新疆特色植物药桑色素的抗辐射保护和抗氧化活性的研究

探究药桑色素对X-射线辐射斑马鱼胚胎损伤的保护作用和体外抗氧化能力。方法:用不同浓度药桑色素处理正常发育4h(4hpf)的胚胎,3h后用X-射线(辐射强度20Gy)一次性照射,分别测定胚胎的ROS、MDA和SOD值;采用DPPH和ABTS的方法测定药桑色素的抗氧化能力。结果:与对照组和辐射组(20G)相比较,在0.5μg/mL、5μg/mL和50μg/mL组中,ROS生成量表现差异极显著(P<0.01);SOD活性表现差异不显著(P>0.05);与对照组相比较,MDA含量在5μg/mL组中表现差异极显著(p<0.01),在50μg/mL组中表现差异显著(P<0.05);与辐射组(20G)相比,MDA含量在5μg/mL和50μg/mL组中表现差异极显著(p<0.01)。结论:药桑色素对斑马鱼胚胎的损伤具有保护作用,其机制可能与药桑色素提高斑马鱼胚SOD活性,减少氧自由基的产生,抑制脂质过氧化有关。药桑色素也具有较强的清除自由基能力。     

羊栖菜褐藻糖胶对AAPH诱导的斑马鱼氧化应激模型的保护作用

目的:探究羊栖菜褐藻糖胶（SFPS）对2, 2-偶氮二（2-甲基丙基咪）二盐酸盐（AAPH）诱导氧化应激斑马鱼模型的保护作用。方法:通过检测SFPS对2, 2'-联氮-双-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）及1, 1-二苯基-2-苦基肼（DPPH）自由基的清除能力,来评价及验证SFPS的体外抗氧化能力,优化AAPH诱导斑马鱼氧化应激模型,并分别以三个表型指标胚胎存活率、卵黄囊大小和心跳速率以及斑马鱼体内细胞死亡率和活性氧（ROS）生成率来评价SFPS的体内抗氧化活性。结果:SFPS主要由75.30%±1.77%的总糖、21.39%±1.07%的硫酸根,1.78%±0.19%的蛋白质以及1.47%±0.02%的多酚组成,对DPPH、ABTS自由基清除的IC₅₀值分别为0.59、0.69 mg/mL。此外,SFPS在50~200 μg/mL范围内对斑马鱼胚胎无毒性,并对AAPH诱导引起的斑马鱼氧化损伤起到保护作用,且呈剂量依赖型。其中,在最优浓度200 μg/mL显著提高斑马鱼胚胎存活率（100%,P<0.05）, 显著降低心跳速率（101.37%,P<0.05）和卵黄囊大小（111.80%,P<0.05）,对斑马鱼体内细胞死亡和活性氧生成的抑制率最高分别可达70.55%和50.68%。结论:SFPS具有较强的体外抗氧化作用,并对AAPH诱导氧化损伤的斑马鱼表现出优越的体内抗氧化能力及氧化损伤修复能力,这表明SFPS作为天然抗氧化剂在保健食品及化妆品领域具有广泛应用前景。     

短波紫外线控制鲜切苹果褐变与其活性氧代谢的相关性

为研究短波紫外线（ultraviolet-C,UV-C）处理对鲜切苹果褐变控制与活性氧（reactive oxygen species,ROS）代谢的相关性,分析贮藏过程中UV-C处理后鲜切苹果的ROS水平、抗氧化相关酶活力、抗氧化物质（VC）含量以及非酶抗氧化能力的变化。结果表明：UV-C处理能够有效抑制鲜切苹果的褐变,降低超氧阴离子自由基产生速率和H2O2、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量;同时,UV-C处理能够有效提高抗氧化相关酶（超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、抗坏血酸过氧化酶和谷胱甘肽还原酶）活力以及VC含量,减缓鲜切苹果非酶抗氧化能力（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)阳离子自由基清除能力和还原能力）在贮藏过程中的下降;相关性分析与主成分分析结果显示,鲜切苹果褐变程度与ROS水平和MDA含量呈显著正相关（P＜0.05）,与抗氧化酶活力和非酶抗氧化能力呈显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）负相关,且UV-C处理组鲜切苹果的ROS代谢能力高于对照组。因此,推测UV-C处理可能通过调节鲜切苹果的ROS代谢进而控制其贮藏过程中的褐变。     

虾青素DHA单酯对脂多糖诱导炎症反应的保护作用

目的：通过构建脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的BV2小鼠小胶质细胞和斑马鱼炎症模型研究虾青素二十二碳六烯酸（docosahexaenoic,DHA）单酯的抗炎活性。方法：采用光学显微镜观察细胞形态,四甲基偶氮唑蓝法检测细胞活性,Griess法测定NO水平。向斑马鱼胚胎显微注射虾青素,体视显微镜下观察胚胎发育,采用试剂盒检测胚胎中活性氧（reactive oxygen species,ROS）产生量和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应测定炎症因子的表达水平。结果：虾青素DHA单酯干预后,细胞内炎症因子表达水平与模型组相比极显著下降（P＜0.01）,接近于空白对照组;游离虾青素和虾青素DHA单酯均能保护斑马鱼胚胎的发育,降低LPS诱导的胚胎畸形率,有效抑制炎症斑马鱼体内ROS产生,同时显著降低MDA含量,下调炎症因子的表达水平,并且虾青素DHA单酯的效果更佳。结论：虾青素DHA单酯比游离虾青素具有更好的抗炎活性,对LPS诱导的炎症反应有明显的保护作用。     

矢车菊素-3-O-葡萄糖苷保护RAW264.7细胞免受过氧化氢诱导的氧化损伤

本研究旨在探究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷（cyanidin-3-O-glucoside,C3G）对H2O2诱导RAW264.7细胞氧化损伤的保护作用及其机制。通过噻唑蓝法测定C3G和过氧化氢分别对RAW264.7细胞存活率的影响;采用酶联免疫吸附测定法检测细胞内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力以及一氧化氮（nitric oxide,NO）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平;利用2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯活性氧荧光探针检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;通过逆转录定量聚合酶链式反应和Western blot法分别测定相关mRNA和蛋白表达水平。结果表明,C3G（6.25～25.00 μmol/L）能显著抑制H2O2诱导RAW264.7细胞活性降低（P＜0.05）。C3G显著降低H2O2诱导RAW264.7细胞内ROS过表达、MDA水平和NO释放（P＜0.05）,显著增加SOD和GSH-Px活力（P＜0.05）。此外,与空白对照相比,400 μmol/L H2O2处理组中,蛋白激酶Mst1/2和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白Keap1的mRNA及蛋白相对表达水平显著上调（P＜0.05）,而细胞中核因子E2相关因子和下游抗氧化酶HO-1的mRNA及蛋白相对表达水平显著下调（P＜0.05）;而采用C3G干预RAW264.7细胞,上述相关mRNA及蛋白的相对表达水平被逆转。结论：C3G对H2O2诱导RAW264.7细胞氧化损伤保护作用,可能与激活Mst/Nrf2信号通路和提高抗氧化酶活性有关。     

基于斑马鱼模型评价发酵对麦麸多糖抗氧化活性的影响

为探讨发酵是否能提高麦麸多糖的抗氧化活性,本实验首先挑选受精后7～9 hpf(hours post fertilization, hpf)的斑马鱼受精卵,将其暴露在不同质量浓度(0、25、50、100、200、300μg/mL)的未发酵麦麸多糖(WBP)和发酵麦麸多糖(FWBP)溶液中,统计初孵仔鱼心率、测量其体长及卵黄囊大小,统计96 hpf时斑马鱼胚胎孵化率,评估WBP和FWBP对斑马鱼胚胎的安全性。在上述试验的基础上,将7～9 hpf的斑马鱼胚胎在不同质量浓度(0、50、100、200μg/mL)的WBP和FWBP溶液中预暴露到24 hpf,在72 hpf时通过荧光染色检测斑马鱼仔鱼活性氧(ROS)产生率、脂质过氧化率和细胞死亡率,分析过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果表明：高质量浓度(>300μg/mL)WBP和FWBP导致斑马鱼胚胎死亡率提高、心率和孵化率降低,体长变短,对斑马鱼胚胎的发育具有毒性作用;50、100、200μg/mL的WBP和FWBP均能降低了斑马鱼体内的ROS产生率、脂质过氧化率和细胞死亡率,提...     

蛋清源活性肽对过氧化氢诱导的HEK293细胞抗氧化酶活力及白细胞介素8分泌的影响

食源性抗氧化肽由于抗氧化能力较好、安全性高,逐渐成为多肽研究领域的热点。本实验以H2O2诱导HEK293细胞损伤建立氧化损伤模型,研究了蛋清源活性肽WNWAD（Trp-Asn-Trp-Ala-Asp）及其结构改造肽WNW（Trp-Asn-Trp）、WAD（Trp-Ala-Asp）、WN（Trp-Asn）对H2O2诱导损伤的HEK293细胞的存活率、活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平、抗氧化酶活力及细胞因子白介素8（interleukin-8,IL-8）分泌的影响。结果表明：蛋清源活性肽对HEK293细胞存活率的影响极显著（P＜0.01）,不同浓度蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN作用于氧化损伤的HEK293细胞后,其存活率明显提高,呈现浓度依赖性;其中1.0 μmol/L蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN处理细胞后,存活率从损伤组的（48.0±2.4）%分别提高到（99.7±1.8）%、（69.4±3.2）%、（78.9±5.1）%、（72.1±3.6）%,与损伤组有极显著性差异（P＜0.01）;H2O2诱导HEK293细胞内ROS的产生,经过活性肽预处理后细胞内ROS的水平极显著降低（P＜0.01）;随着蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN浓度的升高,总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶3 种酶的活力均有所提高,呈现浓度依赖型关系。最后利用酶联免疫吸附测定试剂盒测定了HEK293细胞中IL-8的分泌量,经过H2O2处理的HEK293细胞上清液中IL-8含量极显著升高（P＜0.01）,加入WNWAD、WNW、WN、WAD后,细胞中的IL-8含量均有所降低,其中WNWAD和WN影响显著（P＜0.05）。以上结果显示蛋清源活性肽对降低HEK293细胞氧化应激水平和提高细胞抗氧化能力有积极的影响。     

魔芋低聚糖缓解高糖水平诱发的大鼠代谢综合征及相关机制

本实验以雄性SD大鼠为研究对象,通过尾静脉注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,研究魔芋低聚糖对糖尿病大鼠血糖浓度、血清脂质组成和氧化应激水平及相关机制的影响。结果表明：与糖尿病模型组相比,魔芋低聚糖干预组大鼠的空腹血糖浓度和血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇浓度均显著降低（P＜0.05,P＜0.01）;血清高密度脂蛋白胆固醇浓度、总抗氧化能力及胰岛素分泌水平显著升高（P＜0.05）。对参与糖脂代谢和氧化应激途径的基因分析表明,糖原合成相关基因谷氨酰胺合成酶2、糖原蛋白1基因,胰岛素诱导相关基因Insig1、Insig2,氧化应激相关基因Hmox1、表皮生长因子受体基因均显著上调（P＜0.05）;糖异生相关基因葡萄糖-6-磷酸酶1基因,甘油三酯合成相关基因,固醇调节元件结合蛋白基因,脂肪酸合成相关基因ACC、FAS,氧化应激相关基因,胰岛素样生长因子结合蛋白1基因均显著下调（P＜0.05）。综上,魔芋低聚糖可降低糖尿病大鼠血糖水平,改善糖脂代谢紊乱,抑制糖尿病引起的机体氧化应激损伤,增强机体的抗氧化能力。     

莲壳多酚对T-BHP致HepG2氧化应激损伤的保护作用

目的：研究莲子壳多酚对叔丁基过氧化氢（tert-butylhydro-peroxide,T-BHP）诱导的HepG2氧化应激损伤的保护作用。方法：选取存活率接近50%的T-BHP浓度作为氧化损伤模型建立的浓度。以细胞活力、活性氧水平（reactive oxygen species,ROS）、丙二醛水平（malondialdehyde,MDA）、乳酸脱氢酶水平（Lactic dehydrogenase,LDH）、谷胱甘肽（Glutathione,GSH）水平及抗氧化酶相关基因表达量为评价指标,以茶多酚为阳性对照,评价不同浓度（2.5、5、7.5μg/mL）莲子壳多酚抗氧化应激活性水平。结果：当120μmol/L浓度的T-BHP造模4 h后,细胞存活率达49.18%±7.55%,符合模型构建要求,故选择120μmol/L为氧化损伤模型的建模浓度进行后续实验。莲子壳多酚能极显著抑制T-BHP造成的细胞存活率降低（P<0.01）,7.5μg/mL时,ROS水平降低45.99%,MDA下降58.77%,LDH下降71.61%,GSH提高206.60%(P<0.05),抗氧化酶相关基因...     

虎杖苷对四氧嘧啶诱导的大鼠胰岛细胞损伤的保护作用

目的:研究虎杖苷(Polydatin)对四氧嘧啶(Alloxan)诱导的大鼠胰岛素瘤INS-1细胞损伤的保护作用。方法:利用细胞增殖实验分别检测四氧嘧啶或虎杖苷对INS-1细胞增殖的影响,确定给药浓度;实验分为空白组、模型组(18 mmol/L四氧嘧啶)和不同浓度虎杖苷保护组(分别给予25、50 μg/mL虎杖苷,同时给予18 mmol/L四氧嘧啶),检测细胞存活率、LDH释放、胰岛素分泌、凋亡相关Caspase-3和Caspase-9的活性、活性氧簇ROS、一氧化氮NO、丙二醛MDA的含量及抗氧化相关超氧化物歧化酶SOD、还原型谷胱甘肽GSH水平。结果:10~30 mmol/L四氧嘧啶处理使INS-1细胞存活率显著降低(P<0.05),18 mmol/L四氧嘧啶处理细胞贴壁数目减少,LDH释放升高,胰岛素分泌量降低,凋亡相关Caspase-3和Caspase-9的活性显著升高(P<0.05),氧化应激相关ROS、NO和MDA含量显著提高(P<0.05),抗氧化相关SOD和GSH水平显著降低(P<0.05)。5~100 μg/mL虎杖苷对INS-1细胞无毒性作用,相较于模型组,25和50 μg/mL虎杖苷能显著提高四氧嘧啶诱导INS-1细胞存活率,改善细胞形态,降低LDH活性,增加胰岛素分泌量,抑制凋亡相关Caspase-3和Caspase-9酶活性,抑制四氧嘧啶诱导的氧化损伤,提高抗氧化相关酶活力(P<0.05)。结论:虎杖苷对四氧嘧啶诱导的INS-1细胞损伤有显著保护作用,其作用机制可能与抑制氧化应激及凋亡有关。