石墨电极上甲基纤维素膜固载辣根过氧化物酶的直接电化学

用甲基纤维素（MC）将辣根过氧化物酶（HRP）固定在热裂解石墨电极表面,制备了HRP-MC膜修饰电极.包埋在甲基纤维素膜中的辣根过氧化物酶可以与电极直接传递电子.在pH 7.0的磷酸盐缓冲溶液中可得到一对可逆的辣根过氧化物酶辅基血红素Fe（Ⅲ）/Fe（Ⅱ）电对氧化还原峰,式电势为-0.349 V（vs SCE）.其式电势随溶液pH值增加而负移且成线性关系,直线斜率为-40.0 mV/pH,说明辣根过氧化物酶的电子传递过程伴随有质子的转移.并研究了HRP-MC膜修饰电极对H2O2、NO的电催化性质.     

琼脂糖固载辣根过氧化物酶的直接电化学行为研究

用琼脂糖将辣根过氧化物酶(HRP)固定到玻碳电极(GCE)表面,制备了HRP-琼脂糖膜修饰电极。研究发现包埋在琼脂糖膜中的辣根过氧化物酶可与电极直接传递电子,在磷酸盐缓冲溶液和磷酸盐缓冲溶液/乙醇混合液中均可得到一对辣根过氧化物酶辅基血红素Fe(Ⅲ)/Fe(Ⅱ)电对的可逆氧化还原峰,式电势分别为-0.392V(vs SCE)和-0.412V(vs SCE)。式电势随缓冲溶液pH值增加而负移,且呈线性关系,直线斜率为-56.0mV/pH。这说明辣根过氧化物酶的电子传递过程伴随有质子的转移。     

辣根过氧化物酶固定化方法的探索及分析应用

1前言固定化酶是20世纪60年代开始发展起来的一项新技术,是酶工程的主要内容,它的发展很快。近年来人们已开始转向固定化酶在工业、医学、化学分析、环境保护、能源开发等方面的应用研究。目前,国际上采用的酶的固定化方法包括：吸附法、健合法、包埋法和交税法等。吸附法制备的固定化酶会导致酶的较大程度的失活。为了克服酶的流失、渗漏,提高酶的活性收率,本实验设计出了两种新的固定化方法：氧化铝吸附一海藻酸钠包埋法及氧化铝吸附-戊二醇交联一海藻酸钠包埋法,以辣报过氧化物酶（HRP）制备固定化酶,并应用于混样中L－Tyr和雨…     

琼脂糖膜固载辣根过氧化物酶催化还原过氧化物的研究

用琼脂糖(agarose)水凝胶将辣根过氧化物酶(HRP)固定在玻碳电极(GCE)表面,制备了HRP-Agarose膜修饰电极。在水-乙醇混合溶液中,包埋在琼脂糖水凝胶中的HRP可以与电极直接传递电子,并且能催化还原H2O2、过氧化丁酮、氢过氧化叔丁基、氢过氧化异丙基苯等过氧化物和NO。HRP-Agarose膜修饰电极具有较好的稳定性和重现性,可用于上述过氧化物和亚硝酸盐的定量检测。     

固定化肌红蛋白的电化学和电催化性能研究

用海藻酸钠(Sodium Alginate,SA)将肌红蛋白(Mb)固定在热裂解石墨电极表面,制备了Mb-SA膜修饰电极。包埋在SA膜中的Mb在磷酸盐缓冲溶液(PBS)和乙醇混合溶液中与电极直接传递电子,得到一对对称的Mb辅基血红素Fe(III)/Fe(II)电对的氧化还原峰,式电势为-0.339V(vs SCE)。式电势随缓冲溶液pH增加而负移且成线性关系,直线斜率为-47.0mV/pH,说明肌红蛋白的电子传递过程伴随有质子的转移。并研究了Mb-SA膜修饰电极在水-乙醇混合溶液中催化还原H2O2和NO,该修饰电极可用于H2O2和NO2-的定量检测。     

辣根过氧化物酶催化去除水中染料的特性研究

首次采用辣根过氧化物酶催化降解直接黑38和偶氮荧光桃红染料,发现p H、反应温度、H2O2浓度对酶促反应有重要影响。辣根过氧化物酶可以在p H为3.0~9.0、温度25~65℃范围内有效去除直接黑38和偶氮荧光桃红。动力学实验结果表明,辣根过氧化物酶催化反应动力学符合一级反应动力学,并利用双倒数作图法测定了酶催化直接黑38动力学参数Km。     

超声波对固定化辣根过氧化物酶活性影响研究

为了研究超声波对固定化酶活性的影响,以固定化辣根过氧化物酶为对象,研究了不同超声波处理条件(超声功率,超声时间)以及超声条件下催化体系的pH、温度对固定化酶活性的作用。同时对超声波处理后固定化酶活的重复利用性进行测定。结果表明,超声波处理对提高固定化酶在高温、强酸碱条件下催化活性有一定帮助,最佳处理条件为:超声波功率50 W,超声时间30 min,pH 8,温度35℃,在此条件下,与未经超声波处理相比,固定化酶活性提高了17.6%,固定化酶重复利用性增强,经7次使用后,固定化酶催化活性是未经处理的1.8倍。     

辣根过氧化物酶处理邻苯二酚废水的研究

研究了用辣根过氧化物酶催化处理邻苯二酚废水的效果.结果表明,用辣根过氧化物酶可以有效地去除邻苯二酚.其最佳处理条件为:pH值4.4、过氧化氢与邻苯二酚的摩尔比约2∶1、反应时间30 min,适当增加酶用量可以明显缩短反应时间.     

无金属卟啉置换辣根过氧化物酶辅基研究

不同结构的卟啉插入去辅基辣根过氧化物酶(apo-HRP)所得重构酶具有类过氧化物酶的催化活性.采用紫外分光光度法和荧光光度法对这些重构酶进行研究.结果表明TPyP-apo-HRP比其他卟啉类插入重构蛋白具有的类过氧化物酶催化活性高.     

辣根过氧化物酶降解苯酚废水催化特性研究

采用辣根过氧化物酶催化降解苯酚,研究了辣根过氧化物酶浓度、pH值、反应温度对苯酚去除率的影响。结果表明,辣根过氧化物酶生物催化体系对苯酚有良好的降解效果。当温度为30℃,pH值为6时,在苯酚、H2O2、辣根过氧化物酶浓度分别为1 mmol/L,1.2 mmol/L,0.5μg/mL条件下,反应25 min,可以获得70%左右的苯酚去除率。利用双倒数作图法测定了不同酶浓度的催化动力学参数,动力学参数Kcat,Kcat/Km表明,苯酚的去除率和催化反应速率随着酶浓度的增加而增大;辣根过氧化物酶的催化效率与催化体系中酶和底物浓度有关,过高的底物浓度会降低酶的催化效率。     

血红蛋白在海藻酸钠膜中的电化学和类酶活性研究

用海藻酸钠(SA)将血红蛋白(Hb)固定到热裂解石墨电极表面,制备了Hb-SA膜修饰电极。包埋在SA膜中的Hb在磷酸盐缓冲溶液和乙醇混合溶液中与电极直接传递电子,得到一对对称的血红蛋白辅基血红素Fe(Ⅲ)/Fe(Ⅱ)电对的可逆氧化还原峰。其式电势随缓冲溶液pH值增加而负移,且呈线性关系,这说明血红蛋白的电子传递过程伴随有质子的转移。并考察了Hb-SA膜修饰电极在缓冲溶液和乙醇混合溶液中对氧气、双氧水、一氧化氮和六氯乙烷的电催化性质。     

辣根过氧化物酶催化合成水溶性导电聚苯胺的研究

以辣根过氧化物酶(HRP)为催化剂、十二烷基硫酸钠(SDS)为模板研究了生物催化水溶性导电聚苯胺(PANI)的合成.探讨了反应体系的pH值、过氧化氢浓度和SDS浓度对聚合反应的影响,并研究了HRP催化苯胺聚合过程中性质的变化.紫外可见扫描光谱分析和电导率测定的结果表明,在以SDS为模板的条件下,HRP催化水溶性导电聚苯...     

辣根过氧化物酶生物降解五氯酚

采用辣根过氧化物酶催化降解五氯酚(PCP),探讨了pH值、温度、n(H2O2):n(PCP)和酶用量等因素对五氯酚去除率的影响.通过向反应体系中投加非离子型表面活性剂Tween-40,增强了辣根过氧化物酶的稳定性,延长了酶活性时间,并对其作用机理进行了探讨.实验表明非离子型表面活性剂Tween-40能够提高五氯酚的去除率,降低处理成本.     

Mb在多孔海藻酸钙复合膜上的电化学研究

聚乙烯醇(PVA)被引入多孔海藻酸钙(CA)薄膜中,形成多孔CA-PVA复合膜。利用扫描电子显微镜(SEM)对其进行表征。将制得的多孔CA-PVA复合膜与肌红蛋白(Mb)组装在玻碳电极上,形成Mb-CA-PVA复合膜修饰电极。电化学实验结果表明,Mb在该复合膜上表现出较好的电化学活性。     

香芹酚/海藻酸钠生物复合膜的制备及表征

为了提高海藻酸钠膜的包装性能，本文采用溶剂浇铸法制备了不同含量香芹酚/海藻酸钠生物复合膜，通过SEM、XRD和FTIR对复合膜的微观结构进行了表征，并对其物理、化学、抑菌和保鲜性能进行了考察。结果表明：添加香芹酚增加了香芹酚/海藻酸钠生物复合膜的粗糙度，膜中海藻酸盐和香芹酚的分子间发生静电和氢键作用。复合膜的热稳定性随香芹酚 含量增加呈现先增强后降低的趋势，其中香芹酚体积分数为0.8%时，香芹酚/海藻酸钠复合膜的综合性能最优，水溶性为90.48%，透明度为0.23 mm-1，水蒸气透过速率为0.17 g/(d•cm2)，拉伸强度为72.24 MPa，断裂伸长率为83.41%，对丰孢木霉菌(Trichoderma sp.)的抑制效率为65.79%。香芹酚/海藻酸钠复合膜能有效保持采后双孢蘑菇的品质，延长其货架期。     

非水介质中PA修饰对辣根过氧化物酶性质的影响

研究了二甲基甲酰胺（DMF）和乙腈（AcN）有机溶剂水混合体系中邻苯二甲酸酐（PA）修饰对辣根过氧化物酶（HRP）催化性质的影响。研究结果表明,PA修饰HRP可以提高该酶在有机溶剂中的稳定性,且有机溶剂的浓度越高PA修饰对HRP稳定性的提高越明显,在50％的DMF和ACN有机溶剂中PA修饰HRP的催化活性分别比HRP高25％和19％。在10％有机溶剂中的动力学数据表明PA修饰HRP可以提高该酶在有机溶剂中对酚类化合物的亲和性和专一性。     

阴离子型双功能含环氧基团酶固定化载体的制备及其固定辣根过氧化酶

利用接枝聚合在微米级硅胶微粒表面的甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)和对羟基苯磺酸钠(SHBS)发生环氧基团的部分开环反应,制得阴离子型双功能复合载体SHBS-PGMA/SiO2,研究了辣根过氧化酶(HRP)与载体SHBS-PGMA/SiO2间的静电相互作用在共价固定HRP过程中的作用及其机理. 结果表明,在较大的pH值范围内,复合载体SHBS-PGMA/SiO2表面携带高密度负电荷,pH=6.0时HRP分子荷正电,酶蛋白分子与载体间会产生强静电相互作用,显著促进HRP的固定化;当载体表面SHBS的键合率约为18%时,静电相互作用对固酶的促进作用最强,固定化酶的偶联率和比活力最高. 离子强度对酶的固定化也有很大影响,加入NaCl对载体与酶蛋白之间的静电相互作用力产生屏蔽作用,增大NaCl浓度可使固定化酶的偶联率和比活力降低.