加工食品中若干动物成分的PCR检测技术应用研究

本研究应用PCR技术检测了12种加工食品中的牛、羊、鸡、猪等动物源性成分，在此基础上还开发了真核生物所共有的18S核糖体DNA（18S rDNA）与食品中牛、羊、鸡、猪等多种动物物种特异性基因片段之间的二重PCR检测方法，还分析了牛、羊源性成分单PCR检测的灵敏度，以及18S rDNA与牛、羊之间的二重PCR检测方法的灵敏度。     

基于DNA测序方法检测生鲜肉中5种动物源性成分

目的建立生鲜肉中猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分的DNA测序鉴别方法,并对采集自北京各地区生鲜肉品进行检测验证。方法合成动物线粒体上12S rRNA、cytochrome b、cytochrome c oxidase基因引物,建立猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分的DNA测序鉴别方法,并对50份猪、牛、羊、鸡、鸭肉品进行检测。结果使用线粒体上12S rRNA、cytochrome b、cytochrome c oxidase基因引物对猪、牛、羊、鸡、鸭肉品进行扩增,分别获得456、400和710 bp大小的DNA片段。只有12S rRNA基因引物均可对此5种动物源性成分扩增且效果良好。扩增产物进行序列测定。根据序列构建的系统进化树发现,此方法可有效区分样品中猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分。结论此方法快速、简便,可准确检测50种生鲜肉样品中的动物源性成分,作为肉类鉴别的新方法。     

种属特异性PCR法鉴别罐头食品中猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分

建立适用于肉类罐头等长时间高温加工食品中猪、牛、羊、鸡、鸭5种动物源成分种属特异性PCR鉴别方法。通过使用猪、牛、羊、鸡、鸭的种属特异性引物,对5种动物的总DNA模板进行PCR扩增,得到分别为212、147、202、131、201 bp的扩增产物,将测序结果在美国国家生物技术信息中心(US National Center for Biotechnology Information,NCBI)进行BLAST比对确认实验的准确性,并对市售罐头样品进行检测。该方法5种动物引物种属特异性良好,对猪、牛、羊、鸭源性成分的检测灵敏度可达1%,对鸡源性成分的检测灵敏度为2.5%。在对市售肉类罐头样品的检测中,6.6%样品与标签标注结果不符。该方法操作简便,成本低,结果准确可靠,可广泛用于肉类罐头食品和长时间高温加工食品中猪、牛、羊、鸡、鸭5种动物源成分的鉴别,具有十分广泛的实际应用价值。     

硫酸软骨素中掺假动物成分的检测研究

研究建立硫酸软骨素中牛、羊、猪、鸡、鸭、鹅等动物源性成分的PCR检测方法,该方法特异、灵敏,检测限为0.1%.运用建立的方法对市场上的38个不同动物成分来源的硫酸软骨素样品进行检测,在27个硫酸软骨素样品中检出其它动物成分.该检测方法能够用于硫酸软骨素中牛、羊、猪、鸡、鸭和鹅源性成分的原料成分鉴别.     

膜芯片技术对牛、羊、牦牛、驴肉源食品的掺伪鉴别

采用膜芯片技术,通过对牛、羊、驴、牦牛、鸡、鸭、兔、貂、狐、鼠、猪11 种目标物种的检测,实现对牛、羊、驴、牦牛物种的掺伪鉴别。结果表明：该方法具有良好的特异性和适用性,检测灵敏度和掺伪灵敏度均可达到0.1%,能快速、准确地同时鉴别牛、羊、驴、牦牛、鸡、鸭、兔、貂、狐、鼠、猪11 种动物源性成分,可满足肉类食品样品中对牛、羊、牦牛、驴等掺伪鉴别的检验需求。     

SDS-PAGE法检测动物肌肉蛋白质加热终点温度的研究

为了探索检测动物组织蛋白质热变性程度的方法,分别对猪、牛、羊、鸡、鱼五种新鲜动物肌肉组织进行不同温度的热处理（新鲜未加热、50、60、70、80、90、100℃）,对处理后的样品提取蛋白质进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析。结果显示,同种动物组织经不同温度热处理,所得电泳图谱具有较大差异,电泳条带的数量随温度的升高逐渐减少,猪、牛、羊三种动物肌肉组织加热到80℃后,电泳图谱不再变化,达到加热终点温度;鸡和鱼的肌肉组织加热到70℃后,电泳图谱不再变化,达到加热终点温度。不同种动物组织经相同温度热处理所得电泳图谱显示：猪、牛、羊三种动物组织蛋白质的电泳图谱相似,与鸡和鱼组织蛋白质的电泳图谱差异显著。     

麟游血条面

陕西人喜爱面食,作法也丰富多彩,其中麟游的血条面就是关中面条家族中的佼佼者.血条面是用猪、牛、羊等动物的血和麦面揉和做成的面条。具体     

关于港、澳生猪禽肉进出口的药物规定

香港特别行政区政府最近颁布了新的《公众卫生(动物及禽鸟)(化学物残余)规例》和《食物内有害物质规例》要求所有供港的食用动物(包括猪、牛、羊、禽、贝类、爬行动物类)及动物产品不得含有盐酸克伦特罗等7种禁用药物,其他     

多重PCR法用于畜肉源性鉴定的研究

根据Genebank中猪、牛、羊的线粒体细胞色素b(Cyt-b)基因序列,设计了猪、牛、羊的通用上游引物和特异性下游引物,通过调节引物比例、反应体系、反应条件以及模板量等优化实验确立了多重PCR检测方法.研究结果显示,该多重PCR方法能够同时扩增样品中猪、牛、羊成分,对混合样品的检出限可达10％;并将该方法用于成都市猪、牛、羊肉的调查研究,得到了理想的结果.     

GNM C7-8实时荧光PCR同时快速检测8种动物源性成分

目的基于八模块设计的GNMC7-8实时荧光PCR系统实现对8种动物源性成分同时快速检测。方法基于猪朊蛋白基因、牛生长激素基因、羊生长激素基因、驴线粒体ATPase 6基因、马线粒体ATPase 6基因、鸭生长激素基因、水貂线粒体细胞色素b基因、狐狸线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ亚基基因引物设计了8种动物源性成分实时荧光PCR检测方法。应用GNMC7-8实时荧光PCR系统,对8种动物源性成分启动同时检测和每隔5min顺序启动不同时检测,并将检测结果和ABI7500荧光PCR分别检测结果进行比较。结果 GNM C7-8实时荧光PCR系统同时检测猪、牛、羊、驴、马、鸭、水貂、狐狸8种动物源性成分,起峰周期数分别为30、27、21、21、24、17、15、17,与其不同时检测结果一样,与ABI7500荧光PCR系统检测结果相比,猪、羊、马、鸭、水貂5种成分的起峰快1～2个周期数,其余3种成分检测结果一致,检测完成时间少16～20 min。结论 GNM C7-8实时荧光PCR系统8个模块独立运行,互不干扰,无交叉污染,能够同时快速检测8种动物源性成分,为快速筛查动物源性成分提供强有力的设备技术支持。