一种短小芽孢杆菌分离鉴定及培养条件研究

为实施城市垃圾渗透液的生物无害化处理,分离、筛选、鉴定,获得特定菌株,并对其最适培养条件和最佳培养基组分进行优化。从城市垃圾填埋场垃圾渗透液中分离芽孢杆菌,通过设计特异性引物进行PCR反应鉴定目的菌株。此菌细胞呈现杆状,革兰氏阳性,经鉴定为短小芽孢杆菌。采用单因素实验和正交实验法对菌株生长适宜的培养基进行了优化。优化后的培养基主要成分为:玉米淀粉0.1%,酵母提取物1.0%,小牛浸膏0.3%,NaCl0.5%,MgSO4·7H2O 0.49%。在这种条件下,菌株培养10h,其OD320由1.44上升到6.93,为该菌株的深入研究和应用奠定了基础。     

产纤维素酶枯草芽孢杆菌B29的鉴定与培养条件研究

从近海土壤中分离1株产纤维素酶的菌株,经形态和生理生化指标鉴定为枯草芽孢杆菌。对产酶菌株经碳源、氮源、金属元素、培养温度、pH和接种量进行优化,确定最佳培养组分和条件为：20g／L葡萄糖,10g/L胰蛋白胨,3g／LK2HPO4,3g/LNaH2PO4,2g／L氯化铁,pH6．5,培养温度32℃,接种量为2％（v／v）。优化后纤维素酶系中以羧甲基纤维素酶活性为最高,为72．37U／mL,其次是β-糖苷酶和微晶纤维素酶。     

水质净化芽孢杆菌的筛选及培养条件优化

从养殖池底的海泥筛选出两株具有净化水质的细菌T01、T02,对其进行生理生化鉴定,确定均为芽孢杆菌。对T01、T02及复合菌株(体积比1∶1)降解氨氮和亚硝酸盐氮能力进行测试,菌株T01、T02均具有降解氨氮和亚硝酸盐氮的能力。选择生长状况较好的T02进行培养条件优化,在葡萄糖10g/L、淀粉15g/L、蛋白胨5.0g/L、豆粕10g/L、磷酸氢二钾1.5g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、硫酸镁1.0g/L、碳酸钙1.0g/L的培养基条件下活菌数达到最高,为1.54×109 cfu/mL。在接种量1%、培养温度30℃、转速180r/min、装液量2/5时,活菌数达到最高,为1.63×109 cfu/mL。     

一株同型乳酸发酵芽孢杆菌的分离和鉴定

从奶粉中分离一株同型乳酸发酵杆菌，编号ＴＱ３３，主要特点：生产芽孢，生长温度范围（２０～６３）℃最适生长温度（４５～５０）℃接触酶试验阳性，通气条件下生长良好，厌氧条件下发酵葡萄糖产不产气，主要产Ｌ（＋）乳酸，菌体（Ｇ＋Ｃ）为（３２．４５）％，生理生化性质特殊，据以上特点，将ＴＱ３３菌株鉴定为凝结芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｏａｇｕｌａｎｓ）ＬＤ５０试验表明，菌体和代谢产物属无毒物质。     

贝莱斯芽孢杆菌BA-300的鉴定、发酵条件优化及应用

为了获得在农业生物防治具有广谱抗菌作用的芽孢杆菌类益生菌,经多轮分离筛选,确定了一株对多种致病菌均具有较好抑菌效果的BA-300菌株。经16S rDNA测序比对、形态特征观察和生理生化分析,鉴定菌株BA-300为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。为提高抑菌活性,对菌株BA-300发酵条件进行优化。从6种常见的细菌培养基中筛选出最佳培养基,对时间、温度和pH三种发酵条件进行优化。将稀释5倍和10倍的菌株BA-300发酵液分别喷洒到樱桃树上,结果表明,稀释5倍的发酵液实验组对樱桃树叶片细菌性穿孔病的防治效果可以达到78.4%,稀释10倍的实验组也能达到70.0%。与对照组相比,樱桃产量有明显提高,说明贝莱斯芽孢杆菌BA-300有较高的生物防治作用。     

一株乳酸菌培养条件优化及菌种鉴定

针对取自某工厂的一株未知乳酸菌种进行菌株的培养条件优化及菌种鉴定。以乳酸菌在不同固体培养基中的菌落数、菌落大小及溶钙圈大小为检测指标确定乳酸菌分离培养基为最优乳酸菌固体培养基。在此基础上,对其固体和半固体形式中的生长情况进行比较,发现半固体培养较固体培养更适于乳酸菌生长。通过对乳酸菌生长曲线、pH-t曲线的绘制,了解了此种乳酸菌的生长特性。通过菌落形态观察以及生化鉴定实验,如：吲哚试验、接触酶试验、运动性检测、糖发酵试验等鉴定出此种乳酸菌为德氏乳杆菌保加利亚亚种。     

培养基及培养条件对普鲁兰酶的影响

从土壤中分离出一株产普鲁兰酶的菌株，初步鉴定为芽孢杆菌，通过优化发酵培养基及发酵培养条件，在２５０ｍＬ的摇瓶中可达到４．５μｍｏｌ／（ｍｉｎ．ｍＬ）的普鲁兰酶酶活。优化后的发酵培养基成分如下：玉米支链淀粉２ｇ／ｄＬ，蛋白胨２ｇ／ｄＬ，牛肉膏１．５ｇ／ｄＬ，ＮａＣｌ０．５ｇ／ｄＬ，ＭｎＳＯ４２μｍｏｌ／Ｌ。摇瓶发酵工艺条件：接种量１７％，温３７℃，摇瓶转速２２０ｒ／ｍｉｎ，ｐＨ６．０，发酵周期３２ｈ     

D—葡萄糖脱氢酶活力测定方法的研究——短小芽孢杆菌在D—核糖生产中的应用

D－核酸发酵液离心洗涤得菌体,采用超声波破碎（在40kW下,工作4s,间歇4s,破碎90次）,制备无细胞抽提液。取无细胞抽提液80μL及100μmol／L葡萄糖、4μmol/LNADP、0．6mmol/LTris－HCl（pH＝6．8）、10μmol/LMnSO4溶液各1mL,在37℃下保温10min,测定A340num的值,对比NADPH标准曲线,测定D－葡萄糖脱氢酶的酶含量。根据测定的时间及酶蛋白的含量,从而确定D－葡萄糖脱氢酶的酶活力的测定方法。     

一株产生广谱抗菌物质地衣芽孢杆菌的筛选与鉴定

采用异步培养法,从土壤样品中筛选到一株产抗菌物质活性较强的菌株F69．结合菌落形态、生理生化指标和16SrDNA序列分析对菌株F69进行菌种鉴定．菌株F69在系统发育上属于芽孢杆菌属,它和地衣芽胞杆菌菌株的16SrDNA序列相似性最高为99％,该菌株被鉴定为地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）．菌株F69可作为抗菌物质产生菌进行进一步深入研究．     

蕈状芽孢杆菌SH-1抗菌活性物质发酵条件优化

从土壤中筛选到一株芽孢杆菌SH-1,该菌株能够产生抑制多种细菌的活性物质,初步确定该菌株为蕈状芽孢杆菌．通过单因素实验及正交实验对蕈状芽孢杆菌SH-1菌株所产生抗菌物质的发酵条件进行优化,采用牛津杯法测定该菌株所产抗菌物质的抑菌活性,最终确定蕈状芽孢杆菌SH-1菌株产生抗菌物质的最适发酵条件为：温度36℃,pH8,转速180r／min,接菌量体积分数4％,发酵时间24h．     

利斯的明立体拆分菌株季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)培养条件对手性纯度和转化率的影响

前期研究发现培养条件对利斯的明立体拆分的手性纯度和转化率影响很大,笔者就利斯的明立体拆分菌株季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)HM988686.1的培养基组成(碳源、氮源)和其他工艺条件(培养温度、初始pH、装液量)进行了研究.通过单因素试验和正交试验,确定了该菌株的最适培养条件为蔗糖2%,蛋白胨1%,玉米浆0.5%,pH 8.0,Tris-HCl缓冲体系,培养温度28℃,装液量为100 mL/500 mL三角瓶.在最优的条件下,转化率为42%,产物ee值达95.1%.     

产生物表面活性剂细菌的筛选及发酵条件优化

利用变色圈法、排油圈法从土壤和污泥等样品中分离筛选出1株产生物表面活性剂的细菌菌株WB,并通过单因素实验及L9（3^4）正交实验对该菌株的培养基配方及培养条件进行优化．结果表明：在葡萄糖10g／L,麸皮25g／L,酵母粉0．9g／L,培养基初始pH值为7．2,250mL摇瓶装液量为50mL,发酵时间为72h的条件下,菌株WB的表面活性剂的产量可达3．6g／L．     

高产抗生素Zwittermicin A苏云金芽孢杆菌A164发酵条件的优化

从土壤样品中筛选出高产抗生素(Zwittermicin A)的苏云金芽孢杆菌菌株:A164,对此菌种的发酵条件进行了探讨。以A164合成高含量抗生素为目标对发酵培养的碳源、氮源、时间等条件进行了单因素优化;采用Plackett-Burman设计,确定发酵条件的重要影响因子,根据爬坡路径法,确定了各个因子的最适范围,采用响应面分析法对因子再次进行优化,得到了最佳发酵条件。最佳发酵条件为:蛋白胨含量17.56g.L-1,葡萄糖20.0g.L-1,MgSO40.18g.L-1,CaCl20.08g.L-1,ZnSO40.20g.L-1,K2HPO41.3g.L-1,培养温度28.31℃,发酵时间36h。     

蜡状芽孢杆菌的筛选及其产氢性能

为了研究纯菌种对产氢的影响,从污水厂活性污泥中分离了纯的产氢菌种XN12,根据16S rDNA序列和DnaJ基因序列、细胞形态、生理生化数据等多项鉴定分析,该菌种被鉴定为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus).为了研究该纯菌的产氢性能,实验以葡萄糖为底物,在不同pH值条件下观察其产气情况.实验结果表明:以每摩尔葡萄糖计,该菌在中性条件下获得最大产氢量为1.6 mol.对反应的液相产物的检验结果表明:该菌为丁酸发酵菌,通过丙酮酸代谢途径产出氢气.     

水产养殖益生菌CW9的鉴定及发酵条件优化

海水养殖益生菌CW9是一株分离自连云港甲壳类动物养殖水体的益生菌。通过16SrDNA测定和生理生化反应对该菌进行了鉴定,确定为节杆菌属,故该菌命名为Arthrobacter sp.CW9。对培养基配方和培养条件进行优化后的结果为:葡萄糖8g/L,蛋白胨5g/L,酵母膏3g/L,NaCl 10g/L,pH 7.5,温度26℃,接种量为2%以及摇床转速为200r/min,培养21h后,获得最大的细胞浓度达6.90×1010 cfu/mL。与出发条件相比,细胞浓度提升显著,为该菌株的工业化应用奠定了基础。     

解淀粉芽孢杆菌BI_2的鉴定及其对黄曲霉的抑制作用

菌株BI2是从青贮玉米秸秆饲料中分离得到的一株革兰氏阳性芽孢杆菌.经16S rDNA序列分析,发现该菌株与解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens（NC_009725）的相似性达到99.6%;进一步结合Biolog及生理生化分析,将该菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌.以番茄叶霉病菌、黄瓜枯萎病菌等12种植物病原菌及部分霉菌、酵母、食品乳酸菌和人类致病细菌为指示菌进行抑菌实验.结果表明：BI2主要抑制丝状真菌,而对细菌无拮抗作用;BI2菌株生长36 h的上清液能明显抑制黄曲霉孢子萌发及其菌丝生长,抑制率分别达到67.4%和74.8%;而且该上清液经120℃高温处理20 min后对黄曲霉的抑制效果基本没有影响.     

选题风险的识别及规避措施

选题风险与出版社的效益密切相关.以风险管理的基本理论为依据,提出了运用专家调查法、事故树法和因果分析法识别图书选题风险的操作方法,进而为规避选题风险、争取效益最大化奠定了良好的基础.     

一种改进的遗传算法及其在系统辨识中的应用

研究了基于基本杂交操作的遗传算法的效率及全局收敛性，提出了一种改进的遗传算法，该算法成功地应用于系统辨识。仿真结果表明了该方法的有效性及实用性。