地衣芽孢杆菌P-104发酵生产γ-聚谷氨酸条件优化

对地衣芽孢杆菌P-104发酵合成γ-PGA的条件(接种时间、接种量和培养基组成等)进行了优化,并在发酵罐中进行了批式发酵实验.结果表明,该菌可利用合成培养基生产较高浓度超高分子量(大于2500 kDa)的γ-PGA,最佳培养基组分为(g/L):葡萄糖80,谷氨酸钠70,柠檬酸钠10,(NH4)2SO4 10,MnSO4 0.15,MgSO4 0.8,K2HPO4 0.6,NaNO34.接种时间与量分别为8h和3％((φ))、初始pH 7.5条件下,37℃下180 r/min摇瓶培养24 h,发酵液中γ-PGA浓度可达44.7 g/L,比生产速率为1.49g/(L·h),是已报道的同类比生产速率的2倍.采用优化培养基在6.6 L发酵罐中批式发酵培养33 h,γ-PGA浓度为32 g/L,比生产速率为0.97 g/(L·h).     

氨基甲酸乙酯水解酶在枯草芽孢杆菌中的表达及发酵优化

将来源于赖氨酸芽孢杆菌SC02的氨基甲酸乙酯水解酶(UH)基因在枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB600中进行克隆和表达,在枯草芽孢杆菌中实现了UH活性表达,在摇瓶水平通过单因素考察和响应面分析实验对氨基甲酸乙酯水解酶发酵进行优化. 结表明,酶活最高可达到14.20 U/mL,产酶最佳培养基成分为：淀粉10 g/L、磷酸氢二钾9 g/L、麦芽浸膏25 g/L、硫酸镁1 g/L、胰蛋白胨55 g/L,最适发酵温度为37℃,最佳接种量4%. 在3 L发酵罐中采用最优发酵条件,酶活在16 h达到18.03 U/mL.     

醋糟酶解液的制备及其发酵生产枯草芽孢杆菌TS-02

采用水热处理技术对醋糟进行预处理,优化了醋糟的纤维素酶酶解条件,制得葡萄糖浓度27.00 g/L的醋糟酶解液. 以醋糟酶解液为基础培养基替代培养基中的葡萄糖,发酵生产枯草芽孢杆菌TS-02活菌制剂. 结果表明,在醋糟酶解液培养基中摇瓶发酵44 h时活菌数活菌数最高达4.64×1010个/mL, 7 L发酵罐中发酵周期为22 h,活菌数达6.16×1010个/mL,芽孢率达80%以上.     

蛋白酶产生菌的筛选及发酵条件的优化

筛选了植物蛋白加工用蛋白酶产生菌,为酶的分子改造和植物蛋白加工提供材料基础。通过不同菌株筛选,获得了一株蛋白酶的高产菌株枯草芽孢杆菌X12。经过单因子实验,确立了产酶的最适培养基配方:蔗糖7.5 g/L,黄豆粉6.0 g/L,MnSO40.04 g/L,初始pH=7.0,装液量75 mL/250 mL。结论:按照所优化的产酶条件于37℃,180 r/min,经60 h培养,发酵液最终酶活达1 868.4 u/mL。     

枯草芽孢杆菌产芽孢发酵培养基的优化研究

在三角瓶培养条件下,采用单因素实验对枯草芽孢杆菌B53发酵培养基碳源、氮源进行了优化。在此基础上进行了正交实验,确定了菌株B53最佳的产孢发酵培养基为葡萄糖25g/L、大豆蛋白胨14g/L、玉米浆17g/L、NaCl 3g/L,MgSO_4 0.2g/L。在最优条件下发酵培养,芽孢浓度为9.6×10~9个/mL。     

一株污泥减量菌喷雾干燥条件的优化

使用摇瓶发酵制备解淀粉芽孢杆菌,喷雾干燥将其制备成菌粉。采用单因子实验首先对影响摇瓶发酵制备解淀粉芽孢杆菌的条件因素进行优化,然后采用单因子实验和正交实验,对影响喷雾干燥产物指标的因素进行优化。优化后的摇瓶发酵条件为：5g/L可溶性淀粉、10g/L氮源（酵母粉与蛋白胨体积比为2：1）、接种量7%、摇瓶装液量40%,摇床200r/min、30℃条件下摇瓶发酵48h,菌液活菌数为8.3×10⁸CFU/mL,优于优化前的3.8×10⁸CFU/mL。优化后的操作条件为：进风温度180℃、热风流量315m³/h、进样速度500mL/h、麦芽糊精质量分数5%。各因素对其喷雾干燥工艺的影响程度为：麦芽糊精浓度 > 进料速度 > 进风温度 > 空气流量。在此条件下,解淀粉芽孢杆菌菌粉活菌数可达1.28×10¹⁰CFU/g。     

30L发酵罐培养枯草芽孢杆菌产高密度芽孢的研究

通过本实验室优化的培养基配方,结合前期流加葡萄糖液,使残糖维持在0.5%以下,溶氧和转速关联的培养方式,在30L的发酵罐中枯草芽孢杆菌菌数和芽孢较快达到9次方,培养26h,菌数最高能达到1.2×1010个/m L,芽孢最高能达到1.1×1010个/m L。     

隔夜茶水抑菌活性的研究

采用滤纸片扩散法测定不同浓度的一道茶、二道茶在浸泡12 h后对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、青霉四种微生物的抑制作用。一道茶、二道茶对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌有较明显的抑制作用,一道茶的抑制作用大于二道茶,对黑曲霉、青霉没有抑制作用。一道隔夜茶水对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度分别为0.063 g/mL、0.077 g/mL。本实验证实了隔夜茶水的抑菌作用,为其变废为宝提供理论依据。     

枯草芽孢杆菌HG-02聚谷氨酸发酵条件优化

筛选得到了一株高产γ-聚谷氨酸的枯草芽孢杆菌HG-02。通过单因素试验和正交实验对发酵培养基和培养条件进行了优化,小试发酵验证结果显示,优化后γ-聚谷氨酸的发酵质量浓度达35.9 g/L。优化后的发酵培养基为：蔗糖4%,蛋白胨3.5%,谷氨酸钠6%,硫酸镁0.1%,氯化钠0.5%,氯化钙0.01%,磷酸氢二钾0.05%,硫酸锰0.02%,消泡剂1%。优化后的培养条件为：初始pH7.0,装液量40%,接种量6%,摇床转速为220 r/min, 37℃恒温培养48 h。     

枯草芽孢杆菌液体发酵培养基成分优化研究

通过实验对枯草芽孢杆菌产孢培养基成分中的碳源、氮源、无机盐、生长因子等成分进行筛选与优化,以确定适合枯草芽孢杆菌产芽孢的最佳培养基配方。多次试验的结果表明,通过优化培养基配方,芽孢产率得到提高。通过对碳源、氮源以及无机盐的筛选与优化,实验最终确定枯草芽孢杆菌的最佳产孢培养基的配方为:蛋白胨10 g,硫酸铵2.5 g,牛肉浸出粉3 g,氯化钠5 g,磷酸氢二钾2 g,聚乙烯醇5 g,蒸馏水1000 m L。     

一株采油枯草芽孢杆菌发酵条件优化

对一株适用于采油的枯草芽孢杆菌发酵培养基组成和发酵条件进行了优化。通过实验室内的摇床发酵,得到优化后培养基为:蔗糖50 g/L,NaNO_3 3.4 g/L,NH_4Cl 1.1 g, KH_2PO_4 2.5 g/L,12H_2O·Na_2HPO_4 30 g/L,7H_2O·MgSO_4 0.8 g/L,脂肽平均产量为4.2 g/L,表面张力可降低至25.15 mN/m;同时,因为在采油工业中,每吨NH_4Cl比每吨NaNO_3的成本低30%左右,所以通过NH_4Cl的加入,减少了NaNO_3的用量,大大降低了发酵成本;最佳培养条件为:温度37℃,装液量150 mL/250 mL,发酵时间100 h。     

碳源和Mn2+对地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis WBL-3生产聚γ-谷氨酸的影响

引言 聚γ-谷氨酸[γ-Poly (glutamic acid),γ-PGA]是由某些杆菌产生的一种胞外氨基酸聚合物,是一种水溶性和可生物降解的新型生物高分子材料,由D-和L-谷氨酸通过γ-谷氨酰键聚合而成[1,2].γ-PGA可作为药物的载体应用于医药中,起到逐步释放药物、延长药效时间和增加药效的作用[3～5];此外γ-PGA还能作为增稠剂、保湿剂等应用于食品及化妆品的生产[6];在农业方面γ-PGA还可作为蔬菜、水果的防冻剂[7].1942年Bovarnick等首次发现枯草芽孢杆菌(Bacillus sustilis)能够产生γ-PGA[8],G.Atsuo等[6]探讨了不同培养条件对Bacillus sustilis IFO33350     

地衣芽孢杆菌P-104发酵生产g-聚谷氨酸条件优化

对地衣芽孢杆菌P-104发酵合成g-PGA的条件(接种时间、接种量和培养基组成等)进行了优化,并在发酵罐中进行了批式发酵实验. 结果表明,该菌可利用合成培养基生产较高浓度超高分子量(大于2500 kDa)的g-PGA,最佳培养基组分为(g/L)：葡萄糖 80,谷氨酸钠 70,柠檬酸钠 10, (NH4)2SO4 10, MnSO4 0.15, MgSO4 0.8, K2HPO4 0.6, NaNO3 4. 接种时间与量分别为8 h和3%(j)、初始pH 7.5条件下,37℃下180 r/min摇瓶培养24 h,发酵液中g-PGA浓度可达44.7 g/L,比生产速率为1.49 g/(L×h),是已报道的同类比生产速率的2倍. 采用优化培养基在6.6 L发酵罐中批式发酵培养33 h, g-PGA浓度为32 g/L,比生产速率为0.97 g/(L×h).     

芽孢杆菌应用于聚乳酸的降解及其降解条件的研究

采用液体培养法,将巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌应用于聚乳酸生物降解,探究降解过程中培养条件的改变,对蛋白酶活性以及薄膜降解过程的影响。结果表明：不同种类的诱导物能够提高芽孢杆菌的蛋白酶活性,巨大芽孢杆菌的最高蛋白酶活性约为23.79 U/mL,枯草芽孢杆菌的最高蛋白酶活性约为11.61 U/mL,解淀粉芽孢杆菌的最高蛋白酶活性约为21.23 U/mL。三种芽孢杆菌中,巨大芽孢杆菌对聚乳酸的生物降解影响最大。初始pH值为8.0,接种2%(V/V)种子液,1%酵母浸粉作为降解诱导物,可以有效加快巨大芽孢杆菌对聚乳酸的降解速率,5 d后降解率可达20.96%。薄膜表面存在菌生长,生物降解后出现轻微裂痕。     

一株聚乙烯醇降解酶产生菌的产酶条件优化

枯草芽胞杆菌WSH-062在摇瓶培养中能产生胞外的PVA降解酶。通过单因素及正交实验对其进行了发酵条件的优化。研究结果表明:该菌产生的PVA降解酶为诱导型酶;2 g/L的复合氮源(NaNO3和酵母粉的配比为1∶1)就能满足细胞生长和产酶的营养需要。正交实验分析得到最优的发酵培养基为:PVA 30 g/L,酵母粉12.2 g/L,NaNO3 10.1 g/L,MgSO4.7H2O 0.35 g/L,KH2PO4 3 g/L,pH值7.2。优化之后的PVA降解酶酶活达到5.00 U/mL,比优化前提高了4.75倍,并且重复性较好。     

3种生物农药对水稻纹枯病菌的室内毒力及田间防效

[目的]筛选水稻纹枯病绿色防控的药剂。[方法]采用生长速率法和叶面喷雾法分别测定3种生物农药对水稻纹枯病菌的室内毒力和田间防效。[结果]大蒜素和中生菌素对水稻纹枯病菌的室内EC50值分别为29.10、29.03 mg/L,枯草芽孢杆菌EC50值为23.90亿活芽孢/L;6%大蒜素EW 200～1 200 mg a.i./L、3%中生菌素WP 50～300 mg a.i./L和1 000亿活芽孢/g枯草芽孢杆菌WP 400～1 500亿活芽孢/L药后7、14 d对水稻纹枯病的田间防效均在66%以上。[结论]大蒜素、中生菌素和枯草芽孢杆菌适用于水稻纹枯病的防治。     

PR-CS/γ-PGA纳米胶囊的制备和表征

以壳聚糖（CS）和聚谷氨酸（γ-PGA）为壁材,采用离子凝胶法制备包覆苯乙基间苯二酚（PR）壳聚糖/聚谷氨酸（PR-CS/γ-PGA）纳米胶囊,提高PR的稳定性。研究了γ-PGA质量浓度、CS溶液pH以及PR质量浓度对包覆PR-CS/γ-PGA纳米胶囊粒径大小、Zeta电位和包覆率的影响。研究结果表明,体系中CS质量浓度为1.33 mg/mL时,制备PR-CS/γ-PGA的最佳条件：CS溶液pH为4.5,γ-PGA质量浓度为0.27 mg/mL,PR质量浓度为0.4 mg/mL,反应时磁力搅拌速度为400 r/min,γ-PGA滴加速度为0.5 mL/min,反应时间为1 h。通过对PR-CS/γ-PGA纳米胶囊进行系统表征：TEM扫描表明,PR-CS/γ-PGA纳米胶囊呈球形。FT-IR分析表明,CS与γ-PGA之间发生静电相互作用形成CS/γ-PGA纳米胶囊,且PR-CS/γ-PGA纳米胶囊中含有PR。TGA曲线表明,CS/γ-PGA纳米胶囊可以提高PR的热稳定性,PR-CS/γ-PGA纳米胶囊成功包覆了PR。     

田基黄总黄酮提取物的抑菌性能研究

用抑菌圈法考察了田基黄总黄酮浓度、pH和处理温度对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌活性.结果表明,总黄酮提取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌都具有良好的抑菌活性,最小抑菌浓度分别为3.125,6.25,1.562 5 μg/mL.总黄酮浓度为12.5 μg/mL的田基黄提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌分别在pH为8,7～8和5抑菌活性最大.总黄酮提取液具有较强的耐热性能,在20℃和80℃加热处理30 min后对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈分别为12.8,10.2,11.3 mm和12.0,10.0,10.8 mm.     

解淀粉芽孢杆菌ZM9液体发酵伊枯草菌素A培养基优化

运用单因子实验法和正交实验法,得到解淀粉芽孢杆菌ZM9液体发酵伊枯草菌素A的优化培养基为:豆粕80 g/L,玉米淀粉30 g/L(液化处理),KH2PO41 g/L,Mg SO40.5 g/L,Fe SO40.15 g/L,Mn SO40.05 g/L,伊枯草菌素A的产量为3.37 g/L,较出发培养基产量2.19 g/L提高了53.88%。     

解淀粉芽孢杆菌ZM9液体发酵伊枯草菌素A培养基优化

运用单因子实验法和正交实验法,得到解淀粉芽孢杆菌ZM9液体发酵伊枯草菌素A的优化培养基为:豆粕80 g/L,玉米淀粉30 g/L(液化处理),KH2PO41 g/L,Mg SO40.5 g/L,Fe SO40.15 g/L,Mn SO40.05 g/L,伊枯草菌素A的产量为3.37 g/L,较出发培养基产量2.19 g/L提高了53.88%。