绿原酸对高脂饲喂SD大鼠脂肪组织三酰甘油合成降解关键酶基因表达的影响

目的:研究绿原酸对高脂饲喂SD大鼠附睾脂肪组织三酰甘油合成及代谢关键酶基因表达的影响,探讨绿原酸改善肥胖的新靶点。方法:雄性SD大鼠随机分成对照组(NC)、高脂饲料模型组(HFD)、高脂饲料+绿原酸低、高剂量组(20、90mg·kg-1·d-1,HFD-LC、HFD-HC)和罗格列酮组(ROS),饲养12周后处死,测定体脂含量变化以及附睾脂肪组织中二酰甘油酰基转移酶(Diacylgycerol acyltransferase 2,DGAT2)、甘油三脂脂肪酶(Adipose triglyceride lipase,ATGL)和激素敏感脂肪酶(Hormone-sensitive lipase,HSL)mRNA表达水平。结果:与NC组相比,HFD组体脂含量、DGAT2、HSL mRNA表达水平明显升高,ATGL mRNA表达水平下降不显著。与HFD组相比,HFD-LC、HFD-HC对体脂率、DGAT2 mRNA影响不明显(p0.05),但能极显著提高ATGL mRNA表达水平,HFD-HC组HSL表达水平也极显著上升。结论:绿原酸能显著提高大鼠附睾脂肪组织ATGL和HSL mRNA表达水平,有效控制体脂堆积。     

枸杞蛋白酶解液对自发性高血压大鼠的降血压机制研究

目的:探讨枸杞蛋白酶解液对自发性高血压大鼠(SHR)肾素血管紧张素系统(RAS)的影响及其可能的降压机制。方法:分别灌胃SPF级Wistar大鼠近交系雄性SHR大鼠生理盐水、10 mg/kg卡托普利、枸杞蛋白酶解液低剂量组(40 mg/kg)、枸杞蛋白酶解液中剂量组(80 mg/kg)、枸杞蛋白酶解液高剂量组(100 mg/kg),Wistar-Kyoto(正常大鼠,WKY)作为正常对照组灌胃生理盐水,共9周。采用酶联免疫吸附法测定其血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法测量心脏和肾脏组织中的血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1-R)、血管紧张素转换酶2(ACE2)和Mas受体(Mas-R) mRNA的表达水平。结果:与WKY组相比,SHR大鼠的进食量显著增加而体重均显著低于WKY组(p 0.05),其收缩压(SBP)与舒张压(DBP)均显著升高(p 0.05),血浆中AngⅡ含量明显升高,ACE、AT1-R mRNA表达上调,而ACE2、Mas-R mRNA表达下调;与生理盐水处理组SHR大鼠比较,卡托普利组体重显著降低(p 0.05);卡托普利组、低、中、高剂量组SHR大鼠的SBP均显著下降(p 0.05);其中枸杞蛋白酶解液低剂量组显著降低SHR大鼠血浆中AngⅡ含量(p 0.05),下调心脏及肾脏组织中ACE mRNA表达水平(p 0.05),上调ACE2 mRNA表达水平(p 0.05)。结论:枸杞蛋白酶解液可以有效降低SHR大鼠的血压,其作用机制可能是通过抑制ACE活性,下调ACE、AngⅡ和AT1-R mRNA表达水平,上调ACE2和Mas-R mRNA表达水平起到降压作用。     

脱脂米糠可溶性膳食纤维对小肠葡萄糖吸收和转运的影响及其作用机制

目的:探讨绿色木霉发酵法制备的脱脂米糠可溶性膳食纤维(soluble dietary fiber from defatted rice bran,DRB-SDF)对小肠葡萄糖吸收和转运的影响及其作用机制。方法:以Caco-2细胞为研究对象,分别建立葡萄糖吸收和转运模型,设置正常组、阳性阿卡波糖对照组(25μg/mL)以及DRB-SDF低、中、高(2、4、8 mg/mL)剂量组。在DRB-SDF作用一定时间后,采用CCK-8法检测Caco-2细胞活力、氧化酶-偶联比色法检测葡萄糖质量浓度、酶活力检测试剂盒测定α-葡萄糖苷酶活力、逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应测定α-葡萄糖苷酶以及SGLT-1、GLUT-2和Na~+-K~+-ATP酶mRNA的表达水平。结果:DRB-SDF质量浓度小于8 mg/mL时对Caco-2细胞增殖未产生显著影响。相比于正常组,DRB-SDF低、中、高剂量组葡萄糖吸收和转运水平均被抑制,并呈浓度依赖性。DRB-SDF作用后,Caco-2细胞α-葡萄糖苷酶活力明显被抑制,同时α-葡萄糖苷酶、SGLT-1、GLUT-2和Na~+-K~+-ATP酶mRNA的表达水平均显著下降(P0.05)。结论:DRB-SDF可能通过抑制α-葡萄糖苷酶活性,降低小肠上皮细胞葡萄糖转运载体蛋白SGLT-1、GLUT-2和Na~+-K~+-ATP酶mRNA的表达,抑制碳水化合物水解,占据葡萄糖的吸收位点等途径,延缓小肠葡萄糖的吸收和转运,最终降低餐后高血糖。     

紫薯提取物对雌性果蝇寿命的影响及其作用机制

目的:研究紫薯提取物(Purple Sweet Potato Extract,PSPE)对雌性果蝇寿命的影响并探讨其延缓衰老的作用机制。方法:采用2天龄果蝇作为研究对象,培养于分别添加0、0.5、2.0、5.0 mg/m L PSPE的培养基,统计果蝇寿命,计算果蝇平均寿命和最高寿命。测定果蝇体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力及丙二醛(malonaldehyde,MDA)的含量。Real TimePCR法测定果蝇体内SOD、CAT及MTH的mRNA表达水平。结果:添加PSPE可以显著延长果蝇的平均寿命(2.0、5.0mg/m L,P<0.05);5.0mg/m L PSPE可以极显著升高Cu-Zn-SOD和CAT酶活力(P<0.01),显著降低MDA含量(P<0.05)。Real Time-PCR结果显示,给予5.0mg/m L PSPE能够显著上调Cu-ZnSOD、Mn-SOD mRNA表达水平(P<0.05)且极显著上调CAT mRNA表达水平(P<0.01)。结论:紫薯提取物对果蝇具有延缓衰老和抗氧化作用。     

苦瓜水提物和醇提物对HepG2细胞胰岛素抵抗的调节作用

为研究苦瓜水提物(BMWE)和醇提物(BMEE)调节胰岛素抵抗的异同点,本文采用棕榈酸诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗(IR)细胞模型,测定了BMWE和BMEE对HepG2-IR细胞葡萄糖消耗量、糖原、甘油三酯(TG)、ATP及胰岛素抵抗信号通路相关基因mRNA表达水平的影响。结果表明,BMWE和BMEE均可显著增加IR细胞的葡萄糖消耗量和胞内糖原含量;BMEE还能显著降低细胞中TG含量(112.08%vs.132.97%)、增加细胞中ATP含量(80.62%vs.48.44%);同时BMWE和BMEE均能显著提高IR细胞中IRS1(胰岛素受体1)、PI3K(磷脂酰肌醇-3-激酶)、AMPK(腺苷酸活化蛋白激酶)和CPT1(肉毒碱棕榈酰转移酶1)mRNA的表达水平,降低ACC2(乙酰辅酶A羟化酶2)mRNA的表达水平;BMWE还可增加细胞中AKT(蛋白激酶B)mRNA的表达水平。在mRNA水平,BMWE通过激活IR细胞的IRS1-PI3K-AKT信号通路改善胰岛素抵抗;而BMEE则通过调节AMPK-ACC2-CPT1信号通路改善IR细胞的糖脂代谢,二者的作用途径有所不同。     

乳源酪蛋白糖巨肽对结肠癌HT-29细胞中COX-2、iNOS、GST-π表达的影响

目的:研究乳源酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)对人结肠癌HT-29细胞增殖及细胞中环氧合酶-2(cyclooxyenase-2,COX-2)、诱导性一氧化氮合酶(induc ible nitric oxide synthase,iNOS)及谷胱甘肽-S-转移酶π(glutathione-S-transferaseπ,GST-π)表达的影响,为探讨CGMP作为功能性食品提供可靠的依据。方法:采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验测定不同剂量CGMP作用12、24、48 h对结肠癌HT-29细胞增殖的抑制情况;在不同剂量CGMP作用HT-29细胞24 h后,通过逆转录聚合酶链反应扩增细胞中提取的COX-2 mRNA、iNOS mRNA、GST-πmRNA,用凝胶成像自动分析系统检测各扩增带COX-2 mRNA、iNOS mRNA、GST-πmRNA水平。结果:1)CGMP组对细胞的增殖均有抑制作用,其中10-4 mg/mL抑制效果最强,且呈现时间依赖性。2)低剂量的CGMP(10-5、10-4、10-3 mg/mL)可显著降低3种基因的表达。结论:CGMP可在一定程度上抑制HT-29细胞的增殖,并呈时间依赖性,同时CGMP能在mRNA水平上抑制COX-2、iNOS、GST-π的表达,进而降低3种基因蛋白的表达,从而进一步改善结直肠癌。     

高核苷酸酵母水解物调控HepG2细胞氧化损伤作用

目的:探究高核苷酸酵母水解物的体外抗氧化活性。方法:采用化学法测定高核苷酸酵母水解物对二苯代苦味酰基自由基(DPPH)和羟自由基的清除能力及总还原力。建立游离脂肪酸(FFA)诱导HepG2细胞氧化应激模型,采用噻唑蓝溴化四唑(MTT)法检测高核苷酸酵母水解物对HepG2细胞的活力影响,荧光探针DCFHDA法检测HepG2细胞内活性氧的变化,商业试剂盒检测细胞内氧化损伤标志物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活力。实时定量PCR检测keap1,Nrf2,HO-1和NQO-1的mRNA表达水平。免疫印迹检测Nrf2活化与转位情况。结果:5～50 mg/mL高核苷酸酵母水解物以质量浓度依赖性方式清除体外活性氧自由基,具有显著抗氧化能力。500～1 000μg/mL高核苷酸酵母水解物可显著降低细胞内丙二醛(MDA)的含量,降低活性氧自由基(ROS)水平,提高细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性。抗氧化酶基因NQO1,Nrf2和HO-1的mRNA表达水平显著增加,keap1 mRNA表达水平显著降低。高核苷酸酵母水解物能够显著增加HepG2细胞核内Nrf2的蛋白质含量,降低其胞浆中的蛋白质含量,进一步阐明高核苷酸酵母水解物通过激活Nrf2通路减轻FFA诱导的HepG2氧化应激损伤作用。     

核桃油对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠结肠炎的影响

探讨核桃油(WO)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎的保护作用。将昆明种小鼠随机分为4组,即正常对照组(Con)、DSS组、DSS+WO组和WO组,检测小鼠血清促炎因子、结肠组织抗氧化酶活性和Nod样受体蛋白-3(NLRP3)及相关mRNA的转录水平。结果表明:与Con组相比,DSS组小鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6含量,结肠NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和IL-1βmRNA转录水平及NLRP3蛋白表达水平极显著增高(p <0.01),结肠超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性极显著下降(p <0.01);与DSS组相比,DSS+WO组血清IL-1β和IL-6含量、结肠NLRP3和Caspase-1 mRNA转录水平及NLRP3蛋白表达水平极显著降低(p <0.01),结肠SOD、GSH-Px和CAT活性极显著增强(p <0.01)。核桃油通过增强结肠的抗氧化能力,并可能通过抑制NLRP3炎性小体通路基因的转录水平,降低相关炎性因子的表达水平,对DSS诱导的小鼠结肠炎发挥保护作用。     

黑豆皮提取物升高内源抗氧化酶延长果蝇寿命

黑豆因富含高含量的花青素而被作为天然食品抗氧化剂。本研究探讨黑豆皮提取物(Black Soybean Coat Extract,BSCE)对果蝇寿命的影响及其作用机制。拟以雄性黑腹果蝇为动物模型,饲喂添加0、0.5、1.5、4.5 mg/mL BSCE的培养基,统计果蝇寿命,测定果蝇体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力,丙二醛(malondialdehyde,MDA)及蛋白质羰基的含量。Real Time-PCR法测定果蝇体内SOD、CAT、Nrf2及MTH的mRNA表达水平。结果显示饲喂BSCE可以显著延长果蝇的平均寿命(1.5、4.5 mg/mL,P0.05);饲喂4.5 mg/mL BSCE可以显著升高果蝇体内Cu-Zn-SOD、Mn-SOD和CAT酶活力(P0.05)并极显著降低蛋白质羰基含量和MDA含量(P0.01)。Real Time-PCR结果显示,给予4.5 mg/mL BSCE能够显著上调Mn-SOD、CAT mRNA表达水平(P0.05)且极显著上调CuZn-SOD、Nrf2 mRNA表达水平(P0.01)。因此,黑豆皮提取物可以通过升高内源性抗氧化酶SOD和CAT活性延长果蝇寿命,且其调节机制与MTH基因有一定联系。     

柚叶总黄酮对LPS所致Caco-2结肠上皮细胞间高通透性的保护作用

探讨柚叶总黄酮(PLTFE)对脂多糖(LPS,2 μg/mL)诱发Caco-2高通透性细胞模型的保护作用。Caco-2模型细胞以不同浓度的PLTFE(0、10、50、100、150 μg/mL)处理培养24 h进行后续实验。MTT法测定细胞生存率,细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平依说明书使用试剂盒测定。酶联法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定白介素(interlukin-1β,IL-1β)、IL-8和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌水平。跨上皮细胞电阻(trans epithelial electrical resistance,TEER)值和异硫氰酸荧光素-右旋糖酐(FD40)透过度用于评估细胞通透性水平。实时定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞IL-1β、IL-8、TNF-α、闭锁蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-1(claudin-1)、封闭小带蛋白(ZO-1)和肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)的mRNA表达。结果表明,柚叶总黄酮能显著提高受损细胞生存率至86.1%,抑制受损细胞中LDH的溢出(p<0.05)。同时还能有效抑制受损细胞中炎性细胞因子(IL-1β、IL-8、TNF-α)的分泌及mRNA转录。此外,柚叶总黄酮可增强细胞紧密连接因子(Occludin、claudin-1、ZO-1)的mRNA转录,抑制MLCK的mRNA转录,改善细胞间高通透性qRT-PCR法检测细胞中相关因子的mRNA转录水平。结果提示,柚叶总黄酮具有较强的抗炎活性,能通过上调细胞内细胞紧密连接相关因子的mRNA转录显著改善LPS造成的Caco-2细胞间高通透性的发生(p<0.05)。     

生姜提取物对苯并芘染毒小鼠Ⅱ相酶的诱导作用及对Nrf2-Keap1通路的影响

研究生姜提取物对苯并芘（benzo[α]pyrene,BαP）染毒小鼠抗氧化酶及Ⅱ相酶的影响及调控机制。用100、200、400 mg/（kg?d）的生姜提取物（分别标记为LG、MG和HG）对昆明小鼠连续灌胃给药14 d,然后腹腔注射50 mg/（kg?d） BαP,测定小鼠血清及肝肾中谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）、过氧化氢酶（catalase,CAT）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）以及醌氧化还原酶（quinone reductase,QR）、血氧合酶1（hemooxygenase 1,HO-1）和谷胱甘肽-S-转移酶（glutathione-S-transferase,GST）的活力及相应蛋白和mRNA的表达水平,分析了核转录因子E2相关因子2（nuclear factor (erythroid-derived 2)-like 2,Nrf2）和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Kelch like ECH associated protein 1,Keap1）的表达情况。结果表明：与BαP损伤组相比,BαP＋MG和BαP＋HG能显著诱导小鼠血清中CAT和GSH-Px活力及肝肾中CAT、SOD和GSH-Px的活力（P＜0.05）;BαP＋MG和BαP＋HG处理导致动物肝脏中QR、HO-1和GST的活力分别提高了21.7%和29.05%、23.99%和56.39%、32.40%和15.08%。与BαP处理组相比,BαP＋MG极显著提高了Nrf2的蛋白表达水平（21.9%）,抑制了Keap1蛋白表达（34.7%）（P＜0.01）。高效液相色谱-轨道离子阱质谱联用方法从生姜提取物中共鉴定出19 种成分。因此,生姜提取物能显著诱导BαP染毒小鼠中抗氧化酶和Ⅱ相酶,并且该过程与Nrf2-Keap1信号通路相关。     

Collagen peptides from Acaudina molpadioides prevent CCl4-induced liver injury via Keap1/Nrf2-ARE,PI3K/AKT,and MAPKs pathways

Collagen peptide from Acaudina molpadioides (AMP) showed antioxidative activity in H₂O₂-induced RAW264.7 cells in our pervious study. In this study, it was observed that AMP could effectively improve the morphology and function of liver in CCl₄-induced mice. After 200 mg/kg AMP treatment, the content of MDA in liver decreased by 62.3%, and the level of antioxidant enzymes (SOD, GSH-Px, and CAT) increased by more than 65%. Western blot results disclosed that AMP (200 mg/kg) upregulated the Nrf2 level by 73.8% and downregulated Keap1 by 41.0% in CCl₄-induced mice liver. The levels of p-ERK, p-JNK, and p-p38 in 200 mg/kg AMP treatment groups decreased by 57.3%, 40.9%, and 40.6%, but the levels of p-PI3K and p-AKT increased by 162.6% and 60.3%, respectively. Furthermore, the trends of Nrf2, Keap1, p-ERK, p-JNK, p-p38, p-PI3K, and p-AKT levels in H₂O₂-induced RAW264.7 cells after AMP treatment were similar to the results in CCl₄-induced mice liver. These findings provided evidence that AMP exerted antioxidant activity via Keap1/Nrf2-ARE, PI3K/AKT, and MAPKs pathways in vivo and in vitro. Therefore, the collagen peptide from A. molpadioides might represent a novel functional food to prevent acute liver injury via attenuation of oxidative stress.     

月桂酸替代金霉素对肉鸡腿肌肉品质和抗氧化功能的影响

(目的)本试验旨在研究月桂酸(lauric acid,LA)对肉鸡肌肉品质、常规营养成分和抗氧化性能的调控作用。(方法)试验选用480只1日龄AA肉仔鸡,随机分为4组,每组8个重复,每个重复15只鸡,分别饲喂基础饲粮(对照组)和基础饲粮分别添加75 mg/kg金霉素(抗生素组)、500 mg/kg月桂酸(月桂酸低剂量组;LA500)、1 000 mg/kg月桂酸(月桂酸高剂量组;LA1 000)的试验饲粮,试验期为42 d。(结果)结果表明:与对照组相比,饲粮添加500 mg/kg月桂酸提高了肉鸡腿肌24 h的pH、黄度(b*)值和粗脂肪含量,增加了过氧化氢酶(CAT)的活力(P<0.05),上调了SOD2、CAT、GPX1、Nrf2、HO-1的基因表达量(P<0.05),降低了24 h和48 h的滴水损失(P<0.05),饲粮添加1 000 mg/kg月桂酸提高了肉鸡腿肌24 h的pH、红度(a*)值、黄度(b*)值、粗脂肪含量(P<0.05),增加了总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(SOD)、CAT的活力(P<0.05),上调了SOD1、SOD2、CAT、GPX1、Nrf2、HO-1的基因表达量(P<0.05),降低了24 h的亮度(L*)值、滴水损失、48 h的滴水损失和丙二醛(MDA)的含量(P<0.05);与抗生素组相比,添加500 mg/kg月桂酸的饲粮提高了肉鸡腿肌CAT的含量,降低了肉鸡腿肌24 h的滴水损失、MDA的含量(P<0.05),饲粮添加1 000 mg/kg月桂酸提高了肉鸡腿肌CAT的含量,降低了肉鸡腿肌24 h、48 h的滴水损失和MDA的含量(P<0.05)。(结论)综上所述,月桂酸能够改善肉鸡肌肉品质和抗氧化能力,激活Nrf2信号通路相关基因的表达,且效果优于抗生素,饲粮添加1 000 mg/kg月桂酸更佳。     

沙棘花青素提取物对双氧水诱导的H1299细胞损伤的保护作用及Nrf2/HO-1通路的影响

目的：研究沙棘花青素提取物（The anthocyanidin extract of Hippophae rhamnoides L.,HRAE）对双氧水诱导H1299细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法：利用双氧水诱导H1299细胞氧化损伤模型,采用MTT法检测HRAE对细胞活力的影响,采用荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的含量;采用试剂盒分别测定超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（Catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathion peroxidase,GSH-Px）及丙二醛（Malondialdehyde,MDA）的含量;采用Western Blot法检测血红素氧合酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)、醌氧化还原酶-1(NAD(P)H quinine oxidoreductase 1,NQO1)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch like ECH-associated protein 1,Keap1)和核转录因子E2相关因子（Nu...     

L-茶氨酸对大鼠内脏组织抗氧化能力及相关基因表达的影响

目的:通过对大鼠灌胃L-茶氨酸溶液,观察大鼠心脏、肝脏、脾脏和肾脏中抗氧化指标的变化,探究L-茶氨酸对大鼠心、肝、脾和肾抗氧化能力及其相关酶mRNA表达量的影响。方法:64只SD大鼠随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组4组(每组16只,雌雄各半),分别灌胃0、50、200、400 mg/(kg·d)L-茶氨酸。连续灌胃14 d后采集内脏组织,采用试剂盒检测样品中丙二醛(malondialdehyde,MDA)与一氧化氮(nitric oxide,NO)的含量,以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase,NOS)的活性,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-q PCR)法测定相应抗氧化酶的mRNA表达量。结果:L-茶氨酸灌胃影响大鼠心脏组织的NO含量,以及SOD、CAT与NOS活力,其中高剂量组大鼠心脏组织中NO含量最低,SOD与CAT活力最大;同时影响大鼠肾脏中NO的含量,高剂量组最低;但对除上述指标外的肝、脾、肾、心的MDA与NO含量,以及SOD、CAT、GPX与NOS活力无显著影响。低剂量L-茶氨酸灌胃显著抑制肝脏中SOD1 mRNA的表达和脾脏中SOD1、SOD3、GPX1 mRNA的表达;高剂量L-茶氨酸则上调脾脏SOD2 mRNA的表达;同时各剂量组心脏组织中的SOD1、SOD2、SOD3、GPX1 mRNA的表达量都显著增加。结论:L-茶氨酸灌胃增强了心脏的抗氧化能力,其机制可能是通过上调了大鼠心脏中SOD2基因的mRNA的表达,从而增加心脏中SOD的活性,起到抗氧化的保护作用。同时,L-茶氨酸灌胃对大鼠内脏抗氧化功能的影响存在性别差异。     

矢车菊素-3-O-葡萄糖苷保护RAW264.7细胞免受过氧化氢诱导的氧化损伤

本研究旨在探究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷（cyanidin-3-O-glucoside,C3G）对H2O2诱导RAW264.7细胞氧化损伤的保护作用及其机制。通过噻唑蓝法测定C3G和过氧化氢分别对RAW264.7细胞存活率的影响;采用酶联免疫吸附测定法检测细胞内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力以及一氧化氮（nitric oxide,NO）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平;利用2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯活性氧荧光探针检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;通过逆转录定量聚合酶链式反应和Western blot法分别测定相关mRNA和蛋白表达水平。结果表明,C3G（6.25～25.00 μmol/L）能显著抑制H2O2诱导RAW264.7细胞活性降低（P＜0.05）。C3G显著降低H2O2诱导RAW264.7细胞内ROS过表达、MDA水平和NO释放（P＜0.05）,显著增加SOD和GSH-Px活力（P＜0.05）。此外,与空白对照相比,400 μmol/L H2O2处理组中,蛋白激酶Mst1/2和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白Keap1的mRNA及蛋白相对表达水平显著上调（P＜0.05）,而细胞中核因子E2相关因子和下游抗氧化酶HO-1的mRNA及蛋白相对表达水平显著下调（P＜0.05）;而采用C3G干预RAW264.7细胞,上述相关mRNA及蛋白的相对表达水平被逆转。结论：C3G对H2O2诱导RAW264.7细胞氧化损伤保护作用,可能与激活Mst/Nrf2信号通路和提高抗氧化酶活性有关。     

日粮添加姜黄素对IUGR鼠肌肉抗氧化功能及糖代谢的影响

本试验研究日粮添加姜黄素对宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)鼠肌肉抗氧化功能和糖代谢的调节作用。试验采用2×2因子设计,采用日粮限饲的方法构建IUGR鼠模型。21日龄断奶后,分别选取12只正常和12只IUGR小鼠随机均分为正常组(NBW)、姜黄素组(NC)和IUGR组、IUGR姜黄素组(IC)。NBW和IUGR组饲喂基础日粮,NC和IC组饲喂基础日粮+400 mg/kg姜黄素。试验饲喂至12周龄,取骨骼肌检测抗氧化和糖代谢酶活力以及相关基因的表达。结果表明:与NBW组相比,IUGR组大鼠肌肉糖酵解潜值(glycolytic potential,GP)和乳酸含量显著升高(p<0.05),总还原型谷胱甘肽(total glutathione,T-GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活力显著降低(p<0.05);日粮添加姜黄素可显著降低IUGR大鼠肌肉乳酸脱氢酶活性(p<0.05),显著升高(p<0.05)总超氧化物歧化酶活力、CAT活力、糖原含量、琥珀酸脱氢酶活性以及GP。与NBW组相比,IUGR组大鼠肌肉核因子NF-E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)、超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase,SOD1)mRNA表达水平均显著降低(p<0.05)。日粮添加姜黄素可显著提高IUGR组大鼠肌肉Nrf2、SOD1 mRNA的表达水平(p<0.05),显著降低腺苷一磷酸依赖的蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase α1,AMPKα1)和糖原合成酶(glycogen synthase,GS)mRNA的表达水平(p<0.05)。结论:IUGR鼠肌肉抗氧化能力降低,糖原储存能力下降。姜黄素可能通过调节Nrf2、AMPKα1及其他相关基因的表达,来提高IUGR大鼠肌肉抗氧化能力和抑制糖原分解的作用。     

菊花多糖对2型糖尿病大鼠的降血糖作用

目的:研究菊花多糖对2型糖尿病(T2DM)大鼠的降血糖作用。方法:利用水提醇沉法对菊花多糖进行提取,高脂高糖饲料饲养大鼠6周后,一次性腹腔注射STZ(30 mg/kg·BW),建立T2DM大鼠模型,试验过程中记录大鼠体重、摄食量、饮水量,每2周测定大鼠空腹血糖值(FBG),试验最后1周进行糖耐量(OGTT)试验,采用Elisa法测定大鼠胰岛素(INS)水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。测定大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平,以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)等水平,采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测Nrf2、Keap1、HO-1的表达水平。结果:经菊花多糖治疗后,能够缓解T2DM大鼠体重的下降,减少其摄食量和饮水量,提高T2DM大鼠糖耐量,降低大鼠INS及HOMA-IR。能够显著降低T2DM大鼠TC、TG、LDL-C水平(P<0.05),并显著提高HDL-C水平(P<0.05)。T2DM大鼠SOD、GSH、CAT水平有显著提高(P<0.05),MDA水平显著下降(P<0.05)。经菊花多糖治疗后的T2DM大鼠的Nrf2、Keap1、HO-1蛋白水平均趋于正常组的蛋白水平。结论:菊花多糖能够有效改善T2DM大鼠“三多一少”的症状,降低FBG水平,提高OGTT,改善INS水平及HOMA-IR,改善T2DM大鼠异常脂代谢和氧化应激水平,并通过调控Nrf2/Keap1/HO-1通路相关蛋白起到治疗T2DM的作用。     

根皮苷对高脂膳食喂饲仓鼠氧化损伤保护机制的研究

以饲喂高脂膳食的仓鼠为动物模型,研究根皮苷在喂饲高脂膳食仓鼠体内的抗氧化活性。实验动物随机分为对照组和3 个实验组（3、6、9 g/kg根皮苷）,6 周后测定仓鼠血清、心脏、肾脏及肝脏中抗氧化酶超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathion peroxidase,GSH-Px）、过氧化氢酶（catalase,CAT）和总抗氧化力（total antioxidant capacity,T-AOC）的活力、丙二醛（malonaldehyde,MDA）含量及采用荧光定量聚合酶链式反应（real time-polymerase chain reaction,RT-PCR）法检测肝脏中抗氧化相关基因mRNA表达水平。抗氧化酶活力测定结果显示,给予根皮苷后血清、心脏、肾脏及肝脏中SOD、GSH-Px、CAT酶活力均有升高,氧化产物MDA含量显著降低。RT-PCR结果显示,3 个不同剂量根皮苷实验组CuZn-SOD、Mn-SOD、GSH-Px、血红素加氧酶1（heme oxygenase 1,HO-1）、核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2）mRNA表达水平与对照组相比均极显著升高（P＜0.01）;给予6、9 g/kg根皮苷,CAT基因表达水平较对照组极显著升高（P＜0.01）。因此,根皮苷对高脂膳食喂饲仓鼠氧化应激损伤的保护作用可能是通过激活抗氧化基因Nrf2表达,并上调抗氧化基因SOD、GSH-Px、CAT、HO-1 mRNA表达水平,进而增加抗氧化酶的活力实现的。     

玉簪多糖对细胞氧化应激损伤的保护作用机制

本实验以紫萼玉簪（Hosta ventricosa）为原材料，采用响应面法优化其根系多糖（Hosta ventricosa root polysaccharide，HVRP）的提取工艺，探索HVRP对叔丁基过氧化氢（tert-butyl hydroperoxide，t-BHP）诱导的HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用机制。结果表明：在提取温度84 ℃、提取时间3 h、料液比1∶31条件下，HVRP平均提取率达到23.9%；HVRP中还原性糖、蛋白质、糖醛酸的质量分数分别为11.17%、0.6%、12.31%，含有多糖类物质的特征吸收峰，不存在三螺旋构象。体外抗氧化和细胞实验结果表明，HVRP具有较强的抗氧化活性，能显著或极显著降低t-BHP诱导氧化损伤HepG2细胞内活性氧、丙二醛含量并提高过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、还原型谷胱甘肽及谷胱甘肽过氧化物酶水平（P＜0.05、P＜0.01）。通过实时荧光定量聚合酶链式反应和蛋白质免疫印迹分析发现，HVRP可通过调控Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1/核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件信号通路促进抗氧化酶表达，从而改善t-BHP诱导的HepG2细胞氧化损伤。本研究可为阐明HVRP抗氧化作用机制及其在功能性食品中的应用提供理论依据。