Bel亚型的血型血清学特征及其遗传背景分析

目的分析Bel亚型的血型血清学特征及其遗传背景。方法采用红细胞凝集试验检测先证者及其家庭成员红细胞上的A、B、H抗原和血清中的抗-A、抗-B抗体;凝集抑制试验检测唾液中的A、B、H血型物质;吸收放散试验检测红细胞表面是否存在B抗原。用序列特异性引物多聚酶链式反应技术(PCR-SSP)进行ABO血型基因分型。结果先证者与其父确定为Bel亚型;先证者的两个妹妹分别为ABel亚型和A型;先证者的母亲、配偶、女儿、儿子分别为A、AB、A和B型。结论Bel亚型有家族遗传性。     

1份正反定型不符献血者标本的血清学及分子特性分析

目的对1份正反定型不符的献血者标本进行血清学及分子特性分析。方法采用吸收放散试验进行红细胞弱抗原检测,SSP-PCR方法进行基因分型,PCR产物克隆后进行测序分析。结果该标本血清学反应格局符合Ax亚型,分子生物学检测为A型。测序结果表明,Exon4含有2个连续碱基错义突变位点,分别为nt187G>A,nt188C>T,导致第63位氨基酸的改变(Arg63His)。结论该Ax亚型是由于Exon42个碱基突变,引起氨基酸的改变,导致糖基转移酶活性的降低,从而使红细胞上表达的A抗原大大减少。     

一例稀有CisAB血型血清学及遗传机理分析

目的对1例献血者血型血清学鉴定为A2B血样进行基因型分析。方法应用常规血型血清学方法进行血型鉴定;采用PCR-SSP法进行ABO初步基因分型的检测,并对ABO基因第6和第7外显子的核苷酸序列进行扩增、测序和分析。结果血型血清学鉴定为A2B亚型,基因分型为BB型,初步判定为B(A)型;基因测序发现两条等位基因第6外显子均不存在261delG及297 G/G,判定该献血者血型为B与B基因的组合,经与A101核苷酸序列比对,对第7外显子的核苷酸序列分析发现,有一条核苷酸链上有526C>G,657C>T、703G>A及803G>C点突变,另一条核苷酸链上有297A>G、526C>G、657C>T、703G>A、796C>A、803G>C及930G>A点突变,确定该献血者血型基因型为CisAB02/B101。结论血型血清学对CisAB和B(A)判定有一定的局限性,通过核苷酸序列及分析能够明确本例献血者基因型为CisAB02/B101。     

辽西地区人群ABO、Rh血型及基因频率分布

<正>迄今为止,已发现30多种人类血型系统,其中ABO、Rh血型抗原是人类红细胞上两个最重要的抗原,具有多态性和复杂性的特点,在种族和地域分布上均存在较大差异。为了解辽西地区人群红细胞血型系统分布规律,推动辽西地区制订科学合理的采供血计划,促进临床科学合理用血及建立RhD(-)稀有血型档案库,本文对2012年6月~2013年6月到辽宁医学院附属第一医院进行血型检测的4 168例患者(男性2 200例,女性1 968例,年龄16~60岁)的红细胞血型系统及其基因频率进行分析,现将结果报道如下。     

岳阳市献血者Rh血型系统表型的调查及Rh阴性献血者档案库的建立

目的调查岳阳市无偿献血人群Rh血型系统的表型,建立Rh阴性献血者档案库。方法使用Rh血型定型试剂,采用平板法进行初筛,结果可疑者用试管法确认。初筛阴性标本送血型参比室做确认试验,并进行Rh因子C、c、E、e和不规则抗体筛选。结果在183 596名无偿献血者中共筛出RhD阴性献血者404名(0.22%),弱D 5名(0.003%)。404名Rh阴性献血者中共检出A型112名(27.7%),B型112名(27.7%),O型128名(31.7%),AB型52名(12.9%)。表型共7种:ccdee 212名(52.5%),Ccdee 124名(30.7%),CCdee 30名(7.4%),ccdEe 18名(4.4%),ccdEE 8名(2.0%),CcdEe 8名(2.0%),CCdEe 4名(1.0%)。结论已建立了岳阳市Rh阴性献血者档案库。     

应用微柱凝胶法鉴定ABO及RH(D)血型

目的 应用微柱凝胶法全自动血型鉴定系统（以下简称微柱凝胶法）鉴定ABO及RH（D）血型。方法 选取100份正常献血者标本和100例住院患者标本，采用试管法和微柱凝胶法进行ABO和RH（D）血型鉴定，并选取14份已知ABO血型的亚型标本和10份弱D抗原的标本，采用两种方法进行比较。结果 在正常献血者和患者的ABO及RH（D）定型中，两种方法获得的结果均一致。采用单抗试剂，微柱凝胶法可检出14份亚型标中的9份；试管法可检出14份亚型中的10份。采用人血清抗体，微柱凝胶法可检出14份亚型中的6份；试管法可检出其中的7份。结论 在鉴定正常的ABO及RH（D）血型时，两种方法的结果差异无显著意义，微柱凝胶法可取代传统的试管法用于常规的ABO和RH（D）血型鉴定。     

AIHA的血清学特性及交叉配血1例

1·临床资料患者,罗,男,56岁。2004年3月27日消化道出血。查体:体温36·1℃,脉搏60次/min,呼吸18次/min,血压10·74/4·86 kPa。化验检查:RBC1·82×1012cells/L,Hb54 g/L,WBC 4·5×109cells/L,总胆红素40·2μmol/L,直接胆红素25·3μmol/L。临床诊断:消化道出血,伴有自身免疫溶血性贫血(AIHA)。为纠正贫血需输血治疗,医院与数名献血者交叉配血,主次侧均出现凝集,送本站鉴定及交叉配血。2·血型血清学检查2·1直接Coom’S试验:IgG。2·2 ABO血型鉴定:经室温及37℃反应,显示患者血清存在自身抗体。用37℃生理盐水将红细胞洗涤3次…     

H5N1亚型禽流感病毒样颗粒的构建及鉴定

目的构建同时含有禽流感H5N1疫苗株NIBRG-14的血凝素(Hemagglutinin,HA)、神经氨酸酶(Neurami-nidase,NA)及基质蛋白(Matrix protein,M1)3种基因的重组杆状病毒,并研究其表达产物的生物学特性。方法利用RT-PCR法从禽流感H5N1疫苗株NIBRG-14中扩增HA、NA及M1基因片段,并同时亚克隆至杆状病毒穿梭质粒pFastBacDual中,构建重组杆状病毒穿梭质粒,转染Sf9昆虫细胞,包装重组杆状病毒Bacmid-HA-NA-M1a。Westernblot法和血凝试验检测HA、NA及M1蛋白在Sf9细胞中的表达;表达的重组蛋白经超速离心浓缩及蔗糖密度梯度离心纯化后,透射电镜观察病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)的形态结构,并通过单向免疫扩散(Single radialimmunodiffusion,SRID)试验检测HA的含量。结果已成功构建了重组杆状病毒,该病毒可同时表达HA、NA及M1蛋白,3种蛋白可自行组装成VLPs,并分泌至细胞培养上清中,血凝效价可达1∶64;重组杆状病毒表达的蛋白形成的VLPs与NIBRG-14标准抗血清形成沉淀环,浓缩及纯化后的重组蛋白HA含量分别为36和27μg/ml;透射电镜观察可见直径约100 nm的典型流感VLPs。结论构建的重组杆状病毒可表达VLPs,为禽流感新型疫苗的研制奠定了基础。     

浅谈血型鉴定及交叉配血中出现假阳性的原因

血型鉴定及交叉配血时假阳性反应,是指凡没有相对应的特异性血型抗原抗体存在,本不应发生凝集,却出现了非特异性凝集或类凝集现象。造成假阳性反应的原因很多,现将我们的粗浅体会总结如下文。     

人叉头转录因子O亚型3基因重组表达质粒的构建及鉴定

目的构建人叉头转录因子O亚型3(forkhead box class O3,FOXO3)基因重组表达质粒,并检测其在人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中的表达。方法利用3对引物从人cDNA中分别扩增大小为382、829和891 bp的3个目的片段,胶回收后进行拼接,获得hFOXO3的CDS片段,与pcDNA3.1(+)载体连接,构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)-hFOXO3,转染人PBMC,采用Real-time PCR和Western blot分别检测hFOXO3基因mRNA水平及蛋白表达水平。结果重组表达质粒经双酶切及测序证实构建正确;转染PBMC后,pcDNA3.1(+)-hFOXO3组hFOXO3基因mRNA的水平分别为转染试剂对照组和pcDNA3.1(+)组的2 599.7和2 377.8倍,且差异均有统计学意义(P0.001);pcDNA3.1(+)-hFOXO3组hFOXO3蛋白的表达水平分别为转染试剂对照组和pcDNA3.1(+)组的2和1.8倍,且差异均有统计学意义(P0.01);而转染试剂对照组和pcDNA3.1(+)组间hFOXO3基因mRNA水平和蛋白的表达水平差异均无统计学意义(P0.05)。结论成功构建了pcDNA3.1(+)-hFOXO3重组表达质粒,其在人PBMC中能进行hFOXO3基因mRNA的转录及蛋白的表达,为进一步研究hFOXO3的生物学功能及其作用机制奠定了基础。     

抗-Ce引起的输血反应及其配血分析

目的 分析Rh血型系统中不规则抗体的临床意义。方法对1例带有抗-Ce联合抗体的患者,采用盐水法鉴定血型,并进行直接抗球蛋白试验,抗球蛋白法进行抗体鉴定和效价测定,吸收放散试验鉴定联合抗体,盐水法、抗球蛋白法和聚凝胺法进行配血。结果根据该例有抗-Ce联合抗体患者血清学抗体检测结果,为其找到了配合的血液,输注后无不良反应,治疗效果良好。结论对于经常需要输血的患者或还未生育的女性,在输血前除了做必要的抗体筛查和鉴定其相配合的血液外,建议作RhD以外的各因子的检测,做到Rh系统的配合性输注,避免此系统不规则抗体的产生,保证临床输血的安全。     

高密度介质固相抗人球蛋白法检测孕妇ABO血型系统IgG抗体效价

目的探讨利用高密度介质固相抗人球蛋白法检测孕妇ABO血型系统IgG抗体效价的可行性。方法应用不完全抗体检测试剂盒(高密度介质固相抗人球蛋白法)检测40例O型血孕妇ABO血型系统IgG抗体效价,并与传统抗人球蛋白试管法进行对比。结果以IgG抗A(B)效价≥1:64定为阳性,两种方法的阳性检出率一致,均为50%(20/40);两种方法检测的抗体效价的几何均数差异无统计学意义(P>0.05);两种方法高度相关,r=0.9079(tr=13.36,P<0.001)。结论高密度介质固相抗人球蛋白法与传统抗人球蛋白试管法比较,操作简单,耗时短,结果准确,可应用于ABO血型系统IgG抗体效价的检测。     

ABO Blood Group System and Gastric Cancer: A Case-Control Study and Meta-Analysis

This study focuses on the association between the ABO blood group system and the risk of gastric cancer or Helicobacter pylori infection. The data for the ABO blood group was collected from 1045 cases of gastric cancer, whereby the patient underwent a gastrectomy in Ruijin Hospital, Shanghai. The information on the ABO blood group from 53,026 healthy blood donors was enrolled as control. We searched the Pubmed database on the relationship between ABO blood groups and gastric cancer risk for meta-analysis. In our case-control study, the risk of gastric cancer in blood group A was significantly higher than that in non-A groups (O, B and AB) (odd ratio, OR1.34; 95% confidential interval, CI 1.25–1.44). Compared with non-O groups (A, B and AB), individuals with blood group O demonstrated a reduced risk of gastric cancer (OR = 0.80; 95% CI 0.72–0.88). The proportion of H. pylori infection in blood group A individuals was significantly higher than that in non-A blood groups (OR = 1.42; 95% CI 1.05–1.93). We further combined our data with the published data of others, and crossreferenced the risk of gastric cancer with the blood type, finding consistent evidence that gastric cancer risk in the blood A group was higher than that in the non-A groups (OR = 1.11; 95% CI 1.07–1.15), and that blood type O individuals were consistently shown gastric cancer risk reduction (OR = 0.91; 95% CI 0.89–0.94). Our study concluded that there was a slightly increased risk of gastric cancer in blood group A individuals, and people with blood type A are more prone to be infected by H. pylori than other ABO blood type individuals, whereas, a slightly decreased risk of gastric cancer was identified in blood type O individuals.     

吸附A群脑膜炎球菌蛋白菌苗接种婴幼儿的反应及血清学效果

从A群脑脊髓膜炎奈瑟氏菌（78051，血清型4型）提取的外膜蛋白制备成菌苗，接种363例6个月到2岁的婴幼儿，结果局部及全身反应轻微，未发现局部强反应及无菌化脓。中度反应发生率低于0．7％，48小时消失。免后6～72小时内中度以上发烧率，50μg蛋白菌苗组为1．1％～4．3％，25μg蛋白菌苗组为0．5％～1．6％，30μg多糖菌苗组为0～1．2％，吸附剂对照组为0～2．1％。免后人血清的杀菌抗体几何平均滴度，蛋白菌苗组显著高于多糖菌苗组及吸附剂对照组（P＜0．05）；免后6个月时两个蛋白菌苗组的阳转率显著高于多糖菌苗组。提示蛋白菌苗免后所产生的杀菌抗体较多糖菌苗持久，可考虑以A群蛋白菌苗为婴幼儿免疫的候选菌苗。     

一种改良Rh血型基因及其单倍型频率估计方法的推导

目的推导出一种符合实际工作的Rh血型基因及其单倍型频率估计方法。方法基于目前普遍使用5种血清鉴定Rh血型的实际情况,根据Hardy-Weinberg定律,得出每种表现型频率和相应遗传型频率之间的关系,从而推导出计算Rh血型基因及其单倍型频率的公式;应用本文方法及另一种方法进行实例计算,并比较结果。结果计算结果显示,两种方法算出的P值均大于0.05,显示观察值与期望值差异无统计学意义,Hardy-Weinberg吻合度良好,但用本文方法算出的P值较大。结论本文方法符合目前检测Rh血型的实际情况,且估计其基因及单倍型频率的效率较高,是一种效果良好的改进型Rh血型单倍型频率估计方法。     

Genome-Wide Identification,Classification and Expression Analysis of m6A Gene Family in Solanum lycopersicum

Advanced knowledge of messenger RNA (mRNA) N⁶-methyladenosine (m⁶A) and DNA N⁶-methyldeoxyadenosine (6 mA) redefine our understanding of these epigenetic modifications. Both m⁶A and 6mA carry important information for gene regulation, and the corresponding catalytic enzymes sometimes belong to the same gene family and need to be distinguished. However, a comprehensive analysis of the m⁶A gene family in tomato remains obscure. Here, 24 putative m⁶A genes and their family genes in tomato were identified and renamed according to BLASTP and phylogenetic analysis. Chromosomal location, synteny, phylogenetic, and structural analyses were performed, unravelling distinct evolutionary relationships between the MT-A70, ALKBH, and YTH protein families, respectively. Most of the 24 genes had extensive tissue expression, and 9 genes could be clustered in a similar expression trend. Besides, SlYTH1 and SlYTH3A showed a different expression pattern in leaf and fruit development. Additionally, qPCR data revealed the expression variation under multiple abiotic stresses, and LC-MS/MS determination exhibited that the cold stress decreased the level of N⁶ 2′-O dimethyladenosine (m⁶Am). Notably, the orthologs of newly identified single-strand DNA (ssDNA) 6mA writer–eraser–reader also existed in the tomato genome. Our study provides comprehensive information on m⁶A components and their family proteins in tomato and will facilitate further functional analysis of the tomato N⁶-methyladenosine modification genes.