茶多酚对假单胞菌抑菌机理研究

以假单胞菌为研究对象,考察茶多酚的抑菌作用及其抑菌机理。首先通过平板法确定茶多酚对假单胞菌最小抑菌浓度。然后采用滤纸片法确定不同浓度的茶多酚对假单胞菌的抑菌效果。通过生化检测研究茶多酚对假单胞菌的抑菌机理。结果表明:茶多酚对假单胞菌最小抑菌浓度为0.3%;茶多酚对假单胞菌有很强的抑菌作用;当茶多酚作用于菌体细胞后,能够逐步破坏其细胞壁的完整性,使得碱性磷酸酶渗出,继而使细胞膜的通透性增加,导致金属离子、蛋白质的渗漏使细胞代谢发生紊乱,逐渐破坏细胞结构,从而起到抑菌作用。     

柠檬烯对铜绿假单胞菌的抑菌活性及其机理

以铜绿假单胞菌为供试菌,研究了柠檬烯对铜绿假单胞菌的抑菌活性及机理。利用肉汤稀释法测定了最小抑菌浓度(MIC),评价了柠檬烯抑菌活性,通过细菌生长曲线的测定、扫描电镜观察、细胞膜通透性以及膜电位的测定,诠释柠檬烯对铜绿假单胞菌的抑菌机理。结果表明:柠檬烯能抑制铜绿假单胞菌的正常生长和增殖,最小抑菌浓度为10 mL/L;柠檬烯可以破坏细胞的正常形态,提高菌液的相对电导率,增加细胞膜的通透性;柠檬烯也能降低铜绿假单胞菌菌体的膜电位,干扰细胞正常代谢活动。柠檬烯通过破坏细菌细胞膜的方式,抑制铜绿假单胞菌生长,导致细菌细胞死亡。这说明柠檬烯可以改变铜绿假单胞菌细胞膜的通透性,破坏其正常细胞形态结构及完整性,从而有效地抑制铜绿假单胞菌的正常生长。     

芳樟醇对莓实假单胞菌的抑菌活性及机制

食品在生产、运输和贮藏过程中易受致病菌污染而引起食源性疾病。芳樟醇具有抗菌作用,但其作用机制尚不明确。研究芳樟醇对莓实假单胞菌的抑菌活性及作用机制,可为其作为天然食品防腐剂的开发提供理论依据。通过测定最小抑菌浓度、绘制细菌生长曲线评价芳樟醇的抑菌活性;通过扫描电子显微镜观察、结晶紫染色实验、二乙酸荧光素染色实验以及测定电导率、核酸泄漏、呼吸代谢活力和呼吸链脱氢酶活性的变化探究芳樟醇的抑菌机制。结果表明：芳樟醇对莓实假单胞菌具有较强的抑制作用,最小抑菌浓度为1.5 mL/L;芳樟醇能破坏莓实假单胞菌细胞的结构形态和细胞膜的完整性,增加细胞膜的通透性,导致胞内物质泄漏、膜外电导率升高;能抑制呼吸代谢活力和呼吸链脱氢酶活性,破坏呼吸链,导致胞内代谢紊乱。研究认为,芳樟醇可通过破坏莓实假单胞菌的细胞结构和抑制其呼吸代谢而发挥抑菌作用,有望作为天然防腐剂应用于食品的防腐保鲜。     

几种天然防腐剂的抑菌性能研究

本试验以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、假单胞菌、热死环丝菌为供试验菌,通过滤纸片试验法对常见十种天然防腐剂的抑菌性能进行研究,试验结果显示茶多酚对这四类菌都具有很强的抑菌作用;壳聚糖的抑菌谱也比较宽,但对各菌的抑菌力不如茶多酚强;大蒜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌表现出很强的抑菌作用;溶菌酶、蜂胶和Nisin都主要对G+有较强的抑制作用,而对G-作用弱或无作用;丁香提取液对金黄色葡萄球菌和热死环丝菌的抑菌作用较强;桂皮提取液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用较强,但对假单胞菌的抑菌作用相对较弱;生姜在试验中未表现出有抑菌作用,迷迭香的抑菌作用也很弱.由此可作为进一步优选几种天然防腐剂复配时的优选依据.     

生物保鲜剂对鱼类腐败菌抑菌效果比较及抑菌机理研究

通过分析抑菌圈直径和最低抑制量,研究葡萄柚种子提取物、葡萄籽提取物、柠檬提取物、百里酚和茶多酚5种生物保鲜剂对假单胞菌和腐败希瓦氏菌的抑菌效果进行比较。结果表明:百里酚、茶多酚和葡萄籽提取物表现出较好的抑菌效果,其中百里酚对两种菌都有很好的抑菌效果,尤其是对腐败希瓦氏菌抑菌效果显著。茶多酚对两种菌的抑菌效果相当,而葡萄籽提取物则对假单胞菌的抑菌效果更好,总体上百里酚的抑菌效果较好。通过测定菌液电导率、可溶性糖含量和蛋白质含量,分析百里酚对假单胞菌和腐败希瓦氏菌的抑菌机理。结果表明:百里酚处理组的菌液电导率、可溶性糖含量和蛋白质含量均比对照组大,百里酚的抑菌机理可能是:增大细胞膜通透性,破坏细胞膜外膜完整性,破坏磷脂双层。     

蓝莓叶多酚提取物对3种细菌的抑菌活性

以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和大肠杆菌为试验菌,采用涂布法确定蓝莓叶多酚的抑菌浓度及牛津杯法明确蓝莓叶多酚p H值对抑菌活性的影响。通过测定蓝莓叶多酚与3种试验菌作用前后的生长曲线、菌液的电导率值、260 nm处的吸光值和观察细胞形态变化,初步阐明蓝莓叶多酚对3种试验菌的抑菌机理。结果表明,蓝莓叶多酚对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌都有较强的抑菌活性,最低抑菌浓度分别为0.062 5%、0.062 5%和0.125%,在p H7.0~8.0抑菌性较强。经蓝莓叶多酚处理后,3种试验菌生长缓慢,菌液电导率值、260 nm处的吸光值均增大;蓝莓叶多酚作用于菌体细胞后,菌体细胞出现断裂,细胞壁凹陷等现象,表明蓝莓叶多酚可使细胞膜通透性增加,破坏细胞膜完整性,使细胞内容物外泄。     

脂肽和茶多酚对副溶血弧菌的协同抑菌效应和机理

研究脂肽和茶多酚对副溶血弧菌的协同抑菌效应和机理,为脂肽协同茶多酚应用于副溶血弧菌的控制提供理论依据。利用"棋盘法"研究脂肽和茶多酚对副溶血弧菌的协同抑菌效应;通过研究脂肽和茶多酚独立作用及协同作用对细胞膜完整性、细胞蛋白质合成及磷代谢方面影响来研究二者的协同抑菌机理。结果表明:脂肽和茶多酚对副溶血弧菌存在强烈的协同抑菌效应,部分抑菌浓度指数达到0.19;与1/16最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)脂肽或1/8 MIC茶多酚各自独立作用相比,在1/16 MIC脂肽和1/8 MIC茶多酚协同作用下,副溶血弧菌的细胞膜通透性显著增强,细胞部分蛋白质合成的抑制作用得到进一步加强,并且细胞的磷代谢完全受到抑制。结果表明,脂肽和茶多酚对副溶血弧菌具有强烈的协同抑菌效应,其协同抑菌作用主要通过二者协同破坏细胞膜的完整性,从而影响细胞部分蛋白质的合成与正常代谢实现的。     

壳聚糖复合保鲜剂对荧光假单胞菌的抑菌活性

该实验以质量分数1.5%壳聚糖、0.14%ε-聚赖氨酸、0.15%D-异抗坏血酸钠组成复合保鲜剂,以荧光假单胞菌为实验菌株,探究壳聚糖复合保鲜剂对水产品中的优势菌的抑菌性能和机理。实验方法：通过测定最小抑菌浓度(MIC)、抑菌圈、细菌生长曲线考察保鲜剂对荧光假单胞菌的抑菌活性,测定OD₂₆₀值、ATP酶和AKP酶活性的变化,细胞超微结构(SEM)和SDS凝胶电泳法研究保鲜剂的抑菌机制。结果表明：壳聚糖复合保鲜剂对荧光假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)为2.24 mg/m L。壳聚糖复合保鲜剂有着显著的抑菌活性,壳聚糖复合保鲜剂导致菌体的细胞壁膜通透性增大、完整性被破坏,菌体内ATP和AKP酶活性被抑制,显著低于(P<0.05)对照组;SDS凝胶电泳表明壳聚糖复合保鲜剂使菌蛋白条带颜色变浅且造成部分蛋白条带消失;细菌超微结构(SEM)显示壳聚糖复合保鲜剂使菌体发生变形破裂,内容物大量流出,导致菌体死亡。结论：该研究证明了壳聚糖复合保鲜剂良好的抑菌性能,研究了保鲜剂对荧光假单胞菌的抑菌机理,为水产品可食性涂膜保鲜的研发提供理论支持。     

苯乳酸对荧光假单胞菌基于细胞膜损伤和DNA破坏的双靶位抑菌机制

荧光假单胞菌是导致冷藏食品腐败变质常见的嗜冷菌,抑制荧光假单胞菌的生长繁殖对延长冷藏食品货架期和提高食品安全性具有重要意义。本实验通过测定最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）和时间-抑菌曲线考察苯乳酸对荧光假单胞菌的抑菌活性,从细胞膜电势、细胞膜渗透性和完整性、细胞超微结构、蛋白质表达和DNA结构等方面研究苯乳酸对荧光假单胞菌的抑菌机制。结果表明：苯乳酸对荧光假单胞菌的MIC为1.25 mg/mL;苯乳酸可导致细胞膜电势消散,且消散程度呈剂量依赖性;苯乳酸可导致细胞内钾离子显著泄漏（P＜0.05）,增加细胞膜的渗透性;MIC苯乳酸处理菌体0.5 h后,流式细胞术分析结果显示,碘化丙啶沾染率为57.6%,扫描电子显微镜结果显示,部分菌体破裂,表明苯乳酸可以破坏细胞膜完整性;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明苯乳酸对蛋白质表达无明显影响;凝胶阻滞电泳与荧光光谱结果显示苯乳酸可以破坏DNA结构。结论：苯乳酸可以通过损伤细胞膜和破坏DNA发挥双靶位抑菌作用,苯乳酸对荧光假单胞菌抑菌机制的阐释结果可为冷藏食品中嗜冷菌的控制以及苯乳酸在食品中的应用提供理论依据。     

蒲公英总黄酮对假单胞菌抑菌机理的探讨

对蒲公英总黄酮进行提取和抑菌实验。以革兰氏阴性假单胞菌做为试验菌,通过测定蒲公英总黄酮类提取物与假单胞菌的作用前后细菌培养液的电导率、可溶性总糖及蛋白质表达方面的变化,初步弄清了蒲公英总黄酮类提取物对假单胞菌的抑菌机理。研究结果表明,经过蒲公英总黄酮类提取物处理后,细菌培养液的电导率和可溶性总糖的浓度都增加,表明蒲公英总黄酮类提取物能破坏细胞膜的结构、导致细胞通透性增加,使细胞内容物外泄。另外,通过实验证实蒲公英总黄酮类提取物可以防碍细菌蛋白质的正常表达,导致细菌正常生理功能丧失,起到抑菌作用。     

茶多酚的制备及其抑菌活性的研究

以精制绿茶粉为原料,制备茶多酚。采用滤纸片法和平板计数法研究了制备所得的茶多酚对供试细菌和酵母的抑菌活性及茶多酚浓度、与菌种作用时间、pH值、温度和氯化钠浓度对抑菌活性的影响。结果表明:茶多酚对细菌有较强的抑菌活性,而对供试的酵母抑制作用不明显;茶多酚对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为6.25%、12.5%、25%;茶多酚的浓度越高,与菌种作用时间越长,抑菌活性越强;在弱碱性环境中的抑菌活性最强;一定温度内处理不影响茶多酚的抑菌活性;氯化钠能增强茶多酚的抑菌活性。     

黑果腺肋花楸多酚的抑菌效果及对α-淀粉酶活性的抑制作用

为探究黑果腺肋花楸多酚的抑菌效果及对α-淀粉酶活性的抑制作用,采用滤纸片法测定黑果腺肋花楸多酚对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黄曲霉、烟曲霉、米根霉、岛青霉、康宁木霉的抑制效果,并考察温度和pH值对黑果腺肋花楸多酚抑制金黄色葡萄球菌和烟曲霉活性的影响。通过建立动力学模型研究黑果腺肋花楸多酚对α-淀粉酶活性的抑制作用。结果表明：黑果腺肋花楸多酚对7 种供试菌均有一定的抑制作用,对烟曲霉的抑制效果最强,最低抑菌浓度为0.171 9 mg/mL;黑果腺肋花楸多酚对金黄色葡萄球菌的抑菌效果在pH 5.0条件下最强;而对于烟曲霉,pH值的变化对抑菌效果有破坏作用。黑果腺肋花楸多酚对α-淀粉酶活性具有显著的抑制作用,并在0.10～0.70 mg/mL质量浓度范围内,对α-淀粉酶的抑制活性强于阳性对照阿卡波糖,该抑制作用属于可逆非竞争性抑制,抑制常数为0.193 2 mg/mL。在202 nm波长处,黑果腺肋花楸多酚能够引起α-淀粉酶紫外吸收的增强和吸收峰的红移。通过深入开发研究,黑果腺肋花楸多酚可作为具有辅助防腐抑菌功能的α-淀粉酶抑制剂。     

黑果腺肋花楸多酚的抑菌活性研究

研究黑果腺肋花楸多酚对5种细菌和2种真菌的抑菌活性及其抑菌稳定性。采用双层平板打孔法,根据抑菌圈直径判断黑果腺肋花楸多酚的抑菌活性;采用比色法测定黑果腺肋花楸多酚对5种细菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),并以脂环酸芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌作为指示菌,研究Na Cl浓度、温度、紫外线对黑果腺肋花楸多酚抑菌稳定性的影响。研究结果表明黑果腺肋花楸多酚对脂环酸芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等5种细菌均具有较好的抑菌活性,对2种真菌基本无抑菌效果。黑果腺肋花楸多酚对脂环酸芽孢杆菌(DSM 3922,AAT-92)、阴沟肠杆菌(20051)的MIC为0.40 g/L,对枯草芽孢杆菌(10034)和产气肠杆菌(10017)的MIC分别为0.05 g/L和0.10 g/L。随着Na Cl浓度的增加,黑果腺肋花楸多酚抑菌活性显著下降。多酚溶液经热处理后,抑菌活性有微弱下降趋势,经紫外线处理后抑菌活性基本无变化。     

基于群体感应研究苦丁茶多酚对荧光假单胞菌腐败特性的抑制作用

为探究苦丁茶多酚对分离自卵形鲳鲹的腐败菌荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）的抑制作用,本文以报告菌株紫色杆菌(Chromobacterium violaceum) CV026 为检测模型,测定了苦丁茶多酚对细菌的群体感应抑制活性,以胞外酶活性、生物被膜形成量及形态、群集与泳动性为指标,测定了苦丁茶多酚对荧光假单胞菌腐败特性的抑制作用。结果表明:苦丁茶多酚对CV026、荧光假单胞菌的最小抑菌浓度分别为2.1、3.0 mg/mL;在亚抑菌浓度下,苦丁茶多酚可以显著降低紫色杆菌CV026 紫色菌素的产生量（P<0.05）;当浓度为2.0 mg/mL 时,对紫色菌素的抑制率达68.89%,且不影响CV026 菌株的生长;苦丁茶多酚能有效抑制荧光假单胞菌胞外酶活性、生物被膜形成、群集与泳动能力等相关腐败特性,其抑制作用呈剂量依赖性,苦丁茶多酚浓度为2.0 mg/mL时,对蛋白酶、脂肪酶活性、生物被膜形成、群集和泳动能力的抑制率分别达到80.68%、53.50%、44.90%、79.56%和90.12%;苦丁茶多酚具有较好的群体感应抑制活性,可以为新型天然群体感应抑制剂研发提供参考。     

费菜多酚含量的测定及体外抗菌活性研究

目的:研究药食两用植物费菜不同部位多酚含量及其70%甲醇提取物体外抗菌活性。方法:采用热回流提取法70%甲醇提取费菜,使用福林酚（Folin-Ciocalteu）法对其不同部位多酚含量进行测定;采用牛津杯法和96孔板法测定抑菌圈大小、最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）,比较费菜70%甲醇提取物对10种细菌的抑制作用。结果:费菜地上部分和地下部分多酚含量分别为45.59±0.87和96.25±0.47mg/g（以没食子酸量/干材料表示）,地下部分多酚含量是地上的2倍多。费菜70%甲醇提取物对8种常见的细菌均表现出较强的抑菌活性,金黄色葡萄球菌对提取物最为敏感,其MIC和MBC分别为6.25、25mg/mL。      

交东半岛艾蒿精油化学成分分析及其抗菌活性研究

对胶东半岛地区艾蒿的挥发油采用水蒸气蒸馏,索氏提取及超临界CO2三种方法提取,对其化学成分进行了研究,鉴定了31种活性物质,其中超临界CO2方法提取的艾蒿油活性成分种类和含量均高于水蒸气蒸馏法和索氏提取法。采用琼脂扩散法和微量肉汤稀释法对提取艾蒿油的抗菌活性进行了研究,以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和黄曲霉菌为供试菌种,结果表明上述三种提取方法所得艾蒿油对于所选的3种菌种均有良好的抗菌活性,尤对大肠杆菌抑制性最强,最低的抗菌浓度是0．1％（V／V）。     

三种茶叶中多酚提取物的抑菌活性及其对致病菌膜渗透性的比较分析

目的:研究3种茶叶中茶多酚的抑菌活性及对菌株细胞膜渗透性的影响。方法:以西湖龙井、铁观音和普洱茶为材料提取茶多酚,以滤纸片法测定茶多酚的抑菌圈直径,二倍肉汤稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),比较其抑菌效果。通过DNA渗透性实验、DNA损伤实验评价茶多酚对细胞膜完整性及对DNA损伤的影响。结果:相同条件下,绿茶(西湖龙井)中茶多酚含量最高为(48.12±3.22) mg/g,青茶(铁观音)次之为(37.36±2.64) mg/g,黑茶(普洱茶)最低为(31.61±1.92) mg/g。绿茶对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强,抑菌圈直径为(1.80±0.06) cm,MIC值为0.125 mg/mL、MBC值为0.25 mg/mL。随着茶多酚提取物浓度的增加,260 nm下的细菌渗透性物质逐渐增多,并且基因组DNA的损伤程度逐渐增大。结论:3种茶叶中绿茶具有更好的抑菌效果,并通过增强细菌细胞膜渗透性,进而对DNA产生一定的损伤。     

ε－聚赖氨酸抑菌机理研究

以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、青霉为研究对象,考察ε-聚赖氨酸的抑菌作用。首先通过抑菌实验确定ε-聚赖氨酸对大肠杆菌,枯草芽胞杆菌的最小抑菌浓度均为25mg/L,对青霉最小抑菌浓度为200mg/L。对于不同细菌,ε-聚赖氨酸表现出相似的抑菌动力学特征。通过细胞损伤实验,研究ε-聚赖氨酸不同浓度、不同时间后对菌体造成的伤害。通过细胞形态观察以及生化检测研究ε-聚赖氨酸对细菌的抑菌机理。初步结论：当ε-聚赖氨酸作用于菌体细胞后,逐渐破坏细胞结构,最终导致细胞死亡,从而起到抑菌作用。