结直肠癌有无肝转移血清差异蛋白质表达的研究

目的:利用蛋白质组学技术分离、鉴定结直肠癌有无肝转移患者血清中差异蛋白质,筛选诊断肝转移的血清蛋白标志物。方法:根据入组条件,收集结直肠癌无肝转移病例、有肝转移病例,在两组中随机抽取12例血清样本,同组血清等量混合进行双向凝胶电泳,建立两组血清蛋白质双向电泳图谱,用Image-Master V5.0软件寻找两组差异蛋白质点,MALDI-TOF-MS对差异蛋白质进行鉴定,查询生物信息数据库对差异蛋白质进行初步分析。结果:两组比较差异在2倍以上蛋白质有8种,其中5个蛋白质表达上调,3个蛋白质表达下调;两组每个差异蛋白灰度体平均值比较差异均有统计学意义(P<0.05)。通过数据库搜索鉴定出7种蛋白质,上调的5个蛋白质分别是Transferrin、Complement component C9、RNA directed DNA polymerase(RNA指导的DNA合成酶)、Conserved hypothetical-protein(假定蛋白质)、SEC14L1 7 kDa protein;下调的2个蛋白质分别是Haptoglobin和Isoform 1 of Serum albumin。结论:结直肠癌有无肝转移患者血清中的蛋白质表达谱有一定的差异性,这些差异蛋白质可能成为诊断肝转移的血清标志物。     

三七总皂苷对酒精性肝硬变大鼠肝星状细胞蛋白组学的影响

目的:探讨三七总皂对实验性酒精性肝硬变大鼠肝纤维化治疗作用的分子机制。方法:选取健康成年雄性Wistar大鼠36只,使用体积分数50%酒精16 m L·(kg·d)~(-1)灌胃造模,9周后随机分成模型组、安珐特组、三七总皂苷组,每组12只。安珐特组给予西药安珐特21.6 mg·(kg·d)~(-1)进行灌胃,三七总皂苷组给予三七总皂苷100 mg·(kg·d)~(-1)进行灌胃,模型组继续使用体积分数50%酒精灌胃。同时设置空白组。12周后处死大鼠,剪下肝右叶,提取肝星状细胞总蛋白,测定各组蛋白含量,继而进行等电聚焦双向电泳,比较组间的差异蛋白点。结果:通过组间两两比较发现,组间的蛋白表达均存在着差异,正常组与模型组比较,共有23个差异点;正常组与安珐特组比较,共有33个差异点;正常组与三七总皂苷组比较,共有30个差异点;模型组与安珐特组比较,共有30个差异点;模型组与三七总皂苷组比较,共有31个差异点;安珐特组与三七总皂苷组比较共有30个差异点。结论:三七总皂苷对实验性酒精性肝硬变大鼠具有保护作用,其机制可能与三七总皂苷引起肝星状细胞蛋白质表达差异有关。     

急性髓系白血病多药耐药细胞标记蛋白的探讨

目的：采用蛋白质组学技术筛查急性髓系白血病（AML）细胞多药耐药标记蛋白。方法将16例 AML 患者根据化疗疗效的不同分为2组：多药耐药组（7例）和化疗敏感组（9例）。采用双向电泳和质谱分析检测2组之间差异表达的蛋白质。结果双向电泳凝胶图像分析结果显示,2组之间差异显著的蛋白点共9个。与化疗敏感组比较,多药耐药组第41号蛋白点的蛋白表达水平明显升高（P ＜0．01）,第7／8、25和36／37号蛋白点的蛋白表达水平均明显降低（均 P ＜0．01）。2组之间鉴定的4个差异表达蛋白分别为：细丝蛋白 A（filamin A,FLNa,第7／8号）、β-肌动蛋白（β-actin,第25号）、纤维蛋白原γ链（fibrinogen gamma chain,第36／37号）和热休克蛋白60（heat shock protein 60,第41号）。结论多药耐药 AML 细胞中 FLNa、β-actin、fibrinogen gamma chain 和 heat shock protein 60有可能成为预测 AML 患者耐药的标志物。     

IL-15在兔膝创伤性关节炎模型中的表达研究

目的观察兔膝创伤性关节炎早期白介素15（IL-15）炎性因子的表达及其变化,以进一步探讨创伤性关节炎的发生机制。方法将48只健康新西兰大白兔随机分为实验组和对照组,每组24只。实验组行左后膝关节前后交叉韧带切断和内侧半月板切除术;对照组行单侧膝关节切开术作为假手术对照。2组分别在术后6、12、24h,1、2、3、4周7个时间点抽取关节液,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定关节液中IL-15含量表达。组织学观察其关节软骨和滑膜的变化。结果48只大白兔中进入结果分析29只。2组术后6h兔膝关节液中IL-15含量较其他时间点明显增高（P〈0．05）;术后1周IL-15表达较术后24h明显降低（P〈0．05）;术后1、2、3、4周4个时间点的IL-15表达成升高趋势;实验组术后各时间点IL-15含量均高于对照组（均P〈0．05）。实验组术后4周,关节软骨失去原有的光泽,呈灰黄色,有裂纹,HE染色见表层略不平整,有小裂隙,纤维组织增生,玻璃样变性,局灶性软骨基质异染性减弱,软骨细胞减少,软骨基质纤维化。结论创伤后兔膝创伤性关节炎早期IL-15高表达,关节软骨及滑膜退变,创伤性关节炎早期与IL-15关系密切。     

大鼠急性重症梗阻性黄疸减黄过程中TNF-α和IL-2的变化

目的探讨大鼠急性重症梗阻性黄疸减黄过程中血清TNF-α和IL-2及肝损伤的相关性,术前减黄对于免疫功能恢复的意义。方法以结扎胆总管（LCD）建立阻黄模型（LCD组,n=10）,在建立阻黄模型1周后松解胆总管（ID组,n=60）,正常组不进行任何处理（n=10）。采用放射免疫法测定正常组、LCD组术后1周及ID组不同时间点TNF-α、IL-2的含量,同时自动生化分析仪检测ALT和胆红素含量。结果 LCD组血清TNF-α为（1 320.58±82.15）μg.L-1,IL-2为（45.12±12.65）μg.L-1,与正常组相比差异均有统计学意义（P〈0.01）;引流1周时ALT和胆红素分别为（7.25±1.16）U.L-1和（51.03±7.52）μmol.L-1,与LCD组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,与正常组比较差异无统计学意义（P〉0.01）;TNF-α在引流2周时已恢复正常,IL-2在引流4周时已恢复正常,与正常组比较差异均无统计学意义（P〉0.01）;LCD组和引流组不同时间点的TNF-α与ALT呈正相关（r=0.762,P〈0.01）。结论 TNF-α和IL-2参与了肝损伤,术前减黄治疗对于急性重症梗阻性黄疸免疫功能的恢复具有重要意义。     

人血清白蛋白对HK-2细胞col-Ⅳ、TIMP-1、MMP-9mRNA表达水平的影响

目的探讨人血清白蛋白对体外培养的HK-2细胞Ⅳ型胶原（Ⅳcollagen,col-Ⅳ）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1）、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）mRNA表达水平的影响。方法 HK-2细胞随机分为4组。A组细胞（空白对照组）,未添加刺激物;B组、C组和D组细胞分别与5 mg.mL-1人血清白蛋白培养12、24、48 h。在0、12、24、48 h应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测col-Ⅳ、TIMP-1和MMP-9 mRNA的相对表达量。结果人血清白蛋白刺激HK-2细胞可上调col-Ⅳ、TIMP-1 mRNA的表达,且随着刺激时间延长,表达水平逐渐增高。B、C、D 3组HK-2细胞col-Ⅳ、TIMP-1mRNA表达水平均明显高于A组（均P〈0.01）。人血清白蛋白刺激HK-2细胞,MMP-9 mRNA的表达随着刺激时间的延长,表达水平先增高后下降。B、C 2组HK-2细胞MMP-9 mRNA表达水平均明显高于A组（均P〈0.01）,D组HK-2细胞MMP-9 mRNA表达水平低于A组（P〈0.05）。相关性分析结果显示,TIMP-1 mRNA表达与col-ⅣmRNA表达呈正相关（r=0.987,P〈0.05）,MMP-9 mRNA表达与col-ⅣmRNA表达无关（r=0.146,P〉0.05）。结论人血清白蛋白刺激HK-2细胞可能通过促进col-Ⅳ的合成及上调TIMP-1、下调MMP-9使细胞外基质积聚,参与肾间质纤维化。     

RASSF1-A基因和RASSF1-C基因在胃癌组织及细胞中的表达

目的探讨RASSF1-A基因和RASSF1-C基因在胃癌组织及细胞中的表达特点。方法采用http：//www.ncbi.nl m.nih.gov/及DNAstar软件对80例胃癌（胃癌组）及相对应的癌旁组织（对照组）标本RASSF1-A基因和RASSF1-C基因进行生物信息学分析。采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测2组组织及胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901细胞中RASSF1-A mRNA、RASSF1-C mRNA相对表达量。结果经RT-PCR扩增后,RASSF1-C mRNA在肿瘤细胞系BGC-823、SGC-7901细胞中的相对表达量分别为0.62±0.07、0.66±0.08RASSF1-A mRNA在肿瘤细胞系BGC-823、SGC-7901细胞中的相对表达量分别为0.23±0.10、0.58±0.07,二者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。RASSF1-A mRNA在对照组组织中相对表达量为0.81±0.07,显著高于胃癌组0.31±0.03,差异有统计学意义（P〈0.05）。RASSF1-C mRNA在胃癌组组织中相对表达量为0.87±0.04,对照组组织中相对表达量为0.84±0.03,2组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 RASSF1-A、RASSF1-C基因在胃癌组织中的表达下调。     

纤溶酶原激活物抑制剂-1、脂联素、白介素-1与妊娠期糖尿病的关系

目的：通过检测妊娠期糖尿病（GDM）孕妇血清、脐血、胎盘组织中纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）、脂联素（AP）、白介素-1（IL-1）的表达水平,探讨其与GDM发生、发展的关系。方法选择50例GDM孕妇为试验组,50例正常孕妇为对照组。采用ELISA法测定2组孕妇血清与脐血PAI-1、AP、IL-1表达水平,采用实时定量PCR测定2组胎盘组织中PAI-1、AP、IL-1表达水平。结果试验组血清、脐血、胎盘组织AP表达水平均较对照组显著降低（P＜0．05）,而PAI-1、IL-1表达水平均较对照组显著升高（P＜0．05）。结论AP的低表达、PAI-1与IL-1的高表达可能与GDM的发生、发展有关。     

罗格列酮对大鼠肾脏缺血再灌注损伤保护作用机制的研究

目的 研究罗格列酮预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其保护机制.方法 建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,将40只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为5组：假手术组（S组）、缺血再灌注组（IR组）、罗格列酮＋缺血再灌注组（RIR组）、GW9662＋缺血再灌注组（GIR组）、罗格列酮＋GW9662＋缺血再灌注组（RGIR组）,每组8只.各实验组均于术后6、24、72ah抽取下腔静脉血,并于术后24 h采集肾脏组织.HE染色法光镜下观察肾组织形态、测定血清肌酐（Cr）含量、ELISA法测定血清丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD） 含量、免疫组织化学法观察肾组织中细胞间黏附分子（ICAM-1） 表达.结果 IR组肾小管评分及血清Cr、MDA含量较S组明显升高,血清SOD活性较S组降低,肾组织ICAM-1表达较S组增加（均P＜0.05）.RIR组肾小管评分及血清Cr、MDA含量较IR组下降,血清SOD活性较IR组升高,肾组织ICAM-1表达较IR组下降（均P＜0.05）.GIR组与IR组肾小管评分及血清Cr、MDA、SOD比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）.RGIR组与RIR组比较,肾小管评分及血清Cr、MDA含量显著上升,血清SOD活性下降,肾组织ICAM-1表达显著增高（均P＜0.05）.结论 罗格列酮预处理能通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator activated receptor gamma,PPARγ）保护缺血再灌注损伤的肾脏,其作用机制可能包括抗氧化应激和抗炎作用.     

血清丙氨酸氨基转移酶轻度异常的慢性乙型肝炎肝脏病理分析

目的分析丙氨酸氨基转移酶轻度异常的慢性乙型肝炎的肝脏病理特征,探讨慢性乙型肝炎患者性别、年龄与肝脏病理的关系。方法对209例丙氨酸氨基转移酶轻度异常的慢性乙型肝炎患者采用全自动生化检测仪检测血清丙氨酸氨基转移酶、AST的水平,乙型肝炎病毒的血清标志物（HBsAg、HBeAg）采用荧光定量法检测,行肝穿刺活检及肝组织病理检查。结果209例患者血清丙氨酸氨基转移酶45～80u·L^-1,血清AST45～80U·L^-1。HBeAg阳性120例,HBeAg阴性89例。209例患者肝脏均有病理改变,异常率为100．0％（209／209）。G1为24．4％（51／209）,G2为36．8％（77／209）,G3为33．0％（69／209）,G4为5．7％（12／209）,G2-G4为75．6％（158／209）;S1为42．1％（88／209）,S2为37．3％（78／209）,S3为13．9％（29／209）,S4为6．7oA（14／209）,S2-S4为57．9％（121／209）。男性患者肝组织炎症及肝组织纤维化发生率与女性比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。〈20岁、≥20～〈29岁、≥29～〈40岁患者肝组织炎症及肝组织纤维化发生率与≥40岁比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论血清丙氨酸氨基转移酶轻度异常的慢性乙型肝炎患者存在不同程度的疾病活动,不同年龄的患者与病理G分级、S分期无明显的关联,不同性别的患者与病理G分级、S分期也无明显的关联。     

肿瘤标志物联检在卵巢癌早期诊断中的研究

目的探讨肿瘤标志物[人附睾蛋白4（HE4）、糖类抗原125（CA125）及癌胚抗原（CEA）]联合检测在卵巢癌早期诊断中的应用价值。方法对47例卵巢癌患者（卵巢癌组,FIGO临床分期Ⅰ期6例、Ⅱ期12例、Ⅲ期14例、Ⅳ期15例）、63例良性卵巢疾病患者（良性病变组）及78例健康体检育龄妇女（对照组）进行HE4、CA125及CEA检测,观察各组HE4、CA125、CEA血清水平变化及异常率;比较不同FIGO临床分期HE4、CA125、CEA血清水平的变化;对3种肿瘤标志物单独检测和联合检测对卵巢癌诊断的效果进行方法学评价。结果卵巢癌组的HE4、CA125及CEA血清水平及异常率均明显高于良性病变组及对照组（均P〈0.05）,良性病变组与对照组比较差异均无统计学意义（均P〉0.05）;FIGO临床Ⅲ—Ⅳ期卵巢癌组HE4、CA125及CEA血清水平明显高于FIGO临床Ⅰ—Ⅱ期卵巢癌组（均P〈0.001）。3种肿瘤标志物单独检测以HE4及CA125 2项指标较好;3种肿瘤标志物联合检测对灵敏度、诊断符合率、约登指数及阴性预测值均有不同程度的提升。结论 HE4、CA125及CEA联合检测对卵巢癌的防治有重要的临床意义。     

雷贝拉唑阶梯停药疗法对十二指肠球部溃疡近期及远期疗效的初步观察

目的采用质子泵抑制剂——雷贝拉唑（rabeprazole,Rab）阶梯停药的方法治疗十二指肠球部溃疡（duode-nalulce,DU）,在停药前使患者血清胃泌素（gastrins,GS）的含量下降至正常水平,观察GS是否与DU复发相关。方法 100例DU患者按随机数字表法分成治疗组50例,采用Rab阶梯停药的方法治疗,50例对照组采用常规Rab治疗法。通过疗效判断标准判断2组的治疗效果。治疗后9周、1年检测血清胃泌素、胃镜检查复发病例,观察GS与DU复发的关系。结果 2组治疗的有效率分别为94%与88%,疗效比较差异无统计学意义（P〉0.05）。治疗后9周、1年2组GS检测结果与DU复发病例差异均有统计学意义（均P〈0.01）,2组复发病例的胃泌素检测,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 Rab阶梯停药的方法治疗DU能恢复血清GS正常水平,减少DU复发率。研究表明血清GS水平与DU复发有明显的关系。     

儿童感染的乙型肝炎病毒S基因的分子特征

目的初步调查儿童感染的乙型肝炎病毒表面抗原的基因特征。方法收集10名HBV感染的儿童血清标本,抽提血清中的HBV DNA,采用PCR扩增HBV S基因并测序,利用Genotyping软件对PCR产物序列进行分型,并分析HBV S基因的突变情况。结果 10份血清标本中,扩增出HBV S基因并成功测序6份,其余4份扩增阴性不满足测序要求。6份PCR产物所测序列标本经Genotyping比对后,均属于B型,与NCBI收录的参考序列AF100309同源性最高;5例是adw,1例是ayw。HBV S基因中编码＂a＂抗原决定簇的核苷酸序列突变点分别为G529A、T531C、C534A、T562A、T581A、A589C。编码＂a＂抗原决定簇的氨基酸序列突变点分别为I126T、P127T、S143T、G145A。核苷酸突变点G529A、T562A不引起编码＂a＂抗原决定簇的氨基酸序列突变,为无义突变。而其他4点突变均可引起编码＂a＂抗原决定簇相应氨基酸序列发生改变。结论所调查儿童主要感染B基因型HBV;其感染的HBV S抗原＂a＂决定簇的氨基酸序列出现I126T、P127T、S143T、G145A的突变,可能是逃避乙肝疫苗诱导的免疫保护的一种机制。     

血清降钙素原在重症肺炎中的临床价值探讨

目的探讨血清降钙素原（PCT）在重症肺炎中的临床价值。方法以56例进入本研究的重症肺炎患者作为病例组,另随机抽取同期住院的56例轻症肺炎患者作为对照组。2组均于诊断24 h内测定血清PCT、血常规、CRP、体温,同时将病例组按PCT水平分为〈0.5、≥0.5～2.0、≥2.0～10.0、≥10.0μg.L-14个等级,分析各组的病死率、需要使用呼吸机例数以及抗生素使用时间和住院时间。结果病例组血清PCT、CRP高于对照组（均P〈0.05）,而2组WBC计数、中性粒细胞（N）百分比及体温差异均无统计学意义（均P〉0.05）;随着PCT水平的升高,重症肺炎患者需要呼吸机辅助呼吸的比例逐渐增高,病死率亦呈增高趋势,抗生素使用时间以及需住院时间也延长（均P〈0.05）。结论血清PCT对重症肺炎的诊断及判断病情、评估预后有指导意义。     

维生素C透析液对维持性血液透析患者C反应蛋白、IL-6变化及促红细胞生成素疗效的影响

目的 观察维生素C（VitC）透析液对维持性血液透析（MHD）患者微炎症状态及促红细胞生成素（EPO）疗效的影响.方法 将行MHD的45例慢性肾功能衰竭患者按随机数字表法分为常规血液透析组（A组）、VitC透析液2 g·L-1组（B组）及VitC透析液4 g·L-1组（C组）,每组15例.MHD治疗前及治疗12周后检测各组超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、IL-6水平及Hb值.结果 MHD治疗前3组hs-CRP、IL-6水平差异均无统计学意义（P＞0.05）.经过12周MHD治疗后,B、C组hs-CRP、IL-6水平较治疗前均有下降,与A组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.C组比B组治疗后hs-CRP、IL-6水平下降更明显（P＜0.05）,A组治疗前后hs-CRP、IL-水平差异无统计学意义（P＞0.05）.Hb的升高与hs-CRP、IL-6水平均下降相关（r=0.26,P＜0.05）.结论 MHD患者存在着微炎症状态,VitC透析液可有效改善MHD患者的微炎症状态并能提高EPO纠正贫血的效果.     

超声造影评价肝硬化血流灌注特征的初步研究

目的 探讨超声造影评价肝硬化血流灌注特征的临床应用价值.方法选择慢性乙肝患者60例,其中无肝硬化（无肝硬化组）30例,肝硬化（肝硬化组）30 例;正常对照组20例.无肝硬化组、肝硬化组和正常对照组应用六氟化硫微泡混悬液在低机械指数条件下进行超声造影检查,观察肝动脉、门静脉、肝静脉和肝实质的显影动态过程,记录门静脉开始显影时间（PVAT）、肝静脉开始显影时间（HVAT）、门静脉达峰值时间（PVPT）和肝静脉达峰值时间（HVPT）和门静脉-肝静脉渡越时间（PV-HVTT）.分析无肝硬化组、肝硬化组和正常对照组上述各参数差异有无统计学意义.结果 3组PVAT、PVPT和HVPT比较差异无统计学意义（P＞0.05）,肝硬化组HVAT、PV-HVTT均较正常对照组、无肝硬化组显著缩短（均P＜0.05）.结论 超声造影定量参数HVAT和PV-HVTT可反映肝硬化微循环及血流动力学改变,为临床早期诊断肝硬化提供依据.同时,可以更好地指导临床治疗.     

新生儿感染性黄疸患者C反应蛋白水平的变化及临床意义

目的探讨血清C反应蛋白（CRP）在新生儿感染性黄疸疾病中的变化及临床意义。方法测定观察组（28例感染性黄疸新生儿）及对照组（50例生理性黄疸新生儿）治疗前后的总胆红素（TBIL）、间接胆红素（IBIL）、WBC、CRP指标,并对2组所测结果进行分析。结果观察组治疗前TBIL、IBIL、WBC、CRP指标均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;观察组治疗前后比较,差异亦有统计学意义（P〈0．01）;排除胆红素的影响,血清CRP与WBC呈正相关（偏相关系数为0．8207,P〈0．01）。结论CRP可作为早期诊断新生儿感染性黄疸的指标之一,动态观察其水平变化有助于判定病情的演变及治疗效果。     

乙型肝炎 e 抗原在 HBV 感染过程中的研究进展

乙型肝炎 e 抗原（HBeAg）是由 HBV-C 基因区编码的一种非颗粒性的分泌型核壳蛋白,目前已证实 HBeAg具有耐受原与免疫原双重作用,不参与乙型肝炎病毒（HBV）的复制、感染细胞及装配,但在慢性乙型肝炎宿主的免疫反应中发挥重要作用,其具体功能至今尚未完全明确。文章综述了 HBeAg 的生物学特征、免疫调节功能及其可能的作用机制和一般临床意义。     

B7-H4在原发性卵巢上皮性癌中的表达及临床病理意义

目的探讨B7-H4在原发性卵巢上皮性癌（EOC）中的表达情况及其临床病理意义。方法用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术及免疫组织化学PV-9000二步法研究86例原发性EOC（EOC组）、40例良性卵巢肿瘤（良性组）和10例正常卵巢组织（对照组）B7-H4 mRNA及B7-H4蛋白表达情况,并结合临床病理参数进行分析。结果 B7-H4 mRNA在3组卵巢组织中均有表达,且3组卵巢组织的 mRNA光密度值比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;B7-H4蛋白在EOC组中呈细胞质和（或）细胞膜表达,阳性率为77.9%（67/86）,显著高于良性组5.0%（2/40）及对照组0%（0/10）的表达（P〈0.05）。EOC组的卵巢癌组织中B7-H4蛋白表达与组织病理学类型、临床分期、病理分级、患者年龄、腹水细胞学和淋巴结转移差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 B7-H4在原发性EOC的高表达提示其可能与肿瘤的发生有关,可为卵巢恶性肿瘤的诊断及治疗提供新的依据。