苦荞麦多糖对胰脂肪酶抑制作用的研究

以三油酸甘油酯为底物,研究苦荞麦多糖在不同条件下对胰脂肪酶抑制作用的影响,确定其最佳抑制条件、抑制作用类型及抑制常数。结果表明,苦荞麦多糖对胰脂肪酶具有明显抑制作用,其半抑制浓度IC50为28.23mg/m L。多糖浓度为30mg/m L,反应时间为15min,p H为7.5,温度为37℃时抑制效果最佳,抑制率达到52.17%,为非竞争性抑制,抑制常数Ki=43.28mg/m L。通过紫外吸收光谱测定表明胰脂肪酶紫外吸收光谱最大吸收波长发生红移,显示苦荞麦多糖是通过改变胰脂肪酶的构象,致使其酶催化活性受到抑制。苦荞麦多糖可以作为植物源的胰脂肪酶抑制剂发挥减肥因子的作用。     

黑木耳多糖对胰脂肪酶活性的抑制作用

目的:以月桂酸4-硝基苯酯为底物,考察黑木耳多糖对胰脂肪酶活性的抑制作用,确定最佳抑制条件、抑制类型及抑制常数。方法:采用水提醇沉的方法制备黑木耳多糖,阴离子交换树脂分离多糖,考察不同反应条件（浓度、p H、温度、时间）下黑木耳多糖各组分对胰脂肪酶活性的抑制效果;通过紫外吸收光谱研究黑木耳多糖与胰脂肪酶构象之间的关系;测定不同浓度底物时的反应吸光度值,初步确定黑木耳多糖对胰脂肪酶抑制作用的机理。结果:分离获得6个组分,其中中性多糖组分a对胰脂肪酶抑制效果较好。当p H为7.5、温度37℃、反应时间为60 min时抑制效果最佳,此时中性多糖组分a抑制率最高达到46.93%;反应类型为非竞争性抑制,米氏常数Km为17.68 mg/m L,最大反应速率V_max为1.43μmol/min,抑制常数Ki为30.32 mg/m L。通过紫外吸收光谱测定,胰脂肪酶最大吸收波长发生红移,说明黑木耳多糖改变了胰脂肪酶的构象,致使其酶催化活性受到抑制。结论:黑木耳多糖对胰脂肪酶活性具有抑制作用,表明黑木耳多糖降血脂作用可能与胰脂肪酶的活性抑制有关,为降血脂功能性产品的开发奠定理论基础。      

桑叶多糖的化学组成及其对胰脂肪酶的抑制作用研究

将复合酶辅助热水提取所得的桑叶粗多糖依次进行脱蛋白和脱色处理后得到桑叶多糖,研究其化学组成和对胰脂肪酶的抑制作用及作用类型.结果 表明,桑叶多糖的总糖含量为58.28％,其单糖组成及摩尔比为甘露糖∶鼠李糖∶葡萄糖∶半乳糖∶木糖∶阿拉伯糖∶葡萄糖醛酸∶半乳糖醛酸=8.61∶23.42∶4.23∶12.73∶1.31∶3....     

枸杞叶黄酮对胰脂肪酶活性的抑制作用

采用酶动力学法探讨枸杞叶黄酮对胰脂肪酶活性的抑制作用。采用紫外、荧光和红外光谱研究枸杞叶黄酮与胰脂肪酶相互作用的机理。结果表明:枸杞叶黄酮对胰脂肪酶活性有抑制作用,半抑制浓度(IC50)为(0.910±0.008) mg/mL,抑制类型为可逆非竞争抑制,抑制常数为6.04 mg/mL。紫外和荧光光谱显示:枸杞叶黄酮能使胰脂肪酶芳香氨基酸暴露,微环境和酶构象改变,内源荧光猝灭,猝灭类型为动态猝灭为主的混合型猝灭。热力学参数显示:枸杞叶黄酮与胰脂肪酶的相互作用力主要为疏水相互作用。红外光谱显示:枸杞叶黄酮对酶蛋白二级结构的影响,主要表现为复合物结构变得有序化,β-折叠向α-螺旋的转化。枸杞叶黄酮通过改变胰脂肪酶结构和微环境,进而抑制胰脂肪酶活性。     

黄酮“落新妇苷”对胰脂肪酶抑制作用研究

通过研究落新妇苷对胰脂肪酶的抑制活性,进一步探索其调节脂肪代谢的可能原因。结果表明,落新妇苷对胰脂肪酶有一定的抑制作用,半抑制率浓度为105μmol/L,最大抑制率为56.3%;且抑制效果随二者作用时间延长而增强。酶动力学特征研究表明,落新妇苷是胰脂肪酶非竞争性抑制剂,不改变其与底物的亲和程度,但使最大反应速度减小。荧光光谱滴定法表明落新妇苷会使胰脂肪酶内源荧光淬灭,并使其最大发射波长红移,二者结合常数lg Ka为5.50,结合位点数n为1.17。     

苦瓜皂甙的提取及其对胰脂肪酶抑制活性的研究

苦瓜皂甙可有效抑制胰脂肪酶的活力,是一种潜在的减肥辅助食物补充剂。通过响应面法对苦瓜皂甙的最佳提取工艺进行优化,并测定其对胰脂肪酶的抑制率。研究结果表明:苦瓜皂甙的最佳提取工艺为乙醇提取液的浓度为50%、料液比1∶13.5(g/mL)、提取温度38℃、浸提时间77 min、浸提次数1次,此条件下苦瓜皂甙的提取产率为1.419 1%,其对胰脂肪酶抑制的IC50值为0.384 7 mg/mL。     

茯砖茶多酚类物质对胰脂肪酶活性的抑制作用

以湖南茯砖茶为原料通过热水浸提、树脂吸附分离得到茯砖茶多酚类物质,并采用酶动力学和荧光猝灭分析方法探讨了茯砖茶多酚类物质对胰脂肪酶的抑制作用。结果表明：茯砖茶多酚类物质对胰脂肪酶有抑制作用,半抑制浓度（IC50）为0.81 mg/mL,抑制类型为可逆非竞争性抑制,其抑制常数Ki为2.56 mg/mL。荧光光谱分析表明茯砖茶多酚类物质对胰脂肪酶具有荧光猝灭效应,与茯砖茶多酚类物质的结合可能造成了酶结构的改变,从而降低了酶的催化活性。     

莲子红衣多糖对胰脂肪酶活性抑制作用的研究

为考察莲子红衣多糖对体外胰脂肪酶活性的抑制效果,采用分光光度法测定了不同条件下对胰脂肪酶活性抑制作用的影响,并在单因素试验基础上运用L_9(3~4)正交法优化得到莲子红衣多糖对胰脂肪酶活性抑制作用的最佳条件。结果显示,在pH 7.2、莲子红衣多糖提取物浓度0.15 g/mL、反应时间10 min条件下,可达到最高抑制率94.61%。此外,Dixon和Lineweaver-Burk分析表明,莲子红衣多糖对胰脂肪酶的抑制作用类型为非竞争性抑制,抑制常数为0.073 6 g/mL。     

对羟基肉桂酸乙酯对胰脂肪酶的抑制作用及机理

为探究对羟基肉桂酸乙酯的降脂活性,本文采用酶反应动力学和分子对接技术来研究对羟基肉桂酸乙酯对胰脂肪酶的抑制类型和抑制机理.抑制动力学结果表明,对羟基肉桂酸乙酯对胰脂肪酶表现为可逆竞争型抑制(半抑制浓度IC50为41.07μg/mL),其最大反应速率Vmax为2.61μmol/L·min,抑制常数Ki为114.35μg/...     

胰脂肪酶特异性卵黄抗体对胰脂肪酶活性的抑制作用研究

肥胖对人类的健康构成了极大的危害,胰脂肪酶抑制剂由于可以有效地预防和治疗肥胖而受到了人们的广泛关注。本研究首次以胰脂肪酶为抗原制备了胰脂肪酶特异性卵黄抗体（L-Ig Y）,并分析了其对胰脂肪酶活性的抑制效果。结果表明,L-Ig Y可通过与胰脂肪酶的非竞争性结合发挥显著的酶活抑制作用（p<0.05）,计算得出其表观半抑制浓度（IC50）为168.62μg/m L。模拟胃液消化环境中10 min,L-Ig Y的活性几乎完全丧失,但是在模拟肠液中2 h,L-Ig Y的免疫活性仅下降了约20%,表明其有望作为一种潜在的胰脂肪酶抑制剂应用于肥胖的预防和治疗。      

水溶性苦瓜多糖的分离纯化及生物学活性的研究

本文建立了苦瓜水溶性多糖的提取纯化方法,并对其理化性质及生物学活性进行检测。采用双酶法得到的苦瓜水溶性多糖,通过正交试验确定其最佳水解条件为:纤维素酶-提取温度50℃,pH值6.0,酶用量5%;中性蛋白酶-水解时间48h,pH值7.0,酶用量10%。多糖粗品经DEAE-32、SephadexG-75柱层析得到单一组分,命名为PMCⅠ。PMCⅠ的酸性水解液经薄层层析分析,其单糖组分别为葡萄糖、半乳糖、甘露糖和鼠李糖。对PMCⅠ生物功能的研究表明,其对羟基自由基、超氧阴离子自由基均有清除作用,IC50分别为0.0017mg/ml和0.005mg/ml,最大抑制率可达100%,证实其具有抗氧化的活性。抑菌实验表明其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、枯草杆菌等病原菌均有抑制作用,IC50分别为0.10、0.15、0.13、0.13mg/ml,其中以金黄色葡萄球菌最为明显。     

水提苦瓜多糖的分离纯化及组成性质研究

目的:从苦瓜中分离水溶性苦瓜多糖,并研究其组成性质。方法:采用DEAE纤维素柱层析和凝胶柱层析分离纯化得到苦瓜多糖MCP2和MCP4,SepharoseCL-6B凝胶柱层析和醋酸纤维膜电泳检测证明为均一组分。气相色谱法和薄层层析法测定其多糖组成,凝胶过滤法测定其相对分子质量,红外光谱测定其糖苷键类型。结果:苦瓜多糖MCP2为半乳聚糖,MCP4含有鼠李糖、木糖、半乳糖和阿拉伯糖,它们的摩尔比为1:0.75:1.83:0.85。平均相对分子质量分别为5.37×104,9.65×104。它们的红外光谱中有典型的多糖吸收峰,紫外扫描无核酸和蛋白特征吸收峰。结论:MCP2,MCP4首次从苦瓜中提取获得,为均一多糖组分。     

小分子苦瓜多糖MCPⅡa的纯化及结构分析

利用酶解结合水溶醇沉提取水溶性的苦瓜多糖（Momordica charantia polysaccharide,MCP）,经Sevag法除蛋白、DEAE-纤维素离子交换、Sephadex G-100凝胶过滤获得活性多糖MCPⅡa。由高效凝胶渗透色谱检测可知MCPⅡa为均一多糖,平均分子质量为13.0 kD,单糖组分分析显示其单糖组成为鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖、木糖和阿拉伯糖（各组分物质的量比为12∶3.05∶19.89∶5.95∶56）。傅里叶红外光谱、核磁共振及刚果红实验发现其存在C1、C2、C3、C5连接,在水溶液中具有稳定的β-三股螺旋构象,扫描电镜下显示其为菱形晶体颗粒。     

苦瓜提取物的抑菌作用及其稳定性研究

采用滤纸扩散法研究了苦瓜提取物和其不同溶剂萃取物的抑菌作用及温度、pH值、紫外光等因素对其抑菌活性的影响。结果表明:苦瓜提取物对细菌的抑制作用较强,其正己烷萃取物对酵母菌和霉菌有较好的抑制效果,苦瓜提取物的抑菌活性具有很好的热稳定性和紫外光稳定性,在pH4~6的条件下抑菌效果最佳。     

仙人掌、苦瓜保健饮料的研制

经过研制以仙人掌和苦瓜为主要原料提取汁液,采用正交试验探索出最佳饮料配方和最佳工艺条件,并开发出色、香、味俱佳的一种新型的多功能保健饮料。     

文冠果壳皂苷抑制胰脂肪酶活性的研究

本文旨在确定文冠果壳皂苷作为减肥因子对胰脂肪酶活性的作用效果。通过对胰脂肪酶反应条件(pH、反应时间和反应物加入顺序)的摸索,确定AB-8大孔树脂纯化的文冠果壳皂苷对胰脂肪酶活性的影响,并通过紫外吸收光谱(200~340 nm)、荧光光谱(激发波长290 nm,扫描波长300~450 nm)确定文冠果壳皂苷对胰脂肪酶作用的机理。研究结果表明,文冠果壳皂苷对胰脂肪酶抑制率高达87.5%,最佳反应体系pH 7.4,反应时间15 min,反应物加入顺序为底物与文冠果壳皂苷预热后加入胰脂肪酶溶液反应。文冠果壳皂苷与胰脂肪酶作用后,改变了胰脂肪酶中发光氨基酸(Trp、Tyr)所在微环境,胰脂肪酶分子结构和构象发生变化,导致胰脂肪酶紫外吸收光谱最大吸收波长红移和荧光强度降低,胰脂肪酶活性抑制。文冠果壳皂苷可通过抑制胰脂肪酶发挥减肥因子的作用。     

苦瓜汁的真空冻干研究

为了对苦瓜汁进行真空冷冻干燥 ,首先通过简单的电阻装置测定了苦瓜汁的共晶点与共融点。然后按照一定的升温程序对苦瓜汁进行了冻结与升华干燥 ,并得到了苦瓜汁的真空冻干曲线。最后对真空冻干苦瓜粉与鲜苦瓜汁所含的苦瓜总皂苷、VC、矿物质元素、游离氨基酸等含量指标进行了对比。结果表明 ,真空冷冻干燥能较好地保持苦瓜的生物活性成分及特征。     

苦瓜多糖铁的制备及其对小鼠降血糖活性研究

为研究络合效应对多糖生物活性的影响,从苦瓜中提取水溶性苦瓜多糖,制备苦瓜多糖铁络合物,用红外光谱法对苦瓜多糖及其铁络合物分别进行表征,对比苦瓜多糖及其铁络合物对四氧嘧啶致高血糖小鼠模型的降血糖作用,利用光镜对小鼠胰尾组织石蜡切片进行胰岛细胞形态学观察。结果表明,经铁离子络合后,苦瓜多糖的红外谱图基本骨架未发生较大变化,只是在局部吸收峰向高波数移动,在3407.6 cm^-1处吸收峰增强;苦瓜多糖及其铁络合物给药组都能显著降低高血糖模型小鼠的血糖水平,且苦瓜多糖铁降血糖效果更显著;苦瓜多糖铁对β-细胞具有较好的保护和修复作用,可促进β-细胞内β-颗粒和线粒体再生,提高β-细胞释放胰岛素的能力。