β-甘露聚糖酶产生菌的筛选及魔芋低聚糖制备工艺的研究

以魔芋粉为唯一碳源,从种植魔芋土壤中定向筛选一株高产胞外β-甘露聚糖酶的菌株,进行形态观察、生理生化试验和16S rDNA序列分析鉴定,并研究了该β-甘露聚糖酶水解魔芋胶制备魔芋低聚糖的工艺。结果表明,筛选出一株高产胞外β-甘露聚糖酶的菌株,编号为G1,被鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。确定魔芋低聚糖制备的酶解条件为酶添加量50 U/g魔芋葡甘聚糖（KGM）,酶解pH值 6.5,酶解温度55 ℃;当KGM质量浓度为10 g/L,酶解时间2 h时,还原糖转化率为51.6%;当KGM质量浓度为30 g/L,酶解时间4 h时,还原糖转化率仍可达到46.9%,表明该酶具有较高的催化效率。利用薄层层析（TLC）定性分析酶解产物主要为三糖及三糖以上的低聚糖。该研究为实现酶法制备魔芋低聚糖的工业化生产奠定了基础。     

β-甘露聚糖酶制备魔芋葡甘露低聚糖的研究

利用黑曲霉菌株(Aspergillus niger)LW-1所产酸性β-甘露聚糖酶,对魔芋胶进行水解制备(魔芋)葡甘露低聚糖。酶解的工艺条件为:魔芋胶浓度150g/L,加酶量50IU/g(魔芋胶),酶解温度50℃,酶解时间6h。所获酶解产物经薄板层析和HPLC检测,主要为低聚糖以及少量单糖。再利用酵母发酵法去除其中的可发酵性单糖,最终产物为100%的(魔芋)葡甘露低聚糖。     

辐照魔芋葡甘露聚糖的应用研究

魔芋葡甘露聚糖(KCM)经60Co γ-射线辐照后,用β-甘露聚糖酶水解制备葡甘露低聚糖,然后用活性炭、离子交换树脂纯化葡甘露低聚糖,最后用凝胶渗透色谱(GPC)和质谱(MS)鉴定产物.结果表明,辐照是一种有效的前处理方法,不仅可以显著地降低KGM的黏度,还可以在一定程度上提高其酶解效率.纯化后的葡甘露低聚糖液的总脱色率为89.2%,脱盐率为83.8%,可溶性固形物损失率为15.1%.GPC和MS分析结果显示,辐照魔芋葡甘露聚糖经酶解24h后所得产物为8个葡萄糖或甘露糖组成的低聚糖.     

半干法酶解制备魔芋葡甘低聚糖工艺及其抗氧化性能研究

目的:以魔芋胶为原料优化半干法酶解制备魔芋葡甘低聚糖的工艺。方法:在单因素实验的基础上,通过3因素3水平Box-Behnken组合实验,建立魔芋胶水解率的二次多项式回归方程,经响应面回归分析得到魔芋胶和缓冲液的固液比、酶添加量、反应时间三个因素的优化组合条件;并对产物的抗氧化性能进行了测定。结果:最佳酶解条件为pH6、反应温度为55℃、酶解时间4.2h、固液比1∶1.63、β-甘露聚糖添加量1500U/g;产物对·OH的半抑制率（IC50）为0.4331mg/mL,对O-2·的IC50为15.7mg/mL;其还原能力为同浓度下抗坏血酸（V C）的73.82%。结论:在优化条件下魔芋胶水解率为52.67%,与预测值近似,优化结果的可信度较高具有现实意义;该工艺下的魔芋葡甘低聚糖具有良好的抗氧化能力。      

碱酶一步法水解铬革屑的工艺研究

在原有实验基础上对铬革屑水解工艺参数进行了进一步优化.增加的水洗预处理步骤可以显著降低铬革屑中40％的灰分含量.单因素优化实验结果显示,较佳的工艺参数为氧化钙脱铬温度65℃、氧化钙用量10％、碱处理液比10、氧化钙处理时间30 min、酶水解温度60℃、酶用量0.8％、酶水解时间1.0 h.正交优化实验结果表明,最佳工...     

龟板胶酶解优化条件的研究

采用胰蛋白酶和中性蛋白酶复合水解龟板胶,同时以水解度为考察指标,用正交实验考查了影响酶解的四个主要因素(pH值、酶水解温度、底物浓度,酶水解时间).研究表明,此法能有效降低龟板胶的分子量,增加多肽量,减少浑浊度及沉淀物,其最佳工艺为:酶解温度50℃、pH值为8.5、底物浓度8%、酶解时间8h.     

不同聚合度魔芋葡甘低聚糖的酶解制备及其体外益生功能

以魔芋葡甘聚糖（konjac glucomannan,KGM）为原料,研究β-甘露聚糖酶酶解后魔芋葡甘低聚糖（konjac oligoglucomannan,KOGM）的制备流程对聚合度（polymerization degree,DP）的影响,探讨不同聚合度KOGM 与原料KGM 在理化性质、微观结构上的差异以及对5 种乳酸菌的增殖、产酸、总糖利用及短链脂肪酸的影响。结果表明,采用酵母发酵去除单糖以及随后的离心和灭菌工艺对KOGM 聚合度无明显影响。制备得到的3 种KOGM 的聚合度分别为16.74、12.74 和11.13。3 种KOGM 与原料KGM 具有相似的主链结构,其中2 种低聚合度KOGM（low polymerization konjac oligoglucomannan,KOGM-L）（KOGM-L1 的DP 为12.74,KOGM-L2 的DP 为11.13）有更低的黏度特征,且存在相似的微观形态,呈现更加明显的碎片化和孔洞结构。与KGM 和中聚合度KOGM（medium polymerization konjac oligoglucomannan,KOGM-M）（DP 为16.74）相比,低聚合度KOGM-L 更有利于促进乳酸菌增殖、产酸及总糖分解,但2 种低聚合度KOGM-L 之间没有显著差异（P>0.05）。低聚合度KOGM-L2与长双歧杆菌培养时总菌数最高（OD600=2.13）,但是低聚合度KOGM-L1 与鼠李糖乳杆菌培养时增殖倍数最高（4～5 倍）。短链脂肪酸总产量及各组分含量显示低聚合度KOGM-L 要显著高于中聚合度KOGM-M、原料KGM 和菊糖（P<0.05）。综上所述,不同聚合度的KOGM益生功能差异明显,低聚合度KOGM 效果最佳。聚合度相近的KOGM 益生功能相似,聚合度11～13 对长双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌有更好的益生效果。     

酶解脱脂虾粉制备多肽最佳工艺条件的研究

对酶法水解脱脂虾粉制备多肽的工艺进行了研究，试验以水解度(DH/%)和酸溶性肽得率(YASP／％)为指标，确定了用胰蛋白酶—木瓜蛋白酶混合酶法水解脱脂虾粉制取多肽的最佳酶解工艺条件为：胰蛋白酶—木瓜蛋白酶的酶量比为1：2(W／W)，总酶量为6000U，脱脂虾粉底物浓度为4％，pH7．0，温度60℃，反应时间6h的条件下，可使水解度和酸溶性肽得率分别达到25．91％和38．46％。     

双酶分步水解制备鱿鱼皮胶原蛋白肽的工艺条件优化

通过单因素试验和正交试验对鱿鱼皮胶原蛋白肽的双酶分步提取工艺进行优化。碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶分步提取的最佳工艺条件:先用0.3%碱性蛋白酶于p H10、50℃条件下水解4 h,再用0.2%木瓜蛋白酶于p H8、55℃条件下水解2 h。在此最佳水解条件下得到的鱿鱼皮胶原蛋白肽水解度为24.32%,DPPH清除率为90.34%,多肽转化率为58.68%。采用SDS-PAGE电泳初步分析所得胶原蛋白肽分子量范围,结果表明,其分子量基本小于3000 u。     

盐酸水解大豆异黄酮工艺条件的研究

为提高总异黄酮中的染料木黄酮含量,用盐酸水解大豆异黄酮粗品,单因素试验和正交试验研究表明,盐酸浓度是影响大豆异黄酮水解的主要因素.正交试验得出盐酸水解大豆异黄酮的最佳工艺条件为:盐酸浓度1 mol/L,水解时间4 h,水解温度55℃.以染料木黄酮计的总异黄酮含量由3.06%提高到5.45%.     

二次加酶法提高大米蛋自水解度的研究

选用Alcalase和Flavourzyme为水解大米蛋白的两种工具酶,通过单因素实验和正交实验确定两种酶的最佳水解条件.在这种条件下,采用二次加酶法水解大米蛋白,其水解度可达10.26%,与其他水解法比较明显地提高了大米蛋白的水解度.     

β-葡萄糖苷酶水解、分离纯化大豆异黄酮甙元工艺研究

研究以低纯度的商品大豆异黄酮为原料,采用β-葡萄糖苷酶水解技术制备高纯度的大豆异黄酮甙元产品.比较系统地研究酶的用量、反应时间、反应温度、反应体系pH值、底物浓度等因素对酶水解效果的影响,最终得到酶水解制备工艺的最佳工艺参数.实验结果表明,采用该分离纯化工艺制备大豆异黄酮甙元产品,其产品得率、异黄酮回收率和产品纯度分别为12.12%、77.16%和92.78%,分离纯化效果比较理想.     

大豆异黄酮糖苷酸法水解工艺的研究

通过单因素和正交试验得到了大豆异黄酮糖苷酸法水解为大豆异黄酮苷元的最佳工艺条件为:盐酸乙醇的浓度为3 mol/L,水解温度为80℃,水解时间180 min,酸法水解率为81.31%.     

脱脂豆粕制备高水解度大豆肽酶解条件的优化

目的:研究高水解度大豆肽酶解的最佳条件;方法:以水解度为指标,采用响应面分析考察底物浓度、酶浓度、反应pH等因素对水解度的影响;结果:高水解度大豆肽的最佳酶解条件为:底物浓度8.58%、加酶量8 800 U/g底物、pH 11.20、温度55℃、时间3.0 h,该条件下得到的大豆肽水解度为36.8%;结论:试验结果可为大豆肽的酶解工艺提供依据.     

甘露低聚糖铁配合物的制备工艺研究

经过单因素及正交实验,确定出甘露低聚糖铁配合物的最佳工艺条件是pH9、时间1.5 h、氯化铁浓度0.45 mol/L、柠檬酸钠浓度0.20 mol/L.其中铁含量测定是用邻菲罗啉法检测,并用红外、紫外-可见光扫描确定其结构.     

大豆多肽复合酶解工艺条件优化的研究

以大豆蛋白为原料,采用 Protamex 与 Neutrase 两种蛋白酶酶解,得到小分子多肽(分子量≤2300),进行了两种酶的作用条件比较.采用新方法测定小分子多肽含量,通过正交试验对大豆多肽复合酶解工艺条件进行试验分析,确定了大豆蛋白复合酶解的最佳工艺条件为:Protamex 酶与Neutrase 酶的比例为 6:4,pH7.0,底物浓度为 5%,酶解时间为 8 h,温度为 60℃.为进一步水解制备小分子大豆肽的研究具有一定的参考意义.     

双酶法酶解大豆蛋白制备大豆低分子肽的研究

以水解度为考察指标,研究了枯草杆菌AS1．398中性蛋白酶、木瓜蛋白酶制备大豆肽的工艺参数。结果表明,利用AS1．398中性蛋白酶与木瓜蛋白酶协同水解大豆蛋白制取低分子肽的方法是可行的,木瓜蛋白酶与AS1．398蛋白酶酶活力之比为1：1情况下水解效果较佳。双酶水解的最佳条件是底物浓度100g/L,温度40℃,加酶量为12500U／g,pH为7．5。在此条件下,研究了水解时间与低分子肽得率的关系,表明水解4．5h即可。     

复合蛋白酶水解黑豆粕制备多肽的工艺优化

为充分利用黑豆粕中的蛋白质资源,研究了复合蛋白酶水解黑豆粕制备多肽的工艺路线。从蛋白酶的筛选入手,考察了不同蛋白酶对黑豆粕水解效果的差异,并通过复配比例优化了最佳复合蛋白酶的组成。采用单因素试验及响应面试验确定了复合蛋白酶水解黑豆粕的最佳工艺条件。结果表明:最佳复合蛋白酶为胰蛋白酶、碱性蛋白酶与桔青霉蛋白酶按酶活比1∶3∶2复配;最佳工艺条件为加酶量5 670 U/g,底物蛋白质量浓度40 g/L,pH 9.55,水解温度50℃,水解时间6 h。在优化的工艺条件下水解黑豆粕,多肽得率可以达到82.44%。水解液中多肽的相对分子质量均在7.8 kDa以下,大部分多肽的相对分子质量小于3.3 kDa;多肽基本上保持了黑豆粕蛋白的氨基酸组成,具有较高的营养价值。     

凝乳酶水解酪蛋白生产酪蛋白糖巨肽工艺条件的研究

酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,简称CGMP)是K-酪蛋白经酶解后生成的一类舍有糖链的多肽,具有许多功能特性.本文研究了凝乳酶水解酪蛋白生产CGMP的工艺条件,通过正交实验得到最佳工艺条件是底物浓度10mg/mL、酶的添加量为0.6%、酶解时间为2.5h.唾液酸回收率为80.7%,蛋白质回收率为3.03%,糖基化程度(唾液酸/蛋白质)为77.6μg/mg.     

"Amano"β-糖苷酶水解大豆异黄酮技术的研究

研究了"Amano"β-糖苷酶水解大豆异黄酮技术工艺.通过单因素试验对水解过程中的不同影响因素进行了考察.运用正交试验优化了"Amano"β-糖苷酶水解大豆异黄酮的反应条件.该酶水解黄豆苷的最佳条件为:水解时间140min,加酶液浓度33μg/ml,pH4.5,温度50℃;水解染料木苷的最佳条件为:水解时间140min,加酶液浓度33μg/ml,pH4.5,温度60℃.验证实验证实用最佳反应条件水解大豆异黄酮可使黄豆苷的水解率达到 98.2%,染料木苷的水解率达到94.2%.