南果梨中多酚氧化酶的动力学研究

研究了南果梨多酚氧化酶的底物专一性和不同底物的米氏常数,结果表明,最适底物为绿原酸。同时研究了不同抑制剂对南果梨多酚氧化酶的抑制效果。     

荔枝多酚氧化酶动力学研究

对白腊荔枝多酚氧化酶的底物进行了研究,确定该酶的最佳底物是3-甲基儿茶酚,用氧电极测出酶催化反应的最佳条件是pH值为7.3,温度为62℃,测定反应活化能等于13.24kJ·mol~(-1),米氏常数为2.209×10~(-2)mol·L~(-1),r_(max)=2.306mg·L~(-1)·min~(-1),对防止果蔬酶促褐变具有一定的指导意义。     

高灌蓝越橘多酚氧化酶的提取和纯化

采用丙酮粉沉淀抽滤法、硫酸铵分级沉淀法及苯基琼脂糖疏水性层析法对高灌蓝越橘多酚氧化酶进行提取和纯化。在提取和纯化中，用加入不同的酚吸收剂和抑制剂并比较酶活性的高低来确认最佳方法。结果表明在粗提中加入酚吸收剂、增溶剂和抑制剂提取效果较好，苯基琼脂糖疏水性层析法对此类酶纯化效果较佳并为后来的辅酶的分离提供了较高的纯化倍数。     

香水梨果实多酚氧化酶动力学研究及其底物对组织褐变的影响

以宁夏海原香水梨为试材,采用分光光度法对香水梨多酚氧化酶(PPO)及不同抑制剂的动力学特征及其底物对组织褐变的影响进行了研究。实验表明:香水梨PPO活性是随时间变化逐渐增加,正好与香水梨出现褐变的时间吻合;将邻苯二酚和焦性没食子酸两种底物与香水梨PPO作用后进行全波段(200 nm~650 nm)扫描,274、275 nm处有吸收峰,可推断香水梨PPO作用邻位二元酚和三元酚能力很强;以邻苯二酚为底物,测定不同抑制剂对香水梨PPO活力的影响,抑制效果依次为抗坏血酸间苯二酚L-半胱氨酸EDTA。     

景红桃和白花桃中多酚氧化酶性质的研究

以冷冻丙酮制备了无锡产景红桃、白花桃多酚氧化酶丙酮粉,用分光光度法研究了pH、温度、不同底物、抑制剂对酶活性的影响.     

杏子多酚氧化酶动力学特性研究

杏子多酚氧化酶是造成杏子果肉褐变的主要因素,研究其动力学特性对杏子深加工中防止果肉褐变有着重要理论意义。采用分光光度计法研究pH、温度、抑制剂和高压二氧化碳处理对杏子多酚氧化酶性质的影响,结果表明:杏子(品种为色买提)的最适底物为邻苯二酚,最适pH5.0,最适温度40℃。多酚氧化酶催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,该酶促反应的动力学常数Km为0.014mol/L,最大速率为287U/min。控制pH3.0以下,或者采用L-抗坏血酸4mmol/L与柠檬酸8mmol/L复配,或采用高压二氧化碳40MPa处理30min都可以将相对酶活性控制在20%以下;温度90℃处理6min以上或100℃处理4min可以完全抑制酶活性。在实际应用中,可根据产品特性不同选用适宜的处理方法或组合抑制褐变。     

刺梨多酚氧化酶的提取工艺及其抑制剂研究

以刺梨(Rosa roxburghii Trat)为原料,采用正交试验优化刺梨多酚氧化酶(polyphenol oxidase, PPO)的提取条件,并研究不同抑制剂[抗坏血酸、乙二胺四乙酸二钠(ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt,EDTA-2Na)、柠檬酸]对刺梨PPO活性的影响。结果表明,PPO的最佳提取工艺条件为:底物邻苯二酚的浓度为0.12mol/L,提取温度为30℃,缓冲液的pH值为6.0。同时,抗坏血酸、EDTA-2Na、柠檬酸对刺梨PPO活性均有抑制效果,其中抗坏血酸对PPO活性抑制效果最强,其次是柠檬酸、EDTA-2Na。     

南酸枣中多酚氧化酶的特性研究

以南酸枣为原料,利用磷酸盐溶液提取其多酚氧化酶(PPO)粗酶液。以邻苯二酚为底物,采用分光光度法测定南酸枣PPO的活性。研究温度、pH对南酸枣PPO活性的影响以及底物特异性,并探讨抗坏血酸、亚硫酸钠、L-半胱氨酸、柠檬酸、酒石酸和氯化钙6种抑制剂对南酸枣PPO的抑制效果。结果表明:南酸枣PPO最适反应温度为50℃;最适pH值为7.0;邻苯二酚、对叔丁基邻苯二酚及4-甲基儿茶酚作为底物时PPO的活性较高,没食子酸及焦性没食子酸性作为底物时PPO的活性较小;6种抑制剂对南酸枣PPO均表现出一定的抑制作用,其抑制效果为:抗坏血酸亚硫酸钠L-半胱氨酸柠檬酸酒石酸氯化钙。     

建莲中多酚氧化酶动力学特性的研究

为解决速冻建莲加工与贮藏中出现的褐变问题,本文研究了建莲中多酚氧化酶(PPO)的动力学特性,并对其进行组织定位试验。结果表明:PPO的最适反应条件为:pH6.8,温度40℃,米氏方程为1╱(Vo)=(1.84×1╱(S_0)+1.44)×0.1;建莲尖部和芯部组织中的PPO活性差异不大,但均高于外表部组织中的PPO活性。     

苹果梨中多酚氧化酶酶反应动力学和反应进程的研究

本实验研究了苹果梨在不同贮藏条件下,多酚氧化酶酶活性的变化;并以酶促反应中底物的消耗量和产物的生成量为目标,对多酚氧化酶酶反应动力学进行了研究。     

果酒中多酚氧化酶及其性质的研究

对山楂酒中含有的六种分子量不同的多酚在多酚氧化酶作用下,测定氧化前后其涩度的变化.发现多酚物质的氧化作用能够加重果酒的苦涩味.并对山楂中的多酚氧化酶进行提取,测定其基本特性,确定了底物、温度、pH值对其活性的影响,并进一步测定其酶动力学曲线,发现多酚氧化酶催化的最适温度是25℃,其最适pH是6.5,其作用的最适底物是儿茶酚,其米氏常数是1.077×10-2M.     

Mechanism of Browning in Fresh Highbush Blueberry Fruit (Vaccinium corymbosum L). Role of Blueberry Polyphenol Oxidase,Chlorogenic Acid and Anthocyanins

Browning reactions which occurred after crushing fresh blueberries (Vaccinium corymbosum L) were followed by determination of chlorogenic acid colour density, polymer colour and the level of polymers. A polyphenol oxidase (PPO) activity plays a dominant role in enzymatic browning. Peroxidase (POD) does not contribute to brown colour formation. The loss of 29% of the colour in a model system containing PPO and blueberry anthocyanins indicated that PPO could act directly on these pigments. However, the rate of anthocyanin degradation was stimulated by the addition of chlorogenic acid. © 1997 SCI.     

毛酸浆多酚氧化酶的酶学特性研究

以毛酸浆中多酚氧化酶(PPO)为研究对象,采用分光光度法在420nm处对其酶学特性进行研究。结果表明,毛酸浆PPO的底物邻苯二酚的最适质量分数为0.04%;最适pH为7.0;最适温度为35℃;100℃处理2min,可使酶完全失活;PPO催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,动力学参数为Km=0.025mol/L,Vmax=125U/min;抗坏血酸、柠檬酸、L-半胱氨酸和亚硫酸钠对PPO酶活性的抑制作用均随浓度的增大而加强,抑制能力由强到弱依次为:抗坏血酸柠檬酸L-半胱氨酸EDTA亚硫酸氢钠。     

芋头多酚氧化酶的酶学性质研究

以邻苯二酚为底物,采用分光光度法研究了芋头多酚氧化酶(PPO)的酶学特性。结果表明:芋头PPO的最适温度pH为7.5,最适温度为40℃;90℃高温处理2 min,可使酶完全失活;PPO催化的酶促褐变反应符合米氏动力学方程,相应动力学参数Km=0.0221mol/L,Vmax=46.08 U/min;4种抑制剂对PPO活性均有不同程度的抑制作用,抑制效果由强到弱顺序为:抗坏血酸>亚硫酸氢钠>L-半胱氨酸>柠檬酸;金属离子Sn2+对PPO活性具有较强的抑制作用,A13+、Cu2+、Mg2+、Ca2+和Co2+对PPO活性有一定的抑制作用,Zn2+对PPO活性具有激活作用,Fe3+、Fe2+和Mn2+对PPO活性几乎没有影响。     

茄子多酚氧化酶的酶学特性研究

本文对日本千年2号茄子中多酚氧化酶的酶学特性进行了较详细研究。结果表明：茄子中多酚氧化酶的最适pH为6．8，当体系pH≤5．0或者pH≥7．4时，能有效降低PPO活性。30～50℃下PPO具有较高活性，其最适温度为30℃。PPO的热稳定性较差，沸水加热1min时，酶活已丧失87．57％。柠檬酸、抗坏血酸、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、EDTA-2Na等对PPO活性有抑制作用，其中抗坏血酸抑制作用最强。     

青蒿多酚氧化酶的酶学特性研究

以新鲜青蒿为材料,考察不同温度、pH值、底物浓度、激活剂、抑制剂对青蒿多酚氧化酶（polyphenoloxidase,PPO）活性的影响。结果表明：温度和pH值对酶活性的影响均存在一个最适值,分别为40 ℃和6.8;在一定底物浓度范围内,酶促反应速率随底物浓度的增加而增大,其米氏常数（Km）为0.015 4 mol/L,最大反应速率（Vmax）为125 U/min;MgC12、SDS对青蒿PPO活性有一定激活作用,当MgC12浓度为0.9 mmol/L、SDS浓度为8 mmol/L时,青蒿PPO活性分别高出对照组30.3%和45.3%;当VC质量浓度为0.03 g/L、柠檬酸质量浓度为1.2 g/L、PVP质量浓度为20 g/L时抑制率分别为70.4%、83.7%、77.6%;NaHSO3在0.01～0.08 mmol/L的浓度范围内对青蒿PPO抑制作用缓慢上升。     

油桃多酚氧化酶性质的研究

用硫酸铵分级盐析及透析法提取油桃多酚氧化酶(PPO),测定了该酶的最适pH值,最适作用温度和酶促动力学常数Km,分析比较了几种常见PPO抑制剂的抑制作用,并用PAGE电泳分离了PPO的同功酶。结果表明,以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为6.2,最适温度范围为30～35℃,Km值为17.6mmol╱L。几种PPO抑制剂的抑制效果显示:抗坏血酸高于蔗糖,亚硫酸钠高于氯化钠。油桃PPO经PAGE电泳,通过活性染色分析得知:油桃PPO中至少存在6种同功酶。