酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度的研究(Ⅱ)——能水解甘草苷糖醛酸基酶的提纯与酶性质研究

以酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度为目的,对新分离筛选的甘Ｍ－２和甘Ｍ－６霉菌产的β－葡萄糖醛酸苷酶进行了分离提纯和酶学方面的研究。结果表明,两株菌产的β－葡萄糖醛酸苷酶被６０％饱和硫酸铵沉淀较好,经ＤＥＡＥ－ＣｅｌｕｏｓｅＤＥ５２离子交换层析柱梯度洗脱,得到纯酶,提纯倍数分别为１０．６７和６．１５倍,收率分别为３３．０％和２４．２％,其中甘Ｍ－２菌产β－葡萄糖醛酸苷酶只能将甘草苷水解成甘草次酸（ＧＡ）;甘Ｍ－６菌产β－葡萄糖醛酸苷酶水解甘草苷主要变成甜度很高的单葡萄糖醛酸基甘草苷（ＧＡＭＧ）;两种酶在ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳都得到电泳单点,其酶蛋白相对分子质量分别为６００００和４２０００;酶反应最适ｐＨ分别为５．０和６．０,最适温度均为４０℃,均在ｐＨ４．０～８．０和２０～７０℃范围内相对稳定。     

国外专利文摘

供稳定发酵饮料抗混浊生成用的絮凝硅Ｍｃｋｅｏｗｎ,Ｉ．Ｐ．ａｎｄＧｌｅａｖｅｓ,Ｍ．Ｔ．国际专利申请书：ＷＯ９８２８４０１．１９９８．在贮存时利用无尘絮凝合成无定型硅稳定发酵饮料抗混浊生成。＞４５μｍ絮凝尺寸的絮凝硅 ,只有将其破碎输送≤２０μｍ的颗粒时 ,才能在啤酒稳定中有效。连兴华译自ＣＡ．１９９８ ,１２９（８）利用多糖添加剂稳定制啤酒用麦芽汁中的蛋白质Ｍａｌｃｏｒｐｓ,Ｐ．,ｅｔａｌ国际专利申请书：Ｗ０９８１８９０２．１９９８．所用多糖添加剂可稳定麦芽汁中蛋白质馏分 ,并生产出可接受的浊度的啤酒…     

酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度的研究（II）：能水解甘草苷糖 …

以酶法改变甘草苷糖醛酸基提高其甜度的为目的,对新分离筛选的Ｍ－２和甘Ｍ６－６霉菌产的β－葡萄糖醛酸苷酶进行了分离提纯和酶学方面的研究,结果表明,两株菌产生的β－葡萄糖醛酸苷酶被６０％饱和硫酸铵沉淀较好,经ＤＥＡＥ－ＣｅｌｌｕｏｓｅＤＥ５２离子交换层析柱梯度洗脱,得到纯酶,提纯倍数分别为１０．６７和６．１５倍,收率分别为３３．０％和２４．２％,其中甘Ｍ－２菌产β葡萄糖醛酸苷酶只能将甘草苷水解成甘草次     

二溴对甲基偶氮甲磺光度法测定食品中微量铅

研究了新显色剂二溴对甲基偶氮甲磺（ＤＢＭ－ＭＳＡ）与铅的显色反应。在０．２４ｍｏｌ／Ｌ的磷酸介质中，铅与ＤＢＭ－ＭＳＡ形成稳定的蓝色配合物，其组成比为铅ＤＢＭ－ＭＡＳ＝１２，λｍａｘ＝６４２ｎｍ，ε＝９．５×１０４Ｌ／（ｍｏｌｃｍ）．铅在０～０．６μｇ／ｍＬ范围内符合比耳定律，测定０．４μｇ／ｍＬ时大多数金属离子的允许量在毫克量级。用于食品中微量铅的测定，结果令人满意。     

黑曲霉固态培养生产纤维素酶的研究

黑曲霉突变株ＤＭ－１是一株产纤维素酶菌株，其中β葡萄糖苷酶活性特别高。采用粗纤维原料固体培养，发酵９６小时（培养温度３１℃），其滤纸酶活和β葡萄糖苷酶活分别为９５和１２００ｍｇ葡萄糖／ｇＤＭｈ。本试验系统研究了各种营养成份和培养条件对ＤＭ－１菌株产纤维素酶的影响。最适发酵培养基为：稻草杆（或麦杆）∶麦麸为６０∶４０、硫酸铵３．０、硫酸镁０．３、玉米浆３．０，加水２００％，自然ｐＨ；环境湿度８５％－９０％。酶反应最适温度和ｐＨ分别为５５℃－６０℃和ｐＨ５．０。酶ｐＨ稳定性较好，在ｐＨ３．０－８．０范围内处理１小时，残余酶活力在８５％以上，该酶经５５℃处理３０ｍｉｎ，剩余酶活力为８６．０％。     

黑曲霉液体发酵纤维素酶的研究

在黑曲霉ＤＭ—１液体深层发酵所产纤维素酶系中，β－葡萄糖苷酶活性特别高。系统研究了ＤＭ—１菌株的摇瓶产酶条件及２５Ｌ发酵罐发酵工艺。２５Ｌ发酵罐试验结果表明，在通风量０．４～１．０ｖｖｍ、搅拌转速２５０～５００ｒ／ｍ、发酵温度３１℃及控制发酵液ｐＨ在４．０左右的条件下，发酵１０４小时，其β－葡萄糖苷酶活和ＣＭＣ分别为３３０和２４１ｍｇ葡萄糖／ｍｌ。发酵滤液经硫铵盐析沉淀、过滤或离心及干燥等过程得固体纤维素干酶粉。其中β－葡萄糖苷酶活为１３５００ｍｇ葡萄糖／ｇ，平均收率８０．２％。     

Asp,NigerNo.3单宁酶纯化及性质的研究

Ａｓｐ．ＮｉｇｅｒＮｏ．３单宁酶通过超滤、ＤＥＡＥ－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ离子交换层析,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０柱层析以及Ｓｅｐｈａｒｏｓ－６Ｂ柱层析四步纯化后,经过ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定显现－条蛋白质带,酶的总活力回收率达到１１％,纯化倍数为１１３．５;     

超临界CO2用于蒜酶失活和大蒜SOD的保留

采用超临界ＣＯ２处理使蒜酶失活，同时基本保留大蒜ＳＯＤ，得到大蒜脱臭的较佳条件，５０℃，２８ＭＰａ，浸提１０ｍｉｎ，收集萃取体积２．００ｍｌ，蒜酶失活率９６．３％，大蒜ＳＯＤ保留率９６．９％，同时发现适当的条件下有绿色色素溶出。     

黑曲霉纤维素酶的特性研究

在黑曲霉突变株ＤＭ－１所产生纤维素酶中，β－葡萄糖苷酶活力较高。采用固体发酵培养，其滤纸酶活和β－葡萄糖苷酶分别为９５和１２００ｍｇ葡萄糖／ｇＤＭｈ。本试验系统研究了该酶的固体发酵培养过程，最适反应温度，热稳定性，最适反应ｐＨ以及ｐＨ对酶稳定性的影响，为该酶在酿造行业中的广泛应用提供参考依据。     

啤酒生产过程

Ｌｏｔｚ，Ｍ．ｅｔｃ．德国申请专利：ＤＥ１９６５３３４７Ａ１．１９９８．该发明叙述了提高啤酒泡沫稳定性的酿造过程。在５０～７０℃高于糖化温度范围内，将约５％由富含蛋白质烘干的麦芽制成的面粉加入麦芽醪中即可。木易译自ＦＳＴＡ．１９９８，３０（１０）啤酒生产过程     

酿酒葡萄悬浮细胞游离原生质体

酿酒葡萄花丝在含６ＢＡ２ｍｇ／Ｌ、２，４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ的Ｂ５培养基上诱导出胚性愈伤组织。胚性愈伤组织在含有２，４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ、ＮＡＡ０．０１ｍｇ／Ｌ的Ｂ５液体培养基中振荡培养，得到细胞悬浮系。悬浮细胞在含ＣｅｌｕｌａｓｅＲｓ２％、ＰｅｃｔｏｌｙａｓｅＹ２３０．３％、５ｍＭＣａＣｌ２２Ｈ２Ｏ、０．６Ｍ甘露醇，ｐＨ５．６－５．８的酶液中游离得到原生质体。     

螺旋藻多糖提取新工艺的研究

提取螺旋藻多糖的传统工艺存在着流程长,操作复杂,有机溶剂消耗大等问题。采用三氯乙酸（ＴＣＡ）法代替Ｓｅｖａｇ法去除蛋白质,使改进后的提取工艺中蛋白质去除率增加,多糖损失率降低,流程缩短。通过用ＤＥＡＥ－Ｓｐｅｈａｒｏｓｅ和Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ５０柱的分离纯化得到２个多糖组分。经测定,其相对分子质量分别为Ｍｒ１＝１２６００,Ｍｒ２＝１６６００。组分１的单糖组成：Ｄ－葡萄糖、Ｄ－甘露糖、Ｄ－半乳糖和葡萄糖醛酸;组分２的单糖组成：Ｄ－葡萄糖、Ｄ－木糖、Ｌ－鼠李糖和葡萄糖醛酸。     

里氏木霉固体发酵生产纤维素酶的研究

以里氏木霉突变株ＲＭ－２７为纤维素酶生产菌，采用固体发酵法，２９℃发酵１４４小时，其滤纸酶活和β－葡萄糖苷酶活分别为６００ｍｇ和１１５ｍｇ葡萄糖／ｇＤＭｈ。并系统研究了各种营养成份和培养条件对ＲＭ－２７菌株产纤维素酶的影响。最适发酵培养基为稻草杆或小麦杆７０ｇ、麸皮３０ｇ、硫酸铵３．０ｇ、玉米浆２．０ｇ，水２００ｍｌ，自然ｐＨ。酶反应最适温度６０￣６５℃，最适ｐＨ为５．０。酶ｐＨ稳定性较好，在ｐＨ     

提高数字式多用表（DMM）性能的几种设计方法

提高数字式多用表（ＤＭＭ）性能的几种设计方法安徽财贸学院计算中心汪露明安徽电子学校王预在现代工业生产过程控制电路和一些测量仪器中，都广泛使用数字式多用表（以下简称ＤＭＭ）作显示。现在的ＤＭＭ比过去的ＤＭＭ具有更高的测量速度、精度和灵敏度。然而．要真正...     

一种来源于酵母Y．Lipolytica的新型蛋白质激酶──酪蛋白激酶Ⅱ的制取、纯化、分子结构及特性

培育了酵母菌种Ｙ．Ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ（ｗｉｌｄＷ－２９），并从中制取、纯化了一种蛋白质激酶──酪蛋白激酶Ⅱ（ＣＫ－Ⅱ）．这种酶是一个四聚体α２β２，其分子量为１５８ｋＤ．     

谈谈从酵母中制备SOD酶

1　ＳＯＤ酶概念ＳＯＤ酶全称为超氧化物歧化酶。自从Ｍａｎｎ和Ｋｅｉｌｉｎ1938年首次从牛红血球中分离出一种蓝色铜蛋白 (最初定名为血铜蛋白Ｈｅｍｏｃｕｐｒｅｉｎ) ,后来由ＭｃＣｏｒｄ和Ｆｒｉｄｏｖｉｃｈ根据其酶活特性定名为超氧化物歧化酶 (Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ简称ＳＯＤ)。目前国际学术界对其研究十分活跃 ,其热度可与 195 3年Ｗａｔｓｏｎ和Ｃｒｉｃｋ发表的ＤＮＡ双螺旋结构学说明相媲美。ＳＯＤ是生物体防御氧化损伤的一种主要酶。ＳＯＤ作用于底物超氧阴离子 (Ｏ- 2 ) ,将其分解成Ｏ2和Ｈ2 Ｏ2 ,Ｈ2 Ｏ…     

全浓度二组分体系液－固吸附计量置换模型的研究──Ⅱ模型比较及参数表征

用文献数据对理论部分［１］所导出的吸附计量置换模型（ＳＤＭ—Ａ）进行了检验，并对ＳＤＭ—Ａ的两种表达式（ＳＤＭ－ＡＣＣ和ＳＤＭ—ＡＲＣ）作了比较．结果表明该模型适用于这些吸附体系．从理想溶液及具有负偏差的非理想溶液中吸附时，以ＳＤＭ—ＡＣＣ为优，而从大多数具有正偏差的非理想溶液中吸附时则以ＳＤＭ—ＡＲＣ更佳．若在个别情况下这两种表达式不属线性方程时，则可用简化方法处理．用模型吸附参数ｑ／Ｚ或２ｎ／Ｚ值为依据所表征的理想与非理想吸附体系，不同于吸附剂自其中吸附的理想与非理想溶液．     

以水解大豆蛋白为主要壁材的β-胡萝卜素微胶囊化

水解大豆蛋白分别与糊精（ＳＰＨ＋ＭＤ）以及蔗糖（ＳＰＨ＋Ｓ）复配为壁材微胶囊化β－胡萝卜素，研究结果表明，ＳＨＰ＋Ｓ壁材体系的微胶囊化产品的效率明显优于ＳＰＨ＋ＭＤ壁材体系产品，产率无显著差异。相应的较优工艺参数为：壁材中蛋白质与蔗糖比例为６∶１４，体系壁材浓度２０％，黄原胶浓度０．５％，乳化时均质压力４０Ｍｐａ（乳化温度７０℃），喷雾干燥进风温度１９５℃（出风温度８０～９０℃）。     

分批与流加发酵法生产纤维素酶的研究

采用里氏木霉ＲｕｔＣ－３０,对２．５Ｌ罐分批和流加发酵产酶条件及优化进行了系统研究。通过研究不同浓度的ＳｏｌｋａＦｌｏｃ（纤维素粉）对分批发酵产酶的影响,发现菌体浓度与产酶量随底物浓度增加而增加,当采用５０ｇ／ＬＳｏｌｋａＦｌｏｃ复合１０ｇ／Ｌ麸皮为碳源时,菌体浓度和产酶量最大,最大ＤＣＷ１３．８２ｇ／Ｌ,ＣＭＣａｓｅ２３４．２Ｕ／ｍｌ,ＦＰＡ２１．２５Ｕ／ｍｌ,但ＳｏｌｋａＦｌｏｃ增加至６０ｇ／Ｌ,高浓度底物对菌体初始生长产生强烈抑制,产酶下降。通过研究不同初始Ｓｏｌ－ｋａＦｌｏｃ浓度对流加发酵产酶的影响,发现当初始底物浓度为５０ｇ／ＬＳｏｌｋａＦｌｏｃ复合１０ｇ／Ｌ麸皮时,菌体量和产酶均达到最大值,分别为ＤＣＷ１５．４１ｇ／Ｌ,ＣＭＣａｓｅ３５９．７Ｕ／ｍｌ,ＦＰＡ３０．６Ｕ／ｍｌ,高菌体量是获得纤维素酶高产的关键因素之一。此外用硫铵盐析法对纤维素酶进行了提取。     

中性蛋白酶B．S．HD401生产菌激光选育

本文报道了从花生地土壤分离到一株分泌中性蛋白酶的枯草芽孢杆菌，经纯铜蒸汽激光诱变，选育到一株高产菌株ＨＤ４０１，产酶提高幅度高达７２．７％。诱变过程说明，菌体存活率和正变率以及激光波长、孢子体生理状态有一定的相关性。Ｂ．Ｓ．ＨＤ４０１经多次传代，产酶性状稳定，通过正交试验对培养基进行优化，在２升罐中酶活达８５２０ｕ／ｍｌ。