冬虫夏草多糖合成两阶段培养的设计与优化

研究了不同培养方法对北冬虫夏草生长和多糖合成的影响,结果表明,两阶段发酵方法(摇动培养加静止培养)对于虫草多糖的合成效果最好,添加CTAB有利于多糖的生产,通过响应面优化的方法获得两阶段发酵培养的最佳工艺,并建立了适合虫草两阶段发酵合成多糖的模型。中心组合实验结果表明,在虫草摇动培养115h,然后静止培养120h的条件下,虫草多糖的最大产量达到3.02g/L,其产量分别是摇动培养和静止培养的1.5倍和2倍,实验结果表明此两阶段发酵培养方法对于冬虫夏草合成多糖具有潜在的工业应用价值。      

响应面法优化复方北冬虫夏草颗粒多糖提取工艺的研究

采用Box-Behnken设计星点响应面法对复方北冬虫夏草颗粒中多糖提取工艺进行优化研究。通过单因素试验考察料液比、提取时间和浸泡时间、提取次数4个因素对多糖得率的影响;通过Box-Behnken设计星点响应面试验,对北冬虫夏草、灵芝、甘草、大枣、小麦和桔梗中多糖提取工艺进行优化试验。优化后的提取工艺为:料液比1∶16.75(g/mL)、提取时间2 h、浸泡时间2.4 h、提取次数3次。通过Box-Behnken星点响应面试验方法进行的提取工艺优化,试验结果合理有效,优化效果良好。     

冬虫夏草液体发酵产多糖条件优化及饮料研制

研究了培养时间、初始pH值、乙醇浓度、二次补糖等因素对冬虫夏草菌丝生长和产糖的影响,得出了最佳培养时间为6d,初始pH为5.5,乙醇浓度为1.0%,二次补糖为复合碳源葡萄糖+甘露糖+半乳糖(3:4:2)1.2g/100ml,发酵液胞外多糖产量和菌丝干重最高分别可达5949.6mg/L和17.35g/L。功能性虫草饮料以添加枸杞+党参(2:1)15g/100ml发酵的配伍最佳。最优饮料配方:发酵液:水=70:30、蔗糖7%、柠檬酸0.1%、稳定剂0.15%。     

冬虫夏草多糖的研究进展

多糖是由多个单糖或其衍生物聚合而成的大分子活性化合物，是一切有生命的有机体必不可少的成分，同维持生物机能密切相关。多糖是非特异性的免疫调节剂，具有抗肿瘤、消炎、抗凝血、抗病毒、抗辐射、降血糖、降血脂等生物学活性，多糖正逐渐成为当今新药开发的重要方向之一。冬虫夏草为麦角菌科虫草属的药用真菌，     

响应面法优化短梗霉多糖培养条件

采用响应面方法对出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)生产短梗霉多糖的培养条件进行了优化。首先利用Plackett-Burman设计法研究了培养条件对响应值的影响程度,发现(NH_4)_2SO_4和K_2HPO_4的质量浓度对多糖产量的影响显著。然后利用最陡爬坡法逼近最大响应区域.最后在上升最高点处由中心组合试验和响应面分析确定其最优培养条件。并通过实验测得优化培养条件后的多糖产量为24.652 g/L,与预测值24.597 g/L非常接近,且比优化前多糖产量提高了28.4%。     

响应面法优化干酪乳杆菌LC2W合成胞外多糖的培养条件

采用响应面法(RSM)对影响干酪乳杆菌LC2W合成胞外多糖的培养条件进行了优化。以胞外多糖产量为指标,通过单因素试验初步得到干酪乳杆菌LC2W合成胞外多糖的培养条件,再根据Box—Benhnken中心组合实验设计原理,在单因素试验基础上采用3因素3水平的响应面分析法,建立了胞外多糖产量与各影响因子的回归方程,并得到以胞外多糖产量为响应值的响应面图和等高线图,进而得出干酪乳杆菌LC2W合成胞外多糖的优化培养条件:接种量4%,发酵温度31.5℃,发酵时间32h。验证试验结果表明,在此条件下胞外多糖的产量可达157.46mg/L,比优化前产量提高了30.81%。     

中草药提取液对冬虫夏草深层培养的影响

试验了11种中草药提取液对冬虫夏草液体培养生物量和多糖产量的影响。结果得出：这11种中草药水提液除川牛膝、黄精、山药对冬虫夏草的生物量有抑制作用外，其它几种中草药均有促进作用，增幅范围在0．007-0．94倍。该11种中草药均对冬虫夏草胞外多糖的产量有促进作用，其胞外多糖增幅在0．09～0．88倍；中药醇提液除川牛膝、石斛、黄芪对冬虫夏草的生物量有抑制作用外，其它几种中药促进作用的增幅在0．16～0．67倍。除山药和黄芪外均能提高冬虫夏草胞外多糖的产量，它的增幅在0．03～0．73倍。通过比较，最后实验了当归、党参、枸杞子、川牛膝的最适添加量，前三者在150g／L，后者在50g／L。在此条件下，生物量最大分别可达26．13、22．14、23．55、15．83g／L，胞外多糖的最大产量分别达到7160．2、7580．3、6830．5、6583．6g／L。以上11种中药对冬虫夏草胞内多糖也有一定的促进作用，但增幅不大。     

黄伞胞外多糖发酵培养条件的响应面法优化

采用Plackett-Burman试验设计筛选显著影响多糖产量的培养条件,然后用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,最后通过Box-Behnken设计及响应面分析确定主要影响因素的最佳值。结果表明,多糖发酵培养条件为：初始pH值6.5、摇床转速209 r/min、装液量48 mL/250 mL、温度31 ℃、接种量10%、种龄90 h、培养时间180 h。在此最佳条件下,黄伞发酵胞外多糖产量可达7.44 g/L,比优化前提高了近2倍。利用响应面分析法优化黄伞胞外多糖发酵培养条件是可靠的,具有实际的应用价值。     

冬虫夏草多糖的研究进展

多糖是冬虫夏草所含活性物质中最重要最丰富的类群之一,本文综述了冬虫夏草多糖的提取、结构和药理学活性的研究进展,并提出了目前冬虫夏草多糖研究中存在的问题,为冬虫夏草多糖的进一步研究开发提供依据。     

仙草多糖提取工艺的优化

目的对仙草多糖碱液提取工艺条件进行优化。方法研究碱提法提取仙草多糖的条件,考察碱浓度、提取温度、提取时间及液料比等因素对仙草多糖得率的影响。在单因素实验的基础上,选取碱浓度、提取时间及液料比3因素应用响应面中Box-Benhnken设计原理进行试验设计,以仙草多糖提取率为响应值,建立多糖提取率的二次回归方程,得到碱液提取多糖的最佳条件。结果仙草多糖提取的最佳浸提条件:Na HCO_3 1.25%,提取时间3h,液料比35:1(V:m),在此条件下仙草多糖提取率为8.10%。结论碱液提取法能够提高仙草多糖的提取率。     

高产虫草酸蛹虫草菌株的分离鉴定及培养条件优化

该研究以蛹虫草子实体为研究对象,采用组织分离法从中分离纯化高产虫草酸的蛹虫草菌株,通过分子生物学技术对其进行鉴定,并以虫草酸含量为响应值,利用单因素试验和响应面法对其培养条件进行优化。结果表明,分离得到一株高产虫草酸的菌株YCC-1,并被鉴定为蛹草拟青霉（Paecilomyces militaris）,菌株YCC-1产虫草酸的最佳培养条件为接种量7.8%、初始pH值6.0、培养温度25 ℃、转速140 r/min。在此最优条件下,虫草酸含量为132.65 mg/g,较优化前提高22.86%,为蛹虫草菌株液体发酵培养生产虫草酸提供试验依据。     

响应面法优化蛹虫草酸奶发酵工艺

目的以蔗糖添加量、蛹虫草浓缩液添加量和稳定剂添加量为影响因子优化蛹虫草酸奶制备工艺。方法以酸奶的组织状态、乳清析出状况、口感及风味等为评价指标,采用单因素试验研究蔗糖添加量、蛹虫草浓缩液添加量及稳定剂添加量等对酸奶感官品质的影响,通过响应曲面法优化确定酸奶的最佳工艺参数。结果蛹虫草酸奶最佳制备工艺为蔗糖添加量8.11%、蛹虫草浓缩液添加量2.04%、稳定剂添加量0.69%,感官评分为94.79。结论蛹虫草酸奶具有较好的感官特性,丰富了现有的酸奶口味。     

蛹虫草静置发酵产虫草素的优化

对蛹虫草14014产虫草素的静置发酵培养基和发酵条件进行了优化,旨在探寻大规模制备虫草素的工艺方法。为了提高数理统计的精度,缩短发酵周期,通过单因素实验,获得了种龄为3d,接种量为10%的液体培养物最佳接种方式。通过Placket-Burman设计从7个因素中筛选出了有显著影响的温度、酵母膏和蛋白胨三个因素。通过最陡爬坡实验、中心复合实验设计及响应面分析确定主要影响因素的最佳值及回归模型,并经实验验证模型的可行性。最佳培养基组成和培养条件为:葡萄糖60g/L,KH2PO40.7g/L,MgSO4·7H2O 0.7g/L,酵母膏9.00g/L,蛋白胨17.10g/L,初始pH6.30,温度27.1℃。在优化条件下,虫草素产量达到6.50g/L,含量比优化前提高2倍。      

响应面法优化蛹虫草固态发酵产物虫草素与腺苷综合提取工艺

以大米、啤酒糟共培养的蛹虫草固态发酵产物为原料,采用浸提法综合提取虫草素与腺苷,并利用响应面法优化提取条件。通过单因素试验考察提取时间、乙醇溶液体积分数、液料比和提取温度对综合提取虫草素与腺苷得率的影响。在单因素试验基础上,利用Box-Behnken试验设计,对浸提工艺中各影响因素进行优化。结果表明,浸提法综合提取虫草素与腺苷的最适工艺条件为纯水提取、提取温度45?℃、液料比22∶1（mL/g）、提取时间87?min,在该条件下虫草素与腺苷的综合得率为2.491‰,与模型理论预测值相近,说明该模型回归性良好,试验的拟合程度高。蛹虫草固态发酵产物中富含虫草素、腺苷,具有一定开发价值。     

蛹虫草大米培养基中多糖提取及初步纯化工艺

以蛹虫草培养基为材料,确定硝酸钙提取法去除其中淀粉的最佳条件,进而采用正交试验法提取多糖,Sevag法除蛋白,为培养基中多糖的提取及初步纯化提供依据。将80%Ca（NO3）2按料液比1∶20（g∶mL）在100℃条件下水浴提取3次,淀粉的去除率达42.57%。多糖提取的最优条件为料液比1∶30（g∶mL）,在100℃浸提3 h,提取2次,提取率为3.31%。多糖溶液与Sevag试剂按1∶3比例提取1次,脱蛋白率可达94.2%,而多糖损失率仅为20.95%,效果较好。     

蛹虫草多糖的提取工艺优化及其抗氧化活性研究

以蛹虫草多糖(Cordyceps militaris polysaccharides,CMP)的提取得率为指标,通过单因素和响应面法对CMP的提取工艺进行优化。采用乙醇分级法,将CMP进行乙醇分级,分别得到4种多糖组分(CMP20、CMP40、CMP60和CMP80),并对不同多糖的得率、组分含量及抗氧化活性进行比较。结果表明,CMP的最优提取条件为温度84℃、液料比33∶1(m L/g)和时间128 min。在此条件下,实际提取得率为7.83%;CMP20、CMP40、CMP60和CMP80的得率分别为7.06%、15.07%、17.83%、25.23%。其中,CMP80的得率最高,蛋白含量最低,仅为1.47%;5种多糖均具有一定的抗氧化活性,CMP60的还原力和DPPH自由基清除率均为最高,CMP80的羟自由基的清除率最高。     

蛹虫草发酵产虫草素的培养条件研究

研究外源添加物,麸皮、玉米芯、腺苷等对蛹虫草液体发酵合成虫草素的影响,结果表明,发酵5d后加入3g/L腺苷,虫草素的产量最高。当腺苷添加量大于4g/L时,虫草素对腺苷的得率维持在25%,虫草素产量最大能达到1.62g/L。通过分析菌丝体生长与虫草素合成的动力学关系,发现虫草素的合成属于部分生长偶联型发酵。当振荡发酵4d后,静置发酵7d,虫草素的产量达到1.60g/L,产率达到145.5mg/L/d。这一蛹虫草合成虫草素的发酵工艺具有潜在的工业应用价值。     

冬虫夏草与蛹虫草融合子菌丝体液体培养基筛选

以冬虫夏草与蛹虫草融合子菌丝体生物量为主要指标,采用正交设计方法对其菌丝体液体培养基进行筛选,比较3种培养方法对菌丝体的影响.结果表明其最适培养基配方为葡萄糖5.00g/L,蔗糖5.00g/L,酵母粉0.25g/L、黄豆粉5.00g/L(浸提液),KH2PO41.50g/L,MgSO4·7H2O 0.50g/L,VB1 4g/L,pH自然.25℃培养,周期156h,其菌丝体干重生物量可达3.51g/L.持续摇动培养法获得菌丝体生物量最多,利于菌体的规模发酵生产;动静相间法次之;静止法获得量较少.动静相间法所培养的菌丝体更有利于原生质体的制备和诱变育种.     

蛹虫草胞外锌多糖抗氧化能力的研究

以蛹虫草为材料通过液体深层富锌培养获得胞外富锌多糖,测定了蛹虫草胞外富锌多糖的锌含量和抗氧化性能,即清除氧自由基、羟自由基和DPPH的能力。实验结果表明:蛹虫草富锌培养基内ZnSO4浓度在150μg/mL下,可以显著提高胞外锌多糖的有机锌含量(P<0.01),使有机锌含量达到0.87mg/g,比对照提高295%。有机锌对提高胞外锌多糖清除自由基的能力有显著的促进作用(P<0.01),清除氧自由基、羟自由基和DPPH的能力分别是对照的7.05%、23.5%和17.49%;胞外锌多糖对自由基的清除能力与多糖浓度呈明显的剂量-效应关系(P<0.01)。