酶解高水解度大豆蛋白肽的研究

通过对中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、Alcalase碱性蛋白酶3种酶对大豆分离蛋白水解程度的研究，优化试验方案，探索制备高水解度大豆蛋白水解液的条件组合，并对3种酶进行了比较，以找出适合于大豆蛋白水解的蛋白酶。     

酶解高水解度大豆蛋白肽的研究

通过对中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、Alcalase碱性蛋白酶3种酶对大豆分离蛋白水解程度的研究,优化试验方案,探索制备高水解度大豆蛋白水解液的条件组合,并对3种酶进行了比较,以找出适合于大豆蛋白水解的蛋白酶。     

大豆蛋白的酶解及其抗氧化活性研究

研究了大豆分离蛋白的酶解条件及其产物的抗氧化活性,分析了酶解过程中蛋白水解度(DH)、TCA-NSI变化.结果表明,碱性蛋白酶用于制备大豆蛋白抗氧化肽具有明显的优势,正交试验优化酶解条件下得到的酶解物羟自由基清除率可达53.43%,清除活性的IC50为1.708 mg/mL,Fe2+螯合率为80.13%,螯合活性的IC50为0.822 mg/mL.酶解物的羟自由基清除活性、Fe2+螯合能力与DH、TCA-NSI之间并不呈线性关系.     

2709碱性蛋白酶酶解大豆分离蛋白的研究

从预处理温度、预处理时间、底物浓度、加酶量、酶解温度、酶解时间等方面研究了2709碱性蛋白酶对大豆分离蛋白酶解的影响，并运用正交试验设计和方差分析优化了酶解条件。结果表明，在70℃预处理10min水解度得到极大的提高。单因素正交试验结果表明：以3％底物浓度，4000U／gSPI加酶量，50℃酶解4、5h效果较好。方差分析结果表明，加酶量和酶解温度对水解度影响显著，酶解时间和底物浓度对水解度影响不显著。     

蛋白酶酶解酱油沉淀的工艺研究

对蛋白酶酶解低盐固态和原池浇淋2种酿造工艺的酱油沉淀进行了研究,分析了中性蛋白酶的加酶量、pH值、酶解时间、料液比对蛋白质水解度的影响,并通过正交试验优化了中性蛋白酶酶解酱油沉淀的工艺条件,确定了工艺参数.其最佳工艺条件为原池浇淋酱油沉淀的最佳酶解条件为料液比1∶3,酶解6h,加酶量为4000U/g原料,pH值为6.5,水解度可达到43.8％;低盐固态酱油沉淀的最佳酶解条件为料液比1∶3,酶解8h,加酶量为6000U/g原料,pH值为6.5,水解度可达到53.8％.方差分析表明,4因素均对水解度有显著影响.利用中性蛋白酶可较有效地酶解酱油沉淀.     

枯草芽孢杆菌蛋白酶水解大豆蛋白的研究

本研究选用枯草芽孢杆菌蛋白酶对大豆蛋白进行水解,分别研究了酶浓度、温度、pH和底物浓度等对酶解效果的影响,得出高水解度低聚肽酶解的最佳工艺条件为:酶浓度8000u/g、温度55℃、pH7.0、底物浓度2%、水解时间4h。     

牛骨酶解工艺及其酶解液中游离氨基酸的分析研究

本实验以牛骨为原料,以水解度为牛骨蛋白酶解液酶解程度的指标,确定了木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶双酶分步水解牛骨的工艺条件:将粉碎粒度为10mm 20mm的牛骨碎片,在2kg/cm2的高压蒸汽压下蒸煮3h,降温至50℃,后调节pH6.5,后加入木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶双酶分步水解,通过正交试验确定了木瓜蛋白酶酶解工艺:酶解温度为50℃,pH为6.5,酶解时间为3h,E/S为4000U/g;碱性蛋白酶酶解工艺:酶解温度为65℃,pH为8.5,酶解时间为3h,E/S为7000U/g。并对酶解液前后的氨基酸种类和含量进行了比较,酶解后较酶解前多了苯丙氨酸和色氨酸,各氨基酸含量较酶解前明显增加,为牛骨蛋白水解液制备肉味香精提供了依据。     

枯草杆菌蛋白酶水解对大豆蛋白肽谱变化规律的影响

该研究针对芽孢菌来源的枯草杆菌蛋白酶对大豆蛋白的水解过程,探究过程中形成肽谱的变化规律。使用高效液相色谱-电喷雾四极杆飞行时间串联质谱检测不同时间点的水解多肽,基于非特异性酶切肽谱鉴定方法,解析多肽序列和组成,展示肽谱的动态变化特征和氨基酸位点种类选择的倾向性。结果发现,枯草杆菌蛋白酶更倾向于酶切大豆蛋白中组氨酸C 端、天冬酰胺C 端、丙氨酸N 端和苏氨酸N 端的肽键。     

Alcalase蛋白酶酶解大豆蛋白制备啤酒糖浆复配液的研究

采用Alcalase蛋白酶酶解大豆蛋白,通过测定酶解产物的蛋白质回收率、水解度、隆丁(Lundin)区分以及SDS-PAGE电泳图谱分析,确定在酶解条件为酶解温度55℃、底物质量分数5%、酶量750 U/g、pH 8.0、反应时间0.5～1.0 h时所得的酶解液为浅棕色,其Lundin分布较为接近麦汁Lundin区分分布的要求,蛋白质回收率约65%,可与啤酒糖浆复配作为啤酒发酵的氮源。     

天然大豆蛋白的选择性酶解

研究了几种微生物蛋白酶水解天然大豆蛋白的选择性。用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析酶解过程中大豆蛋白各组分的变化,电泳结果显示-βconglycinin比glycinin容易被蛋白酶水解,-βconglycinin的α’亚基比α亚基更容易水解,-βconglycinin的β亚基比α’亚基和α亚基更难水解;glycinin的酸性亚基比其碱性亚基更容易被水解。     

Isoflavone during protease hydrolysis of defatted soybean meal

The study examined the effects of proteases on the isoflavones during enzymatic hydrolysis of soybean flour. Protease itself did not affect the isoflavones during hydrolysis, whereas the applied conditions and contaminated β-glucosidase in the enzyme could greatly affect the content and composition of isoflavones. Soybean flour hydrolysis by ENZECO Alkaline Protease L-FG at high pH (10) resulted in complete loss of malonylglucosidic and acetylglucosidic conjugates in the hydrolysate. However, these conjugates such as 6″-O-malonylgenistin and 6″-O-malonyldaidzin remained as the principal compounds accounting for 66.2, 58.3 and 70.5% of the total isoflavones in the Protease M “Amano”, Alcalase 2.4L, and neutral enzyme ENZECO Neutral Protease-NBP-L hydrolysates, respectively, compared to that of 57.8% in the original soybean flour. The residue prepared by Protease M contained 10 times higher aglycones than that of soy flour, which was due to the contaminated β-glucosidase activity in the enzyme preparation. Our result showed that β-glucosidase contaminated in Protease M has a unique selectivity compared to that of the purified almond β-glucosidase. Results from the study indicated that hydrolysis of soybean flour may provide another alternative approach to enrich aglycone isoflavones in soybean-containing products.     

大豆粕蛋白酶酶解条件和产物分析研究

以水解度为衡量指标,通过正交试验设计,对木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和As1.398蛋白酶酶解大豆粕的最佳水解条件进行了筛选.试验结果表明:木瓜蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH7.0、温度60℃、时间5 h、酶浓度5%.胰蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH7.0、温度50℃、时间7 h、酶浓度5%;As1.398蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH6.5、温度50℃、时间7 h、酶浓度5%.对酶解产物进行超滤和SDS-PAGE电泳分析表明,因酶解条件不同,大豆粕酶解产物中蛋白质和肽的组成及其数量也不同;酶的种类不同,大豆粕酶解产物组成也不同;大豆粕水解度越高,其酶解产物中小分子肽数量越多.     

复合蛋白酶水解高温变性豆粕的研究

以高温变性豆粕为原料,采用单因素和正交实验方法,对高温变性豆粕在复合蛋白酶作用下的水解特性进行深入研究.考查高温变性豆粕中蛋白质水解度随酶添加量、酶解温度、酶解时间、pH及底物浓度的变化规律,得到了水解高温变性豆粕的最佳水解条件.结果表明,复合蛋白酶水解高温变性豆粕的最佳条件为:酶添加量18000U/g,温度55℃,水解时间4h,pH为7.0,底物浓度9%.此条件下高温变性豆粕中蛋白质水解度可达到36.8%.     

罗汉果蛋白酶水解大豆蛋白研究

研究了采用罗汉果蛋白酶水解大豆分离蛋白制备大豆肽的水解工艺;分析了温度、pH、底物浓度、酶与底物比(质量百分比)和时间对酶水解的影响;得到了罗汉果蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解工艺为温度60℃、pH9.0、底物浓度5.0%、酶与底物比5.0%、水解时间1h。     

不同蛋白酶对脱脂豆粉酶解条件的研究

以水解蛋白得率和蛋白质水解度为评价指标,研究了内切蛋白酶和外切蛋白酶酶解脱脂豆粉的适宜条件.结果表明:内切蛋白酶最适酶解条件为pH7.5,温度60℃,酶解时间6h,酶用量1.5%,水与脱脂可粉的比为7:1;外切蛋白酶最适酶解条件为pH5.5,温度55℃,酶解时间9h,酶用量1.5%,水与脱脂豆粉的比为7:1.在最适酶解条件下,内切蛋白酶酶解脱脂豆粉的水解蛋白得率达到50.6%,外切蛋白酶酶解脱脂豆粉的蛋白水解度为26.7%.     

中性蛋白酶水解玉米黄粉的工艺优化

采用响应面分析法优化中性蛋白酶水解玉米黄粉的工艺条件。在单因素试验基础上,应用Box-Benhnken中心组合设计试验,选取对玉米蛋白水解度有明显影响的3个因素(pH值、温度和反应时间)进行优化。最佳工艺条件为:在底物质量浓度6.0 g/(100 ml),酶用量体积分数1.0%时,pH7.0,温度50℃,水解时间5 h。在此工艺条件下,水解度为25.25%,与预测值24.16%基本相符。     

玉米渣中蛋白质的酶水解

玉米面筋粉（玉米渣）被２７０９地衣形芽孢杆菌碱性蛋白酶水解，对酶解的最佳ｐＨ、温度、固液比、时间和加酶量进行了研究。酶解后酸可溶性肽的含量明显升高。经过ＨＰＬＣ对酶解产物的分析，发现经酶解后玉米面筋中蛋白质的分子量明显下降，且主要分布在１０，０００～３，０００道尔顿左右。本文还对该酶的水解曲线进行了描述。     

黑曲霉发酵豆粕产蛋白酶活性的研究

采用黑曲霉AS3.350发酵豆粕,研究其所产的蛋白酶的活力。运用响应面分析法优化影响发酵的主要因素:接种量、初始pH值、发酵培养基浓度等,采用多元二次回归方程拟和上述3因素与蛋白酶活力间的函数关系,确定了黑曲霉发酵豆粕产蛋白酶的最佳发酵条件,为黑曲霉发酵豆粕产大豆肽的研究提供了相应的工艺参数和一定的理论依据,有利于提高大豆肽的产率。     

酸性蛋白酶水解玉米蛋白粉反应过程的研究

在底物浓度100 g/L、温度55 ℃、酶与底物比12%的反应条件下,对黑曲霉酸性蛋白酶水解玉米蛋白粉反应过程进行研究.结果显示,黑曲霉酸性蛋白酶不能完全水解玉米蛋白,降解率和水解度随水解时间延长均呈现出水解初期增加较快,然后趋于缓慢的问题.产生上述问题的根源在于,黑曲霉酸性蛋白酶在水解玉米蛋白过程中存在自身失活和水解产物对固体底物降解反应的竞争抑制作用.     

企鹅珍珠贝肉蛋白酶解及酶解产物的抗氧化活性

用水解蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶对企鹅珍珠贝蛋白进行水解,以酶解液中的氨基态氮及风味为指标,确定风味蛋白酶为水解企鹅珍珠贝蛋白的最适蛋白酶,单因素及正交实验确定风味蛋白酶的最佳水解条件为:加酶量0.8%、温度55℃、起始p H6.0、固液比1∶1.0、酶解6h后的氨基酸态氮为3.65g/100m L。抗氧化实验表明,酶解产物具有较强的羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基抑制及还原能力。研究结果将为企鹅珍珠贝肉的开发提供参考。