真养产碱杆菌利用葡萄糖生产聚β—羟基丁酸的摇瓶发酵条件

以葡萄糖为碳源,对真养产碱杆菌生产ＰＨＢ的摇瓶发酵条件进行了探索,研究结果表明,在摇瓶补料条件下,细胞干重和ＰＨＢ质量浓度可分别达到３５．１ｇ／Ｌ和２８．３ｇ／Ｌ,ＰＨＢ对葡萄糖的产率系数为０．３６ｇ／ｇ。     

枯草芽孢杆菌产木聚糖酶发酵条件的研究

通过单因素和正交试验,对芽胞杆菌产木聚糖酶的发酵条件进行了研究.结果显示最佳产酶条件是:2%麸皮、0.5%(NH4)2HPO40、.1%K2HPO4、0.02%MgSO4.2H2O、0.2%吐温80、1mmol/L微量元素(Fe2 ,Zn2 )、pH9.0、35℃和振荡培养48 h.其木聚糖酶活力可达到2.67 IU/mL.     

芽孢缺失对D—核糖产是的影响

利用原生质体紫外线诱变的方法处理转酮酶缺陷型短小芽孢杆菌,选育到一株丧失芽孢形成能力的转酮酶缺陷型短小芽孢杆菌,摇瓶培养D－核糖平均产量达到66g/L,较出发菌株提高38％。研究表明,芽孢生成缺陷有利于D－核糖的产生,筛选芽孢生成能力缺陷的菌株是选育D－核糖高产菌株的有效手段。     

赖氨酸摇瓶发酵条件的优化

针对赖氨酸发酵的经要求,以黄色短杆菌ＷＳＨＬ１为产生菌进行摇瓶条件下的赖氨酸发酵条件研究,通过正交实验得到了较佳氨源配比;经在发酵过程中添加几种氨源的试验,发现酵中后期添加适量有机氮源利于发酵;考察不同初始硫酸铵和葡萄糖浓度对发酵的影响,确定了适合工业生产的浓度范围;采用分批补料培养方式,最终赖氨酸盐酸质量浓度为８５．５ｇ／Ｌ。     

L-亮氨酸摇瓶发酵培养条件的研究

应用单因素试验法研究发酵培养基pH值、发酵温度、摇瓶装液量、摇瓶转速等发酵培养条件对L-亮氨酸发酵的影响。试验结果显示,500 mL三角瓶装液量50 mL,置旋转摇床上转速220 r/m in,pH 7.0、培养温度28℃,发酵72 h,产L-亮氨酸18.54 g/L。     

D—葡萄糖酸钠对D—核糖发酵的影响

枯草芽孢杆菌转酮酶缺陷突变株不能以D－葡萄糖酸为唯一碳源生长，但其作为D－核糖的前体则是有效的。固定碳源总量，利用D－葡萄糖与D－葡萄糖酸钠混合碳源发酵，在120g/L的D－葡萄糖酸钠浓度时，菌体生长明显受到抑制，发酵在40h时结束，D－核糖产量达18．8g/L；在30g/L的D－葡萄糖酸质量浓度时，发酵72h，D－核糖产量达68．5g/L。     

抗癌药物L—天冬酰胺酶摇瓶发酵研究

对大肠杆菌Ｌ－天冬酰胺酶的摇瓶发酵进行了研究。在最适条件下发酵１２ｈ，可使产酶达到６０ｕ／ｍｌ。在培养其中添加０．０１％硫酸亚铁和２％的Ｗ试剂可分别提高产酸能力１５％和２８％，该发酵过程是一个耗氧很大的过程。     

发酵生产谷氨酰胺转移酶的摇瓶条件

在摇瓶条件下,以淀粉为碳源,蛋白胨及酵母膏为氮源,对Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｍｏｂａｒａｅｎｓｅ生产谷氨酰胺转胺酶（ＭＴＧ）的摇瓶发酵条件进行了探索,研究结果表明,发酵法生产谷氨酰胺酶的适宜初始ｐＨ值,淀粉质量浓度,接种量分别为６．１,２ｇ／ｄＬ,１０％ＭＴＧ酶活最高可达１．８３ｕｍｏｌ／（ｍｉｎ·ｍＬ）初始加入硫酸铵对菌体生长影响不大,但对ＭＴＧ的合成却产生抑制作用,初始加入纯氨     

聚γ-谷氨酸高产突变株的选育及摇瓶发酵条件

对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)进行亚硝基胍和^60Co诱变，获得一株)γ-PGA的高产菌株C9．γ-PGA质量浓度由9．44g／L提高到19．76g／L，提高了109％．突变株传代10次，质量浓度保持基本稳定．通过正交试验和单因素试验对发酵培养基及发酵条件进行了优化．当发酵培养基中含柠檬酸12g／L、甘油80g／L、L-谷氨酸23g／L、氯化铵7g／L，pH7．0，装液量为50mL／250mL三角瓶。接种体积分数为5％时。37℃摇瓶发酵72h。γ-PGA达到23．32g／L。     

枯草芽孢杆菌FM208849产果胶酶发酵条件的优化

枯草芽孢杆菌FM208849是从罗布麻表皮中筛选到的一株高效产果胶酶的菌株,对罗布麻的生物脱胶效果明显。本文从菌种生长与诱导物两个方面对枯草芽孢杆菌FM208849产酶发酵条件进行优化,并对所产果胶酶催化反应条件进行了初步分析。结果表明:最佳产酶培养基为果胶与葡萄糖共4 g/L(质量比为1∶3),牛肉膏15 g/L,NaCl 2 g/L;最佳发酵时间为24 h。初步测定果胶酶的最适反应温度为40℃,最适pH为9.5,其分子质量在39.3 ku左右。     

枯草芽孢杆菌FM208849产果胶酶发酵条件的优化

枯草芽孢杆菌FM208849是从罗布麻表皮中筛选到的一株高效产果胶酶的菌株,对罗布麻的生物脱胶效果明显。本文从菌种生长与诱导物两个方面对枯草芽孢杆菌FM208849产酶发酵条件进行优化,并对所产果胶酶催化反应条件进行了初步分析。结果表明:最佳产酶培养基为果胶与葡萄糖共4 g/L(质量比为1∶3),牛肉膏15 g/L,NaCl 2 g/L;最佳发酵时间为24 h。初步测定果胶酶的最适反应温度为40℃,最适pH为9.5,其分子质量在39.3 ku左右。     

产纤维素酶枯草芽孢杆菌B29的鉴定与培养条件研究

从近海土壤中分离1株产纤维素酶的菌株,经形态和生理生化指标鉴定为枯草芽孢杆菌。对产酶菌株经碳源、氮源、金属元素、培养温度、pH和接种量进行优化,确定最佳培养组分和条件为：20g／L葡萄糖,10g/L胰蛋白胨,3g／LK2HPO4,3g/LNaH2PO4,2g／L氯化铁,pH6．5,培养温度32℃,接种量为2％（v／v）。优化后纤维素酶系中以羧甲基纤维素酶活性为最高,为72．37U／mL,其次是β-糖苷酶和微晶纤维素酶。     

D—葡萄糖脱氢酶活力测定方法的研究——短小芽孢杆菌在D—核糖生产中的应用

D－核酸发酵液离心洗涤得菌体,采用超声波破碎（在40kW下,工作4s,间歇4s,破碎90次）,制备无细胞抽提液。取无细胞抽提液80μL及100μmol／L葡萄糖、4μmol/LNADP、0．6mmol/LTris－HCl（pH＝6．8）、10μmol/LMnSO4溶液各1mL,在37℃下保温10min,测定A340num的值,对比NADPH标准曲线,测定D－葡萄糖脱氢酶的酶含量。根据测定的时间及酶蛋白的含量,从而确定D－葡萄糖脱氢酶的酶活力的测定方法。     

D—核糖生产菌的原生质体诱变育种及其发酵条件的研究

以短小芽孢杆菌为出发菌株,经过硫酸二乙酯和原生质体紫外诱变,定向选育出一株稳定的核糖生产菌ＴＪ３,该菌株具有莽草酸营养缺陷,耐高糖,以核糖为唯一碳源不生长等遗传标记。在发酵条件试验中,采用均匀设计理论,利用微机对试验数据进行统计处理,确定出以葡萄糖为原料直接发酵生产核糖的优化配比。在最适培养条件下,摇瓶发酵平均产核糖３０．１２ｍｇ／ｍＬ。     

L-亮氨酸产生菌TK0303的摇瓶发酵条件优化

对L-亮氨酸产生茵黄色短杆菌TK0303(Met^- 2-TA^r α-AB^r β-HL^r SG^r Rif^r800μg／mL)的摇瓶发酵条件进行了研究，经种子培养条件及培养基、发酵培养基的优化后，采用该最佳条件，L-亮氨酸产量由19．2g／L提高至25．2g／L．     

产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌发酵条件的响应面优化

采用实验室前期构建的能够高产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌株,对其液体发酵条件进行优化。通过单因素实验和响应面Box-Behnken模型优化液体发酵培养参数,五因素三水平的响应面分析表明最佳发酵培养条件为:蛋白胨26.05 g/L,葡萄糖29.29 g/L,MgSO4 1.5 g/L,CaCl2 0.74 g/L,NaCl 10 g/L,pH 9.0,接种量3 %。在最优发酵培养条件下,纳豆激酶最高酶活达到2 186.17 IU/mL,比优化前提高了269 % ,这表明响应面法优化枯草芽孢杆菌工程菌能够明显的提高纳豆激酶活性,为该菌株规模化生产纳豆激酶提供了基础应用参考。     

D—核糖提取工艺的研究

核糖发酵液用饱和醋酸铅除去菌体、杂蛋白，然后通过AB－8树脂进行脱色，脱色液分别001×7，201×7树脂脱盐后，经过浓缩，于201×4硼酸型阴离子交换树脂进行分离。以0．02mol/L四硼酸钠缓冲液为洗脱液，将其中核糖流分浓缩、加甲醇除去硼酸根后，加乙碱减压浓缩得到白色核糖固体。     

重组大肠杆菌生产谷胱甘肽合成酶系的摇瓶发酵条件

研究了重组大肠杆菌E.coli II-1摇瓶发酵生产谷胱甘肽合成酶系的工艺条件,确定了E.coli II-1的最适产酶条件,最佳发酵培养基组成（ g/L)为：葡萄糖10,蛋白胨5,酵母膏2．5,K2HPO4．3H2O 4．0,KH2PO4 1．0,FeCl3 0.2 ,MnCl2.01,CoCl2.01,CaCl20.1,ZnCl2 0.02,H3BO3 0.01,NaMoO4 0.01,NaCl1.0,Na2SeO3 0.02,发酵起始PH7．2,灭菌后加入无菌氨苄青霉素至100ug/mL,每个三角瓶装液量为100毫升,培养前期的温度控制在37度,后期将温度降为35度,拥护档转速200r/min,发酵周期16h,在此条件下,重组大肠杆菌E.coliII-1的谷胱甘肽合成酶系的活性为862．3U／L。     

枯草芽孢杆菌对有害真菌的生防作用及最佳发酵条件研究

运用平板对峙法初步研究了枯草芽孢杆菌BS-02对部分有害真菌的拮抗效果,结果显示:BS-02菌株对砖红镰刀菌的拮抗作用明显,对黑曲霉、黄曲霉、青霉等有害真菌无拮抗作用.显微观察结果表明:BS-02对砖红镰刀菌的生防机制主要是分泌抗菌物质抑制病原菌生长.通过单因素试验和正交试验,得到BS-02最佳拮抗活性的发酵条件为:12 h种龄、1.0%蔗糖、1.0%酵母膏、0.5%NaCl、初始pH 5.0、5%接种量、装液量50 mL/250 mL、210 r/min、31℃、48 h.