化妆品中金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌检出能力验证结果与分析

为提升对化妆品中金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的检测能力,增强实验室竞争能力,本实验室参加CNAS T0710化妆品中金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌检出能力验证。按照能力验证作业指导书和《化妆品卫生规范》(2007年版)的要求进行增菌,采用16Sr DNA全序列分析、全自动微生物生化鉴定系统(VITEK2)和全自动微生物基因指纹鉴定系统(Ribo Printer)对分离出的疑似菌进行鉴定。结果显示,样品HZP167-1检出金黄色葡萄球菌,HZP167-2检出铜绿假单胞菌,HZP167-3检出金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌,HZP167-4检出表皮葡萄球菌,HZP167-5未检出。5个样品测试均取得满意的结果。     

双重荧光定量PCR技术在药品微生物检验中的应用

目的建立快速检测金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的双重荧光定量PCR方法并在药品微生物检测中应用。方法通过设计特异性引物和探针,扩增金黄色葡萄球菌的femB基因和铜绿假单胞菌的DNA gyrase subunit B基因,建立荧光定量PCR方法。将该方法应用于30批次药品微生物检测。结果建立同时检测金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的双重荧光定量PCR方法,从DNA提取到检测完毕仅需2 h。检测灵敏度为50 copies/μL,特异性为100%。30批次样品检验结果表明该方法与传统细菌培养方法结果一致。结论该法缩短了检测时间,具有良好的灵敏性和特异性,在药品微生物检验中有很好的应用前景。     

荧光光电法检测化妆品中致病菌的研究

建立了一种利用荧光光电技术快速检测化妆品中致病菌的方法。分别对化妆品中的大肠杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌进行检测。结果显示此方法检测大肠杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的特异性良好,检测菌液和人工污染爽肤水及乳液样品的灵敏度均达到100cfu·mL-1,总检测时间可控制在14 h以内。     

生漆漆液对三种常见菌的抑制作用初步研究

以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及铜绿假单胞菌为供试菌,对湖北恩施巴东野三关出产的生漆漆液进行抑菌性实验。实验结果显示,金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌三种常见菌,在分别培养0、1、2、4、24小时后观察,发现生漆漆液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌均具有抑菌效果,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好。通过对生漆漆液抑菌性试验结果,为生漆在各种实用器具方面的开发利用提供参考。     

赤丹丸与其组方药材的体外抑菌试验

目的 研究赤丹丸及其组方药材的体外抑菌作用.方法 采用液体培养基2倍稀释法测定赤丹丸及其组方药材的水提取物 和乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色念球菌的体外最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC).结果 赤丹丸及其组方药材的水提取物和醇提取物对白色念球菌的抑菌作用明显弱于对其它3种菌的作用(P＜0.05),其中药材的水提取物体外抑制白色念球菌作用相对较强(P＜0.05);各种提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的抑菌作用也各有差异.药材水提取物对铜绿假单胞菌、白色念珠菌的抑菌作用最强(P＜0.05);赤丹丸醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的抑菌作用最强(P＜0.05).结论 赤丹丸及其组方药材的水提取物与醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌均具有体外抑菌作用.     

4种眼影微生物检验方法挑战性试验研究

目的:建立4种类型眼影微生物检验方法。方法:参照《化妆品安全技术规范》2015年版微生物检验方法和美国化妆品微生物测试USP51和USP61+62,对4种眼影(NOVO键盘指尖酷潮眼影星辰11#、希貝单色钻石眼影41#、希貝单色钻石眼影14#和希貝单色钻石眼影18#)进行菌落总数、霉菌和酵母菌以及金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和耐热大肠菌群进行挑战性试验。结果:计数方法中细菌总数采用1:20,1:100供试溶液1ml注皿,霉菌和酵母菌总数采用1:20供试溶液1ml注皿;控制菌(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和耐热大肠菌群)均采用常规方法。结论:通过微生物挑战性试验,建立4种眼影微生物检验方法。     

伊丝诺轻奢焕色口红微生物检验方法挑战性试验研究

目的:验证伊丝诺轻奢焕色口红微生物检验方法可行性;方法:参照《化妆品安全技术规范》2015年版微生物检验方法和美国化妆品微生物测试USP51和USP61+62,对伊丝诺轻奢焕色口红进行细菌、霉菌、酵母菌以及金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和耐热大肠菌群进行挑战性试验;结果:伊丝诺轻奢焕色口红计数方法:细菌总数采用1:20供试溶1ml注皿,霉菌和酵母菌总数采用1:20供试溶1ml注皿;控制菌:金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和耐热大肠菌群采用常规方法。结论:通过挑战性试验,伊丝诺轻奢焕色口红微生物检验方法可行。     

微生物试验能力验证结果与分析

为提高实验室微生物检测能力,增强实验室竞争能力,参加了2017年由中检院组织的NIFDC-PT-123(化妆品中金黄色葡萄球菌)和NIFDC-PT-098(乳粉中沙门氏菌)2项检验能力验证。按照各项指导书以及相关标准对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌进行了分离,并对分离出的疑似菌进行了生化鉴定。结果发现,样品TF1230019-18未检出金黄色葡萄球菌,样品TF1230019-70检出金黄色葡萄球菌;样品TF098156-336未检出沙门氏菌,样品TF098156-76检出沙门氏菌。2项4个样品均取得满意的结果。     

荞麦七提取物的体外抑菌活性研究

以铜绿假单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌为受试菌,通过最小抑菌浓度测定、抑菌圈的判断、生长曲线的绘制及菌液电导率的测定等方法,研究了荞麦七的4种提取物(水提物、蒽醌、鞣质、黄酮)的体外抑菌活性。结果表明:荞麦七水提物对枯草芽孢杆菌及铜绿假单胞菌抑制作用较强;荞麦七蒽醌对金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌抑制作用较强;荞麦七鞣质对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌抑制作用较强;荞麦七黄酮对大肠杆菌抑制作用最强。     

中药饮片鱼腥草中微生物污染情况研究

考察广东省中药饮片鱼腥草中微生物污染情况,为中药饮片微生物污染限度标准制定提供参考。方法参考《中国药典》2015年版第3公示稿微生物相关检查方法,对10份鱼腥草样品进行微生物计数、耐热菌计数和致病菌的检查,掌握其生物负载水平。结果对10份鱼腥草样品检测发现微生物污染较为严重,样品需氧菌总数计数结果介于10~4~10~7 CFU/g,霉菌和酵母菌总数计数结果介于10~2~10~5 CFU/g,耐胆盐革兰阴性菌污染比较严重且出现较为异常的实验现象,两批次来源于同一厂家的样品检出控制菌大肠埃希菌,未检出沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌。此外10批样品中还分离到3株典型污染微生物,分别为1株产气肠杆菌和2株阴沟肠杆菌。结论中药饮片微生物污染较为严重,需要积累更多的数据以完善其检验方法和评价标准,以提升中药饮片及中药制剂的质量。     

非特殊彩妆类化妆品的微生物检测方法的评价

对非特殊彩妆类化妆品的微生物检测方法进行评价。参考《中国药典》（2010年版）微生物限度的方法,以金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠埃希菌为试验菌株进行回收试验,同时增加阳性对照组考察控制菌的检验方法。除彩妆A的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌外,其他所有试验菌株的回收率均大于70%,而且当采用培养基稀释法（1∶100的供试液,1 mL）时,彩妆A的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌的回收率均大于70%;大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的阳性生长率为100%,金黄色葡萄球菌阳性生长率为86%。目前的检测方法基本适合非特殊彩妆类化妆品的微生物检测。     

Screening of Molecular Virulence Markers in Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa Strains Isolated from Clinical Infections

Staphylococcus (S.) aureus and Pseudomonas (Ps.) aeruginosa are two of the most frequently opportunistic pathogens isolated in nosocomial infections, responsible for severe infections in immunocompromised hosts. The frequent emergence of antibiotic-resistant S. aureus and Ps. aeruginosa strains has determined the development of new strategies in order to elucidate the different mechanisms used by these bacteria at different stages of the infectious process, providing the scientists with new procedures for preventing, or at least improving, the control of S. aureus and Ps. aeruginosa infections. The purpose of this study was to characterize the molecular markers of virulence in S. aureus and Ps. aeruginosa strains isolated from different clinical specimens. We used multiplex and uniplex PCR assays to detect the genes encoding different cell-wall associated and extracellular virulence factors, in order to evaluate potential associations between the presence of putative virulence genes and the outcome of infections caused by these bacteria. Our results demonstrate that all the studied S. aureus and Ps. aeruginosa strains synthesize the majority of the investigated virulence determinants, probably responsible for different types of infections.     

间硝基苯胺水杨醛Schiff碱过渡金属配合物的合成及性质

合成了4种间硝基苯胺水杨醛Schiff碱过渡金属配合物,其结构经UV-Vis、IR、元素分析、摩尔电导率测定等表征。荧光光谱表明,4种配合物都能强烈猝灭牛血清白蛋白（BSA）的内源荧光。生物活性实验表明,配合物对金黄色葡萄球菌（S.aureus）、大肠杆菌（E.coli）、枯草芽孢杆菌（B.subtilis）、绿脓杆菌（P.aeruginosa）均有不同程度的抑菌作用,其中对绿脓杆菌的抑菌活性较强。4种配合物的抑菌活性均大于配体的抑菌活性。     

Evaluation of the antimicrobial action of honey against Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Listeria monocytogenes and Aspergillus niger. Evaluation of its microbiological charge

The evaluation of the microbiological charge present in Costa Rican samples as the evaluation of its antimicrobial activity over different microorganisms, including those associated to wound infections, will allow to emit criteria referred to its use in therapeutic treatments, specially as alternative therapy for cases involving antibiotic resistant bacteria. The microbiological charge of 25 honey samples, acquired in Costa Rican markets was evaluated through several indicators including total plate aerobic count, total plate anaerobic count, total aerobic spore count, total anaerobic spore count and molds and yeast count. Also, samples were inoculated in tubes with chopped meat media and plated in egg yolk agar in order to determine the presence of Clostridium botulinum. For the antimicrobial activity evaluation, the diffusion method in Muller Hinton agar was performed, testing different honey concentrations (100, 75, 50, 25, 12,5 and 6,25 % v/v) against Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Staphylococcus epidermidis (UCR 2902), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9027), Escherichia coli (ATCC25922), Salmonella enteritidis (ATCC 13076), Listeria monocytogenes (ATCC 19116) and Aspergillus niger. The results obtained for the microbiological characterization of honey show that 91% of samples had counts equal or lower than 1,0 x 10(1) CFU/g. No positive result was obtained for the isolation of C. botulinum. 24 of the samples analyzed inhibited the growth of S. aureus even in a 25% v/v concentration, nevertheless, A. niger was no inhibited by any of the samples tested.     

水溶性壳聚糖稀土配合物的合成、表征及其抑菌性研究

以水溶性壳聚糖(CS)与稀土离子La3+, Nd3+, Sm3+, Eu3+和Dy3+在常温和pH值为4~5的条件下制备了水溶性壳聚糖稀土配合物CS-La, CS-Nd, CS-Sm, CS-Eu和CS-Dy. 并运用FT-IR, UV和TG-DTA对其配合物进行表征,并研究了配体和配合物的热稳定性及配合物的抑菌活性. 结果表明,5种配合物均有选择性抑菌性能;其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有很好的抑菌作用;其对5种菌的最小抑菌浓度(MIC)为120~500 mg/mL,低于800 mg/mL,且抑菌效果明显优于单独的壳聚糖和稀土硝酸盐. CS-Sm对大肠杆菌的抑菌性最好,MIC为125 mg/mL;而CS-Nd和CS-Sm对金黄色葡萄球菌的抑菌性最强,MIC均为120 mg/mL.     

Antibacterial Polyelectrolytic chitosan derivatives conjugated natural rubber latex films with minimized bacterial adhesion

Water soluble polyelectrolytic derivatives of chitosan (CDs) with carboxyl (COO⁻) and quaternary ammonium (NH₄⁺) groups were synthesized and characterized by NMR, FT-IR, TGA and zeta potential analyses; while degree of substitution was determined by potentiometric titrations. Both CDs in the as-synthesized form exhibited antibacterial zones against Escherichia coli (E. coli) and Staphylococcus aureus (S. aureus). The CD conjugated vulcanized natural rubber latex (NRL) films were investigated for understanding the level of bacterial adhesion and bactericidal properties as a function of the polyelectrolytic groups present. NRL Films modified at ambient conditions were found effective against Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa). The biofilm assay results demonstrate that CD conjugated samples exhibit significantly reduced adhesion (63.8%) against P. aeruginosa. Further, alterations observed in cellular morphology of attached bacteria indicate that the modified surface of films is bacteriocidal while presence of significantly higher level of extra cellular polymer substances (EPS) were detected on control NRL films.     

对甲氧基肉桂酸乙酯的制备及其抑菌活性测定

采用水蒸气蒸馏法提取沙姜挥发油,然后以溶剂结晶法制得对甲氧基肉桂酸乙酯。通过气-质联用色谱法对其进行了结构鉴定,通过体外抑菌实验,利用纸片法和试管法分别测定了其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌和黑曲霉菌的抑菌活性和最低抑菌浓度(M IC)。结果表明,对甲氧基肉桂酸乙酯对这5种常见皮肤致病菌均有良好的抑菌活性,对绿脓杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉菌和白色念珠菌的最低抑菌浓度分别为0.625,1.25,2.5,2.5和10.0 mg/mL。     

琼榄提取物的抗氧化及抗菌活性

为研究琼榄的药用活性成分,更好地开发和利用琼榄资源,对琼榄根、茎、叶的5种不同溶剂提取物分别采用清除DPPH自由基法和滤纸片扩散法进行抗氧化及抗菌活性研究。结果表明,琼榄叶的乙酸乙酯提取物(L-EtOAc)清除DPPH自由基的IC50最小,为154.1 mg/L,是15组提取样品中清除自由基活性最强的部位。琼榄根、茎、叶的15组提取物对5种供试菌均具有不同程度的抑菌活性,且以琼榄叶的乙酸乙酯提取部位对5种供试菌的抑菌作用均较强,特别是对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌的抑制作用和阳性对照品头孢他啶的抑菌作用接近。因此,琼榄叶部位的抗氧化和抗菌活性最强,且活性物质在乙酸乙酯部位,L-EtOAc为有效提取部位。     

金黄色葡萄球菌液相芯片检测方法的建立及应用

目的建立一种快速检测金黄色葡萄球菌的液相芯片检测方法,并进行初步应用。方法将金黄色葡萄球菌单克隆抗体(mAb930)与聚苯乙烯微球偶联,结合双抗体夹心技术建立金黄色葡萄球菌液相芯片检测方法,通过L(934)正交设计试验优化方法的反应条件;对建立的方法进行灵敏度和特异性验证;应用建立的方法检测200份食品样品,并与国家标准检测方法进行比较。结果所建立的检测方法的最佳反应条件为:多克隆抗体工作浓度为1∶100,生物素标记的二抗工作浓度为1∶1 000,链霉亲和素-藻红蛋白的工作浓度为2μg/ml,生物素标记的二抗与SA-PE的反应时间为40 min;建立的方法检测金黄色葡萄球菌的灵敏度可达103CFU/ml,检测其他常见食源性致病菌无交叉反应;建立的方法与国家标准方法检测200份食品样品的结果基本相符。结论已建立了一种快速检测食品中金黄色葡萄球菌的液相芯片检测方法,能够应用于实际样品的检测。     

Everpro系列防腐剂性能测试

介绍了月桂酰精氨酸乙酯盐酸盐作为一种新型防腐剂在使用时的安全性,研究了月桂酰精氨酸乙酯盐酸盐作为防腐剂时对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的抑菌性能和热稳定性。对添加月桂酰精氨酸乙酯盐酸盐为主要成分的Everpro系列防腐剂的香波、护肤湿巾配方进行防腐性能测试,实验结果表明,以1.0%Everpro~(TM)LCG作为防腐体系的纯氨基酸润泽香波配方和以0.75%Everguard~(TM)LAE-20+0.3%辛甘醇作为防腐体系的洁肤湿巾都能通过防腐挑战测试。