冬虫夏草胞外多糖的体外抗氧化活性

研究了人工培养冬虫夏草胞外多糖的体外抗氧化活性。通过体外抗氧化模型和分光光度法研究了5种胞外多糖级分在不同体系中对超氧阴离子和羟自由基的清除作用、Trolox等价抗氧化能力。结果表明:胞外多糖各级分均能较好的清除O2-.、.OH和ABTS+.自由基,且级分EPS-1A-F3的作用效果强于其他各级分,进一步揭示其在膳食和理疗上具有潜在的应用价值。     

树舌胞外多糖抗氧化活性研究

采用分光光度法研究树舌胞外多糖体外抗氧化活性。以V C为对照,测定GAEPS对超氧阴离子（O-2·）、羟自由基（·OH）、二苯代苦味酰自由基（DPPH·）、亚硝酸盐的清除能力。结果表明GAEPS具有较强的抗氧化能力,其抗氧化活性与多糖浓度在一定浓度范围内呈量效关系。当GAEPS浓度为4mg/mL时,其对O-2·、·OH、DPPH·、亚硝酸盐的清除能力分别达到83.26%、75.81%、86.16%、82.36%。      

产云芝胞外多糖发酵工艺优化及抗氧化活性研究

试验对云芝发酵生产胞外多糖的培养基进行优化并对其抗氧化活性进行研究,通过单因素试验和中心组合设计并用Design-Expert 7.0软件对实验结果进行分析,确定培养最优条件为氮源5.870 g/L多价胨,碳源53.120 g/L麦芽糖,起始pH值为5,温度28℃,搅拌发酵转速150r/min,多糖得率为10.098 2 g/L;对发酵多糖进行提取分离和脱蛋白处理得到EPS,然后用邻二氮菲法和DPPH法测定了EPS的抗氧化活性,结果表明,EPS对·OH自由基和DPPH·自由基均具有较高的清除率,且具有较好的量效关系,说明云芝EPS具有较强的抗氧化活性.     

黑松露多糖提取工艺优化及体外抗氧化活性分析

选取云南黑松露为研究对象,对黑松露多糖优化提取工艺,纯化后单糖组成和体外抗氧化活性进行研究。应用响应曲面法优化后最佳提取工艺条件为：提取温度75.36 ℃,提取时间1.02 h与料液比1:31.32 g/mL,在此条件下,多糖的实验得率为11.79%,预测得率为11.86%。采用DEAE-Sepharose快速流动柱从黑松露粗多糖中分离纯化出4个新的多糖组分（TSP-1、TSP-2、TSP-3、TSP-4）。应用离子色谱法分析多糖成分,得出TSP-1的单糖组成为盐酸氨基半乳糖、葡萄糖和甘露糖,比例为2.8:77.1:20;TSP-2为鼠李糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖,比例为18.7:1.5:2:40.6:37.3;TSP-3为鼠李糖、盐酸氨基葡萄糖、葡萄糖、甘露糖、葡萄糖醛酸和半乳糖的比例为13:3.5:58.4:21.1:2.7:1.2。粗多糖（crud TSP）和TSP-1、TSP-2、TSP-3三个纯化组分多糖浓度在0.25~4 mg/mL范围内,对DPPH自由基的最大清除率分别为73.93%、36.67%、73.60%和54.10%;对ABTS自由基的最大清除率分别为60.47%、36.20%、41.87%和52.73%;金属螯合力分别为61.63%、27.00%、52.50%和43.17%;还原力吸光度值分别为0.39、0.34、0.28和0.56。该研究旨在为研究黑松露多糖具生物活性的物质基础及开发利用提供理论依据,并对其保健食品研发具有重要意义。     

乳杆菌胞外多糖抗氧化活性研究

从本实验室保藏的8株产胞外多糖的乳杆菌:干酪乳杆菌-Y3,干酪乳杆菌-Y4,干酪乳杆菌-Y16,植物乳杆菌-Y41,植物乳杆菌-Y42,植物乳杆菌-Y44,干酪乳杆菌-Y35,鼠李糖乳杆菌LGG中,筛选出1株产抗氧化活性多糖的菌株,评价其抗氧化性并分析其结构。采用酸沉醇提法从8株乳杆菌的MRS培养液中提取胞外多糖,并用苯酚硫酸法和考马斯亮蓝法测定粗多糖和蛋白含量,同时测定胞外多糖的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)清除率、2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)自由基(ABTS)清除率、羟自由基(·OH)清除率、铁离子还原力(FRAP)、氧自由基吸收能力(ORAC)及对ABAP氧化损伤HT-29细胞的保护作用,以评价8株菌胞外多糖抗氧化活性。通过主成分分析法得到产高抗氧化活性胞外多糖的菌株为Y42。进一步研究发现:随着菌株Y42胞外多糖作用浓度的降低,对ABAP氧化损伤HT-29细胞的保护作用降低,然而都显著高于氧化损伤组(P0.05)。菌株Y42胞外多糖显著上调HT-29细胞过氧化物酶和超氧化物歧化酶的表达量(P0.05),HT-29细胞内谷胱甘肽过氧化物酶活性也显著高于氧化组(P0.05)。菌株Y42胞外多糖由中性多糖和酸性多糖组成,其单糖组成为甘露糖、葡萄糖醛酸、氨基葡萄糖、氨基半乳糖、半乳糖,它们的物质的量比为11.30∶3.51∶10.64∶7.53∶7.19。红外光谱扫描显示菌株Y42胞外多糖具有典型的特征吸收峰,属于吡喃糖环的骨架模式。     

富锗树舌胞外多糖的体外抗氧化活性研究

利用树舌为材料通过液体深层富锗培养获得富锗胞外多糖,测定了树舌富锗胞外多糖中锗含量及其抗氧化活性,即清除氧自由基、羟自由基、DPPH自由基、亚硝酸盐的能力和总还原力,并以维生素C(Vc)作为阳性对照。实验结果表明:树舌富锗培养基内锗质量浓度为150μg/mL时,可显著提高胞外多糖的产量,使胞外多糖产量达到1.12 g/L,比对照组提高36.62%。同时胞外多糖中的有机锗含量也得到显著提高达到0.26 mg/g,比对照组提高116.67%。有机锗对提高胞外多糖清除氧自由基、羟自由基、DPPH.、亚硝酸盐的能力及总还原力有显著的促进作用,在多糖浓度为2.5 mg/mL时,分别比对照提高25.52%、31.83%、26.95%、16.38%和10.36%。富锗树舌胞外多糖抗氧化活性与多糖浓度呈明显的剂量-效应关系。     

穿山龙多糖的提取及其体外抗氧化活性研究

目的 提取穿山龙多糖,对主要影响因素进行考察,优化提取工艺,并对所得多糖的体外抗氧化活性进行研究.方法 以多糖收率和含量为综合评价指标,考察料液比、水浴温度和提取时间对水醇法提取穿山龙多糖的影响,通过正交试验确定最优工艺.采用超氧阴离子自由基(O?2?)、铁离子和DPPH?研究其体外抗氧化活性.结果 水醇法提取穿山龙多...     

酿酒酵母胞外多糖发酵工艺条件优化

为提高酿酒酵母产胞外多糖能力,了解酿酒酵母生长情况、代谢产物等特性,进一步扩大微生物多糖来源范围,对酿酒酵母发酵培养基中的碳源、氮源及各种金属离子对其胞外多糖的影响进行了研究,同时对碳源、氮源浓度配比进行了试验,还对发酵条件中pH、装液量、时间、接种量等组合进行了正交试验。确定发酵培养基最佳组合：葡萄糖5%、酵母浸粉0.5%、KH2PO40.1%。用此培养基,最佳发酵条件为：初始pH为4.5,装液量为50mL/250mL,接种量为5%,发酵时间为2d,在此条件下,胞外多糖产量可达到0.292mg/mL。     

乳酸杆菌胞外多糖高纯度提取工艺的优化

乳酸菌胞外多糖的分离纯化一直是研究热点,目前国内对高效提纯条件研究报道较少。本实验从除EPS中蛋白条件优化、乙醇沉淀EPS条件优化、不同的离心力及离心时间对多糖获得量的影响等方面着手,优化出了乳酸菌胞外多糖最佳提取工艺。最终得到的产品纯度高、杂质度低,适合于进一步纯化和结构鉴定。      

响应面法优化樟芝胞外多糖的发酵条件

为提高樟芝液态发酵胞外多糖产量,本实验对发酵条件进行优化,首先对11种氮源和5种碳源进行初选,然后在单因素实验的基础上,设计了Plackett-Burman实验,筛选出显著影响胞外多糖产量的因素,最后采用四因素三水平的响应面法优化胞外多糖的产量。优化得到最佳发酵条件为:葡萄糖60 g/L、酵母浸粉16 g/L、维生素B₁ 1 g/L、KH₂PO₄ 0.75 g/L、MgSO₄·7H₂O 0.77 g/L、初始pH=5.0、装液量120 mL/500 mL、接种量18%、27 ℃、10 d、100 r/min。该条件下胞外多糖产量为1.23 g/L,较优化前提升了71%。优化后多糖产量有大幅提高,可为后续工业化应用提供参考。     

黑灵芝不同部位多糖成分分析及抗氧化活性

分别采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)和气相色谱法(GC)分析黑灵芝菌盖、菌柄和孢子粉多糖的分子质量分布和单糖组成,结果表明三者存在显著性差异。对三者的抗氧化活性进行考察,结果表明：菌盖多糖在清除羟自由基和总还原能力(FRAP)方面效果最佳;菌柄多糖在清除DPPH 自由基、羟自由基和抑制β- 胡萝卜素与亚油酸体系氧化方面效果显著;孢子粉多糖的体外抗氧化效果较差,但在金属离子螯合能力方面明显优于菌盖和菌柄多糖。     

黑灵芝多糖体内抗炎活性及对甘露糖受体表达的影响

目的:研究水溶性黑灵芝多糖(a water-soluble polysaccharides from Ganoderma atrum,PSG)-1体内抗炎活性及对甘露糖受体(mannose receptor,MR)表达的影响。方法:腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立小鼠体内炎症模型,随机分为5组:正常对照组、LPS组、PSG-1(高、中、低剂量,分别为100、50、25 mg/(kg·d))+LPS组。流式细胞仪检测巨噬细胞中MR表达、吞噬功能及活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成,用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分析血清中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL)-1β和IL-6的含量。结果:与正常对照组相比,LPS组腹腔巨噬细胞表面MR表达量下降,与LPS组相比,PSG-1+LPS组腹腔巨噬细胞表面MR表达量极显著增加(P0.01);与正常对照组相比,LPS组腹腔巨噬细胞吞噬能力和ROS生成增加,与LPS组相比,PSG-1+LPS组腹腔巨噬细胞吞噬功能和ROS生成显著降低(P0.05,P0.0 1);与正常对照组相比,小鼠经LPS处理后,血清中TNF-α、IL-1β和I L-6的分泌水平极显著升高(P0.01);与LPS组相比,小鼠灌胃PSG-1后,PSG-1(高剂量)+LPS组中TNF-α的含量显著降低(P0.05),IL-1β和IL-6的分泌水平无显著差异。结论:PSG-1具有抗炎作用,可部分抑制LPS诱导的体内炎症,其机理与PSG-1促进小鼠腹腔巨噬细胞表面MR的表达、抑制巨噬细胞向M1型极化有关。     

黑灵芝多糖对氧化应激所致心肌细胞损伤的影响

目的：研究黑灵芝多糖(PSG-1)对氧化应激所致大鼠乳鼠心肌细胞损伤的影响。方法：采用过氧化氢(H2O2)作用于心肌细胞,建立氧化应激损伤模型,观察细胞搏动频率,MTT 法测定细胞存活率;比色法测定细胞乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量,流式细胞仪检测细胞内的活性(ROS),蛋白印迹检测细胞SOD 的蛋白表达。结果：PSG-1 预处理可减少MDA 含量,ROS 产生及LDH 的漏出,增加心肌细胞搏动频率、细胞存活率和SOD 活性及蛋白表达并且呈剂量依赖性。结论：PSG-1 对心肌细胞氧化应激损伤具有保护作用,其保护作用可能与降低MDA、ROS 的含量,增强SOD 活性及蛋白的表达有关。     

黑灵芝多糖对免疫抑制小鼠肠道黏膜形态及肠道黏膜免疫的影响

目的：探究黑灵芝多糖对免疫抑制小鼠肠道黏膜形态及肠道黏膜免疫的影响。方法：腹腔注射环磷酰胺构建免疫抑制小鼠模型,将小鼠分为6 组：正常对照组、模型组、阳性对照组以及黑灵芝多糖低、中、高剂量（25、50、100 mg/（kg·d））组,灌胃期间每天记录小鼠体质量并观察其生活状态,空肠组织进行切片病理学观察,酶联免疫吸附实验测定肠道白细胞介素（interlrukin,IL）-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）及干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）的含量,反转录定量聚合酶链式反应分析T-bet、GATA-3 mRNA相对表达水平。结果：与模型组相比,低、中、高剂量黑灵芝多糖有助于体质量回升,改善肠道黏膜形态结构,提高IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ细胞因子含量,增强T-bet、GATA-3 mRNA相对表达水平,使Th1/Th2平衡向Th1偏移。结论：黑灵芝多糖可改善免疫抑制小鼠的肠道黏膜形态,调节免疫抑制小鼠的肠道黏膜免疫。     

大鲵皮胶原蛋白制备工艺优化及其抗氧化活性研究

选择大鲵皮中胶原蛋白得率为指标,研究适宜的有机酸浸提液种类和提取温度,并考察酸浓度、料液比和提取时间三个因素对胶原蛋白提取得率的影响。在单因素基础上,通过正交试验优化了大鲵皮胶原蛋白的提取工艺。并采用DPPH法与水杨酸法对大鲵皮中胶原蛋白进行抗氧化活性研究。结果表明,大鲵皮胶原蛋白的最佳提取条件为:盐酸浸提液浓度为0.4 mol/L、提取温度为35℃、料液比为1:15(g:mL)、提取时间为24 h,在该条件下,大鲵皮胶原蛋白得率为40.2%。该条件下得到的胶原蛋白对DPPH自由基、羟基自由基的IC₅₀值分别为9.96和7.79 mg/mL。研究显示,酸法浸提大鲵皮中胶原蛋白得率较高,且具有较好抗氧化活性,为大鲵皮的开发应用提供了理论依据。     

新疆白皮大蒜中多糖提取工艺及抗氧化活性的研究

对新疆白皮大蒜中多糖的提取工艺及抗氧化活性进行研究。结果表明:最佳的浸提温度为80℃、浸提时间150min、水料比5(5:1)、浸提2次、粉碎度为60~80目;新疆白皮大蒜多糖有一定的清除DPPH的作用,与VC相比,大蒜多糖对DPPH的清除效果要差;但大蒜多糖对菜籽油的抗氧化能力较VC强,能够有效抑制菜籽油的氧化。     

胭脂果多糖提取工艺优化及其抗氧化活性分析

为了考察超声辅助水提法对胭脂果多糖得率的影响,本研究应用单因素实验对超声功率、超声时间、提取温度和液料比展开了研究。在此基础上,采用响应面法优化了工艺参数,并分析了胭脂果粗多糖的体外抗氧化活性。结果表明,当胭脂果多糖最佳提取工艺为超声时间6 min、超声功率97 W、提取温度86℃、提取时间150 min和液料比40 mL/g时,粗多糖得率可达12.55%±0.31%,仅低于预测值0.23%,而且其中多糖含量达到了(413.75±0.41)mg/g,说明该模型能较好地预测实际得率。胭脂果多糖对DPPH·和·OH以及总还原能力与质量浓度呈量效关系,对DPPH·和·OH的IC₅₀分别为0.0203、1.44 mg/mL。因此,响应面法优化超声辅助水提法提取胭脂果多糖工艺方便可行,得到的多糖有较好的体外抗氧化活性,可为进一步的合理开发利用提供理论依据。     

黑灵芝水溶性膳食纤维的理化性质及抗氧化活性

目的:以黑灵芝为原料,研究其水溶性膳食纤维（soluble dietary fiber,SDF）的理化性质及抗氧化活性。方法:在中试水平上通过热水浸提法制备黑灵芝SDF,并采用红外光谱、气相色谱等技术分析其理化性质;通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH·）清除能力、羟基自由基（OH·）清除能力、铁还原/抗氧化能力（ferric reducing/antioxidant power,FRAP）等评价体系表征SDF的抗氧化能力。结果:从黑灵芝中提取得到的SDF总糖含量47.3%,蛋白质含量7.0%,糖醛酸含量5.7%;红外光谱中有多糖和β-糖苷键吸收峰,GC分析结果表明SDF中的主要单糖以甘露糖、葡萄糖和半乳糖为主,三者摩尔比分别为1∶4.4∶3;抗氧化实验表明黑灵芝SDF具有一定的抗氧化能力,抗氧化能力与浓度呈现明显的量效关系。结论:从黑灵芝中提取得到的水溶性膳食纤维SDF,显示其具有糖的结构特征,主要单糖为甘露糖、葡萄糖和半乳糖,SDF具有一定的抗氧化能力,具有良好的开发、利用价值。