核桃蛋白肽的抗氧化活性研究

以VC为对照,研究了分子质量小于3000u的核桃蛋白肽混合物的还原能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力以及二苯代苦味酰基自由基清除能力。结果显示,随着核桃蛋白肽浓度的增加,其还原能力、羟自由基的清除能力和超氧阴离子清除能力增大,在浓度为30mg/mL时,核桃蛋白肽还原能力达到VC的57.1%;在浓度为50mg/mL时,核桃蛋白肽对羟自由基(OH.)的清除率分别69.1%,对超氧阴离子自由基的清除率达到了85%。而对二苯代苦味酰基自由基清除能力则是先增大后变小,在20mg/mL时达到最大值66%。核桃蛋白肽的分子质量分布主要有2大区域,蛋白肽氨基酸含量达到89.74%。     

木瓜蛋白酶酶解核桃粕蛋白产物抗氧化活性研究

目的:研究木瓜蛋白酶酶解核桃粕蛋白产物的抗氧化特性.方法:测定不同酶解时间下的酶解液的抗氧化性;用葡聚糖凝胶分离活性肽段并测定其抗氧化性.结果:在酶用量6 000 U/g 底物、底物质量分数3%、pH7.5、温度55℃的酶解条件下酶解210 min,酶解液的抗氧化活性较高,0H·清除率55.43%,O2-·清除率64.23%,DPPH·清除率79.32%,总抗氧化能力98.74%单位/mL;通过葡聚糖凝胶分离并与已知标准品对照,木瓜蛋白酶酶解核桃粕蛋白产物抗氧化活性多肽的分子质量主要集中在1321～607 Da,该分子质量片段活性多肽对0H·的清除率为42.26%,对02-·的清除率为57.33%,对DPPH·清除率为74.43%,总抗氧化能力88.43单位/mL.结论:木瓜蛋白酶酶解核桃粕蛋白210 min时酶解液的抗氧化活性较高,抗氧化活性多肽分子质量主要集中在1 321～607 Da之间.     

核桃清蛋白抗氧化肽的制备及其活性研究

以核桃清蛋白为原料,用碱性蛋白酶进行酶解制备抗氧化肽,通过单因素与响应面试验,分析确定制备核桃清蛋白抗氧化肽的最佳工艺条件为:pH9.5,温度45℃,底物浓度4%,加酶量8 000 U/g,酶解时间2.5 h。对最优条件下制备的抗氧化肽进行活性研究,测定其Fe~(2+)螯合能力及对羟基自由基、DPPH·、ABTS~+·3种自由基的清除能力,结果表明核桃清蛋白抗氧化肽对几种自由基均有显著的清除作用和金属离子螯合能力,是一种活性的的天然抗氧化剂。     

油茶籽粕蛋白功能特性及其酶解产物抗氧化活性研究

采用碱溶酸沉法提取油茶籽粕中的蛋白质,运用正交试验优化提取的最佳条件,并分析油茶籽粕蛋白功能特性及其木瓜蛋白酶水解物的抗氧化活性。结果表明,在pH 10、料液比1∶30(m/V)、提取时间3h、提取温度50℃的最佳条件下,油茶籽粕蛋白的得率为4.99%。油茶籽粕蛋白等电点在pH 5左右。乳化能力、乳化稳定性和起泡能力随p H增加呈先降后升的趋势,与蛋白溶解度密切相关。木瓜蛋白酶能有效提高油茶籽粕蛋白溶解性,其蛋白水解物对DPPH·自由基和羟基自由基均具有很好的清除能力(清除率85%),对铜离子的螯合能力大于对铁离子的螯合能力。     

酶解条件对核桃多肽抗氧化活性的影响

以核桃蛋白粉为原料制备核桃蛋白抗氧化活性肽,分别采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对核桃蛋白进行酶解,测定了不同酶作用下的核桃多肽抗氧化活性,确定碱性蛋白酶是酶解核桃蛋白的最适蛋白酶。研究了酶解温度、酶解时间、酶解pH、底物浓度、酶添加量等酶解条件对酶解产物抗氧化活性的影响。结果表明:不同的酶解条件对酶解产物核桃多肽的抗氧化活性有显著影响,最佳酶解条件为:温度50℃,时间120 min,pH8,底物浓度3%,酶添加量3%,在此酶解条件下制得的核桃多肽对羟基自由基和超氧阴离子的清除率分别为53.8%和50.0%,还原能力为51.7%。     

酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的研究

利用木瓜蛋白酶酶解核桃分离蛋白制备小分子活性肽,并研究了不同分子量段核桃小分子肽的抗氧化性能。通过单因素实验和正交实验,确定了木瓜蛋白酶制备抗氧化肽的最佳酶解条件为:pH8.5,温度50℃,酶与底物浓度之比[E]/[S]=3:100,底物浓度[S]=3.5g/100mL,酶解时间5h。用截留分子量分别为3kDa和10kDa的超滤膜将核桃粗肽液分离成<3kDa、3～10kDa及>10kDa3个分子量段,并对不同分子量段核桃多肽的抗氧化性进行了研究,结果表明,分子量<3kDa的核桃多肽的抗氧化性大于其他两个分子量段。     

大豆蛋白的酶解及其抗氧化活性研究

研究了大豆分离蛋白的酶解条件及其产物的抗氧化活性,分析了酶解过程中蛋白水解度(DH)、TCA-NSI变化.结果表明,碱性蛋白酶用于制备大豆蛋白抗氧化肽具有明显的优势,正交试验优化酶解条件下得到的酶解物羟自由基清除率可达53.43%,清除活性的IC50为1.708 mg/mL,Fe2+螯合率为80.13%,螯合活性的IC50为0.822 mg/mL.酶解物的羟自由基清除活性、Fe2+螯合能力与DH、TCA-NSI之间并不呈线性关系.     

畜禽源抗氧化肽的酶解工艺优化

以鸭肝为原料,通过酶解法制备鸭肝抗氧化肽。从8 种蛋白酶中筛选出风味蛋白酶为酶解鸭肝肽的最佳用酶。以水解度和抗氧化性为评价指标,通过单因素试验、响应面试验探究料液比、酶解温度、酶解时间、酶解pH 值和酶用量对鸭肝抗氧化肽活性和水解度的影响。响应面优化的最佳酶解条件为料液比1∶10（g/mL）、酶解温度50 ℃、酶解时间3.9 h、酶解pH6.2、酶用量4 100 U/g。在此条件下,鸭肝肽的DPPH·清除率可达93.25%,水解度为15.03%。     

贻贝的可控酶解及其酶解液的抗氧化活性

用Alcalase对贻贝进行酶解能够得到具有抗氧化活性的酶解物。通过控制酶解时间分别得到水解度(hydrolysis degree,DH)为12%、18%、24%和30%的4种酶解物,研究其抗氧化活性。结果表明,酶解物的还原力和羟基自由基清除率均随DH升高而升高,但在DH 24%~30%范围升高极缓;其DPPH自由基、超氧阴离子自由基清除率和脂质过氧化抑制率均随DH升高而呈现先增后降的趋势,最高清除率均出现在DH 24%处。DH为24%的贻贝Alcalase酶解物具有最佳的抗氧化活性。     

苜蓿叶蛋白及其酶解物抗氧化活性的比较

通过提取、酶解和超滤从苜蓿叶蛋白中分离得到相对分子质量不同的可溶性苜蓿叶蛋白及其酶解粗肽和精制肽,研究了其氨基酸组成和相对分子质量分布,并对其抗氧化活性进行了比较.结果表明:虽然从苜蓿叶分离的各种蛋白质其氨基酸组成相近,但相对分子质量大的可溶性苜蓿叶蛋白SALPr未发现抗氧化活性,而酶解后的粗肽CALPe以及超滤后的精制肽PALPe均表现出较强的抗氧化活性,并且存在剂量效应关系,而且PALPe抗氧化活性强于CALPe.这可能是由于PALPe中疏水性氨基酸和小分子肽的含量均高于CALPe.     

复合蛋白酶法制备玉米胚蛋白多肽及其抗氧化活性研究

利用复合酶(碱性蛋白酶∶木瓜蛋白酶=1∶1)酶解玉米胚蛋白制备蛋白多肽,在单因素实验的基础上,采用Box-Behnken设计响应面法,以蛋白多肽的还原力为检测指标,优化酶解条件。确定玉米胚蛋白的最佳酶解条件为:加酶量9 200 IU/g,底物浓度11%,酶解时间188 min,在此条件下测定的还原力为0.229。将玉米胚蛋白多肽添加到面条中,考察其在面条中的抗氧化防褐变能力,并与抗坏血酸的添加效果进行对比。结果表明,玉米胚蛋白多肽粉添加到面条中具有防褐变的作用,添加量为0.9%时对鲜面条褐变速率的抑制作用最强,与添加抗坏血酸的效果相当。此外质构仪分析(TPA)实验结果表明,在面条中添加0.9%的玉米胚蛋白多肽粉,对面条的硬度、弹性有一定程度的改善作用。     

核桃蛋白酶法水解工艺条件研究

研究了核桃蛋白酶法水解的工艺条件,结果表明:蛋白酶种类对核桃蛋白水解作用影响较大,Alcalase 2.4L、Neutrase 0.8L对核桃蛋白水解作用较强;Alcalase 2.4L较适宜的酶解条件为酶与底物浓度比1000U/g,pH 8.0,温度60℃;Neutrase 0.8L较适合的水解条件为酶浓度为2000U/g,pH 6.0,温度45℃;Alcalase 2.4L、Neutrase 0.8L复合酶可以对核桃蛋白进行连续水解,并能提高核桃蛋白的水解度,产物肽链长度趋近于5。     

核桃粕源抗氧化活性肽的酶解制备及活性分析

目的：深度利用核桃粕蛋白。方法：采用分级分离法从核桃粕中提取蛋白质后,分别用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和风味蛋白酶5种蛋白酶对其进行水解,并比较分析胰蛋白酶酶解物（trypsin hydrolysate,TH）、木瓜蛋白酶酶解物（papain hydrolysate,PH）、中性蛋白酶酶解物（dispase hydrolysate,DH）、碱性蛋白酶酶解物（alcalase hydrolysate,AH）和风味蛋白酶酶解物（flavourzyme hydrolysate,FPH）的抗氧化活性;以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和羟自由基清除率为检测指标分析不同浓度AH的体外抗氧化性;采用LC-MS/MS技术鉴定AH中所有肽的序列,并利用PeptideRanker、BIOPEP-UWM数据库和分子对接工具AutoDock1.5.6筛选潜在的核桃抗氧化活性肽;将上述两条肽分别与Keap1蛋白进行计算机模拟分子对接,并利用斑马鱼胚胎氧化损伤模型,对人工合成的两条抗氧化活性肽的抗氧化活性进行分析。结果：5种酶解物中抗氧化活性较好的AH对DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基的最佳清除率分别为（71.56±0.75）%,（60.63±0.45）%,（98.63±0.06）%。LC-MS/MS鉴定并通过计算机分析预测得到两条活性最优的肽,即：ALWPF和PLRWPF;两条抗氧化活性肽均能与Keap1蛋白的活性部位结合,其结合能分别为-9.2,-9.6 kJ/mol。ALWPF和PLRWPF肽处理斑马鱼胚胎的安全质量浓度范围分别为0～50,0～30 μg/mL。结论：从核桃粕中鉴定出两条抗氧化肽,其对斑马鱼胚胎具有保护作用。     

响应面法优化龙须菜蛋白酶解工艺及酶解液的抗氧化活性

为获得高抗氧化活性的龙须菜蛋白酶酶解液,运用响应面(RSM)分析方法对龙须菜蛋白酶解工艺条件进行优化。经单酶筛选,在单因素实验基础上,以亚铁离子螯合率和DPPH自由基清除率为主要指标,水解度为辅助指标,研究酶解时间、p H、酶解温度、底物质量浓度、加酶量对龙须菜蛋白酶解液抗氧化活性和水解度的影响。结果表明:在所选的5种蛋白酶中,复合蛋白酶是龙须菜蛋白酶解的最适用酶;酶解液抗氧化活性的最优酶解条件为酶解时间8.1 h、酶解温度50.1℃、p H7.0、底物浓度10 g/L、加酶量0.1%(0.15 AU/g)。在此条件下,酶解液的亚铁离子螯合率为74.61%,DPPH自由基清除率为47.66%,水解度为17.58%。对比常用抗氧化剂,酶解液在亚铁离子螯合能力方面显著高于0.01%维生素C和0.01%BHA(p<0.05),而在DPPH自由基清除能力和还原能力方面,酶解液低于0.01%维生素C和0.01%BHA(p<0.05)。优化后的龙须菜蛋白酶酶解液具有一定的抗氧化活性。      

酶法水解麦胚蛋白及其产物的抗氧化活性研究

选择碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶5种蛋白酶对麦胚蛋白进行水解,并考察其水解产物的抗氧化活性。结果表明,中性蛋白酶为制备麦胚抗氧化肽的最适蛋白酶,其最佳水解条件为:底物质量分数4%,酶添加量6 000U/g,酶解温度50℃,pH值7.5,水解至270min时抗氧化活性最大。     

酰化和酶水解对菜籽蛋白功能性质和抗氧化活性的影响

研究乙酰化和丁二酰化对菜籽蛋白功能性质和抗氧化活性的影响,以及碱性蛋白酶水解对酰化菜籽蛋白功能性质和抗氧化活性的影响。结果表明,乙酰化和丁二酰化能明显提高菜籽蛋白的水溶性、吸油性和乳化性,但对乳化稳定性和起泡性影响不大,泡沫稳定性略有增加;酰化反应还能提高菜籽蛋白对DPPH自由基的清除率;酶水解酰化菜籽蛋白能显著提高水溶性,同时提高乙酰化菜籽蛋白对DPPH自由基的清除率。     

酶解蛋白制备抗氧化肽研究进展

从蛋白质酶解产物中制备抗氧化活性肽研究受到高度重视,对蛋白质资源开发利用具有重要意义。该文介绍近年来这一领域研究进展。     

大豆蛋白水解度与大豆肽抗氧化力关系研究

通过研究酶解大豆蛋白的水解度与大豆肽的抗氧化力大小,探索大豆蛋白水解度与大豆肽抗氧化力的关系。结果表明,两种组合蛋白酶所水解大豆蛋白的水解度大于其中任一种蛋白酶的水解度,小于两种蛋白酶的水解度之和;组合蛋白酶制备的大豆肽抗氧化力也大于其中任一种蛋白酶制备的大豆肽抗氧化力,小于两种蛋白酶制备的大豆肽抗氧化力之和;大豆肽抗氧化力的大小和大豆蛋白的水解度、单一蛋白酶及组合蛋白酶的种类有关,大豆肽抗氧化力有最佳水解度范围（18%~19%）,大豆蛋白水解度过大或过小时,大豆肽抗氧化力都会下降。     

米糟蛋白酶解制备生物肽及其抗氧化活性的研究

为了高值化利用米糟资源,以米糟蛋白为原料通过酶解法生产一种高效、低毒的天然米糟抗氧化肽。实验结果表明:7种蛋白酶中,中性酶为最佳酶选,其最佳酶解条件为:米糟蛋白质量浓度(S)为10g/100mL,中性酶浓度(E/S,质量分数)为8%,pH为6.0,温度为60℃,时间为30min。在该最佳酶解条件下,米糟生物肽的得率为18.50%,水解度为2.84%,DPPH.(1,2-二苯代苦味肼基自由基)清除率为90.10%。该米糟生物肽具有较强的DPPH和羟自由基清除能力,其IC50值(抗氧化活性为50%时所对应的米糟生物肽质量浓度)分别为1.136、0.169g/L,还具有较强的还原能力和Fe2+螯合能力(IC50值为2.127g/L)。由此得出,米糟蛋白是一种很好的米糟抗氧化肽生产原料,且该生物肽是一种较为理想的天然抗氧化剂产品。     

蓝园鲹制备抗氧化肽酶解工艺的研究

运用响应面(RSM)分析法对酶解蓝园鲹蛋白制备抗氧化肽的工艺进行优化.在单因素的基础上,以还原力和羟基自由基清除率为指标,研究了酶解时间、温度、水料比对 Alcalase2.4 酶解蓝园够蛋白酶解液抗氧化性的影响.结果表明,最大还原力的最优条件为温度 50℃,酶解时间 200 min.水料比为 2.6,此时还原力达到0.640.最大羟基自由基清除率的最优条件为温度 50℃.酶解时间220 min,水料比为 2.2,羟基自由基清除率达到 53.58%.