人心肌脂肪酸结合蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

目的制备人心肌脂肪酸结合蛋白(H-FAB)单克隆抗体。方法利用重组H-FABP蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0细胞)在PEG的作用下进行融合,通过杂交瘤细胞的筛选,细胞的亚克隆以及扩大培养建立分泌抗H-FABP特异性抗体的单克隆细胞株。将细胞接种入小鼠体内制备腹水抗体,纯化后得到抗H-FABP单克隆抗体并对其性质进行鉴定分析。得到3株稳定分泌H-FAB抗体的单克隆细胞株,命名为2C06、2F08、6G03,非竞争性ELISA测定亲和力常数得知三株抗体的亲和力常数都达到108以上,三株抗体的亲和力较好。交叉实验表明三株单克隆抗体与牛血清、猪血清、鼠血清均无交叉反应,western blot实验证明对H-FABP有较好的特异性。成功得到3株特异性识别H-FAB单克隆细胞株,可用于H-FAB的检测研究。     

白斑综合征病毒胶体金免疫层析试剂板的研制

目的研制检测对虾中白斑综合征病毒(white spot syndrome virum,WSSV)的胶体金免疫层析试剂板。方法分别制备抗WSSV单克隆抗体和多克隆抗体,并用胶体金标记单克隆抗体,将胶体金标记的抗WSSV单克隆抗体包被在金标垫上,抗WSSV多克隆抗体和羊抗鼠Ig G分别包被在硝酸纤维素膜的检测线和质控线上,组装成试剂板,通过双抗体夹心法检测样品中WSSV含量。确定试剂板检测WSSV的最低检出限,验证其特异性,并检测其与ELISA结果的符合率及稳定性。结果该试剂板对WSSV的最低检出限为1.0 mg/kg,特异性强,与ELISA实验结果相符,在室温条件下(20~25℃)可保存12个月。整个检测所需时间为8~10 min。结论该试剂板能快速有效地筛查WSSV,适合现场快速检测。     

氰戊菊酯残留胶体金免疫层析试纸条研制

应用胶体金免疫层析技术研制出一种准确、快速、简便检测氰戊菊酯农药残留的试纸条.采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,标记氰戊菊酯单克隆抗体,以硝酸纤维素膜为载体,包被氰戊菊酯抗原作为检测线(T线),包被兔抗鼠IgG抗体作为质控线(C线),经过竞争反应后目测结果.实验结果表明,该快速检测试纸条100%抑制浓度为800 ng/m...     

破伤风抗体胶体金检测试剂盒的研制

目的 研制破伤风抗体胶体金检测试剂盒。方法 应用胶体金免疫斑点法研制破伤风抗体胶体金检测试剂盒,并对破伤风类毒素免疫的豚鼠及人血清的破伤风抗体水平进行测定。结果 该试剂盒所测定的结果与小鼠体内法的相关性好(r>0.95,P=0.25),远优于目前使用的间接血凝法(r<0.10);且该试剂盒的灵敏度较小鼠法高1倍,特异性强,无交叉反应,精密准确。结论 可用于临床检测患者创伤后的血清破伤风抗体水平。     

HPLC测定脂肪酸的紫外检测衍生试剂

HPLC测定脂肪酸的紫外检测衍生方法是一高灵敏技术。本文介绍了脂肪酸的紫外检测衍生试剂及应用。     

胶体金法试剂与EIA试剂检测梅毒螺旋体抗体的临床比较分析

目的探讨胶体金法梅毒螺旋体(TP)抗体试剂的灵敏度与特异性。方法用胶体金法与EIA法对188份梅毒患者血清样本进行检测。结果TP抗体S/CO值在>10.0时,胶体金法与EIA法的阳性符合率只有85.3%。结论胶体金法检测TP抗体S/CO值高值样本时存在着一定的漏检率。     

胶体金试纸条法快速检测纺织品中总铅和总镉含量

建立了一种基于铅、镉单克隆抗体的胶体金试纸条方法,用于快速检测纺织品中总铅、总镉含量,通过加标实验及对实际试样进行测试,探讨了试纸条的灵敏度、准确性和稳定性.结果表明:制备胶体金试纸条时,铅、镉单克隆抗体较佳用量分别为50,45μL;试纸条对纺织品中总铅及总镉含量的检出限分别达5.0 mg/kg和0.625 mg/kg...     

ELISA法与胶体金试纸条检测HBsAg差异分析

目的探究胶体金试纸条与ELISA法检测HBsAg临床应用价值。方法分别用胶体金试纸条与ELISA法检测360份标本中的HBsAg,并对阳性率进行比较,然后将强阳性的10份标本作倍比稀释,观察2种检测方法灵敏度的差异。结果2种方法的阳性率之间无显著差异,ELISA法灵敏度较胶体金试纸条灵敏度高。结论2种方法皆是检测HBsAg的良好方法,胶体金试纸条法操作简便、快速适用于急诊及健康人群的筛查,ELISA法适用于常规检测。     

胶体金免疫层析试纸条在食品安全检测中的研究进展

为了提高免疫检测的速度,简化操作步骤,建立了胶体金免疫层析技术.它是利用纤维膜的毛细作用,使待测物和金标物(抗原/抗体)沿膜表面向前运动,与检测区的捕获物特异结合而聚集显色.它既有免疫学方法的特异性,又有简便快速,无需仪器的优点.本文主要介绍了胶体金免疫层析技术的在食品安全检测中的应用,并对胶体金免疫层析试纸条技术的发...     

三聚氰胺快速检测试纸条评价

胶体金试纸条因其方法简便、快速,已经广泛应用于日常检测和实验研究中.为了解国产三聚氰胺试纸条的有效性和可靠性,选择了一种市售试纸条,从灵敏度、特异性、准确度、耐变性、批间变异等多个角度对其进行了技术评价.结果发现用胶体金法测定牛奶中的三聚氰胺,检测限为0.05 mg/L,特异性、耐变性较好,批件差异较小,不同基质对检测结果无影响.此试纸条满足食品中有毒有害物质快速检测的要求,可作商品化快速检测试纸条使用.     

乙型脑炎病毒抗原定量检测试剂的研制

目的制备酶联免疫乙型脑炎病毒抗原定量检测试剂,用于乙型脑炎灭活疫苗中抗原定量检测。方法分别用2株杂交瘤细胞分泌的抗乙型脑炎病毒单克隆抗体作为包被和标记物,配以辅助试剂,建立酶联免疫检测系统,用经标化的乙型脑炎疫苗参考品绘制定量标准曲线,对试剂各项技术指标进行验证。结果试剂对乙型脑炎病毒抗原的最佳定量范围是0·131~0·666ELISA单位(EU/ml),标准曲线相关系数r=0·996,平均变异系数CV小于10%。与NIH法测定结果相比较,相关有非常显著意义(P<0·01)。对2批乙型脑炎疫苗9次测定,变异系数分别为2·7%和4·4%。结论试剂的精密性和准确度高,特异性和稳定性可靠,可用于乙型脑炎疫苗中的抗原定量检测。     

载脂蛋白A1和B检测试剂的研制

目的　研制载脂蛋白A1和B检测试剂。方法　采用硫酸葡聚糖沉淀、超速离心、层析等方法。结果　分离的载脂蛋白A1(ApoA1)和B (ApoB) ,经检定证实其为单一成分 ,用它们为抗原 ,免疫绵羊 ,获得ApoA1和ApoB抗血清 ,检定结果与德国Bochinger公司产品一致。用这两种抗血清配制的浊度检测试剂与德国Diasys公司的同类试剂盒进行对照 ,相关良好。结论　所研制的载脂蛋白A1和B检测试剂达到了国外同类产品的质量水平。     

犬细粒棘球绦虫感染胶体金检测试纸条的制备

目的制备犬细粒棘球绦虫感染胶体金检测试纸条。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,用于标记抗细粒棘球绦虫Ediag A864单克隆抗体2D12制作金标垫,兔抗细粒棘球绦虫Ediag A864多克隆抗体标记检测线(T线),羊抗鼠Ig标记质控线(C线),制备胶体金试纸条,并进行特异性、敏感性、重复性及稳定性试验。用优化的胶体金检测试纸条对96份犬粪样品(36份参照阳性样,60份临床样品)进行检测。结果制备的犬细粒棘球绦虫感染胶体金检测试纸条与犬蛔虫阳性粪及犬贾第虫阳性粪样品均无交叉反应;粪便稀释度为1∶4时仍可检出正确结果;3次检测参照阳性样本均为阳性;于不同温度(室温、4及37℃)下保存不同时间(1、2、3、4个月)的试纸条均可检出正确结果。96份犬粪便样品中,36份参照阳性样品检出率为97.2%(35/36),60份临床样品均为阴性。结论制备的试纸条具有良好的特异性及稳定性,可应用于临床样品检测及大规模流行病学调查。     

结合多糖的功能性高分子材料——胶乳试剂的研制

过去研制的功能性聚苯乙烯胶乳,大多是结合蛋白质而制得的具有不同功能的胶乳试剂,结合多糖的胶乳试剂较少。我们采用非乳化的合成方法,掺入一定数量的羧基和羟基制成不同粒径的胶乳。通过筛选和摸索制成了能牢固结合多糖抗原的胶乳试剂。利用它来测试相应的免疫血清和其它血清只出现专一的功能反应,其滴度可达1:3200,检测抗原的最小浓度为75ng/m1,因而具有一定的应用价值,参照研制的方法制定更多的生物医学领域中能结合多糖类功能性的高分子材料是完全可能的。     

百日咳杆菌核酸检测试剂国家参考品的研制

目的 研制百日咳杆菌核酸检测试剂国家参考品,确定其质量标准.方法 通过对21份病原体培养物的复核、确证,关键抗原位点等位基因分析、红霉素耐药位点测序分析,组成百日咳杆菌核酸检测试剂国家参考品,经多家实验室协助标定,确定参考品的质量标准,并对参考品进行均匀性及稳定性评估.结果 百日咳杆菌核酸检测试剂国家参考品由12份阴性...     

胶体金免疫层析法快速检测水样品中的镉离子

目的研制检测水样品中镉离子残留的胶体金免疫层析快速检测试纸条。方法采用免疫竞争法,将抗Cd2+-EDTA单克隆抗体-胶体金复合物包被于胶体金结合垫上,并将人工合成的Cd-iEDTA-BSA检测抗原包被在硝酸纤维素薄膜表面,作为检测线(T线),3～5min后,根据颜色直观显示检测结果。对试纸条进行灵敏度、特异性和稳定性验证,并检测添标水样。结果制备的试纸条对镉离子的最低检测限为100ng/ml;除了与Hg2+-EDTA有交叉反应外,与Fe3+、Pb2+、Cu2+等类似物无交叉反应;试纸条在常温下放置8周稳定性良好;检测添标水样的结果与ICP-AES的检测结果一致。结论胶体金免疫层析法操作便捷,稳定可靠,可作为水样中重金属镉离子残留现场检测和监控的有效手段。     

人类免疫缺陷病毒抗体快速检测试剂的临床评价

目的评价人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体快速检测试剂检测全血、血清或血浆样品中HIV抗体的敏感性及特异性。方法从不同地区及不同人群中收集全血样品493份,并分离血清,用考核试剂分别检测同一人的全血及血清样品;同时从不同地区及不同人群中收集HIV抗体阳性和阴性血清/血浆样品共1175份,用考核试剂和参比试剂同时检测。结果考核试剂检测493份全血和血清样品的结果一致,HIV抗体阳性为99份;与参比试剂相比,考核试剂检测血清/血浆样品的敏感性为100%,特异性为99.92%。结论该考核试剂与参比试剂的质量相当。     

氯霉素抗原的制备及其在免疫胶体金快速检测中的应用

本研究从优化氯霉素免疫抗原、包被抗原的结构及优化偶联技术角度出发,提高氯霉素抗体的特异性、亲和力,并通过优化样品前处理步骤,最终得到氯霉素胶体金免疫层析试纸条的检测低限为0.1μg/L,特异性好,稳定性高。     

呋喃妥因抗原的制备及其在免疫胶体金快速检测中的应用

本研究从优化呋喃妥因代谢物免疫抗原、包被抗原的结构及优化偶联技术角度出发,提高呋喃妥因代谢物抗体的特异性、亲和力,并通过优化样品前处理步骤,最终得到呋喃妥因代谢物胶体金免疫层析试纸条的检测低限为1.0μg/kg,特异性好,稳定性高。     

新醛试剂的研制

由品红与二氧化硫制备希夫试剂,手续复杂,保管不便。我们研制的新醛试剂,是醛的显色剂,与酮不显色,可作醛的定性、定量试剂。该试剂灵敏度高、性质稳定、使用方便。几年的应用证明,这种试剂适于醛的测定。它是一种略呈红色的固体试剂,容易配制。一、制备方法取品红2.0克,溶于100～150毫升蒸馏水中(Ⅰ),另称取无水亚硫酸钠15克、亚疏酸氢钠8克,一起溶于200毫升蒸馏水中(Ⅱ)。在搅拌下,将(Ⅰ)缓慢地加入(Ⅱ)中,加完后放置30分钟。如反应混合液的颜色过深可