDNA文库中筛选出糖化酶基因,并在酿酒酵母中进行表达．阳性克隆在发酵培养基中培养60h后,产生的糖化酶酶活力达到峰值为4．3U／mL．测定结果显示其糖化酶大小为1908bp,编码636个氨基酸残基组成的蛋白质．酶学性质分析显示该酶的最适反应温度为50℃,pH为5．0．经柱分离纯化其发酵上清液后,SDS-PAGE电泳方法,测得它的分子量大约为70kD,且条带清晰．     

具脂肪酶和酯酶活性酵母菌的选育及酶学研究

从青岛市区含油土壤中筛选得到一株酵母S9菌株，它可以同时产生较高酶活的脂肪酶和酯酶．对影响S9产脂肪酶和酯酶的各种因素进行了研究，1％的可溶性淀粉为最佳碳源，最适的初始培养pH和温度分别为pH 6．5和28℃，对S9脂肪酶和酯酶的各种酶学性质进行的研究表明，脂肪酶和酯酶的最适作用温度都为30℃，最适作用pH分别为7．0和8．0，两者都属于常温酶，在30～40℃范围内比较稳定，脂肪酶在中性偏碱的pH环境中比较稳定，酯酶属于碱性酶，在pH 7．5～10．5范围内相当稳定。     

木薯醇腈酶部分酶学性质研究

对利用基因重组技术获得的木薯醇腈酶（HNL）的酶学特异性进行研究，确定了其部分酶学性质。重组木薯HNL的最适温度为50℃，最适pH值为5．5。重组木薯HNL在60℃条件下，保温30min后仍具有90％的酶活力，说明温度稳定性较好；在pH4．0～6．0的条件下，获得的相对酶活仍大于80％。     

麦芽根中核酸酶的分离纯化及性质研究

采用硫酸铵沉淀及色谱分离技术对麦芽根中核酸酶进行了分离纯化，通过Sephacryl S-200,DEAE Sephadex A-50 and Sephacryl S-200 3步色谱分离，得到了部分纯化的两种核酸酶（I和II），核酸I的纯化倍数为94，核酸酶II的纯化倍数为1790，高效液相色谱显示两种酶作用于酵母RNA的产物均为5－核苷酸，核酸酶I的热稳定性比核酸酶II好，在55度下保温2小时后，核酸酶I的活力损失仅13％，而核酸酶II则高达64％，两种酶的最适温度分别为55％和65度，两种酶的PH稳定性相似，在PH2．5－9．0范围内很稳定，核酸酶I的最适PH值为5．0和8．0－8．5，核酶酶II的最适PH范围为4．0－5．5。     

猪心苹果酸脱氢酶的分离纯化及性质

采用组织破碎，二度硫酸铵盐析，DEAE Sepharose F．F．离子交换层析及SephadexG-75Fine凝胶过滤等纯化方法，从猪心中提取得到了苹果酸脱氢酶。提取纯化的苹果酸脱氢酶经SDS-PAGE测定显示为单一条带，相对分子质量为34000。酶活回收率为57．99％，最适pH为8．0，最适温度为50℃。     

曲霉CJ22—326内切壳聚糖酶的分离纯化和性质

使用75％乙醇沉淀、CM-Sepharose FF离子交换色谱、Sephacryl S-200凝胶过滤色谱和Phenyl Sepharose CL-4B疏水色谱分离纯化技术，对曲霉CJ22-326发酵液中的内切壳聚糖酶进行分离纯化和性质研究．结果表明，纯化后的内切壳聚糖酶ChiB经SDS-PAGE凝胶电泳鉴定为单带，其相对分子质量为27 700．采用Sephacryl S-200凝胶过滤色谱测定的相对分子质量为27 800．ChiB作用最适温度为65℃，最适PH值为6．0，75℃保温1h还残留40％酶活．1mmol／L Mn^2 对ChiB有强烈激活作用，2mmol／L Cu^2 ，Ag^ ，Hg^2 ，Cd^2 ，Fe^3 有强烈抑制作用．ChiB作用的最适底物为脱乙酰度95%的胶体壳聚糖．     

麦冬多糖糖苷酶的分离纯化及其酶性质

分离纯化了Absidia sp.O84s菌产的麦冬多糖糖苷酶,并对其酶性质进行了研究。结果表明,酶蛋白的分子质量为72 ku,最适pH为5.0,在pH 4.0~8.0范围内稳定。最适反应温度为40℃,在20~55℃范围内稳定。Ca+、K+、Na+、Fe3+、Mg2+Zn2+对该酶活性没有影响,Cu2+对酶活力具有抑制作用。酶反应动力学参数Vmax=0.131 5 mmol/(h.L),Km=2.375 mmol/L。     

麦冬多糖糖苷酶的分离纯化及其酶性质

分离纯化了Absidia sp.O84s菌产的麦冬多糖糖苷酶,并对其酶性质进行了研究。结果表明,酶蛋白的分子质量为72 ku,最适pH为5.0,在pH 4.0~8.0范围内稳定。最适反应温度为40℃,在20~55℃范围内稳定。Ca+、K+、Na+、Fe3+、Mg2+Zn2+对该酶活性没有影响,Cu2+对酶活力具有抑制作用。酶反应动力学参数Vmax=0.131 5 mmol/(h.L),Km=2.375 mmol/L。     

一种酵母菌菊粉酶性质及其基因测序

报道了来源于毕赤酵母（Pichia)Y109菊粉酶酶学性质和该菊粉酶基因的序列分析。Y109菊粉酶最适反应pH值4．5，最适反应温度55℃，为外切型菊粉酶。PCR扩增Y109菊粉酶基因并进行核苷酸序列分析，该菊粉酶的基因全长1665bp，没有内含子，存在4个潜在的N－糖基化位点。     

植物来源穿山龙皂苷酶的分离提纯及其酶性质

对从麦麸中提取的穿山龙薯蓣皂苷酶进行分离提纯并对其酶性质进行鉴定．结果表明，该酶的分子质量约为65km该酶不仅能水解穿山龙薯蓣皂苷的α-鼠李糖基，也能水解人参皂苷Rc的20-O-α-阿拉伯糖基和3-O-β-葡萄糖基，酶反应的最佳温度为40℃，最适pH值为5．     

江米酒酒醪中凝乳酶酶学性质的初步研究

对江米酒中提取纯化得到的凝乳酶的酶学性质进行了研究．结果表明,该凝乳酶反应的最适反应温度为35。40℃,60℃保持20min完全失活;随着pH的降低凝乳活力提高,在pH1～7范围内稳定,最适pH为5．2;Na＋、K＋对其凝乳活力表现微弱的抑制作用,而NH4＋、Mg2＋,ca2＋、Ba2＋、Zn2＋、Mn^2＋、Al^3＋、Fe^2＋有明显的促进作用．离子型表面活性剂对凝乳酶活力有明显的抑制作用,非离子型表面活性剂对凝乳活力具有明显的促进作用．多羟基化合物、p巯基乙醇及乙二胺四乙酸（EDTA）作为酶的修饰剂对酶活力具有不同的影响．     

海参肠道β-1，3-葡聚糖酶的提取条件及其酶学性质

对海参肠道β-1，3-葡聚糖酶的提取条件及酶学性质进行了研究．结果表明，最佳提取条件为：pH6．0的磷酸盐浸提液0．05mol／L，NaCl浓度为0．05mol／L，缓冲液体积与海参肠质量之比为4：1，硫酸铵饱和度为80％；该酶最适反应条件为：温度40℃，pH6．0；该酶在10-40℃，pH5．O～6．5酶活力稳定．Mn^2＋对酶具有一定的激活作用，Cu^2＋、Cd^2＋、Mg^2＋、Fe^2＋、Zn^2＋、Bd^2＋、K^＋、Ag^＋对酶存在不同程度的抑制，其中Cu^2＋对酶的抑制作用最强．     

G8r菌产人参皂苷糖苷酶的酶性质及酶水解作用

对由Absidia sp.G8r菌产的人参皂苷糖苷酶(Glc8)进行了分离纯化,并对其酶性质和酶水解作用进行了研究.结果表明,该酶的分子质量约为72 ku,酶反应的最适温度和pH分别为30 ℃和5.0,在20～60 ℃、pH 3.0～7.0条件下稳定性较好.该酶水解人参皂苷Rb1生成人参皂苷C-K,水解过程是分步进行的...