基于纳米材料构建免疫传感器快速测定粮油食品中的黄曲霉毒素B_1

以改性壳聚糖和纳米金复合物为电极修饰材料,包埋固定黄曲霉毒素B_1抗体制备信号放大型免疫传感器。以K_3[Fe(CN)_6]为探针,利用循环伏安法和差分脉冲伏安法研究其免疫反应对传感器响应电流的影响,结果表明,免疫响应电流与溶液中AFB_1的浓度在0.1~1.1 ng/m L范围内成线性关系,最低检测限为0.05 ng/m L(S/N=3);免疫传感器的特异性、稳定性和重现性较好。利用该法对花生、花生油等实际样品中的黄曲霉毒素B_1进行检测,回收率在87.8~98.2%,检测精确度优于ELISA试剂盒,可用于食品中黄曲霉毒素B_1的快速检测。     

纳米金标记黄曲霉毒素B1新型检测方法

本文建立了两种基于银增强纳米金标记探针的高灵敏度免疫分析方法.方法一是用黄曲霉毒素B1(AFB1)抗体与金标抗原、待测抗原进行竞争免疫反应,然后加入银增强溶液,以金为核沉积生长银,通过检测光密度来确定待测物中AFB1的含量,该方法的检出限可达到0.01 ng/mL.方法二是在前一种方法的基础上,将银化学溶出,通过化学发光法检测沉积的银量来确定待测物中AFB1的含量,该方法的检出限可达到0.002 ng/mL.     

酱油中黄曲霉毒素B_1的测定意义及测定方法比较

黄曲霉毒素是一种真菌毒素,其存在严重影响农作物的产量及农产品的质量。酱油产品无论在原料上还是在工艺上都有感染黄曲霉毒素的可能性。食品质量安全市场准入制度也将黄曲霉毒素列为酱油产品的必检项目。本文阐述了黄曲霉毒素的测定意义,并将国标中两种测定方法进行比较,供同行参考。     

纳米免疫传感器法快速测定粮油食品中的黄曲霉毒素B1

摘要：本文以改性壳聚糖为固定化材料,包埋固定纳米金胶微粒及黄曲霉毒素B1抗体制备信号放大型纳米免疫传感器,建立了免疫传感器测定黄曲霉毒素B1的方法;优化了纳米免疫传感器的制备条件及检测参数;基于AFB1抗体与抗原之间的特异性免疫反应,以K3[Fe(CN)6]为探针,利用循环伏安法和差分脉冲伏安法研究了其免疫反应对传感器响应电流的影响,结果表明免疫响应电流与底液中AFB1的浓度在0.1～1.1 ng mL-1范围内成线性关系,其校正曲线方程为IP =-4.9274x +15.108（R 2= 0.9912）,其最低检测限为0.05 ng mL-1（S/N=3）;该免疫传感器的稳定性和重现性较好。利用该法对花生油、玉米油等实际样品中的AFB1进行了检测,其回收率为在87.8～98.2%,检测精确度优于ELISA试剂盒法,用于粮油食品中黄曲霉毒素的快速检测是可行的。     

植物源天然产物对黄曲霉和黄曲霉毒素B_1的抑制作用研究进展

黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)是化学物质中致癌性最强的一种,对人和动物的健康具有极大的威胁,尤其是对肝脏的损害。AFB1是谷物和粮油中最为多见的真菌毒素,危害性也最强,长期低剂量的摄入AFB1除了会导致肝脏损伤和诱发肝癌之外,也会损害人体的其他器官。因此,能够有效防护人体免遭AFB1损伤的功能食品和新型保健药物已成为研究重点。近年来,天然产物因其具有生物活性显著、副作用小、多靶点等优点而备受关注,多种植物源天然产物已被报道能够抑制黄曲霉的生长产毒和AFB1的毒性作用。该文主要综述了植物源天然产物对黄曲霉生长产毒和AFB1毒性作用的抑制作用以及其相关抑制机制,为进一步开展AFB1毒性损伤的防护研究工作,开发能降低AFB1对人和动物的毒性损伤的新型保健药物和功能食品提供参考。     

基于金纳米花标记的免疫层析法检测牛奶中黄曲霉毒素M1

研究金纳米花作为信号放大用于黄曲霉毒素M_1高灵敏检测。用粒径为(91.8±0.8)nm、分支数多的金纳米花(gold nanoflowers,AuNFs)标记黄曲霉毒素M_1(aflatoxin M_1,AFM_1)单克隆抗体(monoclonal antibody,Mab),制备用于检测牛奶中AFM_1的金纳米花免疫层析检测卡(aflatoxin M_1-gold nanoflower immunochromatographic test card,AFM_1-GFICT)。纳米金免疫分析读数仪被用于读取AFM_1系列浓度(20 pg/mL～1 000 pg/mL)的信号值。以AFM_1浓度为横坐标,信号值为纵坐标绘制非线性四参数拟合曲线。非线性四参数拟合曲线相关系数R~2=0.999 3,检测限为12.3 pg/mL。检测在空白牛奶样品加入AFM_1标准品浓度为0.1、0.3、0.5μg/kg的回收率为80.4%～118.2%,变异系数(n=10)为4.27%～9.43%。15份牛奶样品的AFM_1-GFICT和商业化AFM_1-ELISA检测结果相比,线性拟合相关系数R~2=0.976 8。     

基于金标抗体的电化学免疫传感器检测米糠油中黄曲霉毒素B1

目的 为了快速检测食品中黄曲霉毒素B1的含量,本文提出一种以胶体金标记抗体的电化学免疫传感器用于米糠油中AFB1的检测。方法 首先在金电极(AuE)表面修饰抗原,再进一步修饰制备好的金标抗体,最后带有辣根过氧化物酶的二抗(IgG-HRP)通过与抗体反应结合到电极表面。当目标物AFB1存在时,与抗原竞争结合金标抗体,HRP催化过氧化氢(H2O2>)将溶液中对苯二酚(HQ)氧化成苯醌(BQ)的电流信号会下降,间接检测AFB1。结果 该免疫传感器在抗原包被量和金标抗体用量为3 μL且金标抗体与AFB1孵育80 min条件下具有最佳性能。该法线性范围为0.02 ng/mL~80 ng/mL,检出限为0.027 ng/mL。将该传感器应用于米糠油中进行加标回收实验,回收率在88.7%～108.0%。结论 该传感器具有良好的特异性、重现性和稳定性,可用于植物油中AFB1的快速检测。     

无需衍生化样品处理快速测定食品中黄曲霉毒素B_1

目的建立无需衍生化法.超高效液相色谱直接测定食品中的黄曲霉毒素B_1的快速检测方法。方法样品经甲醇.水(7:3,v:v)提取,免疫亲和柱净化,C_(18)色谱柱分离后,采用大体积流通池荧光检测器检测。结果黄曲霉毒素B_1在0.10~5.00 ng/mL范围内与峰面积呈良好线性关系,R~20.999,在饼干、粉丝、点心、沙琪玛、蛋糕、辣椒酱6种基质中,黄曲霉毒素B_1在0.50~2.00μg/kg范围内加标,平均回收率在71.7%~111.2%之间,相对标准偏差(RSDs)为3.8%~11.5%,检出限(LOD)为0.05 gg/kg。结论本方法灵敏、快速、无衍生、结果准确,能够满足食品中黄曲霉毒素B_1残留的检测需求。     

电化学生物传感器在黄曲霉毒素检测中的研究进展

黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉的次级代谢产物,具有剧毒性和严重的致癌性、致畸性和致突变性,摄入受黄曲霉毒素污染的农作物和食品会对人类和动物的身体健康造成极其严重的危害。基于十年来国内外的研究成果,从电化学传感机理方面概述了电化学生物传感器在黄曲霉毒素检测中的发展现状和应用前景,介绍了各类电化学生物传感器的工作原理、制备方法和检测性能。电化学生物传感器相比于传统的黄曲霉毒素检测方法,具有检测时间短、操作简单、成本低、便于微型化等优势。金纳米颗粒、碳纳米管等纳米材料的使用将进一步提高电化学生物传感器的灵敏度以及抗原或抗体的固定效率。超微电极技术、传感器阵列技术以及微流控技术的应用也将进一步提高电化学生物传感器在毒素检测中的性能。     

应用抗黄曲霉毒素单链抗体检测酱油中黄曲霉毒素B1

利用本实验室制备的抗黄曲霉毒素B1的单链抗体(ScFv),通过棋盘实验确定了抗原抗体的最适工作浓度,在此之上根据间接竞争酶联免疫法(ELISA)绘制标准曲线,检测酱油中AFB1的含量;通过改变样品的盐浓度及pH来确定其对ELISA检测结果的影响。研究结果表明,利用ScFv检测黄曲霉毒素的最小检测值为0.10ng/mL,平均加标回收率在84%～109%之间,本文建立的ELISA方法在pH5～8,盐浓度小于10%时较稳定。本文建立的利用抗AFB1的ScFv检测黄曲霉毒素含量的方法方便快捷,稳定性较好,并且成本较低,适合于食品中黄曲霉毒素的检测。      

基于石墨烯/离子液体构建免疫传感器快速测定食品中黄曲霉毒素B1

采用壳聚糖、石墨烯和1-丁基-3-甲基咪唑基四氟硼酸盐复合膜修饰玻碳电极,包埋固定黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）抗体,构建了一种免疫传感器,用于快速测定食品中的AFB1。在pH值为7.0含1 mmol/LK3[Fe(CN)6]和0.1 mmol/L KCl的磷酸盐缓冲溶液中,基于AFB1抗体与抗原之间的特异性免疫反应,以K3[Fe(CN)6]为探针,运用循环伏安法和差分脉冲伏安法研究免疫反应对传感器响应电流的影响。在优化实验条件下,免疫传感器峰电流的降低值随溶液中AFB1质量浓度对数的增大而增大,且二者在0.1～8.1 ng/mL范围内呈线性关系,其检出限为0.04 ng/mL（RSN=3）。该免疫传感器的稳定性和重复性较好,利用该法对花生和玉米油样品中AFB1进行检测,回收率为94.73%～104.41%,检测结果与高效液相色谱法基本一致,用于食品中AFB1的快速检测是可行的。     

基于金属有机骨架（ZIF-8）的酶联免疫法灵敏检测米粉中的黄曲霉毒素B1

为解决黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）快速检测方法中信号标记物稳定性差的问题,建立基于金属有机骨架的酶联免疫法检测米粉中AFB1。该研究采用仿生矿化方法将辣根过氧化物酶（horse radish peroxidase,HRP）封装在沸石咪唑骨架结构材料（zeolite imidazole frameworks-8,ZIF-8）中作为信号标记物。发现HRP@ZIF-8复合材料在碱性条件、高温等极端条件下能保持稳定的催化活性。在此基础上建立间接竞争免疫比色法检测AFB1,通过肉眼可直接分辨含有AFB1样品。在最佳条件下,随着AFB1浓度的增加,吸光度在0.01~20 ng/mL内递减,具有明显的线性关系y=0.03×C[AFB1]+0.79,R2=0.99,检测限为72 pg/mL,同时精密度和特异性都达到可接受的水平,AFB1在米粉和面粉中的添加回收率分别在96.00%~105.00%、82.00%~110.00%之间,相对标准偏差均小于5%。该法操作简单、快速、灵敏、特异性好,可用于米粉、面粉等谷类食品中AFB1的痕量检测。