UHPLC-DAD-ESI-MS/MS法分析紫山药块根和茎叶中酚类物质

本文采用微波辅助法,以80%甲醇作为溶剂提取经冻干后紫山药块根和地上茎叶中的多酚类物质,提取物经超高效液相色谱分离、电喷雾串联三重四级杆质谱正和负离子方式检测分析。根据液相保留时间、紫外吸收、相对分子质量和二级碎片离子等信息,结果表明,紫山药块根和茎叶中酚类物质主要为酚酸、花色苷及黄酮类化合物。分析得到的29种酚类化合物中,5-O-咖啡酰奎宁酸、阿魏酰奎宁酸(tR:12.289)、迷迭香酸、芦丁和槲皮素为块根和茎叶共有组分,块根中另含有芥子酸、芥子酸葡萄糖苷、丁香酸衍生物、香豆酸衍生物、阿魏酸衍生物、芥子酸二葡萄糖苷和花色苷等11种酚类物质。茎叶中除5种共有组分,还含有咖啡酸、咖啡酰奎宁酸甲酯、咖啡酰莽草酸、对香豆酰奎宁酸、香豆酰奎宁酸甲酯、山奈酚-3-O-芦丁糖苷与迷迭香酸甲酯等13种酚类化合物。     

木槿花瓣中的总黄酮成分及抗氧化能力分析

为阐明木槿花瓣中总黄酮的成分及其抗氧化性,本研究利用液质联用技术,通过DPPH、ABTS+自由基清除实验,对木槿花瓣中的总黄酮成分及抗氧化能力进行分析。结果表明:木槿花瓣中含有芹菜素-C-二葡萄糖苷、芹菜素-7-O-芸香糖苷、牡荆苷、山奈酚-O-六碳糖-C-六碳糖苷、圣草酚-7-O-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-丙二酰葡萄糖苷-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、麦黄酮-O-丙二酰基-己糖苷、木犀草素-7-O-6-丙二酰基半乳糖苷这9种黄酮类化合物;‘红心’、‘紫色法国酒馆’、‘红色法国酒馆’、‘蓝莓冰沙’和‘牡丹’5个品种的木槿花均具有较好的抗氧化性,以DPPH自由基清除率和ABTS+自由基清除率为指标其等效Trolox当量分别为35.51、49.13、50.28、49.99、49.34 mg Trolox/g（干重）和20.23、27.83、44.11、29.79、35.53 mg Trolox/g（干重）;在影响抗氧化能力因素方面,总黄酮含量是影响木槿花抗氧化性的主要因素,在具体成分中牡荆苷、山奈酚-O-六碳糖-C-六碳糖苷、圣草酚-7-O-葡萄糖和麦黄酮-O-丙二酰基-己糖苷是影响木槿花抗氧化性主要的总黄酮成分。本研究表明木槿花中含有多种生物活性成分和抗氧化能力。     

黑果枸杞中一种花色苷类物质的分离纯化及抗氧化活性

以黑果枸杞为原料,利用ÄKTA Purifier蛋白纯化系统分离纯化得到1 种纯度97%以上的花色苷物质。通过质谱和核磁共振分析,鉴定该花色苷物质为矮牵牛素3-O-芸香糖（反式-香豆酰基）-5-O-葡萄糖苷（petunidin3-O-[rhamnopyranosyl-(trans-p-coumaroyl)]-5-O-(β-D-glucopyranoside)）。体外抗氧化活性分析表明该花色苷物质具有显著的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和超氧阴离子自由基（O2 － ·）清除能力。     

HPLC-Q-TOF-MS-MS测定桑椹中多酚类物质

采用高效液相色谱与四极杆飞行时间串联质谱（high performance liquid chromatography of quadrupole time of flight-tandem mass spectrometry,HPLC-Q-TOF-MS-MS）联用技术定性检测桑椹中多酚类物质,新鲜桑椹样品经体积分数80%丙酮溶液超声辅助提取15 min后,采用C18固相萃取小柱分离纯化,纯化后的样品进行质谱鉴定。采用HPLC-Q-TOF-MS-MS对多酚进行分析：初步鉴定了桑椹中存在14 种多酚类物质,主要以酚酸、花色苷和黄酮的形式存在。其中6 种酚酸：3-O-咖啡酰奎宁酸、4-O-咖啡酰奎宁酸、二聚绿原酸、二聚4-O-咖啡酰奎宁酸、绿原酸顺式异构体、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸。4 种花色苷：飞燕草-3-半乳糖苷、飞燕草-3-葡萄糖苷、矢车菊-3-葡萄糖苷、矢车菊-3-芸香糖苷;3 种黄酮：芦丁、鞣花酸己糖苷和槲皮素3-O-（6’-O-丙二酰）葡萄糖苷,1 种白藜芦醇衍生物。HPLC-Q-TOF-MS-MS可以鉴定出桑椹的多酚类物质。     

干燥温度对橙皮干燥动力学、酚类物质及抗氧化特性的影响

本文研究热风干燥温度(50,60,70,80,90,100℃)对橙皮的干燥动力学。通过超高效液相色谱法与分光光度法研究其对酚类物质与抗氧化能力的影响,结果表明:橙皮的干燥过程分为升速过程和降速过程,干燥温度升高,干燥时间显著缩短。与冷冻干燥相比,热风干燥温度50~80℃未引起橙皮中总酚和总黄酮含量的显著变化,而100℃处理其总酚和总黄酮含量均显著增加,分别增加7.60%和5.87%。随着干燥温度的升高,橙皮清除DPPH自由基能力逐渐升高,100℃热风干燥的橙皮清除DPPH自由基能力为8.84 mg Trolox/g DW,比冷冻处理组高6.23%;50℃干燥处理橙皮的清除ABTS+能力最低(25.57 mg Trolox/g DW),当热风温度从60℃升至90℃时,橙皮清除ABTS+自由基能力并无显著差异变化(P0.05),而100℃热风干燥橙皮的清除能力最高(28.04 mg Trolox/g DW),显著高于其余温度处理组(P0.05)。高温处理(100℃)导致橙皮中没食子酸、香草酸、咖啡酸、阿魏酸、p-香豆酸、橙皮苷和芸香柚皮苷含量显著增加,而原儿茶酸、新绿原酸、圣草次苷和香蜂草甙含量显著降低。橙皮中其余黄酮类物质含量未发生显著变化。     

高效液相色谱-串联质谱测定砀山酥梨中的酚类物质

本文研究了高效液相色谱-电喷雾串联质谱定性、定量检测砀山酥梨及其制品中的酚类物质。样品中的酚类物质在70min内得到分离,酚类物质由色谱的保留时间、质谱信息和参考文献确定。质谱检测在负离子模式下,利用全扫描模式、多反应检测模式和中性丢失模式进行。本研究在砀山酥梨中共检出酚类27种,主要酚类物质是绿原酸,含量为180mg/L,其次为熊果苷、没食子酸、咖啡酸、咖啡奎宁酸、表儿茶素、儿茶素、柚(皮)苷、芦丁、槲皮素-葡萄糖苷、槲皮素-半乳糖苷、槲皮素-鼠李糖苷、香豆酸-葡萄糖苷、槲皮素-戊糖苷、鼠李糖素-葡萄糖苷、槲皮素等。     

高效液柑色谱-串联质谱测定砀山酥梨中的酚类物质

本文研究了高效液相色谱．电喷雾串联质谱定性、定量检测砀山酥梨及其制品中的酚类物质。样品中的酚类物质在70min内得到分离，酚类物质由色谱的保留时间、质谱信息和参考文献确定。质谱检测在负离子模式下，利用全扫描模式、多反应检测模式和中性丢失模式进行。本研究在砀山酥梨中共检出酚类27种，主要酚类物质是绿原酸，含量为180mg／L，其次为熊果苷、没食子酸、咖啡酸、咖啡奎宁酸、表儿茶素、儿茶素、柚（皮）苷、芦丁、槲皮素．葡萄糖苷、槲皮素-半乳糖苷、槲皮素-鼠李糖苷、香豆酸-葡萄糖苷、槲皮紊-戊糖苷、鼠李糖素-葡萄糖苷、槲皮索等。     

桑葚、甘蔗糖蜜多酚的成分鉴定及其复配物的抗氧化活性

为探索酚类提取物及其复配物的协同增效作用,以桑葚和甘蔗糖蜜多酚作为研究对象,分别测定其总酚、黄酮含量及酚类组成,基于单一提取物的总酚含量按一定配比制得复配物,评价抗氧化活性。结果表明,桑葚游离多酚（MFP）占桑葚总酚含量的90.3%,为677.62 mg没食子酸当量（Gallic Acid Equivalent,GAE）/100 g,黄酮含量为736.65 mg芦丁当量（Rutinum Equivalent,RE）/100 g,共检测出原儿茶酸、3,4-二羟基苯丙酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、矢车菊素3-O-葡萄糖苷和芦丁8种多酚物质,其中矢车菊素3-O-葡萄糖苷含量占92.6%。甘蔗糖蜜多酚（SMP）总酚含量为339.69 mg GAE/100 g,总黄酮含量为314.61 mg RE/100 g,主要单体包括没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、芦丁和表儿茶素9种多酚物质。在0~10 mg/mL的浓度范围内SMP、MFP及其复配物具有良好的抗氧化活性且呈现量效关系。同时,两种复配物的抗氧化活性优于SMP和MFP,其中中效原理计算复配物DPPH自由基清除能力的0.25 IC50、0.5 IC50、0.75 IC50、1 IC50、1.25 IC50、1.5 IC50的联合作用指数CI分别为0.73、0.85、0.94、0.91、0.89和0.90,均小于1,表明桑葚和甘蔗糖蜜多酚复配物具有协同抗氧化作用。     

青梅酚类物质在体外模拟消化过程中生物接受率和抗氧化活性的变化

该研究采用UPLC-MS/MS和INFOGEST 2.0体外静态模拟胃肠道消化模型，分析青梅在消化过程中酚类物质释放量和抗氧化活性的变化，以期探究青梅多酚的消化情况。结果表明，在青梅中共鉴定出10种单体物质，包括7种酚酸和3种黄酮。其中，新绿原酸、表儿茶素、异阿魏酸和p-香豆酸是青梅多酚的主要单体物质。青梅多酚含量为(10.72±0.23)mg GAE/g DW,ABTS和DPPH抗氧化值分别为(16.03±1.00)和(14.65±1.40)mg TE/g DW。青梅多酚的生物可接受率为9.33%。其中，对羟基苯甲酸的生物可接受率(63.20%)最高，其次为芦丁(21.93%)和p-香豆酸(8.14%)。青梅总酚含量、单体酚含量和抗氧化值在体外消化过程中均出现显著下降(P<0.05)。此外，ABTS和DPPH抗氧化值与总酚含量存在显著正相关。其中，原花青素B1、p-香豆酸、阿魏酸和芦丁等单体物质可能是青梅抗氧化能力的主要有效物质。     

金桂和丹桂抗氧化活性比较研究

为进一步研究开发桂花资源及其综合利用价值,以采摘和市售金桂和丹桂为研究对象,采用DPPH、ABTS及FRAP法评价桂花水提物的抗氧化活性,同时测定桂花中总黄酮、总酚含量,并通过高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS)法分析桂花中绿原酸、毛蕊花糖苷、阿魏酸、槲皮素4种酚类物质。结果表明,金桂的DPPH自由基清除力、ABTS自由基清除力及FRAP总还原力均较强,且总黄酮与总酚含量均高于丹桂;采摘金桂和丹桂总黄酮、总酚及4种酚类物质含量均高于市售同品种桂花,其中,毛蕊花糖苷和绿原酸含量较高;总黄酮、总酚及4种酚类物质,尤其是毛蕊花糖苷、槲皮素含量均与其抗氧化活性呈较显著正相关。研究表明桂花具有较强抗氧化活性是多种酚类物质共同参与的结果,为金桂和丹桂功能性食品的开发及资源的综合利用提供一定理论参考。     

荸荠皮总黄酮的纯化及其抗氧化活性研究

利用大孔吸附树脂纯化荸荠皮总黄酮,探讨总黄酮的纯化条件,并通过总抗氧化性能试验、ABTS试验和DPPH试验评价了总黄酮抗氧化活性。试验结果表明,用乙醇水溶液梯度洗脱D101大孔吸附树脂,获得纯度高、抗氧化活性好的荸荠皮总黄酮,黄酮收率为58.52%,纯度为70.64%。所得总黄酮具有良好的还原能力,为0.60 mmol TE(Trolox当量)/g,和良好的ABTS·+、DPPH自由基清除活性,IC50分别为1.86、0.49 mmol TE/g,其中ABTS·+自由基清除性能均大于对照物Trolox和芦丁,DPPH自由基清除性能大于芦丁。     

发芽对小麦苗酚类物质及抗氧化能力的影响

为研究发芽对小麦苗酚类物质含量及其抗氧化能力的影响，探讨了5个品种小麦苗在不同发芽阶段下的芽苗生长状况、总酚含量及酚类物质合成关键酶苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase, PAL)、肉桂酸-4-羟化酶(cinnamic acid 4-hydroxylase, C4H)和4-香豆酸辅酶A连接酶(4-coumaric acid CoA ligase, 4CL)活性及抗氧化能力的变化。结果表明，发芽显著提高了小麦苗酚类物质合成关键酶活力，5个品种小麦苗总酚含量均有不同程度的提高，不同品种小麦苗差异较大，其中发芽6 d时，5个品种中秋乐168酚类物质含量最高，为740.72 mg GAE/100 g DW。小麦苗ABTS阳离子自由基和DPPH自由基清除能力也随发芽时间的延长而显著提高。相关性分析表明，总酚含量与抗氧化能力之间存在显著相关性(P<0.05)。综上所述，发芽可激活小麦苗酚类物质合成关键酶，显著提高小麦苗酚类物质含量及抗氧化能力，且酚类物质的积累是提高抗氧化能力的重要条件。该研究结果可为将小麦苗研发成富含酚类物质等功能成分的食品提供理论基础。     

贵州主栽蓝莓品种活性成分及其抗氧化活性评价

为了解贵州主栽蓝莓品种果实中活性成分含量及其综合抗氧化活性,以贵州规模化种植的粉蓝、圆蓝、巴尔德温和灿烂为试材,测定其9种酚类组分含量、多酚、总黄酮、花色苷,并用FRAP法、总还原力(TRAP)、DPPH法和ABTS法开展体外抗氧化活性评价,采用皮尔森相关性分析对4个品种各项指标进行分析。结果显示:没食子酸、表儿茶素、芦丁、p-香豆酸、槲皮素、儿茶素、鞣花酸、绿原酸、阿魏酸是供试蓝莓果实中的酚类成分较高,4个品种蓝莓果实中活性成分含量差异显著(P0.05),粉蓝中没食子酸、阿魏酸和总黄酮含量最高,圆蓝中绿原酸、鞣花酸和芦丁含量最高,巴尔德温中槲皮素和花色苷含量最高,灿烂果实中儿茶素、表儿茶素、p-香豆酸和总酚含量最高;4个品种蓝莓果实的抗氧化活性差异显著(P0.05),灿烂的抗氧化活性指数最高;蓝莓果实中不同活性成分对抗氧化活性差异显著(P0.05),绿原酸含量对FRAP值具有较强贡献,阿魏酸、多酚和总黄酮含量对TRAP值的贡献极强,没食子酸含量对DPPH值的贡献极强,花色苷含量对ABTS值的贡献较强,抗氧化活性指数(ACI)与表儿茶素和p-香豆酸含量呈现极其显著的正相关(P0.01)。     

紫甘薯茎叶中绿原酸及异绿原酸对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

本实验通过高速逆流色谱从紫甘薯茎叶中制备分离得到绿原酸(1)、4,5-O-咖啡酰基奎宁酸(2,异绿原酸C)、3,5-O-咖啡酰基奎宁酸(3,异绿原酸A)及3,4-O-咖啡酰基奎宁酸(4,异绿原酸B)等四个高纯度天然化合物,并以4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物分别测定了四个化合物及紫甘薯茎叶提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。结果显示上述4个化合物及紫甘薯茎叶粗提物抑制α-葡萄糖苷酶的IC50值分别为:7.556μg/mL、1.419μg/mL、0.209μg/mL、9.339μg/mL和5.371μg/mL,均远远低于阳性对照阿卡波糖的IC50(355.4μg/mL),而进一步的酶抑制反应动力学分析结果显示化合物及提取物对α-葡萄糖苷酶表现为竞争性抑制类型。试验表明紫甘薯茎叶提取物具有显著的α-葡萄糖苷酶抑制作用,为甘薯茎叶资源作为降糖保健品或药品开发提供理论依据。     

百合花瓣酚类物质及其抗氧化活性的分析

目的：研究3个栽培百合品种(“索邦”、“西伯利亚”及“黄天霸”)和岷江百合花瓣的酚类物质及抗氧化活性。方法：测定4类百合花瓣的酚类物质及15种单体酚含量,并通过测定5个抗氧化指标(ABTS+·、DPPH自由基、羟自由基(·OH)的清除能力,铜离子还原能力以及金属螯合能力对其抗氧化活性进行评价。结果：花瓣酚类物质含量由高到低次序为：“索邦”＞“西伯利亚”＞“黄天霸”＞岷江百合。其中单体酚的种类也有所不同,但均含有儿茶素、飞燕草素、表儿茶素、二氢杨梅酮、芦丁、香豆酸、二氢槲皮素、山奈酚。4类百合花瓣酚类物质对ABTS+·、DPPH 自由基、·OH均有较好的清除效果,对铜离子均有较强的还原能力以及良好的金属螯合能力。结论：4类百合花瓣均适合作为天然抗氧化材料进行开发应用。     

草果多酚物质提取及LC-MS/MS分析

对提油后的草果粉末进行了多酚提取工艺优化,多酚成分分析及抗氧化活性研究。在单因素实验的基础上,选取提取时间、料液比、乙醇浓度、提取温度进行了四因素三水平的Box-Behnken中心组合研究,运用Design Expert8.06软件对实验数据进行分析;利用LC-MS/MS对多酚物质进行定性;通过DPPH自由基清除法和ABTS自由基清除法检测了草果多酚的抗氧化活性。实验结果表明,草果多酚最佳提取工艺条件为:提取时间150 min、料液比1:30 g/mL、乙醇浓度60%、提取温度67℃、多酚提取得率为9.69%;同时,从草果中检测出6种（原儿茶酸、对羟基苯甲酸、香草酸、芦丁、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、3,5-二-C-β-D-吡喃葡萄糖基根皮素）文献已报道的多酚类物质和4种（龙胆酸、原花青素B2、金丝桃苷、木樨草素-7-O-β-D-葡萄糖苷）文献未报道的多酚类物质;该草果多酚具有一定的DPPH、ABTS自由基清除能力,IC50值分别为42.46μg/mL和85.47μg/mL,且多酚浓度与其抗氧化活性正相关。      

非水相酶促合成不同链长的对香豆酸酯及其自由基清除能力

酶促酯交换反应常用于改善酚酸的亲脂性。本研究采用酶促酯交换策略,将脂肪酸链以羧基的形式引入对香豆酸中,成功地在非水介质中合成了一系列新的对香豆酸衍生物。在最佳反应条件下,脂肪酶Nov.435 40 mg/m L,溶剂为吡啶:环己烷=1:9,底物摩尔比=1:10,温度50℃,转速180 r/min,对香豆酸甲酯的转化率可达98%。进一步的研究表明,20μM时p-CA对DPPH自由基(醇溶体系)的清除活性为56.34%,对香豆酸月桂酯、对香豆酸癸酯、对香豆酸辛酯、对香豆酸己酯、对香豆酸丁酯和TBHQ在相同浓度下对DPPH自由基的清除活性分别为73.91%、70.32%、68.90%、60.62%、43.65%和67.51%。其中,对香豆酸月桂酯的DPPH自由基清除活性明显高于p-CA和TBHQ,但低于Trolox。结论:非水相酶促合成的不同链长对香豆酸酯具有良好的清除自由基能力。因此,合成的具有不同抗氧化活性的酯类衍生物有望应用于不同的食品、药物和化妆品体系中,为酯类衍生物的合成提供有益的指导。     

黄金茶醇提取物成分及抗氧化活性的研究

研究了黄金茶醇提取物组成及体外抗氧化活性。采用乙醇提取、石油醚和乙酸乙酯萃取后得粗提物,并通过液相-质谱联用技术对其结构进行了初步鉴定,分析了醇提物体外抗氧化活性。结果表明,黄金茶醇提取物由绿原酸、对香豆酰奎尼酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、阿魏酸、圣草酚-O-己糖苷和木犀草苷所组成。黄金茶醇提物具有较好的体外抗氧化能力:在相同的浓度下,相对于Vc来说,对DPPH自由基具有更好的清除能力;对羟自由基有较好的清除能力,随浓度的增大,其清除能力逐渐增大;对超氧阴离子具有较强清除能力,浓度为250μg/m L时,清除率可达89.80%;在50~100μg/m L浓度下,对ABTS+自由基的清除能力比Vc效果更好,在100~250μg/m L浓度下,两者的清除效果相当;相同浓度下,醇提物的还原能力比Vc稍弱。     

野地瓜茎正丁醇萃取物中主要抗氧化活性成分的筛选

探清野地瓜茎不同极性萃取物的抗氧化活性,筛选并鉴定抗氧化活性较高萃取物的主要化学成分。通过系统溶剂法对野地瓜茎提取物进行萃取,获得石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇相提取物及剩余上层被萃取水相提取物;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力、2,2’-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力和总还原力(TRPA)试验综合评价其不同极性萃取物的抗氧化活性;结合在线高效液相色谱—质谱—二苯基三硝基苯肼(HPLC-DAD-ESI/MSn-DPPH)快速筛选并鉴定活性较高萃取物中的抗氧化活性成分。结果表明:正丁醇萃取物具有较强的抗氧化活性(P<0.05),随着质量浓度的增大呈明显的剂量依赖效应,正丁醇萃取物对DPPH自由基、ABTS自由基清除能力的半数抑制浓度(IC₅₀)分别为(23.28±0.21),(76.30±1.13)μg/mL。经液相色谱、质谱、文献报道和对照品的综合分析,从野地瓜茎正丁醇萃取物中筛选的3种抗氧化活性化合物为5-O-咖啡酰奎宁酸、3-O-咖啡酰奎宁酸和4-O-咖啡酰奎宁酸。     

草果多酚物质提取及LC-MS/MS分析

对提油后的草果粉末进行了多酚提取工艺优化,多酚成分分析及抗氧化活性研究。在单因素实验的基础上,选取提取时间、料液比、乙醇浓度、提取温度进行了四因素三水平的Box-Behnken中心组合研究,运用Design Expert8.06软件对实验数据进行分析;利用LC-MS/MS对多酚物质进行定性;通过DPPH自由基清除法和ABTS自由基清除法检测了草果多酚的抗氧化活性。实验结果表明,草果多酚最佳提取工艺条件为:提取时间150 min、料液比1:30 g/mL、乙醇浓度60%、提取温度67℃、多酚提取得率为9.69%;同时,从草果中检测出6种(原儿茶酸、对羟基苯甲酸、香草酸、芦丁、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、3,5-二-C-β-D-吡喃葡萄糖基根皮素)文献已报道的多酚类物质和4种(龙胆酸、原花青素B2、金丝桃苷、木樨草素-7-O-β-D-葡萄糖苷)文献未报道的多酚类物质;该草果多酚具有一定的DPPH、ABTS自由基清除能力,IC50值分别为42.46μg/mL和85.47μg/mL,且多酚浓度与其抗氧化活性正相关。