葡萄籽原花青素的聚合度与抗氧化活性关系

采用亚油酸体系和脂质体体系研究葡萄籽原花青素不同聚合度组分的抗氧化活性。结果表明,葡萄籽原花青素具有很强的抗氧化能力,在亚油酸及脂质体体系中,原花青素的抗氧化活性高于VC和VE,并且随着浓度的增加其抗氧化能力与合成抗氧化剂BHT相近。聚合度对原花青素抗氧化作用的影响较大,单体对脂质体体系的抗氧化活性低于二聚体,对于聚合体而言,原花青素对亚油酸体系和脂质体体系的抗氧化作用均随着聚合度的升高而降低。     

葡萄籽原花青素抗氧化作用的研究

采用亚油酸体系、脂质体体系、DPPH.及O2-.研究葡萄籽原花青素提取物的抗氧化活性,结果表明,葡萄籽原花青素具有很强的抗氧化和自由基清除能力,在亚油酸及脂质体体系中,原花青素的抗氧化活性高于VC和VE,并与VC、VE具有协同增效作用,随着浓度的增加,其抗氧化能力可以与合成抗氧化剂BHT相近;原花青素对DPPH.自由基的清除能力优于VC、VE及BHT,半抑制浓度分别为:原花青素1.8μg/mL、VC 2.5μg/mL、VE 6.3μg/mL、BHT 3.5μg/mL。对O2-.的清除能力优于VE而与VC相近,半抑制浓度分别为原花青素15.4μg/mL、VC 14.5μg/mL、VE 177μg/mL。     

葡萄籽提取物中原花青素的测定

用高效液相和Folln—Ciocalteau相结合的方法分析了葡萄籽提取物中原花青素的百分含量。此方法能够弥补Bate—Smith法和Porter法只能测定原花青素相对含量的缺陷。分析结果显示：葡萄籽提取物中原花青素的含量为77．4％。     

山葡萄籽中原花青素提取工艺优化

目的：通过单因素与正交试验研究不同的提取温度、料液比、时间、溶剂体积分数等因素对原花青素提取率的影响,确定最佳提取工艺参数。方法：以山葡萄籽为原料,乙醇作为提取剂,通过香草醛-HPLC法测定提取物中原花青素的提取率,香草醛法测定黄烷-3-醇单体与原花青素的总含量,HPLC法测定黄烷-3-醇单体的含量,二者之差为原花青素总含量。结果：最佳工艺参数为乙醇体积分数70%、提取时间120min、提取温度60℃、料液比1:5(g/mL)。结论：在此工艺参数下,原花青素提取率为3.12%。     

葡萄籽原花青素的制备及活性研究

选用多种有机溶剂,经过梯度分离,从葡萄籽中得到葡萄籽原花青素提取物,并采用邻苯三酚和DPPH方法研究提取物的清除自由基活性。实验结果表明：通过显色反应,可初步判断和溶剂提取物中含有黄酮类和多酚类物质,利用邻苯三酚和DPPH检测方法,证明各提取物具有清除超氧阴离子自由基和1,1--二苯基苦肼基的活性,其中乙酸乙酯提取物清除自由基的效果最好。     

葡萄籽提取物中原花青素含量的测定

基于原花青素与香草醛的显色反应 ,采用分光光度法对葡萄籽提取物中原花青素含量的测定进行了研究 ,对标准物的选择、催化剂添加量和反应时间进行了讨论 ,确定了香草醛 盐酸法的原花青素测定方法。该方法检测波长为 5 0 0nm ,反应时间为 15h ,反应温度为(2 0± 1)℃ ,以儿茶素为标样 ,线性范围为 10～ 15 0 μg/mL ,相对标准偏差为 0 78%～ 0 79% ,加标回收率为 97 4%～ 98 3 %     

葡萄籽中原花青素的保健功能

原花青素（Procyanidins，简称PＣ）是一类聚多酚类混合物。葡萄属植物种子中的该类物质含量很高，具抗氧化、预防心血管疾病、抗肿瘤、抗辐射等多种生理功能。     

葡萄籽低聚原花青素体外抗氧化活性研究

以实验室分离纯化得到的葡萄籽低聚原花青素为研究对象,水溶性维生素E和维生素C为对照,分别考察葡萄籽低聚原花青素对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基（O2-·）的清除能力以及铁离子还原能力（FRAP）。结果表明,葡萄籽低聚原花青素对DPPH自由基、ABTS自由基以及超氧阴离子自由基具有较高的清除能力,IC50值分别为23.52 μg/mL、51.38 μg/mL和684.46 μg/mL,具有较高的还原能力,且均优于对照水溶性维生素E。与维生素C相比,原花青素对ABTS自由基的清除能力以及还原能力均优于维生素C,两者DPPH自由基的清除能力相当,原花青素和水溶性维生素E在极低质量浓度（0.05～1.00 μg/mL）范围内,对超氧自由基具有清除能力,清除率为30%～40%,随着质量浓度的增加,维生素C的超氧阴离子自由基清除能力优于葡萄籽低聚原花青素。     

铁盐催化比色法测定葡萄籽超微粉中的原花青素

以正丁醇-盐酸为铁盐催化法的反应介质，测定了葡萄籽超微粉中的原花青素含量。通过对盐酸浓度、水分含量、硫酸铁铵浓度、反应温度及时间等影响比色反应的因素进行研究，确定了最佳的测定条件。本方法准确、灵敏、稳定、操作简便，适用于葡萄籽超微粉中原花青素的含量分析。     

DPPH法测定葡萄籽原花青素清除自由基的能力

通过DPPH法测定葡萄籽原花青素抗氧化、清除自由基能力,实验表明:随着葡萄籽原花青素纯化程度的提高,其抗氧化、清除自由基的能力也相应地提高。葡萄籽原花青素纯化物的抗氧化、清除自由基能力大于VC和芦丁,葡萄籽粗提物的抗氧化、清除自由基能力略低于VC,但高于芦丁。GSP、GSPP1、GSPP2、GSPP3、GSPP3-SP、VC、芦丁清除DPPH自由基的半抑制量分别为118,93,88,86,63,110,170 g/kg,其自由基清除能力AE分别为0.84×10-2、1.08×10-2、1.14×10-2、1.16×10-2、1.58×10-2、0.59×10-2、0.59×10-2。     

影响超氧化物歧化酶活性测定的因素

目的：证实在黄嘌呤氧化酶法中影响超氧化物歧化酶(SOD)活性测定的干扰因素及其对保健食品抗氧化功能评价造成误差。方法：用黄嘌呤氧化酶法测定加入白蛋白、总蛋白、甘油三酯、葡萄糖、VC、还原型谷胱甘肽6 种物质对SOD 检测体系的影响以及小鼠灌胃VC 后的SOD 比活力值。结果：在黄嘌呤氧化酶法反应体系中,SOD 灭活后依然能够检测到SOD 比活力值。白蛋白、总蛋白、甘油三酯、葡萄糖、VC、还原型谷胱甘肽6 种物质都对该体系造成干扰。透析能够消除小鼠血清中小分子物质的干扰。结论：由于黄嘌呤氧化酶法检测SOD 为非特异性反应,血清中的蛋白质、脂肪、VC、还原型谷胱甘肽等物质都对SOD 活性测定产生干扰而造成正误差。可采用透析的方法去除血清中含有对SOD 检测体系构成干扰的小分子物质。     

利用低温聚合酶链式反应技术提高大豆超氧化物歧化酶活性

目的：利用低温聚合酶链式反应对大豆超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的活性进行改良。方法：将6 种在较低退火温度下扩增出的超氧化物歧化酶基因插入到表达载体pREP5N上,构建pPM1、pPM2、pPM3、pPM4、pPM5、pPM6表达载体,转入大肠杆菌后得到工程菌,诱导其在大肠杆菌中进行蛋白表达,并进行酶活力测定,筛选高酶活力菌株。结果：将已克隆的目的基因序列与已知的大豆MnSOD基因序列比对分析,一致性平均为86.57%,氨基酸序列同源性平均为82.58%。对已获得的6 种工程菌进行蛋白质提取,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示表达产物的分子质量约为26 kD。经1%差异水平分析,改良后的SOD酶活力均有极显著提高,平均比对照菌株的酶活力提高1.95 倍。结论：本实验证明低温聚合酶链式反应是改变酶活性的一种有效方法,为超氧化物歧化酶在生产中的应用提供了技术支持。     

纳豆中SOD的分离纯化及性质的研究

通过采用不同的溶液、pH和温度处理探讨了对SOD提取物活性的影响,采用硫酸铵沉淀法粗提,葡聚糖凝胶过柱,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法判定纯度.结果表明,提取时纳豆捣碎与否结果没有差异,采用缓冲液效果较好.采用50℃以上的温度处理影响酶活性,硫酸铵饱和度在65％～90％时得到较纯的酶粗提物,pH5.9的条件下有利于分离纯化,得到了分子量为3.86×104u的Fe-SOD型SOD.     

显微高光谱技术检测肌细胞中超氧化物歧化酶活力的方法研究

利用可见显微高光谱技术对羊肉肌细胞中的超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活力进行检测。通过显微高光谱系统(380~980 nm)采集223个显微图像,根据样本光谱的反射率提取感兴趣区域并结合SOD酶活力建立模型。对原始光谱结合偏最小二乘回归模型,进行样本集划分及多种光谱预处理的模型对比分析,优选出多元散射校正为预处理方法,采用6种方法提取特征波长,并根据特征波长建立偏最小二乘回归、多元线性回归、主成分回归三种模型。结果显示,建立基于竞争性自适应重加权法挑选特征波长的多元线性回归模型最优,预测集的相关系数和均方根误差分别为0.8351和21.3578 U/mg·prot。采用显微高光谱成像技术对肌细胞内超氧化物歧化酶活力的检测是具有可行性的。     

蜂王浆中超氧化物歧化酶的活性测定与应用

为评价蜂王浆的质量与新鲜度,该文采用黄嘌呤氧化酶法测定蜂王浆中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,优化蜂王浆的预处理方法,比较不同贮存时间和温度条件下蜂王浆中SOD活性的变化及不同生产工艺和蜜源的蜂王浆产品中SOD的活性.优化的预处理方法为蜂王浆样品稀释溶解于生理盐水中至3倍体积,...     

黄棒菜超氧化物歧化酶(SOD)分离纯化的技术

以植物新品种黄棒菜为原料,研究料液比,浸提温度及pH,热变性温度及时间、丙酮加入量等因素对黄棒菜超氧化物歧化酶(SOD)提取效果的影响,利用正交试验与单因素试验优化提取工艺。结果表明,提取SOD的最佳条件为:料液比1︰3(g/mL),浸提温度0℃,pH 7.0,50℃热变性20 min,1.5倍酶液体积的丙酮,此时SOD纯化倍数可达3.17。经层析纯化及真空冷冻干燥,获得SOD成品。最佳条件下处理新鲜黄棒菜叶茎、叶片组织,测得SOD最终比活力分别为7662.23 U/mg,4897.39 U/mg,纯化倍数达17.55、23.08,叶茎更适于提取SOD。经电泳检测,黄棒菜SOD相对分子质量约80 kDa,据文献鉴定为Mn-SOD。试验结果为黄棒菜SOD的分离纯化及资源开发提供技术参考。     

玉米胚芽超氧化物歧化酶提取及对酒精发酵的影响

从玉米胚芽提取SOD的最佳工艺条件为：100g玉米中加入200mL0．05mol/L磷酸缓冲液，40℃浸泡玉米36h，淋干后分离胚芽与胚乳，再加入胚芽质量2倍的0．05mol/L磷酸缓冲液破碎后浸提1h，离心得SOD提取液，总酶活为22549．0u；然后添加硫酸铵依次达到饱和度40％和90％，进行除杂蛋白和盐析，离心后将沉淀冷冻干燥即得到SOD粗酶制剂，其比活为334．6u／mg蛋白。将分离后的胚乳和提取SOD后的胚芽残渣混合进行酒精发酵，淀粉出酒率达到53．16％，证明胚芽SOD提取不影响酒精发酵，且可降低酒精的生产成本。     

玉米超氧化物歧化酶的提取与纯化工艺

为优化玉米超氧化物歧化酶(SOD)提取与纯化工艺。研究不同浸提条件及沉淀分离工艺对玉米SOD提取及纯化效果的影响。最佳诱导和浸提的原料与缓冲液配比分别为1∶1.5~1∶3、1∶2,最佳诱导和浸提时间分别为25 h~30 h、1.5 h。采用50、60℃分别处理15、10 min两次热变性除杂蛋白、丙酮沉淀SOD的纯化效果最好。DEAE-纤维素柱层析纯化后,SOD比活为1 699.7 U/mg,回收率为31%,纯化倍数为30.7。该方法高效且低毒污染少,适于工业化生产。     

柑橘主要组织SOD分布及其在生长中晚期活性变化

以16个柑橘品种为材料,通过测定叶片、果皮、果肉和种子4种组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性大小,研究柑橘SOD的分布情况,以及在柑橘生长过程中SOD活性的变化趋势。结果表明:柑橘果皮、果肉、种子和叶片4种组织中均存在SOD,其活性大小依次为:叶片>种子>果皮>果肉;柑橘各个组织之间SOD活性呈显著性差异,个别品种的相同组织之间SOD的活性也呈显著差异。在柑橘生长中后期,随着果实的逐渐成熟其果皮和果肉组织中SOD的活性变化呈现多样化趋势,但活性变化幅度较小;在种子和叶片组织中SOD的活性变化呈持续上升趋势。     

高超氧化物歧化酶活性海洋红酵母的筛选

为了提高海洋红酵母超氧化物歧化酶的活性,寻找一种可以从众多菌株中定向筛选超氧化物歧化酶高产菌株的方法,通过在培养基中添加百草枯并逐级提高、层层筛选,筛选出了超氧化物歧化酶活性较高的菌株并研究了不同程度的氧化胁迫对海洋红酵母的生长状况、超氧化物歧化酶活性及虾青素质量分数的影响。结果表明:在百草枯浓度为0.075mmol/L的条件下,可大大提高超氧化物歧化酶活性;经逐步提高百草枯浓度所筛选的菌株超氧化物歧化酶比活性提高35.2%;而所筛菌株在含0.075mmol/L的百草枯培养基中培养后,超氧化物歧化酶比活性较初始菌株提高103.7%,差异显著(p<0.05)。这说明使用该方法可以达到筛选超氧化物歧化酶高产菌株的目的,而在培养基中添加低浓度的百草枯同样可提高海洋红酵母的超氧化物歧化酶活性。