癌胚抗原（CEA）固相包被管法免疫放射分析

癌胚抗原（CEA）是一种肿瘤相关抗原,由Gold和Freeman于1965年首次提出。该抗原为一糖蛋白,β电泳测得其相对分子质量约为200 000,由一单链蛋白（约 800个氨基酸）及糖侧链组成,糖链部分占总相对分子质量的50％～80％。CEA首先被认为是结肠腺癌的一特异抗原。更新的研究表明,CEA存在于许多涉及胃肠或肺等来源于外胚层组织的癌细胞中。据有关报道,结肠粘膜分泌物中也有少量CEA,在非黄疸病人正常胆汁中有CEA类似物质。CEA检测对监测治疗后伴有血循环CEA持续升高的病人具有重要价值,高CEA浓度预示有潜伏的     

癌胚抗原(CEA)固相包被管法免疫放射分析

采用了两株CEA单克隆抗体(McAb),一株用于固相包被,另一株用于标记制备125I-CEAMcAb,研制了一步法CEA免疫放射分析(IRMA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.5μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为97.4%～108.9%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.     

固相抗体包被管法TSH免疫放射分析

采用TSH单克隆抗体包被聚苯乙烯试管,并对抗体包被条件进行了研究,建立了TSH免疫放射分析法。结果表明：在2～8℃下过夜包被,抗体浓度为2.1mg/L时,制备的包被管用于TSH免疫放射分析,结合达到最大;不同浓度下包被,包被温度和时间对制备的包被管的影响不同。TSH免疫放射性分析最小检测限为0.05mIU/L;回收率为88.4%～100.0%;批内、批间变异系数分别为7.4%～10.9%和8.7%～10.7%。46例健康人血样测定值为0.3～6.2mIU/L。     

癌胚抗原试管固相免疫放射分析

报道以试管为固相载体，通过共价键的联结把两株癌胚抗原单抗结合的试管壁上，并标记另一株单抗，建立了癌胚抗原试管固相免疫放射分析法。该法具有较高的特异性和灵敏度，操作简便，重复性好，与液相放免法对照测定样品，两者结果密切相关。     

固相抗体包被管法TSH免疫放射分析

采用TSH单克隆抗体包被聚苯乙烯试管,并对抗体包被条件进行了研究,建立了TSH免疫放射分析法.结果表明:在2～8℃下过夜包被,抗体浓度为2.1mg/L时,制备的包被管用于TSH免疫放射分析,结合达到最大;不同浓度下包被,包被温度和时间对制备的包被管的影响不同.TSH免疫放射分析最小检测限为0.05mIU/L;回收率为88.4%～100.0%;批内、批间变异系数分别为7.4%～10.9%和8.7%～10.7%.46例健康人血样测定值为0.3～6.2mIU/L.     

固相包被技术及应用

对免疫分析中的生物分子包被固相载体技术做了系统的研究,并探索其在免疫分析中的应用。采用物理吸附法和多聚赖氨酸活化管化学连接方法对多克隆抗体和单克隆抗体在聚苯乙烯试管上的固定方法进行了研究,并用商品化的免疫分析试剂盒对研究的方法进行了评估。采用物理吸附方法包被的试管稳定性较好,应用于TSH和CA125免疫放射分析,技术指标均达到国家暂行标准。采用活化管技术包被的试管在应用某些具体的免疫分析试剂盒时,部分技术指标高于核行业标准,但需进一步的实验。     

人血清CA15-3免疫放射分析法的建立

一株CA15-3单克隆抗体用于^125I标记，另一株CA15-3单克隆抗体包被试管作为固相抗体，建立了双位点夹心肿瘤标志物CA15-3免疫放射分析法。CA15-3标准品以CIS公司免疫放射分析药盒标准品校正。最小检测限为0.4U／mL；批内、批间变异系数分别为6．0％～6．2％和4．1％～5．9％；样品中加入已知量CA15-3测定，回收率为86．8％～118．6％；高浓度CA15-3的血清样品系列倍比稀释后测定，实测值和计算值呈线性相关，相关系数大于0.99；38例健康女性血清样品测定值为5．7～23．7U／mL。     

癌胚抗原(CEA)酶联免疫分析试剂盒的研制

以一株CEA单克隆抗体(McAb)用于固相包被,另一株McAb与辣根过氧化物酶偶联制备抗CEA酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,制备了CEA酶联免疫分析(ELISA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为99.4%～108.7%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.该方法具有简便、快速和准确的特点,适用于临床检测和科研应用.     

前列腺酸性磷酸酶(PAP)免疫放射分析试剂盒的研制

采用包被管分离技术，利用两株抗PAP单克隆抗体，双位点夹心免疫 血清中PAP含量。结果表明，该试剂盒分析灵敏度为0.1μg/L；批内变异系数为（8．8－9．6）％；批间变异系数为（7．7－12．3）；回收率为（96．3－105．0）％；标准曲线范围内2．5－200．0μg/L。与DPC公司CAC PAP IRMA试剂盒进行方法学比较，相关系数r=0.909。     

癌胚抗原（CEA）酶联免疫分析试剂盒的研制

以一株CEA单克隆抗体(McAb)用于固相包被,另一株McAb与辣根过氧化物酶偶联制备抗CEA酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,制备了CEA酶联免疫分析(ELISA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异系数＜10.0%,批间变异系数＜15.0%,回收率为99.4%～108.7%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值＜10.0μg/L.该方法具有简便、快速和准确的特点,适用于临床检测和科研应用.     

Establishment of Immunoradiometric Assay for Carcinoembryonic Antigen

Two anti-CEA monoclonal antibodies are used, one is coated on the microtiter plate, the other is labeled to make 125I-CEAMcAb. The one-step assay is established based on immunoradiometric assay(IRMA). The sensitivity of the assay is 0.5 μ g/L. The intra-assay CVs and the inter-assay CVs are lower than 10.0% and 15.0%, respectively. The analytical recoveries are ranged from 97.4% to 107.8%. The reference cut-out value of 35 normal serum is lower than     

游离前列腺特异抗原免疫放射分析方法的建立

采用双抗体夹心法,利用两株前列腺特异抗原（Prostate Specific Antigen,PSA）的单克隆抗体（抗游离前列腺特异抗原F-PSA和抗血清中总前列腺特异抗原T—PSA）,建立了定量测定血清中F-PSA含量的免疫放射分析方法。该方法的最小检测限为0．04μg／L,批内变异系数≤4．0％,批间变异系数≤10．5％,平均回收率为102．7％。该法与CIS公司生产的放免试剂盒比对的相关方程为y=0．9651x-0．0011,相关系数r=0．9964。本研究建立的F-PSA免疫放射分析方法灵敏度高,定量分析效果较好,适用于临床诊断。     

The Establishment of an Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Carcinoembryonic Antigen

Two anti-CEA monoclonal antibodies are used, one is coated on the microtiter plate, the other is labeled with horseradish peroxidase(HRP). The two-step assay is established based on enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA). TMB-H2O2 solution is used as the substrate of HRP. The sensitivity of the assay is 0.4 μ g/L. The intra-assay CVs and the inter-assay CVs are lower than 10.0% and 15.0%, respectively. The analytical recoveries are ranged from 99.4% to 108.7%. The reference cut-off value of normal serum (n= 100 ) is 10.0 ng/L.     

胰岛素免疫放射分析方法的建立

摘要：采用两株抗胰岛素单克隆抗体，一株包被聚苯乙烯试管作为固相抗体、另一株标记125I，建立了胰岛素测定的双抗体夹心免疫放射分析方法。其方法学灵敏度为2.8mIU/L；曲线范围5～160mIU/L；批内、批间变异系数分别小于5%、10%；回收率92.3％～112.6％；高浓度胰岛素血清样品系列倍比稀释后测定，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数0.996；39例健康人血清样品测定值为4.7～14.3mIU/L，该方法与胰岛素放射免疫分析法的相关性良好（r=0.981）。     

前列腺特异抗原PSA酶联免疫分析试剂盒的研制

一株ＰＳＡ单抗用于固相包被,另一株单抗与辣根过氧化物酶偶联制备抗ＰＳＡ酶标记物,以四甲基联苯胺（ＴＭＢ）为底物,采用二步法,建立了ＰＳＡ酶联免疫分析试剂盒（ＥＬＩＳＡ）制备方法。本文法的灵敏度为０．２μｇ／Ｌ,批内变异系数＜５．３％,批间变异系数＜６．４％,回收率为９６．６％￣１０５．５％,特异性鉴定显示与其他肿瘤标志物无明显交叉反应。正常参考值＜４．０μｇ／Ｌ。本法所制试剂盒与ＰＳＡ－ＥＬＩＳＡ     

Development of Immunoradiometric Assay Kit for Insulin

The detection of insulin level in blood is important to the assessment of β-cells＇ function, the therapy plan of diabetes mellitus and the diagnosis of insulinoma. Insulin is the first human hormone to be determined by radioimmunoassay （Yallow and Berdon, 1959）. Despite the enormous improvements and developments in immunoassay in the subsequent years, RIA still plays an important role in China. Due to interfere of breakdown products of insulin, the immunoradiometric assay using two monoclonal antibodies has a higher specificity than RIA.     

肿瘤标志物CA125免疫放射分析试剂盒的研制

采用两株CA125单克隆抗体,一株用于125I标记,另一株包被于试管作为固相抗体,稀释卵巢癌患者腹水制备标准品,建立了双位点夹心法人血清肿瘤标志物CA125免疫放射分析法.标准曲线的最大标准点免疫结合与零标准非特异结合之比大于100;最小检测限为1.0 U/mL;批内、批间变异系数分别为 4.4%～5.8 %和8.4%～9.9 %;样品中加入已知量CA125测定,回收率为96.8%～112.5%;对含高浓度CA125的血清样品稀释测定,结果表明方法的健全性良好.38例健康女性血清样品测定值范围为2.9～24.1 U/mL;±2s为9.6±9.6 U/mL.     

糖类抗原CA19-9免疫放射分析法的建立

采用两株CA19-9单克隆抗体,一株用于125I标记、另一株包被于试管作为固相抗体,用血清稀释CA19-9抗原,制备标准品,建立了CA19-9双位点夹心免疫放射分析方法（IRMA）。分析采用两步法,本方法最小检测限为2.0 U/mL,批内、批间变异系数分别为 6.4%~9.5%和6.0%~12.6%,样品添加实验结果显示,回收率为88.1%~106.1%,血清样品倍比稀释后测定,测定值和稀释度的相关系数为0.990。CA19-9浓度至11800 U/mL时测定未见“弯钩”效应。69例健康人血清样品测定值为0.3~29.6 U/mL（ ±s 为7.4±5.8 U/mL）,和法国CIS公司的CA19-9免疫放射分析药盒同时测定84例人血清样品,二者测定值相关方程为y=1.32x-17.6,相关系数r=0.896。相似文献