反相离子对高效液相色谱法测定猪肉中呈味核苷酸

建立反相离子对高效液相色谱法测定猪肉中呈味核苷酸5’-尿苷酸二钠(5’-UMP)、5’-胞苷酸二钠(5’-CMP)、5’-鸟苷酸二钠(5’-GMP)、5’-肌苷酸二钠(5’-IMP)和5’-腺苷酸二钠(5’-AMP)含量的方法。应用ZORBAX SB-C_(18)色谱柱,以0.01 mol/L KH_2PO_4溶液(含1.45 mmol/L四丁基硫酸氢铵,p H4.0)-乙腈(97∶3,V/V)为流动相进行洗脱,紫外检测器在254 nm处进行检测,外标法定量。结果表明,5种呈味核苷酸线性关系良好,相关系数均为0.9999,回收率在92.5%~106.0%范围内,相对标准偏差在1.75%~4.26%之间,5’-UMP、5’-CMP、5’-GMP、5’-IMP和5’-AMP检出限分别为2.0、2.0、2.0、3.0和3.0 mg/kg。该方法操作简便、灵敏度高、重现性好,适用于猪肉中呈味核苷酸含量的测定。     

高效液相色谱法测定四角蛤蜊、菲律宾蛤仔中呈味核苷酸

建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时测定四角蛤蜊、菲律宾蛤仔中呈味核苷酸5’-尿苷酸(5’-UMP)、5’-鸟苷酸(5’-GMP)、5’-肌苷酸(5’-IMP)和5’-腺苷酸(5’-AMP)含量。采用Waters Atlantis T3(4.6 mm×250 mm,3μm)色谱柱,以0.01 mol/L KH_2PO_4溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,紫外检测器在260 nm处进行检测,外标法进行定量。结果表明:各呈味核苷酸线性关系良好,相关系数R~2均为0.999 9,回收率在96.19%~103.25%内,相对标准偏差在1.08%~1.28%内。四角蛤蜊与菲律宾蛤仔中均含有4种呈味核苷酸,其中5’-AMP含量最多,其次是5’-IMP和5’-UMP,而5’-GMP含量最低。该方法简单,重现性好、灵敏度和准确度高,适用于四角蛤蜊、菲律宾蛤仔中呈味核苷酸含量测定,为研究贝类风味及贝类食品的开发提供一定的依据。     

反相高效液相色谱法测定酱油中的呈味核苷酸

文章建立了酱油中呈味核苷酸(鸟苷酸GMP和肌苷酸IMP)含量测定的反相高效液相色谱方法。该方法中样品以甲醇脱蛋白、C18固相萃取小柱脱色和除杂质,以50mmol/L pH 4.6的磷酸缓冲液为流动相进行等梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为254nm。结果显示:GMP和IMP的保留时间分别为12.2,13.8min,区分度很好,酱油样品在25min内可完全分离,GMP和IMP在5.00～50.00mg/L范围内具有良好的线性,相关系数R2均可达0.9999,变异系数分别为2.08%和1.83%,方法检出限(RSN=3)分别为0.52,0.23mg/L,定量限(RSN=10)分别为1.74,0.77mg/L,酱油样品的平均加标回收率在90.0%～105.0%之间。该方法快速准确、灵敏度高、重复性好,适用于酱油中呈味核苷酸的测定。     

高效液相色谱法测定呈味核苷酸二钠及其过程产品

建立了一种测定呈味核苷酸二钠及其过程产品肌苷酸、鸟苷酸合成反应液,肌苷酸、鸟苷酸萃取水相、酯相的高效液相色谱法。该方法以乙腈:0.02mol/L KH2PO4(0.5∶99.5v/v)作为流动相,色谱柱为XDB-C18分离柱,采用等度洗脱,检测波长为254nm。实验验证:方法线性良好,重复性、准确性符合检测需要,RSD≤1.85%,加标回收率在99.4%～100.6%之间。综合分析,该方法能更好的指导呈味核苷酸二钠的生产过程、控制产品质量。     

离子对反相高效液相色谱法测定暗纹东方肉中呈味核苷酸

建立了离子对反相高效液相色谱法测定暗纹东方鲀肉中呈味核苷酸5’-GMP、5’-IMP、5’-CMP、5’-AMP含量的方法。采用紫外检测器,波长为254nm;色谱柱为SUPELCOILLC-18-TC18分离柱;流动相为甲醇∶(0.01mol/LKH2PO4+1.45mmol/L四丁基硫酸氢铵,K2HPO4调pH5.0)=5∶95,流速为0.8mL/min。样品的加标平均回收率在96.70%～104.47%之间,样品6次重复测定的变异系数在1.12%～1.99%之间,最小检出限分别为1.42、4.10、0.67和0.91μg/mL。该方法准确可靠,操作简便。     

油脂及其制品中BHA、BHT、PG和TBHQ快速测定方法的研究

研究了采用高效液相色谱仪同时测定油脂及食品中BHA、BHT、PG、TBHQ的检测方法。样品经甲醇提取、过滤后即可直接测定。检测波长 ,2 80nm ;流动相 ,V(甲醇 )∶V(质量分数 1%乙酸 ) =40∶60 ;梯度 ,40 %～ 10 0 %甲醇 /7 5min ,10 0 %甲醇保持 4 5min。 4种组分的回收率在 85 8%～ 10 1 5 %之间 ,相对标准偏差 (RSD) <5 5 4%。该法简单、快速、准确 ,可用于油脂及其制品中BHA、BHT、PG和TBHQ的日常检测。     

紫外分光光度法同时测定鸡精中谷氨酸钠和呈味核苷酸

建立了同时测定鸡精中谷氨酸钠和呈味核苷酸的紫外光谱法.扫描鸡精的吸收峰,根据吸光度的加和性原理,通过联立方程求解,得到鸡精中的谷氨酸钠和呈味核苷酸(I+G)含量.实验测得鸡精中谷氨酸钠平均含量为51.21%,RSD为1.74%,加标回收率为94%～103%之间;呈味核苷酸(I+G)平均含量为2.08%,RSD为1.82%,加标回收率为92%～105%之间.UV方法方便快捷,准确可靠,适用于鸡精中的谷氨酸钠和I+G的同时测定.     

酱油中呈味核苷酸简易测定法的探索

近年来,呈味核苷酸作为强力助鲜剂,在我们的酱油中已开始得到了应用并开始受到重视,研究正向纵深方向发展。但其中的分析工作是生产控制和产品质量检验的一个重要环节,国内有关食品中呈味核苷酸检测的报导不多,尤其是酱油中呈味核苷酸的检测尚属鲜见。国外报导:通过(1)离子交换柱层析(2)纸上层析(3)纸上电泳、等措施先将核苷酸分离     

超高效液相色谱法测定肉类食品中甲氧氯普胺的含量

建立超高效液相色谱法测定肉类食品中甲氧氯普胺含量的检测方法。样品用乙腈提取,经HLB小柱净 化后,采用C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,乙腈-0.1%甲酸水溶液（20∶80,V/V）为流动相,流速 0.3 mL/min,检测波长275 nm,柱温35 ℃,进样量3.0 μL。结果表明：甲氧氯普胺在1～100 mg/L范围内呈良好的线 性关系,R2=0.999 5,检出限为0.25 mg/kg,定量限为0.5 mg/kg,相对标准偏差为0.79%～5.27%（n=12）,平均回 收率为87.0%～106.0%。所建立的方法适用于检测肉类食品中甲氧氯普胺的含量。     

30种酱油中基本成分和呈味核苷酸的高效液相色谱法分析研究

通过对不同等级的市售酱油的pH值、NaCl含量、吸光度、氨基态氮、总氮、铵盐、总酸度等几项理化指标的检测,并采用反向高效液相色谱法测定酱油中呈味核苷酸含量,结合其主要成份对市售酱油中呈味核苷酸含量及其与产品质量档次进行相关性分析.方法:酱油样品用甲醇/水(75/25,v/v)沉淀30 min,提取液用C18固相萃取小柱去杂,定容后过0.22 μm滤膜后进行液相色谱分析.色谱条件:色谱柱Zorbax SB-Aq C18 (4.6×250 mm,5 micron);流动相为磷酸二氢钾(0.01 mol/L,pH为4.5),流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长254 nm.结果:高效液相色谱法测定呈味核苷酸加标回收率98.5％～102.5％,相对标准偏差小于1.05％,该法最低检出限量10μg.结论:本法适用于酱油中5’-肌苷酸一钠和5'-鸟苷酸二钠的测定,检测速度快,结果准确,尤其适用于批量样品分析.     

风味蛋白酶酶解制备中国对虾调味料风味前体物质工艺优化

以中国对虾下脚料为原料,在碱性蛋白酶酶解基础上利用风味蛋白对中国对虾下脚料进行二次酶解,制备中国对虾调味料风味前体物质——酶解液,并考察温度、初始pH、风味蛋白酶用量等单因素对水解度的影响,再通过响应面分析法优化风味蛋白酶酶解工艺。结果表明,最佳酶解工艺条件为:料水比1:9、风味蛋白酶用量2.2%、初始pH6.4、酶解温度59℃、酶解时间3 h。在此条件下,中国对虾下脚料水解度为54.79%。酶解液中氨基酸含量为33.6862 mg/mL,其中必需氨基酸(如:苏氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸等)含量为27.2543 mg/mL。谷氨酸和赖氨酸的含量有明显提高,极大的增强了鲜味强度。采用分步酶解法制备的酶解液具有诱人、浓郁虾风味,可作为调味基料。     

浓酱兼香型酒醅中产酱香芽孢杆菌的筛选及发酵风味成分分析

该研究从兼香型白酒不同轮次酒醅中筛选到两株碱性蛋白酶活较高并对乙醇具有较好耐受性的菌株,分别为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）LS9和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）S10,其液态发酵产碱性蛋白酶活性分别可达（163.82±15.85） U/mL和（241.69±20.07） U/mL,二者均能在含体积分数6%乙醇的培养基中生长良好。菌株LS9和S10均能产生典型的酱香风味。气质分析结果表明,菌株LS9和S10发酵后代谢产生了5-甲基糠醛、β-苯乙醇、苯乙酸、α-亚麻酸等新的风味成分。菌株LS9和S10在小麦固体培养基中均具有一定的发酵产乙偶姻能力,在28 ℃恒温条件下乙偶姻产量分别为（65.15±6.15） mg/L和（41.33±4.82） mg/L,35 ℃→45 ℃→55 ℃升温培养条件下的乙偶姻产量分别为（41.21±3.27） mg/L和（26.91±2.97） mg/L。     

中国对虾调味料风味前体物质酶解制备工艺研究

以中国对虾下脚料为原料,利用酶解技术获得中国对虾调味料风味前体物质——酶解液,并通过响应面分析方法优化酶解工艺。研究结果表明,最佳酶解工艺条件为料水比1/9,酶解时间3h,酶用量2.4%,酶解温度68℃,初始pH6.5。在此条件下,中国对虾下脚料水解度为16.58%。水解液中氨基酸含量为23.2028mg/mL,其中必需氨基酸含量为10.5312mg/mL。所得酶解液具有诱人、浓郁的虾风味,可以作为调味基料。     

反复卤煮对老汤品质的影响研究

传统酱卤肉制品因老汤的使用而深受消费者喜爱,卤汤在连续的使用过程中不断积累较多的可溶性滋味物质,使其本身具有鲜醇浓厚独特的美味,进而赋予卤煮制品特有的滋味。本研究以白羽肉鸡鸡腿为原料,对传统卤煮工艺不同卤制次数卤汤中的营养物质如蛋白质、游离氨基酸、呈味核苷酸、味精当量等和有害物质中的杂环胺的变化进行研究。结果表明:与对照组第0锅卤汤相比,当卤制次数达到第9锅时,卤汤中蛋白质含量由0.09%增加至3.86%,总游离氨基酸含量由68.57 mg/100g上升至601.92 mg/100 g,呈味核苷酸含量由0.78 mg/100 g达到了22.97 mg/100 g,味精当量(EUC)值由0.0068 g MSG/100 g升高至1.32 g MSG/100 g,但有害物质中杂环胺含量由12.29 ng/g上升至28.64 ng/g。因此,传统卤煮工艺中随着卤制次数的增加,卤汤中营养物质的含量呈不断上升的趋势,同时有害物质中杂环胺的含量也不断富集。     

蒙顶甘露名茶主要滋味成分及香气组分检测分析

采用常规分析法与高效液相色谱、气相色谱-质谱分析法相结合对蒙顶甘露茶的主要滋味成分、游离氨基酸组分和香气组分进行检测,并就内含成分与品质风味的关系进行探究。结果表明,主要滋味成分茶多酚、儿茶素、咖啡碱、可溶性糖和氨基酸的全含量为（23.98±0.26）%、（17.52±0.05）%、（4.26±0.21）%、（4.85±0.12）%和（4.66±0.16）%,酚氨比值为3.95～7.43;日常饮茶冲泡时,第2次泡滋味感官评分（28.9±0.2）最高,品质风味好,其主要成分包括茶多酚、咖啡碱、可溶性糖和游离氨基酸,浸出质量浓度分别为262.2、63.9、66.5 mg/250 mL和89.3 mg/250 mL,酚氨比值较小,为2.93;蒙顶甘露茶中含有18 种游离氨基酸组分,其中茶氨酸高达20.46 mg/g,占51.5%;蒙顶甘露茶中酯型儿茶素组分表儿茶素没食子酸酯和表没食子儿茶素没食子酸酯的含量分别为3.39%、6.97%;检测到51 种香气组分,主要是醇类（12 种）和酯类（9 种）,其中芳樟醇、β-紫罗兰酮、橙花叔醇和反-橙花叔醇含量较高,这些组分共同成为嫩香持久馥郁的香气物质基础。     

蒸制鲟鱼肉特征性滋味组分的鉴定

为明确传统热加工鲟鱼肉特征性滋味组分,对蒸制鲟鱼肉中游离氨基酸、核苷酸、有机酸、甜菜碱及无机离子等滋味组分进行定量分析,并结合滋味活性值、滋味组分减缺、添加及重组实验探究蒸制鲟鱼肉的关键味觉化合物。结果表明：蒸制16 min鲟鱼肉的关键味觉化合物为甘氨酸、谷氨酸、丙氨酸、5’-一磷酸腺苷、5’-一磷酸肌苷、乳酸、琥珀酸、K＋、Na＋和Cl－;将10 种关键味觉化合物按其天然含量溶解在超纯水中制备简化重组液,简化重组液能够较为完整地复制完全重组液的味道,但与天然提取液相比,在鲜味上仍有所欠缺。     

食盐腌制对油炸罗非鱼风味的影响

为探究食盐腌制对油炸罗非鱼风味的影响,本研究以蛋白质、脂肪酸、游离氨基酸以及呈味核苷酸含量为考察指标,通过感官评定结合顶空固相微萃取-气质联用(HS-SPME-GC-MS)方法分析食盐腌制对油炸罗非鱼可挥发性风味物质以及风味组分间的影响。结果表明,腌制前后的油炸罗非鱼风味变化明显,感官评价结果显示经过食盐腌制处理,油炸罗非鱼油脂味、肉香味增强,土腥味减弱;HS-SPME-GC-MS检测结果显示,食盐腌制过后油炸罗非鱼的可挥发性气味物质中1-辛烯-3-醇相对含量降至4.17%,ROAV值为5.70、(E,E)-2,4-癸二烯醛含量升为5.12%,ROAV值为100,肉香味和油脂味明显增强,土腥味明显降低;食盐腌制处理后油炸罗非鱼蛋白质与脂肪的含量显著降低(P<0.05),游离氨基酸与脂肪酸的消耗量增加,分别为38.94 mg/100 g和2.37 mg/g,且呈味氨基酸的占比与不饱和脂肪酸的含量发生显著降低(P<0.05),提供鲜味的肌苷酸(Inosinic acid,IMP)和鸟苷酸(Guanylic acid,GMP)含量显著(P<0.05)降低。实验证明食盐腌制对油炸罗非鱼的风味物质及组分影响显著(P<0.05),显著降低蛋白质和脂肪的含量,降解形成的挥发性物质显著提高,提高罗非鱼的油脂香、鲜味和肉香味,降低其土腥味和青草味,明显改善罗非鱼的品质。     

南美白对虾虾头自溶产物主要呈味成分分析

以南美白对虾虾头为原料,制备风味良好的自溶产物。采用高效液相色谱法、原子吸收光谱等方法分析其主要的呈味物质。结果表明：游离氨基酸含量丰富,总量达9300mg/L,其中天门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸4 种呈鲜味氨基酸的总含量达2130mg/L,占总游离氨基酸的22.9%;核苷酸及其关联化合物中,与鲜味有着密切联系的肌苷酸(IMP)含量为6.12mg/L;无机质离子Na+、K+、Cl －含量分别达663.7、182.1、417.2mg/L;甜菜碱、乳酸和琥珀酸含量分别达2400、15.27、13.32mg/L。这些成分都影响着南美白对虾虾头自溶产物的鲜味、甜味及整体的滋味。     

温和条件下模型体系中烧烤风味及杂环胺形成测定

以美拉德模型体系葡萄糖-肌酸酐-氨基酸（丙氨酸、苏氨酸、甘氨酸）为研究对象,探索3 个体系在130 ℃条件下反应3 h后风味物质及杂环胺的形成。采用固相微萃取-气相色谱-质谱联用方法检测表明,3 种模型均产生烧烤风味物质,主要为烷基吡嗪类。高效液相色谱分析表明,丙氨酸模型（Ⅰ）和甘氨酸模型（Ⅲ）均检测到2-氨基-3,4-二甲基咪唑并[4,5-f]喹啉、2-氨基-3,4,8-三甲基咪唑并[4,5-f]喹喔啉和2-氨基-3,7,8-三甲基咪唑并[4,5-f]喹喔啉3 种杂环胺,苏氨酸模型（Ⅱ）检测到了2-氨基-3,4-二甲基咪唑并[4,5-f]喹啉和2-氨基-3,4,8-三甲基咪唑并[4,5-f]喹喔啉2 种杂环胺;3 种模型体系均未检测到2-氨基-3-甲基咪唑并[4,5-f]喹啉和2-氨基-3,8-二甲基咪唑并[4,5-f]喹喔啉。130 ℃温和条件下,1.5 h内各模型体系中杂环胺的生成量很少,1.5 h后杂环胺总量随着加热时间的延长逐渐增多,3 h时模型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中杂环胺总量分别为（375.50±15.80）、（414.00±18.40）、（363.50±12.20） ng/mL。本研究为肉制品加工尤其是烤肉制品加工如何控制加工条件,从而实现美拉德反应定向控制、减少杂环胺的产生提供一定参考。     

Effective and repeatable chromatographic separation of 5 nucleotides in infant formula milk powder by ion-pair high-performance liquid chromatography–ultraviolet

A robust method using HPLC-UV was developed to improve the accuracy and repeatability of a quantitative method to detect 5 nucleotides (cytidine-monophosphate, uridine monophosphate, adenosine monophosphate, guanine monophosphate, and inosine monophosphate) in infant formulas. The results showed that efficient separation could not be achieved without strict conditions. The proposed method displayed a strong linear relationship (R² > 0.9999) of single nucleotide in infant formula milk powder in the range of 10 to 1,000 mg/kg, a steady recovery (80.0% ～110.0%) with relative standard deviation from 0.5% to 3.5%, under strict conditions of hydrophilic C₁₈ column with di-isopropyl at 62.5 ± 2.5°C (± standard deviation), 0.65 ± 0.1 mg/mL tetrabutylammonium bisulfate, and mobile phase of pH of 2.75 ± 0.02. By applying this method on a series of milk products in the Chinese market, we found a few of them exceeded the legal limits of nucleotides.