嗜酸乳杆菌生长促进物质研究

为提高嗜酸乳杆菌活菌数,工业化生产嗜酸乳杆菌冻干菌粉,通过测定嗜酸乳杆菌发酵液的吸光度和活菌数,采用优选法研究了不同生长促进物质对嗜酸乳杆菌活菌数的影响。结果表明:在11%(m/m)的脱脂乳中加入麦芽汁、番茄汁、酵母膏、真菌浸汁、胡萝卜汁能显著促进嗜酸乳杆菌的生长,蛋白胨、葡萄糖次之,麦芽糖几乎无促进效果。因此,以脱脂乳为基础培养基,嗜酸乳杆菌的最佳生长促进物质的组合为0.5%(m/m)酵母膏、5%(V/V)番茄汁、5%(V/V)真菌浸汁、12%(V/V)胡萝卜汁和5%(V/V)麦芽汁,在此条件下其活菌数可达5.46×109cfu/mL。     

提高酸乳中嗜酸乳杆菌活性的研究

从市售合生元中分离鉴定出嗜酸乳杆菌,以脱脂乳培养基或MRS液体培养基培养菌株,探讨嗜酸乳杆菌的生长特性,研究不同pH、保藏温度以及西红柿汁含量对嗜酸乳杆菌活性的影响。结果表明:嗜酸乳杆菌在pH6.5培养基中培养6h后的活菌数最大,且在pH2.5的培养基中0～2h内保持106CFU/mL以上,即能在较低的胃酸环境保持其益生作用;嗜酸乳杆菌酸乳在4℃下保藏活菌存活期较长;在脱脂乳培养基中添加西红柿汁对嗜酸乳杆菌的生长起促进作用,且以添加15%的西红柿汁效果最佳。     

响应面法优化嗜酸乳杆菌增殖培养基

为了获得低成本,易配制且增菌效果优良的嗜酸乳杆菌工业化培养基,研究采用Plackett-Burman试验设计筛选出了嗜酸乳杆菌生长的显著影响因子,通过响应面设计试验,得到了嗜酸乳杆菌的优化增殖培养基配比.结果显示:酵母浸粉,葡萄糖,硫酸锰为乳酸菌生长的显著影响因子,优化的增殖培养基配比为:酵母浸粉8.682％,葡萄糖3.842％,硫酸锰0.02％,硫酸镁0.058％,柠檬酸三铵0.2％,Tween-80 0.1％,磷酸氢二钾0.1％,乳清粉0.5％;采用优化培养基后,细胞密度可达到16.49×109cfu/mL;较经典MRS培养基,活菌数提高了20.61倍,其成本较MRS培养基降低了约30％.     

响应面法优化嗜酸乳杆菌黄秋葵汁培养基

通过单一因素试验并结合SPSS软件分析,得出对嗜酸乳杆菌的生长有较大影响的条件,通过响应面优化,得到嗜酸乳杆菌秋葵汁培养基的最优组合。结果显示,接种量、pH和柠檬酸三铵的浓度及葡萄糖的浓度为显著性影响因子,优化后的结果为:葡萄糖含量为0.99%,柠檬酸三铵含量为0.57%,pH为6.63,接种量为4.43%。优化后菌体的生长情况明显高于优化前的秋葵汁培养基中的生长,基本接近MRS培养基中的生长情况。     

嗜酸乳杆菌促生因子的研究

以11%的脱脂乳为基础培养基,研究了加入几种不同类型、不同比例的促生因子对嗜酸乳杆菌产酸及凝乳的影响。结果表明,葡萄糖0.75%、吡哆醛0.09%、半胱氨酸1%、酪蛋白水解物0.5%对嗜酸乳杆菌生长促生作用的影响较大。     

抗性淀粉对益生菌增殖作用的研究

以葡萄糖和可溶性淀粉为对照,分别研究了抗性淀粉对双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌3种益生菌的体外增殖作用、生长过程及模拟胃肠道逆环境中耐受性的影响。结果表明,当抗性淀粉和葡萄糖浓度为1%时,双歧杆菌OD_(600 nm)值最大分别为1.921±0.021、1.716±0.014;当可溶性淀粉浓度为0.5%时,双歧杆菌OD600nm值最大为0.993±0.013。当抗性淀粉和葡萄糖浓度为2%时,嗜酸乳杆菌OD_(600 nm)值最大为1.993±0.012、1.736±0.018;当可溶性淀粉浓度为0.5%时,嗜酸乳杆菌OD_(600 nm)值最大为0.985±0.015。当抗性淀粉、葡萄糖和可溶性淀粉浓度为1%时,保加利亚乳杆菌OD_(600 nm)值最大分别为1.766±0.014、1.524±0.02、0.914±0.015。抗性淀粉可显著促进3种菌的生长且增殖效果高于葡萄糖和可溶性淀粉。3种菌在抗性淀粉培养基中对胆汁酸盐、低pH、模拟胃肠液的耐受性显著高于葡萄糖培养基。     

嗜酸乳杆菌培养的研究

本实验以普通营养培养基为对照,通过对pH的调节,加入不同碳源、氮源,对嗜酸乳杆菌的培养进行研究,结果表明:嗜酸乳杆菌的生长在很大程度上受到培养基的pH的影响,-般在pH 3.8的时候,嗜酸乳杆菌的生长就会受到抑制;嗜酸乳杆菌的生长也受碳源和氮源比值的限制,培养基中氮源过多,会引起微生物生长过于旺盛,不利产物的积累;如若氮源不足则菌体生长过慢,而碳源供应不足时容易引起菌体衰老和自溶.最佳培养基是:葡萄糖2%、蛋白胨2%、氯化钠0.1%、硫酸锰0.001%、硫酸镁0.02%、乙酸钠0.05%、pH6.0.     

山药低聚糖体外调节乳酸菌生长的作用

以山药低聚糖取代葡萄糖为碳源,添加到乳酸菌基础培养基中,结果表明,山药低聚糖对嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌的体外生长具有显著的促进作用。随着取代含量的提高,培养液中活菌数和OD600值随之增加,而p H值随之降低。以山药低聚糖完全取代葡萄糖,培养结束时,嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌的最大生长量分别提高了3%和5%;OD600值分别提高了13%和17%;p H值分别下降6%和7%。同时,山药低聚糖可提高嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌的生长速率,促使这些乳酸菌的生长提前进入稳定期。本研究结果还表明,山药低聚糖对保加利亚乳杆菌和植物乳杆菌无明显促生长作用,说明山药低聚糖对乳酸菌的生长促进作用具有选择性。     

液体培养观察菊粉对青春双歧杆菌生长代谢的影响

菊粉替换培养基中的葡萄糖,对青春双歧杆菌进行体外培养,通过测量培养液吸光度、pH和滴定酸度的变化,考察了菊粉对青春双歧杆菌生长代谢的影响,探讨了实验室简单易行的观察方法。所有培养液菊粉组吸光度均大于相应空白组的吸光度,说明菊粉能够促进青春双歧杆菌生长。但不同培养基的观察效果有区别。唯一碳源培养基菊粉组吸光度的平均值0.376相对较低,但其菊粉组与空白组的比值1.584、糖发酵培养基的比值1.404均显著高于PTYG培养基的比值1.248(P<0.05)。PTYG培养基营养丰富,空白组中的双歧杆菌也能较好地生长,菊粉组的优势不明显。唯一碳源培养基的构成为无机盐加待测底物,液体呈透明状,便于观察具体的生长情况。如果要培养观察双歧因子的促生长效果,建议采用唯一碳源培养基。     

大豆酸乳发酵菌种的驯化及营养因子的研究

选择保加利亚杆菌（Lactobacillus bulgaricus）和嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）作为发酵菌种,通过逐步提高牛奶中豆乳的比例对菌种进行驯化的方法和改变培养基中营养成分的含量,研究大豆酸乳发酵过程中酸度值和菌落总数的变化情况。结果表明,经过驯化后的保加利亚杆菌发酵大豆酸乳过程中,酸度值从37.5 °T上升至40.0 °T,活菌数量提高了0.5倍;经过驯化后的嗜热链球菌发酵大豆酸乳过程中,酸度值从35.0 °T上升至37.5 °T,活菌数量提高了1.67倍;经过驯化后的混合菌种（保加利亚杆菌∶嗜热链球菌比例为1∶1）发酵大豆酸乳过程中,酸度值从42.5 °T升至48.5 °T,活菌数量提高了1.85倍;5种营养因子对大豆酸乳酸度的提高作用顺序为大豆肽＞氨基酸＞胡萝卜汁＞低聚果糖＞西红柿汁。     

Antibiosis of some lactic acid bacteria including Lactobacillus acidophilus toward Listeria monocytogenes

Eleven strains of lactic acid bacteria were tested by the 'spot' on the 'lawn' method for their antagonistic activity against four strains of Listeria monocytogenes. Four out of the five strains of lactic acid bacteria most antagonistic toward the pathogen were those cultures known to produce bacteriocins. Four other strains of lactic acid bacteria were not antagonistic against Listeria by this method. Seventeen inhibition zones of the pathogen were obtained at 25 degrees C as compared to 10 at 32 degrees C. Lactobacillus acidophilus strains NU-A and 88, growing in the presence of L. monocytogenes in milk prevented the latter from attaining populations it would have in pure culture (P less than 0.01). 10(1.4)-10(3.5) lower numbers were noted. L. acidophilus in most cases exhibited a bacteriostatic effect toward the pathogen except for strain 88 which appeared to have a bactericidal effect (P less than 0.01) against Listeria strain OH. The lactobacilli reduced the pH of the milk to 4.7 over a 24 h period, showing that acid played a role in the observed antibiosis.     

蓝莓汁乳酸菌的发酵特性

蓝莓汁中分别接种干酪乳杆菌、保加利亚乳杆菌、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌进行发酵,比较蓝莓汁发酵过程中乳酸菌活菌数、p H值、总滴定酸、总糖、还原糖、总花色苷、总酚、抗氧化能力和色泽等变化。结果表明,蓝莓汁营养丰富,上述各种乳酸菌均能在蓝莓汁中正常生长,发酵24 h,活菌数达8.10 lg cfu/mL以上;此外,植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌产酸能力均强于其它两种乳酸菌,可滴定酸含量均超过10.29 g/L,而植物乳杆菌对蓝莓汁中糖的消耗能力最强,总糖的残留量为40.26%;在花色苷和总酚的保留率以及抗氧化能力等方面,植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌也要优于其它两种乳酸菌。植物乳杆菌与嗜酸乳杆菌单独发酵和混合发酵时蓝莓汁营养品质的差异分析表明,单独发酵组与混合发酵组在抗氧化能力和总酚的保留上无明显差异,但混合发酵组在花色苷和色泽的保留方面明显优于单独发酵组。综上所述,蓝莓汁应以植物乳杆菌与嗜酸乳杆菌混合发酵为宜。     

Selective enumeration of Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus,Streptococcus thermophilus,Lactobacillus acidophilus,bifidobacteria, Lactobacillus casei,Lactobacillus rhamnosus,and propionibacteria

Nineteen bacteriological media were evaluated to assess their suitability to selectively enumerate Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus, bifidobacteria, and propionibacteria. Bacteriological media evaluated included Streptococcus thermophilus agar, pH modified MRS agar, MRS-vancomycine agar, MRS-bile agar, MRS-NaCl agar, MRS-lithium chloride agar, MRS-NNLP (nalidixic acid, neomycin sulfate, lithium chloride and paramomycine sulfate) agar, reinforced clostridial agar, sugar-based (such as maltose, galactose, sorbitol, manitol, esculin) media, sodium lactate agar, arabinose agar, raffinose agar, xylose agar, and L. casei agar. Incubations were carried out under aerobic and anaerobic conditions at 27, 30, 37, 43, and 45 degrees C for 24, 72 h, and 7 to 9 d. S. thermophilus agar and aerobic incubation at 37 degrees C for 24 h were suitable for S. thermophilus. L. delbrueckii ssp. bulgaricus could be enumerated using MRS agar (pH 4.58 or pH 5.20) and under anaerobic incubation at 45 degrees C for 72 h. MRS-vancomycine agar and anaerobic incubation at 43 degrees C for 72 h were suitable to enumerate L. rhamnosus. MRS-vancomycine agar and anaerobic incubation at 37 degrees C for 72 h were selective for L. casei. To estimate the counts of L. casei by subtraction method, counts of L. rhamnosus on MRS-vancomycine agar at 43 degrees C for 72 h under anaerobic incubation could be subtracted from total counts of L. casei and L. rhamnosus enumerated on MRS-vancomycine agar at 37 degrees C for 72 h under anaerobic incubation. L. acidophilus could be enumerated using MRS-agar at 43 degrees C for 72 h or Basal agar-maltose agar at 43 degrees C for 72 h or BA-sorbitol agar at 37 degrees C for 72 h, under anaerobic incubation. Bifidobacteria could be enumerated on MRS-NNLP agar under anaerobic incubation at 37 degrees C for 72 h. Propionibacteria could be enumerated on sodium lactate agar under anaerobic incubation at 30 degrees C for 7 to 9 d. A subtraction method was most suitable for counting propionibacteria in the presence of other lactic acid bacteria from a product. For this method, counts of lactic bacteria at d 3 on sodium lactate agar under anaerobic incubation at 30 degrees C were subtracted from counts at d 7 of lactic bacteria and propionibacteria.     

乳酸菌发酵菊芋汁及其风味的研究

对不同品种和产地的菊芋主要成分进行了测定,并利用乳酸菌对菊芋汁进行发酵,研究了不同乳酸菌在菊芋汁中的生长规律、低温存活性及发酵菊芋汁中主要风味物质。结果表明,4种乳酸菌在菊芋汁中均生长良好,最高活菌数可达到109CFU/mL;菊芋汁经乳酸菌发酵后具有良好风味,其风味的差异与发酵菌种有关;发酵菊芋汁中乳酸菌在4℃低温贮藏过程中具有较好的低温存活性,4周后活菌数保持在108CFU/mL。菊芋汁适用于开发成新的功能性乳酸菌饮料。     

产抗菌肽乳源乳酸菌的筛选及定向培养

为了获得乳酸菌高效表达抗菌肽的代谢调控方法,对德氏乳杆菌保加利亚亚种等7种乳酸菌进行了产抗菌肽能力的筛选和定向培养。筛选出具有较高抑菌活性的菌株嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌,它们产生的抑菌物质经排除酸、过氧化氢后,仍具有抑菌活性,然而经蛋白酶处理后其抑菌活性明显下降。结果表明,两种菌发酵上清液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有抑制作用。经一系列定向培养嗜酸乳杆菌抑菌直径达到(23.53±0.06)mm,与未经定向培养的抑菌直径(11.63±0.15)mm相比抑菌活性提高了102%;经定向培养的干酪乳杆菌抑菌直径达到(21.27±0.25)mm,与未经定向培养的抑菌直径(12.50±0.10)mm相比抑菌活性提高了70.2%。     

4 种乳酸菌体外抗氧化能力的比较研究

通过抗脂质过氧化、清除DPPH自由基、清除超氧阴离子自由基(O2－ ·)、还原力、清除羟自由基实验对发酵乳杆菌、乳酸乳球菌、嗜酸乳杆菌和瑞士乳杆菌4种乳酸菌发酵上清液和胞内提取物的抗氧化能力进行研究。结果表明：4种乳酸菌的具有不同的抗氧化能力,其中瑞士乳杆菌的羟自由基清除能力、DPPH自由基清除能力和还原能力相对较高,乳酸乳球菌和嗜酸乳杆菌清除O2－ ·能力相对较强,发酵乳杆菌抗脂质过氧化能力为最强。实验还初步研究乳酸菌的抗氧化机理,显示乳酸菌存在SOD和GSH-Px,这可能与乳酸菌的抗氧化作用有一定相关性。     

益生菌对发酵菠萝果汁综合品质的影响

菠萝果汁分别接种干酪乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和肠膜明串珠菌进行发酵,研究菠萝果汁发酵过程中理化品质和感官品质的变化规律。结果表明,4种乳酸菌在菠萝果汁中生长良好,发酵24 h,植物乳杆菌和肠膜明串珠菌的活菌数对数值均已超过8.3;经乳酸菌发酵后,菠萝果汁的pH、维生素C（VC）含量均显著降低,而总酸、可溶性固形物、总酚、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率显著升高。其中,植物乳杆菌具有较强的产酸能力,肠膜明串珠菌能够延缓VC的流失。在对感官品质影响方面,4种发酵菠萝果汁之间存在差异,经肠膜明串株菌发酵的菠萝果汁感官评价较优（79.79分）,而经嗜酸乳杆菌能够更好地保留菠萝果汁特有的挥发性香气成分。研究结果为益生菌菠萝果汁产品的开发提供参考依据和技术支持。     

Fermentation of beet juice by beneficial lactic acid bacteria

Red beets were evaluated as a potential substrate for the production of probiotic beet juice by four species of lactic acid bacteria (Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus plantarum). All the lactic cultures were found capable of rapidly utilizing beet juice for cell synthesis and lactic acid production. However, L. acidophilus and L. plantarum produced a greater amount of lactic acid than other cultures and reduced the pH of fermented beet juice from an initial value of 6.3 to below 4.5 after 48 h of fermentation at 30°C. Although the lactic cultures in fermented beet juice gradually lost their viability during cold storage, the viable cell counts of these lactic acid bacteria except for L. acidophilus in the fermented beet juice still remained at 10⁶–10⁸ CFU/ml after 4 weeks of cold storage at 4°C.     

黑豆乳酸发酵菌种的筛选

本实验以糖化的黑豆为基质,对五株乳酸菌的发酵性能进行了测试,其中嗜酸乳杆菌产酸最高,产酸速率最快。确定了嗜酸乳杆菌(La)、植物乳杆菌(Lp)和两岐双岐杆菌(Bb)为最佳菌种组合,确定了最佳种间比,即La:Lp:Bb=2:1:1,大豆汁为促生长物质。     

高效同化胆固醇乳酸菌菌株的筛选及在食品中的应用

从发酵食品中分离筛选能高效同化胆固醇的乳酸菌,以开发低胆固醇系列产品。从25个来源不同的样品中,分离筛选出8株乳酸菌,与活化出的8株已知乳酸菌共同在特殊培养基中培养,最后筛选出2株具有较高同化胆固醇能力的菌株。结果表明,嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌应用于食品中,对食品风味影响较小,可大量应用。