一次性使用导尿管的生物学评价体系中细胞毒性试验方法的研究

目的:建立一次性使用导尿管的生物学评价体系中细胞毒性的试验及评价方法。方法:参考GB/T14233.2-2005和ISO10993-5的试验方法指导原则,将一次性使用导尿管浸提液与L929细胞培养接触,采用MTT(四唑盐)法量化细胞毒性,计算相对增殖率(RGR)。对一次性使用导尿管进行了细胞毒性试验。并对两种方法的试验结果进行比较。结果:不同材料的一次性使用导尿管对L 929细胞显示出不同的细胞毒性。其中硅胶与聚氯乙烯材质的导尿管的细胞毒性均小于或等于1级;而天然乳胶与硅橡胶的细胞毒性均达到4级。结论:本研究建立的细胞毒性试验方法和评价标准可用于一次性使用导尿管产品的生物学评价体系中细胞毒性的试验与评价。     

几种儿童牙膏体外细胞毒性研究

使用体外培养的人口腔黏膜成纤维细胞,通过MTT法,测定了几种市售普通儿童牙膏和可吞咽儿童牙膏浸提液的细胞相对增殖率(RGR),并进行细胞毒性分级,同时与成人牙膏的细胞毒性进行比较,从而反映这些牙膏对口腔黏膜的影响。结果表明:可吞咽儿童牙膏和普通儿童牙膏的细胞毒性相对较小;成人牙膏细胞毒性较大,与儿童牙膏比较细胞相对增殖率有显著性差异(P0.05),可能会对儿童的口腔黏膜造成刺激。     

MTT法评价硫酸酯化魔芋多糖血液灌流吸附剂的体外细胞毒性

选用了L929小鼠成纤维细胞为靶细胞,用硫酸酯化魔芋多糖血液灌流吸附剂不同浓度的浸渍液,通过体外细胞培养法进行细胞毒性检测,于1 d、3 d、5 d测其吸光度(OD)值,计算细胞的相对增殖率,用6级毒性分类法评价。培养期各组细胞大量增殖,毒性级为0~1级,各实验组与阴性对照组比较无显著性差异(P>0 05);与阳性组比较有显著性差异(P<0 05)。说明硫酸酯化魔芋葡甘聚糖血液灌流吸附剂是一种具有良好细胞生物相容性材料。     

一种糖基二苯甲酮类聚合物紫外线吸收剂的合成与性能

以2,4-二羟基二苯甲酮(UV-0)为原料,与丙烯酰氯反应得到2-羟基-4-丙烯酸酯基-二苯甲酮(HAB),然后与糖单体3-O-丙烯酰基-1,2,5,6-O-双异丙叉-α-D-葡萄糖(OAIG)聚合,制备了poly(HAB-OAIG)(PHIG),最后PHIG经三氟乙酸水解得到了poly(HAB-co-3-O-烯丙基酰氯-α-D-葡萄糖)(PHG),采用IR、1HNMR和GPC对其进行了表征。并研究了聚合物的紫外吸收能力和抗光氧化能力,结果表明,PHG在280~360 nm内有良好的紫外线吸收效果,最大吸收波长为331 nm;MTT实验显示,不同浓度PHG浸提液处理的L929细胞相对细胞增殖率均大于80%,且随着浓度增大,相对细胞增殖率无明显降低,说明PHG具有良好的生物相容性。     

一种糖基二苯甲酮类聚合物紫外线吸收剂的合成与性能

以2,4-二羟基二苯甲酮（UV-0）为原料,与丙烯酰氯反应得到2-羟基-4-丙烯酸酯基-二苯甲酮（HAB）,然后与糖单体3-O-丙烯酰基-1,2,5,6-O-双异丙叉-α-D-葡萄糖（OAIG）聚合,制备了poly(HAB-OAIG)(PHIG),最后PHIG经三氟乙酸水解得到了poly(HAB-co-3-O-烯丙基酰氯-α-D-葡萄糖)(PHG),采用IR、1HNMR和GPC对其进行了表征。并研究了聚合物的紫外吸收能力和抗光氧化能力,结果表明,PHG在280-360 nm内有良好的紫外线吸收效果,最大吸收波长为331 nm;MTT实验显示,不同浓度PHG浸提液处理的L929细胞相对细胞增殖率均大于80%,且随着浓度增大,相对细胞增殖率无明显降低,说明PHG具有良好的生物相容性。     

聚乙二醇交联的透明质酸衍生物的细胞毒性

目的利用聚乙二醇(PEG)作为交联剂制备透明质酸(HA)衍生物,并检测其细胞毒性,从而探讨其应用于临床医学的可行性。方法将PEG-HA衍生物配制成1mg/ml的生理盐水溶液作为供试液,在培养瓶中加入含有50%供试液的细胞培养液,分别在培养2、4和7d时检测细胞毒性,并利用SPSS10·0统计软件包分析细胞的相对增殖度。结果PEG-HA衍生物作为细胞培养液成分之一,使细胞在培养过程中生长形态正常,贴壁情况良好,L-929细胞呈梭型,细胞相对增殖度为95·49%,细胞毒性为1级,评定为合格。结论PEG-HA衍生物对人体无毒副作用,可应用于临床医学。     

应用XTT法检测白细胞介素-6的生物学活性

应用XTT比色分析法检测IL - 6的活性 ,并与MTT法和3H掺入法进行了比较 ,结果XTT法较之上述两法简便易行 ,结果稳定 ,重复性好。     

类骨磷灰石的体外制备及体外细胞学评价

目的探讨体外合成类骨磷灰石,并对其进行体外细胞生物学性能评价。方法通过明胶诱导和无机离子共杂化的作用,利用化学沉淀法体外合成类骨磷灰石,利用MC3T3-El小鼠胚胎骨细胞对其浸提液进行细胞学评价。MTT法检测骨细胞增殖;类骨磷灰石浸提液培养基中用β-甘油磷酸钠为骨诱导剂诱导MC3T3-El定向分化为成骨细胞,碱性磷酸酶(ALP)染色法测定骨细胞分化的能力。结论体外合成的类骨磷灰石具有与自然骨无机相相似的化学组成和晶体结构。类骨磷灰石浸提液在实验早期,能够显著促进MC3T3-El小鼠胚胎骨细胞增殖,并且可以诱导分化为成骨细胞。     

激活素A对L929细胞活性的调节作用

目的探讨激活素A对小鼠纤维母细胞L929活性的调节作用。方法用不同剂量的激活素A刺激L929细胞,应用还原酶法分析细胞分泌一氧化氮(NO)的水平,RT-PCR法检测细胞诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、纤维连接蛋白(FN)和金属蛋白酶组织抑制物(TIMP)mRNA的表达,应用中性红检测细胞的吞饮活性,MTT法检测细胞的增殖活性。结果L929细胞经激活素A刺激后,与对照组细胞比较,分泌NO的水平明显升高,iNOS mRNA及FN mRNA的表达水平也升高,而TIMP mRNA的表达水平无明显改变。激活素A可以促进L929细胞的吞饮活性,但对L929细胞的增殖活性无影响。结论激活素A具有促进L929细胞分泌炎性介质和形成细胞外基质的作用,这可能是其促进炎症发展、诱导组织纤维化的原因。     

药用聚异戊二烯橡胶细胞毒性的研究

以两种不同催化体系合成的药用聚异戊二烯橡胶(IR0307和IR80)为研究对象,分别以质量分数为0.9%的氯化钠注射液和纯化水为浸提介质,在两种浸提条件(在高压灭菌器内于121℃下浸提60 min或在密闭容器内于37℃下浸提24 h)下进行浸提处理,然后采用显微镜观察法和四唑盐比色法测定IR0307和IR80的体外细胞毒性,分析不同浸提条件下IR0307和IR80的细胞毒性反应等级。在药用聚异戊二烯橡胶生产中,建议控制催化剂的残留量以及对杂质和金属离子的含量和种类,使用洁净的非污染型防老剂和稳定剂。     

常见人工泪液细胞毒性评价

目的:采用MTT法评估比较几种常见的市售人工泪液对人角膜上皮细胞(HCECs)的毒性。方法:常规培养HCECs,用完全培养基DMEM将几种人工泪液分别稀释2倍、4倍和10倍,MTT法检测不同浓度滴眼液处理细胞24 h后的细胞存活率。结果:滴眼液稀释2倍时,所有滴眼液都有显著性细胞毒性,但其余组和小牛血去蛋白提取物滴眼液组相比,细胞毒性更显著(P0.01),稀释4倍时,除了小牛血去蛋白提取物滴眼液组和右旋糖酐羟丙甲纤维素滴眼液组,其余组均表现出显著的细胞毒性(P0.001),稀释10倍时,小牛血去蛋白提取物滴眼液组、玻璃酸钠滴眼液1组和右旋糖酐羟丙甲纤维素滴眼液组没有显著的细胞毒性(P0.05)。结论:小牛血去蛋白提取物滴眼液、对HCECs毒性最小。     

经皮植入体对大鼠皮肤成纤维细胞的作用研究

对自行研制的新型经皮通路植入材料致密增强羟基磷灰石基陶瓷、医用硅橡胶/羟基磷灰石复合材料进行体外细胞毒性评价.原代培养大鼠皮肤成纤维细胞,并与材料的浸提液相互作用,用MTT法测定新型经皮通路材料的细胞毒性.结果表明,致密增强羟基磷灰石基陶瓷、医用硅橡胶/羟基磷灰石复合材料均无细胞毒性.     

LTD蛋白体外对HeLa细胞毒性的影响

目的探讨LTD蛋白在体外对HeLa细胞毒性的影响。方法将不同浓度的LTD蛋白作用于HeLa细胞,光学显微镜下观察细胞形态等变化,MTT法检测细胞增殖情况,激光共聚焦显微镜观察蛋白在细胞内的定位,HE染色和TUNNEL试剂盒检测细胞凋亡情况。结果 LTD蛋白对HeLa细胞具有毒性作用,能抑制细胞增殖,引起细胞凋亡。随着蛋白浓度的增加及作用时间的延长,HeLa细胞凋亡现象明显,生长抑制作用增强,蛋白浓度与细胞A_(490)值之间明显相关;且LTD由定位于细胞膜变为定位于胞浆和细胞核。结论 LTD蛋白促进HeLa细胞凋亡,对其增殖具有明显的抑制作用。     

三苯胺类荧光探针的合成与细胞成像

以三苯胺为原料,通过Vilsmeier-Haack和McMurry反应合成了一个碳碳双键连接两个三苯胺的荧光分子1,2-二(三苯胺基)乙烯(TPAS)。采用紫外-可见光谱和荧光光谱对TPAS的光学性质进行了考察。结果表明:TPAS有很强的荧光发射性能,荧光发射为蓝光,荧光强度与浓度的线性关系较好,且溶剂化效应不强,光稳定性良好。采用扫描电镜测试了TPAS的聚集态行为。结果显示:当水的体积分数增大后,TPAS分子聚集,形貌改变。采用MTT法对TPAS进行了细胞毒性测试。结果表明,不同TPAS浓度下,细胞的存活度都在80%以上,说明TPAS对细胞的毒性很低,生物相容性好。并实现了TPAS对A549的活细胞成像。     

浸提橡木中香气成分的工艺研究

以橡木为原料,采用回流提取、超声提取和搅拌提取三种方式得到橡木浸提液。以浸提液挥发性成分为实验指标,确定橡木浸提液的最佳提取方式为回流提取法。最佳工艺条件下得到的橡木浸提液经GC-MS分析,共鉴定出54种挥发性成分,含量最多的挥发性成分是糠醛。     

脱硫液中硫酸盐的测定方法比较

采用三种方法(重量法、EDTA滴定法、离子色谱法)测定脱硫液中硫酸盐的含量,并比较其测定结果。结果表明:三种测定方法各有优缺点,其中EDTA滴定法相对标准偏差小、费用低、操作简单、准确度高,是测定脱硫液中硫酸盐的最佳方法。     

复方半边莲雾化剂对Hela,HepG2,KYSE150三种细胞抑制作用研究

目的:对比单方半边莲药材与复方半边莲药材制成的雾化液分别对Hela,HepG2,KYSE150三种癌细胞模型的生长抑制情况。方法:采用MTT比色法对三种癌细胞的生长抑制情况进行对比。内质网染色初步探究复方制剂的药理学影响结果:以半边莲,半枝莲,白花蛇舌草等比制成的稠膏为料,进一步制得复方半边莲雾化剂,同法得到单方雾化液,用MTT法检测其分别对三种细胞培养72h内三个时间点的抑制作用,以荧光染料Dapoxyl及对HepG2细胞内质网的染色。结:论复方雾化剂的瘤细胞抑制效果更佳,HepG2细胞的内质网信号与剂量正相关。     

复方半边莲雾化剂对Hela,HepG2,KYSE150三种细胞抑制作用研究

目的:对比单方半边莲药材与复方半边莲药材制成的雾化液分别对Hela,HepG2,KYSE150三种癌细胞模型的生长抑制情况。方法:采用MTT比色法对三种癌细胞的生长抑制情况进行对比。内质网染色初步探究复方制剂的药理学影响结果:以半边莲,半枝莲,白花蛇舌草等比制成的稠膏为料,进一步制得复方半边莲雾化剂,同法得到单方雾化液,用MTT法检测其分别对三种细胞培养72h内三个时间点的抑制作用,以荧光染料Dapoxyl及对HepG2细胞内质网的染色。结:论复方雾化剂的瘤细胞抑制效果更佳,Hep G2细胞的内质网信号与剂量正相关。     

恩度对横纹肌肉瘤PLA-802细胞生长的抑制作用及其机制

目的探讨人血管内皮抑制素恩度(Endostar)对横纹肌肉瘤PLA-802细胞生长的抑制作用及其机制。方法将常规培养的横纹肌肉瘤细胞PLA-802分为对照组和恩度处理组(不同浓度处理不同时间),采用MTT法检测恩度对细胞生长的影响;流式细胞术检测细胞周期的变化;RT-PCR和Western blot法检测恩度对细胞内血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA和蛋白表达的影响;ELISA检测细胞培养液上清中VEGF的生成水平。结果恩度可抑制PLA-802细胞增殖及VEGF的表达和生成,且上述作用具有显著的浓度-时间依赖性。结论恩度能够抑制PLA-802细胞的生长,其机制可能与阻断VEGF的表达相关。     

红花多糖对胃癌BGC-823细胞增殖抑制作用的研究

目的:探讨红花多糖对人胃癌BGC-823细胞增殖抑制效应。方法 :不同浓度的红花多糖作用于人胃癌BGC-823细胞,采用MTT法检测药物对BGC-823细胞增殖的抑制作用、倒置显微镜观察BGC-823细胞的形态改变及Hoechst 33342染色观察胃癌细胞凋亡的情况。结果 :红花多糖对胃癌BGC-823细胞增殖具有明显的抑制作用,且呈一定的时间与剂量依赖;光镜下可见凋亡细胞的形态学特征性改变。结论:红花多糖能抑制人胃癌BGC-823细胞增殖,同时可诱导胃癌细胞凋亡。