黑曲霉产抗菌成分液体发酵条件的研究

将分离并鉴定的黑曲霉菌株(Aspergillus niger xj)进行液体发酵,生产抗金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus的抗菌成分.确立了其最佳条件:以2%麦芽糖,2%甘油,3%牛肉膏,3%蛋白胨为液体发酵培养基,10%装液量,起始pH 6.0,25℃,140 r/min,发酵5 d,抑菌圈直径可达到4.22±0.25 cm.     

Bacillus amyloliquefaciens KHQH-1的鉴定及其抗菌活性初步研究

为了探寻新的具有防腐保鲜功能的微生物资源,前期从柑橘防腐保鲜研究过程中,分离纯化得到1株具有抗菌活性的细菌。该研究对该菌进行了形态、生化和分子生物学等鉴定,确定该菌株属于芽孢杆菌属,命名为Bacillus amyloliquefaciens KHQH-1。通过NCBI平台BLAST进行序列比对,结合Clustalw和Mega 7.0等软件进行序列分析和构建系统发育树,确立了该菌株在系统发育上的地位。采用点植法和滤纸片法研究了KHQH-1对几种食品中常见霉菌和细菌的拮抗效果,结果表明,KHQH-1对根霉(Rhizopus spp.)、米曲霉(Aspergillus oryzae)有一定抑制效果,对食品中常见霉菌黄曲霉(Aspergillus flavus)、青霉(Penicillium spp.)、绿色木霉(Trichoderma viride)具有较强抑制效果,其抑菌圈大小分别为13.70、9.30和10.87 mm;KHQH-1对食品中常见细菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大肠杆菌(Escherichia coli)均有一定抑制作用,其抑菌圈分别为3.20和8.20 mm。这为更进一步探索天然产物防腐保鲜技术和微生物制剂的开发与应用提供了一定的理论与技术参考。     

二氢杨梅素抗菌活性研究

使用滤纸片法和试管二倍稀释法测定二氢杨梅素对几种常见食品微生物的抗菌效果.结果表明:二氢杨梅素对细菌有很强的抑制活性,对真菌抑制效果不明显;对供试菌种的最低抑菌浓度(MIC)不超过1.76 g/L;对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低杀菌浓度(MBC)分别是1.76 g/L和0.88 g/L,对链球菌和枯草芽孢杆菌的最低杀菌浓度高于3.52 g/L;抑菌活性在pH3～4的酸性环境中最强;二氢杨梅素在一定温度处理后仍具有良好的抑菌效果.     

抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株的筛选、鉴定及其活性物质初步研究

从海南红树林土壤分离筛选抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）菌株,通过形态学观察、生理生化试验及分子生物学进行菌种鉴定。采用不同培养基优选抑菌活性物质生成条件;以有机溶剂萃取抑菌活性物质,采用气相色谱-质谱（GC-MS）分析抑菌物质化学成分,采用微量稀释法测定最低抑菌浓度与最低杀菌浓度。结果表明,筛选得到一株抗MRSA菌株,编号为NEL-002,被鉴定为萎缩芽孢杆菌（Bacillus atrophaeus）。菌株NEL-002采用LB液体培养基得到发酵液经石油醚萃取粗提物抗MRSA菌活性最强,且在40～80 ℃、pH在5～10较稳定,对多种蛋白酶不敏感;最低抑菌质量浓度为62.5 μg/mL,最低杀菌质量浓度为500 μg/mL。GC-MS鉴定出抗菌活性物质为十甲基环戊硅氧烷、十二甲基环六硅氧烷及邻苯二甲酸二丁酯。     

藠头中抗菌活性成分的抑癌作用及机理研究

从藠头(Allium chinense G.Don)中提取的活性物质在不同温度处理下具有良好的热稳定性。利用其活性物质处理肝癌(HepG-2)细胞和海拉(Hela)细胞,发现该物质对两种癌细胞生长都有抑制作用,且呈浓度依赖性。采用流式细胞仪分析发现,该物质可改变两种癌细胞的细胞周期,但不诱导细胞凋亡。通过体外对木瓜蛋白酶和蛋白酶K活力的测定,该物质对木瓜蛋白酶活力有较大的影响,对蛋白酶K活力影响不明显,这可能与木瓜蛋白酶的活性中心含巯基有关。分析认为藠头活性成分的抑癌作用可能是通过影响癌细胞内象木瓜蛋白酶等一些活性中心含巯基的酶的活力来实现的。     

黑龙江产芫荽籽精油成分及其抗菌活性

以水蒸汽蒸馏法提取黑龙江产芫荽籽,以0．50％的产率获得精油。用GC-MS联机对精油进行了成分分析,检测出31个成分,解析鉴定了占精油99．726％的29个成分,主要成分芳樟醇占总精油含量的73．614％。对精油的抗菌性研究结果显示,芫荽籽精油对黑曲霉的抑制作用最强,其次为枯草芽胞杆菌、大肠杆菌和白色葡萄球菌。水蒸汽蒸馏后的残渣有机溶剂萃取物没有抗菌性或者抗菌性较低。     

巴戟天水提取物油脂抗氧化性和抗菌活性研究

目的:研究巴戟天水提取物的油脂抗氧化性和抗菌活性.方法:采用水煎法提取巴戟天后,将其提取物用于抗氧化活性和抗菌活性的试验应用.结果:巴戟天水提取物具有油脂抗氧化作用,并且随着添加量的增加抗氧化效果越好;抗菌试验说明巴戟天水提取物对细菌的抗菌效果较好,尤其是对金黄色葡萄球菌的抗菌能力强,但对于酵母和霉菌的抑制作用弱.结论:巴戟天水提取物具有油脂抗氧化作用和抗菌活性,可进一步深入研究并将其用于食品添加剂.     

孜然精油成分及其抗菌作用

以水蒸气蒸馏法提取孜然籽精油,产率2.6%,用GC-MS联机对精油进行成分分析,检测出28个成分,解析鉴定了占精油99.801%的26个成分,主要成分枯茗醛占总精油含量的39.511%,其次为2-蒈烯-10-醛(17.707%)和3-蒈烯-10-醛(17.542%).对精油和蒸馏后残渣有机溶剂萃取物的抗菌活性研究结果显示:孜然精油具有较强的抑菌作用,抑菌活性大小顺序为米曲霉＞枯草芽胞杆菌＞黑曲霉＞白色葡萄球菌＞大肠杆菌＞根霉;残渣有机溶剂萃取物抗菌活性较精油小.     

恭城月柿皮果胶酶解物的抑菌活性初探

采用盐析法从恭城月柿皮中提取果胶,用果胶酶酶解处理后得到果胶酶解物,对其抑菌活性进行了研究.结果表明,恭城月柿皮果胶的酶解物对大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母和黑曲霉均具有明显的抑菌活性,其中对细菌和酵母菌最低抑菌浓度(MIC)均为 0.63%,对霉菌的最低抑菌浓度(MIC)为 1.25%.     

低值鱼蛋白多肽-钙螯合物的制备和抗氧化、抗菌活性研究

探讨了以南海低值鱼蛋白为原料,采用木瓜蛋白酶和风味酶的复合酶水解制备多肽复合物,并制备多肽-钙螯合物,对螯合工艺及螯合产物的结果及抗氧化和抗菌功能特性进行了初步研究.结果表明:DH为5%的多肽与钙离子螯合效果最佳,螯合率为81.75%;化学分析及红外光谱说明活性肽与钙离子螯合并形成稳定结构的螯合物;未经过乙醇沉淀的螯合钙具有明显的抗氧化活性,其抗氧化作用相当于生育酚的94.43%,经过80%乙醇沉淀的螯合物具有显著的抗枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌活性,其抑菌圈均直径分别为16mm和16mm.通过本研究,不仅为低值鱼的深精加工与综合利用开辟了新的途径,而且也为低值鱼酶解多肽螯合物的广泛应用奠定了基础.     

黑曲霉发酵液中脂肪酸化学成分的研究

目的：分析黑曲霉（Aspergillusnigerxj）发酵液中的脂肪酸成分。方法：液体发酵培养黑曲霉0spergillusnigerxj）,发酵液通过石油醚萃取,硅胶柱层析,石油醚-乙酸乙酯洗脱,得到的脂肪酸经甲酯化处理,通过气相色谱一质谱联用技术对其进行鉴定。结果：鉴定出4种脂肪酸成分。结论：黑曲霉（Aspergillusniger巧）发酵液中的脂肪酸成分主要为亚油酸、6-十八碳烯酸、14-甲基十五烷酸和硬脂酸。     

黑曲霉发酵液改善上部烟叶风味品质的研究

为降低上部烟叶中的淀粉和蛋白质含量,提高燃吸品质,以黑曲霉（Aspergillus niger）对上部烟叶粉末进行液态发酵,获得产淀粉酶和蛋白酶较高的菌株及发酵条件为黑曲霉h5,接种量5%（V/V）,培养基烟叶添加量3%,初始pH值6.0,培养温度30℃,发酵时间6d。 将所得发酵液与生物酶配制成新型复合改良剂用于上部烟叶的处理,得到最佳作用条件为含水量20%（发酵液添加量50%）,复合酶添加量1 U/g,反应温度40 ℃,反应时间2 h。处理后上部烟叶中淀粉和蛋白降解率分别为24.84%和21.22%,烟叶燃吸品质明显 提升。 进一步研究发现,以湖南B1F烟叶为培养基底物的发酵液对上部烟叶燃吸品质的改善具有更好的效果,且在其他产地和类型 的上部烟叶中具有很好的扩展性。     

食用菌发酵液对耐药菌的抑菌活性研究

研究食用菌发酵液对临床分离耐药菌的抑菌活性,期望找到一些对耐药菌有较好抑菌效果的食用菌。采用液体深层发酵法制备发酵液,用管碟法测定发酵液对细菌的抑菌圈,通过抑菌率反映其对耐药菌的抑菌效果。结果表明,香菇和鸡腿菇对金黄色葡萄球菌的抑菌作用和相对抑菌率都较高,抑菌圈直径分别是5.1 mm和3.8 mm,相对抑菌率分别是62.02%和58.69%,有较高的开发价值。     

黑曲霉发酵脱脂麦胚过程中抗氧化活性变化研究

以脱脂麦胚为原料,研究了黑曲霉（Aspergillus niger）发酵脱脂麦胚过程中发酵液抗氧化活性、蛋白酶活力和蛋白质含量的变化。结果表明,随着发酵时间在0～120 h范围内延长,发酵液对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、羟基（OH）和超氧阴离子（O2-）自由基的清除能力及其总还原力均呈现先增加后缓慢降低的趋势,在发酵84 h达到最大值,分别为75.68%、80.40%、40.7%、0.476 7（A700 nm值）;发酵液蛋白酶活力在72 h时达到最大值为269.35 U/mL,之后逐渐平稳,在发酵第108小时,发酵液中蛋白质含量达到最大值为21.92 mg/mL。该研究为发酵法制备麦胚抗氧化产品提供了一定的参考依据,有助于提升麦胚的附加值。     

柠檬酸高浓度发酵过程中糖化酶活性对柠檬酸发酵的影响

在进行柠檬酸高浓发酵的研究中发现,柠檬酸高浓发酵残糖高的主要原因是发酵料液中的糖化酶迅速失活、液化淀粉糖化不完全。对生产菌株分泌糖化酶的性质进行研究显示,该酶能够耐受较低pH值,在pH 2.0以下时仍能保留50%以上的酶活性,但对柠檬酸耐受性较差,20 g/L柠檬酸就会对酶活力造成强烈抑制,酶活力损失达90%以上。通过在发酵料液中预加商品糖化酶,加快糖化进程,及时完成糖化,解决了柠檬酸高浓度发酵残糖高的问题。     

黑曲霉固态发酵产糖化酶的研究

以糖化酶活力为评价指标,对1株黑曲霉变异株固态发酵产糖化酶的培养基组成和发酵条件进行了研究,分别考察了碳源、氮源、原料粉碎度、培养基含水量、温度、起始pH值、发酵时间、接种量等对该菌株固态发酵产糖化酶的影响.结果表明,该菌株产糖化酶的最佳发酵培养基组成为:麦麸:豆饼粉=3:1,(NH4)2SO4含量为3%,K2HPO40.1%.原料粉碎度为过60目筛,起始pR5.0,培养基含水量为120%,培养温度为32℃,接种量为每瓶培养基接108/mL的孢子悬液2.5mL,培养时间为72h,最高产酶活力达17800U/g.     

黑曲霉液体深层发酵产纤维二糖酶的研究

纤维二糖酶（cellobiase）是纤维素酶系中的重要组分之一,目前由里氏木霉（Trichoderma reesei）生产的纤维素酶制剂中纤维二糖酶的活力明显偏低,限制了纤维素的糖化效率。本文采用一个黑曲霉菌株（Aspergillus niger ZU-04）,在液态发酵条件下生产纤维二糖酶,对主要的发酵工艺参数进行了研究,结果表明,培养基中添加1.0%的麸皮对纤维二糖酶的形成有明显的促进作用;葡萄糖、玉米浆粉的适宜浓度分别为2.0%、0.3%;变温培养缩短了产酶周期,培养4d,酶活力达到最高,为6.23IU/mL。采用黑曲霉纤维二糖酶与里氏木霉纤维素酶协同水解酸预处理后的玉米芯,当纤维素酶用量为20IU/g底物时,纤维二糖酶活力和滤纸酶活力比例为0.43,2d酶解得率达到91.1%。     

黑曲霉产壳聚糖发酵工艺的优化

通过单因素及正交实验对黑曲霉产壳聚糖的发酵工艺进行了优化。结果表明,最佳发酵条件为:70mL玉米浆,4%葡萄糖,1·2%硫酸镁,8·0×108孢子量,pH7·4～7·6,转速为130r/min,29℃发酵72h的壳聚糖的产率最高,达到18%。      

Bioremediation of CCA-C treated wood by Aspergillus niger fermentation

This study evaluated the potential of the fungus Aspergillus niger to remove copper, chromium, and arsenic from waste wood treated with chromated copper arsenate (CCA) wood preservative. The removal of heavy metals by A. niger was carried out in two stages. In the first stage, A. niger was cultivated in carbohydrates media in order to produce large quantities of oxalic acid. Bioremediation of CCA-treated wood was performed in the second stage through both leaching of heavy metals with oxalic acid occurred during the first stage and possible biosorption of metals onto the binding sites in the cellular structure of A. niger. Oxalic acid production by A. niger was 13.4 kg/m³ at pH 6 and in an enriched nitrogen and phosphorus medium. CCA-treated chips exposed to A. niger for 10 days showed a decrease in arsenic of 97%. In addition, A. niger fermentation removed 49% copper and 55% chromium from CCA-treated chips. This study showed that fungal fermentation and passive metal removal by A. niger had a potential in arsenic release from CCA-treated waste wood.

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Aufwertung von CCA-behandeltem Holz durch Fermentation mit Aspergillus niger

Zusammenfassung Diese Studie untersuchte die Möglichkeit des Pilzes Aspergillus niger Kupfer, Chrom und Arsen von Abfallholz, das mit CCA-Holzschutzmittel behandelt worden war, zu entfernen. Die Entfernung von Schwermetallen durch A. niger wurde in zwei Stufen durchgeführt. Während der ersten Stufe wurde A. niger in Kohlenhydratmedien kultiviert, um große Mengen von Oxalsäure zu produzieren. Die Aufwertung von CCA-behandeltem Holz wurde während der zweiten Stufe durchgeführt. Sowohl das Auslaugen der Schwermetalle mit Oxalsäure als auch die mögliche Biosorption von Metallen an Rezeptoren in der Zellstruktur von A. niger fand während der ersten Stufe statt. Die Oxalsäure-Produktion durch A. niger betrug 13,4 kg/m³ bei einem pH-Wert 6 in einem mit Stickstoff und Phosphor angereichertem Medium. Die mit CCA behandelten Späne zeigten nach 10-tägiger Behandlung mit A. niger einen Arsenabfall von 97%. Zusätzlich entfernte die A. niger-Fermentation 49% Kupfer und 55% Chrom von CCA-behandelten Spänen. Diese Studie zeigte, dass Pilzfermentation und passive Metallentfernung durch A. niger eine Möglichkeit bot, Arsen von CCA-behandeltem Holz freizusetzen.

     

单宁酶产生菌的发酵培养基优化

用响应面试验对一株单宁酶产生菌黑曲霉的固体发酵培养基进行优化,优化后的最佳发酵培养基组成为:在250mL三角瓶中装入5g麸皮和5mL由(蔗糖12g/L,KNO325b/L、玉米浆22.4g/L、五倍子65.1g/L、MgSO4 13.6g/L,CoCl2 0.2g/L、柠檬酸钠3g/L、NaCl2.5g/L)组成的盐溶液,在此条件下,发酵单宁酶酶活为13.54U/g,比优化前提高了1.82倍.