玉米自交系8112特异SCAR标记的获得

通过对３个玉米骨干自交系特异ＲＡＰＤ标记的克隆、测序、合成特异引物及ＳＣＡＲ－ＰＣＲ反应条件优化,成功地把其中一个自交系８１１２的特异ＲＡＰＤ标记（０．９ｋｂ）转换成了稳定的ＳＣＡＲ标记。为把局限于实验室水平的ＲＡＰＤ标记推向作物种质鉴定和种子纯度检验的实验应用开辟了一条途径。     

紫菜自由丝状体SCAR标记的获得

应用RAPD技术对27个紫菜自由丝状体材料进行遗传多样性分析，获得7个紫菜材料的7个特异标记。对这7个特异片段进行了回收、克隆，对其中5个片段已完成了序列测定，根据这5个序列的两端顺序合成了5对SCAR—PCR引物，经过优化PCR反应条件成功地将紫菜材料Porphyra tenuipedalis的RAPD扩增片段OPZ-19140和P．yezoensis qd-8的RAPD扩增片段OPJ-18488转换成两个SCAR标记。因为这两个标记的序列已全部测通，故又称为STS标记。这两个SCAR标记(STS标记)可以作为紫菜P．tenuipedalis和P.yezoensis qd-8自由丝状体材料种质鉴定、优良品系选育和产权保护的分子标记。     

抗 SMV 栽培大豆种质资源的 SCAR 标记指纹图谱分析

依据与ＳＭＶ（ＳｏｙｂｅａｎＭｏｓａｉｃＶｉｒｕｓ）抗性基因紧密连锁的共显性ＳＣＡＲ标记ＳＣＷ—０５６６０的序列测定结果，合成了两对ＳＣＡＲ（ＳｅｑｕｅｎｃｅＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄＡｍｐｌｉｆｉｅｄＲｅ－ｇｉｏｎｓ）标记特异引物，对３０个栽培大豆品种进行了指纹图谱分析。结果表明，较短的片段Ｓ—５６００和Ｓ—０５６６０是抗病品种的特征性条带；而较长的片段Ｓ—５１０００和Ｓ—５１６００是感病品种的特征性条带。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果表明，这两对引物扩增出的条带具有同源性。     

松杨栅锈菌小种特异性DNA片段的SCAR标记转换

用SCAR标记技术对松杨栅锈菌生理小种特异性DNA片段进行了转化和检测研究.通过对RAPD随机引物的扩增筛选,发现随机引物BAO118扩增产生的约700bp的DNA片段与松杨栅锈菌小种特异性相关联.将该片段进行回收、TA克隆、双向测序和序列整合后,序列全长685bp,3'端有BAO118随机引物序列.根据整合后序列,用Primerselect软件设计了一对包含随机引物序列的简并引物对.用该引物对对供试菌样进行PCR扩增,成功获得了松杨栅锈菌小种685bp的SCAR标记.用该标记进行田间混合孢子菌样、单孢子接种菌样DNA检测,均得到了685bp的DNA片段,不受寄主DNA和孢子菌系类型的影响,具有较好的稳定性和特异性.     

脂肪酶的应用与研究现状

脂肪酶是一种具有较大应用潜力的适用范围较广的一类生物催化剂,介绍脂肪酶在生物化工、手性药物拆分、三甘酯结构测定和食品加工过程中的应用。     

与大豆孢囊线虫病抗性相关的RAPD标记

利用ＲＡＰＤ－ＰＣＲ技术，对７个抗大豆孢囊线虫的大豆材料和１０个感病大豆品种的基因组ＤＮＡ进行了ＲＡＰＤ分析，供试的２００个随机引物均产生了清晰稳定的ＲＡＰＤ扩增产物，其中有２１个随机引物产生的ＲＡＰＤ扩增产物具有多态性。获得了５个与大豆孢囊线虫病抗性相关的ＤＮＡ片段，这些ＲＡＰＤ标记具有较高的重复性和稳定性，可辅助抗大豆孢囊线虫病大豆新品种的选育。     

水稻种胚脂肪酶酶活的精确定量分析技术研究

建立了一种新的适合在微乳液体系中采用脂肪酸比色法定量分析水稻种子脂肪酶活力的方法,并通过酶动力学实验优化了该方法的最适条件.优化的结果是:底物浓度30mg/mL,酶反应时间20h,各种品种只用10～50个种胚即可精确测出种子脂肪酶的总活力,方法的重现性好.用该方法检测了皖鉴2090及其后代材料的脂肪酶活并利用人工老化实验进行了耐储藏性评价,实验结果显示,该酶活性与储藏特性关系十分密切.该方法可用于大规模选育耐储藏水稻品种,并为全面揭示耐储藏机理打下坚实基础.     

与大豆孢囊线虫病性相关的PAPD标记

利用ＲＡＰＤ－ＰＣＲ技术，对７个抗大豆孢囊线虫的大豆和１０个感病大豆品种的基因组ＤＮＡ进行了ＲＡＰＤ分析，供试的２００个随机引物均产生了清晰稳定的ＲＡＰＤ扩增产物，其中有２１个随机引物产生的ＲＡＰＤ扩增产物具有多态性，获得了５个与大豆孢囊线虫病抗性相关的ＤＮＡ片段，这些ＲＡＰＤ标记具有较高的重复性和稳定性，可辅助抗大豆孢囊线虫病大新品种的选育。     

斑马鱼和稀有(鱼句)鲫的SCAR标记建立及其异种克隆胚的检测

以斑马鱼和稀有(鱼句)鲫的基因组DNA进行RAPD分析,获得特异的RAPD标记,经克隆、测序,合成特异性引物并优化SCAR-PCR反应条件,将四个特异的RAPD标记转化成稳定的SCAR标记.SCAR1、SCAR3和SCAR2、SCAR4分别在斑马鱼与稀有(鱼句)鲫基因组DNA扩增中产生单一的条带,可作为区分斑马鱼和稀有(鱼句)鲫的分子标记.此外,SCAR3和SCAR4还可以分别将斑马鱼和稀有(鱼句)鲫从鲫鱼、白鲢、鲤鱼、鳊鱼等其它鱼类中鉴别出来,从而成为良好的种质鉴定分子标记.在此基础上,选用SCAR标记进行了斑马鱼与稀有(鱼句)鲫配合的鱼类异种克隆胚胎鉴定研究,结果发现,克隆胚由供体核支持发育而来.SCAR标记的获得,为鱼类异种间克隆胚胎和克隆鱼的检验,以及细胞核再程序化机制等重大理论问题的探索提供了重要的技术支持.     

产脂肪酶海洋嗜冷菌的鉴定及酶学性质研究

从东海的深海底泥中筛选出一株产脂肪酶的海洋细菌 EastSeaG5-1415,该菌为革兰氏阴性好氧菌,短杆状,0.9～1.3μm×1.5～3.8μm,无鞭毛,无芽孢,无色素,菌落光滑不透明,过氧化氢酶和氧化酶阳性,甲基红实验阴性,氧化葡萄糖产酸,可耐受10%的NaCl.此菌最适生长温度为18℃,最高生长温度为35℃,在0℃也能生长,是典型的嗜冷菌.菌株脂肪酸种类为C17:1(28.2%),C18:1 9c(49.7%),辅酶Q-8是其主要的异戊烯醌类,DNA中G C含量为45.2mol%.以16SrRNA同源性为基础构建了相关种属细菌在内的系统发育树,在系统发育树中,分离菌株 EastSeaG5-1415 与 Psychrobacter glacincola 在同一分支,二者的序列相似性为97.6%,DNA 杂交显示与 P.glacincola 最为相近,达到87%.结合形态和生理生化试验,将其鉴定为嗜冷杆菌 P.glacincola.同时对其所产脂肪酶的性质进行了初步研究.该菌所产碱性脂肪酶最适反应温度为35℃,在5℃时仍有较高酶活,酶活达到23%,最适 pH 值为9,属低温碱性脂肪酶.     

洋葱假单胞菌G63脂肪酶基因及其伴侣基因的克隆和同源高效表达

从油污土壤中筛选到一株脂肪酶活性较高的洋葱假单胞菌(Pseudomonas cepacia)G63.运用PCR的方法从该菌株中克隆了脂肪酶基因(lipA)及其伴侣基因(lipB).该脂肪酶基因开放式阅读框(ORF)为1092bp,编码364个氨基酸残基.经KpnⅠ/HindⅢ酶切,将其克隆到广泛宿主质粒pBBR1Tp载体上,构建成质粒pBBR1-lipAB.通过三亲杂交,在辅助质粒pRK2013的帮助下,转入原宿主菌P.cepacia G63中,构建成lipA基因同源高效表达的基因工程菌.该菌株在连续转接5次,培养45h后质粒保持率为82.6%,适用于规模化发酵生产.摇床发酵表明,工程菌在60h时酶活达到150.63 U/mL,较原始菌株提高3.6倍.     

稻壳/高密度聚乙烯复合材料与稻壳炭/高密度聚乙烯复合材料性能对比

采用挤出法制备稻壳/高密度聚乙烯（HDPE）和稻壳炭/HDPE复合材料。利用SEM、XRD对稻壳/HDPE和稻壳炭/HDPE复合材料进行表征,并对其力学性能和抗蠕变性能进行测试对比。结果表明,稻壳和HDPE之间的结合方式与稻壳炭和HDPE之间的结合方式存在根本性的差异,稻壳/HDPE复合材料表现为稻壳被HDPE所包裹,稻壳炭/HDPE复合材料表现为HDPE嵌入稻壳炭的孔隙中;稻壳和稻壳炭的加入都会影响HDPE基复合材料的结晶峰强度,但不会对其微晶结构产生影响;无论是抗弯强度、拉伸强度还是抗蠕变强度,稻壳炭/HDPE复合材料都远远强于稻壳/HDPE复合材料。     

Relationship between problem characteristics and the optimal number of genetic algorithm generations

Genetic Algorithms (GAs) have been successfully applied to a wide range of engineering optimization problems. The success of the GA is dependent on the parameter values used, and identifying suitable values to use is a difficult task. Typically, the GA parameters must be calibrated for each application, hence it might be expected that the optimal parameter values are related to the characteristics of each problem. To aid the calibration of GAs, it is proposed that there exists an optimal number of GA generations for a given problem, where from the number of generations, the population size can be determined from the total function evaluations that are available. A number of test functions have been considered with different problem characteristics, such as salience, correlation structure, and epistasis, and statistics are proposed to quantify each of these characteristics. A large-scale parametric study has been undertaken to determine the effect of these characteristics on the optimal number of GA generations necessary in order to solve the problem most efficiently. From these results, two function classes have been identified. The function classes have been tested on two instances of an engineering optimization problem and found to classify the most appropriate population size accurately for solving each problem. Hence, the classification method developed can be used to assist in the calibration of GAs for applications where long simulation times are expected.     

转PSAG12-ipt基因水稻植株的获得及其延衰性的初步研究

运用农杆菌转化法将叶片衰老抑制基因PSAG12-ipt转入南方推广的优质籼型不育系中A、恢复系明恢63、南胜10号,所获得的潮霉素抗性植株通过GUS组织化学分析、PCR检测、Southern blot分子检测证实,PSAG12-ipt已经转入水稻基因组中.对转基因植株进行了延衰性考察,结果表明,与对照组相比,部分转基因水稻植株明显表现出叶片推迟衰老,提高了单株有效穗数、千粒重.对转基因R1代植株进行了PCR和PCR Southern分析,表明外源基因在转基因植株后代中稳定遗传.