群体感应抑制剂3,4-二溴-2（5H）-呋喃酮对荧光假单胞菌生物膜形成的抑制作用

为了研究3,4-二溴-2（5H）-呋喃酮（3,4-dibromo-2（5H）-furanone,DF）对荧光假单胞菌生物膜形成的抑制作用。通过在24孔板和硅胶片上构建生物膜模型,CFU计数法测定DF对荧光假单胞菌的最低抑制浓度（Minimum Inhibitory Concentration,MIC）和最低杀菌浓度（Minimum Bacterial Concentration,MBC）以及生物膜生长曲线,在1倍MIC和5倍MIC的DF作用下的荧光假单胞菌生物膜形成率和细菌群集运动能力,并探讨DF对荧光假单胞菌总蛋白合成及多糖含量的影响。结果表明,DF对荧光假单胞菌作用的MIC和MBC值分别为12.5μg/m L和800μg/m L;在DF浓度为1 MIC和5 MIC时,作用于荧光假单胞菌24 h生物膜形成抑制率分别为20.59%±2.91%和99.54%±1.83%,并能明显抑制荧光假单胞菌的群集运动能力,干扰荧光假单胞菌群体感应（Quorum sensing,QS）系统而影响其总蛋白合成及多糖的含量,24 h时5 MIC的DF对荧光假单胞菌总蛋白和菌多糖合成量的抑制率分别为8.04%±0.37%和51.08%±2.71%。本研究对DF影响荧光假单胞菌生物膜形成的原因,DF对荧光假单胞菌生物膜形成的抑制作用及其对QS通路的干扰具有良好的理论和实践参考。      

复合生物保鲜剂对荧光假单胞菌的抑菌活性及作用机理

目的:研究由10.0 g/L壳聚糖、3.0 g/L茶多酚与0.3 g/L溶菌酶组成的复合生物保鲜剂对荧光假单胞菌的抑菌机理。方法:采用平板打孔法确定复合生物保鲜剂对荧光假单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并对抑菌率、抑菌活力、细菌生长曲线、细胞膜完整性、碱性磷酸酶(AKP)含量等指标进行测定,同时结合细菌超微结构观察,综合评价复合生物保鲜剂对荧光假单胞菌的作用效果。结果:复合生物保鲜剂对荧光假单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC)分别为3.3 mg/m L与6.6 mg/m L,其抑菌率分别为33.49%与61.54%,抑菌活力在作用初期效果最佳。结论:随着作用时间的延长,复合保鲜剂对荧光假单胞菌的生长有抑制效果,菌体细胞壁与细胞膜的完整性受到影响,细胞中的AKP量增多。同时,菌体内部的核酸与蛋白质外泄,影响细胞的代谢循环。细菌超微结构观察发现,菌体在扭曲变形的同时,还发生干瘪破裂现象,菌体外膜覆有泡状物,细胞壁发生溶解,细胞质从菌体细胞体内大量渗出,最终导致菌体死亡。     

沙枣果实提取物对常见肠道G~-杆菌的抑制作用

目的:研究沙枣果实提取物对常见革兰氏阴性(G~-)杆菌的抑制作用。方法:采用纸片扩散法测定沙枣果实的提取物对不同浓度的变形杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌的抑菌效果;利用液体倍比稀释法测定沙枣果实提取物对各菌的最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration, MIC)及最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)。结果:沙枣果实提取物对4种受试菌在较低浓度时均有抑菌作用,对大肠杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌、铜绿假单胞菌的MIC分别为115、85、85、85mg.mL~(-1);MBC分别为145、125、115、115mg.mL~(-1)。结论:沙枣果实提取物对较低浓度铜绿假单胞菌、痢疾杆菌、变形杆菌具有一定的抑菌作用。     

草果提取物对大肠杆菌和沙门氏菌抑菌机理研究

文章研究了草果中所含抑菌物质对大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌机理。通过最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)、最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)和生长曲线的测定研究草果抑菌提取物对大肠杆菌和沙门氏菌细胞生长的影响;通过扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)观察细菌细胞微观形态结构的变化;通过测定胞外碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)研究草果抑菌提取物对大肠杆菌和沙门氏菌细胞壁通透性的影响。结果表明,草果提取物对供试菌的生长具有明显抑制作用,大肠杆菌的MIC和MBC值均为0.625mg/mL,沙门氏菌的MIC和MBC值约为1.25mg/mL;草果提取物在作用供试菌8h后,对其细胞结构造成了破坏,使得细胞壁的通透性增加。     

桃金娘果实花色苷提取物对两种假单胞菌生物被膜的抑制

为研究桃金娘果实花色苷提取物对隆德假单胞菌(Pseudomonas lundensis)和荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)生物被膜的抑制作用,采用肉汤稀释法测定了桃金娘果实花色苷提取物对两种假单胞菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度,在亚抑菌浓度下采用结晶紫微孔板染色法测定了桃金娘果实花色苷提取物对两种假单胞菌的抑制作用和粘附情况。结果表明,桃金娘果实花色苷提取物对两种假单胞菌均有一定的抑制作用,对隆德假单胞菌和荧光假单胞菌的最小抑菌浓度分别为1500和1000 mg/mL,在500 mg/mL的亚抑菌浓度下,桃金娘果实花色苷提取物对隆德假单胞菌和荧光假单胞菌生物被膜具有显著抑制效果,能够显著降低两种假单胞菌在接触面上的粘附量(p<0.05)。桃金娘果实花色苷提取物具有开发为隆德假单胞菌和荧光假单胞菌生物被膜抑制剂的潜在价值。     

柠檬烯对荧光假单胞菌抑菌活性及机理研究

为研究柠檬烯对荧光假单胞菌的抑制活性及其抑菌机理,通过最小抑菌浓度(Minimal inhibition concentration,MIC)和生长曲线的测定研究柠檬烯对荧光假单胞菌细胞生长的影响;通过扫描电镜观察细胞结构,测定胞内蛋白含量和二乙酸荧光素(Fluorescein diacetate,FDA)染色实验研究柠檬烯对荧光假单胞菌细胞膜通透性的影响;通过测定膜电位、胞内ATP含量和琥珀酸脱氢酶(Succinic acid dehydrogenase,SDH)活性研究其对荧光假单胞菌能量代谢和三羧酸循环的影响。结果表明,柠檬烯对荧光假单胞菌具有较好的抑菌效果,其MIC值为20 mL/L,添加1×MIC和2×MIC浓度的柠檬烯3 h后膜电位分别下降至34.41和7.33 AU;12 h后SDH酶活性分别减小至11.12和22.69 U/mg。柠檬烯通过破坏荧光假单胞菌的细胞形态和结构,使细胞出现严重的破裂、塌陷和孔洞,从而引起细菌胞内蛋白含量降低,膜电位下降以及胞内ATP含量下降和SDH酶活性减小,从而发挥其抑菌作用。     

丁香酚对腐败希瓦氏菌和荧光假单胞菌的抑制机理

为探讨丁香酚对海产品冷藏过程中优势腐败菌(腐败希瓦氏菌和荧光假单胞菌)的抑制作用及其机制,本实验先测定丁香酚对腐败希瓦氏菌和荧光假单胞菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),然后分别研究了0.5 MIC、1 MIC、2 MIC对腐败希瓦氏菌和荧光假单胞菌生长曲线的影响,通过对比分析丁香酚处理前后细胞的破坏情况,发现细胞外OD_(260 nm)和OD_(280 nm)、钾离子和碱性磷酸酶的水平均上升,细胞内三磷酸腺苷酶活力下降;从丁香酚处理后的扫描电子显微镜图像可看出,完整光滑的菌体出现裂解、粘黏现象,结合傅里叶变换红外光谱所呈现的代表脂质、蛋白质等分子成分官能团的改变,可以得出丁香酚能够破坏细胞壁,并使细胞膜通透性增大、细胞内容物流出,最终导致细胞死亡。     

费菜黄酮对冷却猪肉腐败菌及品质的影响

通过二倍稀释法和牛津杯法确定了费菜黄酮对3种冷却猪肉腐败菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)、最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)和抑菌活性,并研究了不同质量浓度费菜黄酮对猪肉的保鲜效果。结果表明,费菜黄酮对实验菌有不同程度的抑制作用,其中对于气单胞菌的抑制性最强,MIC和MBC分别为0.675、2.5 mg/mL,假单胞菌次之,MIC和MBC分别为1.25、5 mg/mL,乳酸菌抑制性最差,MIC和MBC分别为1.25、10 mg/mL。综合菌落总数和色差指标,选择2 mg/mL作为费菜黄酮对冷却猪肉保鲜的适宜质量浓度。在4℃贮藏条件下,黄酮处理组组织结构、pH值、持水力、挥发性盐基氮值和硫代巴比妥酸值各品质指标均优于对照组。     

豆蔻精油的杀菌活性及其在肉食品中的应用

研究目的是调查豆蔻精油的杀菌活性及其在食品中的应用。本试验中,豆蔻精油对大肠杆菌、单核细胞增生李斯特和金黄色葡萄球菌呈显著的抗菌活性,最小抑制浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)均分别为0.05%和0.1%。对单核细胞增生李斯特菌的MIC和MBC为0.1%和0.2%,肠炎沙门氏菌MIC和MBC均为0.05%。此外,肉制品是人类主要食物和营养的重要来源。通过平板菌落计数法测定了豆蔻精油在猪肉、鸡肉、牛肉中对大肠杆菌生长的抑制作用,并且在猪肉中豆蔻精油对金黄色葡萄球菌也有显著的抑制作用。     

南五味子丙酮提取物对食品腐败细菌的抑制作用

目的:探讨南五味子丙酮提取物对食品腐败菌的抑制作用。方法:以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌等7种菌为供试菌,测定其抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),并研究热处理、pH、紫外光对丙酮提取物抑菌活性的影响。结果:质量浓度为100mg/mL的丙酮提取物对供试菌的抑菌圈直径均大于12mm。丙酮提取物对供试菌的MIC值和MBC值:金黄色葡萄球菌100、150mg/mL,铜绿假单胞菌100、150mg/mL,大肠杆菌100、150mg/mL,枯草芽孢杆菌50、100mg/mL,蜡样芽孢杆菌50、100mg/mL,乙型副伤寒沙门氏菌100、150mg/mL,变形杆菌50、100mg/mL。121℃、30min热处理对该提取物抑菌活性无影响。当pH>4时对其抑菌活性有明显的影响。紫外光照射对其抑菌活性有一定的影响。结论:南五味子丙酮提取物对7种食品腐败细菌均有较好的抑制作用。     

荷叶黄酮提取及对肉类腐败菌抑菌活性研究

研究乙醇浓度、提取温度、料液比和提取时间对荷叶黄酮提取得率的影响,通过正交试验优化了提取荷叶黄酮的最佳工艺条件。结果表明,50%(体积分数)乙醇,提取温度为70℃,料液比为1∶40(m/v),提取时间1.5 h,荷叶黄酮的得率为0.87%。测定了荷叶黄酮对5种肉类腐败菌的抑菌效果,最小抑菌浓度实验结果显示:荷叶黄酮对大肠杆菌、荧光假单孢菌、铜绿假单孢菌、酵母菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为5.30、6.26、6.26、5.30 mg/100 m L,对大肠杆菌、荧光假单孢菌、酵母菌的最低杀菌浓度(MBC)分别为5.30、6.26、6.26 mg/100 m L。     

喙花姜精油体外抑菌活性及其稳定性的研究

采用微波辅助水蒸气蒸馏法提取了喙花姜精油,用滤纸片法研究了其对5种常见肉制品致病菌和腐败菌的抑菌活性,平板涂布法测定了其最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),并分析了pH、温度和NaCl对精油稳定性的影响。结果表明:喙花姜精油对5种受试菌有不同的抑制作用,对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌的MIC最低,为3.44mg/mL,铜绿假单胞菌的MIC最高,达到55mg/mL,而对大肠埃希氏菌的MBC为6.88mg/mL,对铜绿假单胞菌的MBC为110mg/mL,表明大肠埃希氏菌对喙花姜精油最敏感,喙花姜精油对铜绿假单胞菌的抑菌效果相对较差。喙花姜精油在酸性条件下表现出较强的抑菌活性,pH为6到8时,5种受试菌的抑菌圈都表现出先减小后增大的趋势;喙花姜精油具有良好的热稳定性,温度对其影响不显著;NaCl可增加喙花姜精油的抑菌效果。     

迭鞘石斛提取物对四种致病菌的抑制作用

研究迭鞘石斛提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌及沙门菌四种致病菌的抑制作用。采用96孔板微量肉汤稀释法以及平板培养法测定其最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的抑菌和杀菌作用均较佳,MIC和MBC浓度均为12.5mg/mL;而水提取物则对小肠结肠炎耶尔森菌表现出较强的抑制作用,MIC为6.3mg/mL,MBC为50.0mg/mL。迭鞘石斛提取物的抗菌作用值得进一步开发利用。     

壳聚糖复合保鲜剂对荧光假单胞菌的抑菌活性

该实验以质量分数1.5%壳聚糖、0.14%ε-聚赖氨酸、0.15%D-异抗坏血酸钠组成复合保鲜剂,以荧光假单胞菌为实验菌株,探究壳聚糖复合保鲜剂对水产品中的优势菌的抑菌性能和机理。实验方法：通过测定最小抑菌浓度(MIC)、抑菌圈、细菌生长曲线考察保鲜剂对荧光假单胞菌的抑菌活性,测定OD₂₆₀值、ATP酶和AKP酶活性的变化,细胞超微结构(SEM)和SDS凝胶电泳法研究保鲜剂的抑菌机制。结果表明：壳聚糖复合保鲜剂对荧光假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)为2.24 mg/m L。壳聚糖复合保鲜剂有着显著的抑菌活性,壳聚糖复合保鲜剂导致菌体的细胞壁膜通透性增大、完整性被破坏,菌体内ATP和AKP酶活性被抑制,显著低于(P<0.05)对照组;SDS凝胶电泳表明壳聚糖复合保鲜剂使菌蛋白条带颜色变浅且造成部分蛋白条带消失;细菌超微结构(SEM)显示壳聚糖复合保鲜剂使菌体发生变形破裂,内容物大量流出,导致菌体死亡。结论：该研究证明了壳聚糖复合保鲜剂良好的抑菌性能,研究了保鲜剂对荧光假单胞菌的抑菌机理,为水产品可食性涂膜保鲜的研发提供理论支持。     

马铃薯胰蛋白酶抑制剂的抑菌活性

本研究探讨了马铃薯胰蛋白酶抑制剂（PTI）抑菌活性及其抑菌机理。采用滤纸片扩散法测定抑菌圈直径,微量二倍稀释法测定最低抑菌浓度（MIC）、最低杀菌浓度（MBC）,以此评价PTI的抑菌性。通过扫描电镜观察并测定胞膜通透性、胞膜完整性、胞内活性氧含量及对细菌蛋白酶的抑制率等实验,探讨了PTI的抑菌机理。结果表明：PTI对枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和铜绿假单胞菌有较明显的抑制作用,其抑菌圈直径分别为12.56 mm、12.35 mm和11.76 mm,MIC为1.88~3.75 mg/mL,MBC均为3.75 mg/mL。PTI破坏了菌体细胞的形态,导致菌悬液中相对电导率升高和核酸的泄漏,影响了细菌的膜通透性;通过荧光显微镜观察,1 MIC的PTI使菌体胞膜的完整性遭到破坏并促进胞内ROS的产生,造成了菌体氧化损伤;PTI对菌体蛋白酶的活性表现出一定的抑制作用。通过实验得出PTI可能通过这种多靶点协同增效作用达到其抑菌效果。     

油菜蜂花粉中抑菌活性成分的分离纯化和结构鉴定

以对枯草芽孢杆菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的抑菌能力为活性跟踪指标,以最小抑菌质量浓度(MIC)和最小杀菌质量浓度(MBC)为评价指标,从油菜蜂花粉水提物中分离得1个化合物,用波谱学进行结构解析,鉴定为山奈酚,其抑菌效果显著,是油菜蜂花粉抑菌活性成分,可作为植物源抗菌剂,提高油菜蜂花粉的应用价值。     

响应面法优化槟榔挥发油提取工艺及其抑菌活性研究

采用水蒸气蒸馏法提取槟榔挥发油。以挥发油得率为指标，在单因素试验的基础上通过响应面法优化提取工艺，并研究挥发油对4种供试菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明：最佳提取工艺为料液比1∶9.5(g/mL)、浸泡时间3 h、提取时间10.5 h,在此条件下挥发油得率为0.040 9%±0.000 2%;槟榔挥发油对金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌的MIC分别为15.63、31.25、31.25、62.5 mg/mL,对4种供试菌的MBC均超过250 mg/mL。     

乳酸对三种食源性致病菌的抑菌及杀菌作用

选用金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、埃希氏大肠杆菌3株常见的食源性致病菌,用于测定乳酸的抑菌效果、最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC),并研究乳酸对3株致病菌细胞对数期代时的影响,同时研究不同浓度乳酸对大肠杆菌膜电位的影响.试验结果表明:乳酸对3株食源性致病菌均有不同程度的抑制作用,并得出最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC),分别是金黄色葡萄球菌MIC 1.8 mg/mL,MBC3.6 mg/mL;蜡样芽孢杆菌MIC 3.6 mg/mL,MBC 7.2 mg/mL;大肠杆菌MIC 0.9 mg/mL,MBC 1.8 mg/mL;乳酸在最小抑菌浓度下显著(p≤0.05)延了3株食源性致病菌对数生长期的代时.大肠杆菌对乳酸的敏感性较强,代时增加128%.采用流式细胞仪测定大肠杆菌的膜电位.发现乳酸对大肠杆菌细胞膜电位有一定的影响,随着乳酸浓度的增加,细胞膜电位逐渐增加,导致细胞的超极化程度越来越严重直至细胞死亡.     

牛至精油对荧光假单胞菌的抑制作用及其对冷藏三文鱼品质的影响

为研究牛至精油对三文鱼特定腐败菌之一荧光假单胞菌的抑制效果及其对冷藏三文鱼品质的影响,分别测定了牛至精油对荧光假单胞菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)、细菌生长曲线、细菌细胞膜流动性、细菌培养液电导率、碱性磷酸酶活力并观察细胞微观结构,分析了牛至精油浸泡处理对三文鱼冷藏过程中对感官得分、菌落总数、总挥发性盐基氮含量、生物胺含量及水分迁移情况,并以未加牛至精油处理的样品为对照。结果表明:牛至精油对荧光假单胞菌的MIC为0.062 5%(体积分数),与对照组相比,MIC牛至精油处理组荧光假单胞菌培养液电导率上升,细菌失去原有的细胞形态,细胞膜的荧光强度更高,说明牛至精油处理破坏了荧光假单胞菌细胞膜,使细胞内容物外渗,降低了荧光假单胞菌对细胞膜流动性的调节能力。同时研究了MIC牛至精油对接种有荧光假单胞菌的冷藏三文鱼的保鲜效果,结果显示,贮藏末期(12 d)牛至精油处理组菌落总数较对照组降低1.34(lg(CFU/g)),总挥发性盐基氮含量较对照组降低7.48 mg/100 g,腐胺和尸胺含量较对照组分别降低48.5%和33.5%,而且牛至精油能抑制不易流动水向自由水转变,对抑制假单胞菌生长和保持三文鱼品质具有良好效果。     

肉桂提取物对铜绿假单胞菌生物膜产生的抑制作用研究

为研究肉桂提取物在最小抑菌浓度(MIC)以下对铜绿假单胞菌PAO1生物膜产生的抑制作用,首先以紫色杆菌CVO26为初筛菌,研究了肉桂提取物对其紫色素产生的抑制作用,在此基础上利用酶标仪对铜绿假单胞菌PAO1产生的生物膜进行了定量测定,利用光学显微镜对其生物膜概貌进行观察。结果表明:肉桂提取物在MIC以下对紫色杆菌CVO26紫色素的产生量以及铜绿假单胞菌PAO1生物膜的产生量具有抑制作用,且抑制率随着肉桂提取物浓度的升高而升高;对PAO1形成的生物膜概貌特征也具有明显的影响。因此,肉桂提取物在MIC以下对铜绿假单胞菌PAO1生物膜的形成具有抑制作用。