高效液相色谱-荧光检测器测定水产品中孔雀石绿残留总量的研究

建立了水产品中孔雀石绿残留总量的液相色谱检测方法。样品中的孔雀石绿全部还原为无色孔雀石绿后,用乙腈-缓冲液提取,经净化、浓缩后,以Symmetry shieldTM RP18为固定相,以乙腈-水为流动相,使用荧光检测器检测无色孔雀石绿。无色孔雀石绿线性范围为1～160ng/ml;方法检出限为1.0μg/kg(以孔雀石绿总量计);回收率为82.6%～92.6%。     

基于质量评价的孔雀石绿快检试剂盒筛选策略

目的建立快速筛选出技术指标合格的市售水产品孔雀石绿残留快速检测试剂盒的方法。方法选用5种市售孔雀石绿快检试剂盒比较其操作步骤、检测时间、提取效率,同时参考SN/T 2775-2011和GB/T19857-2005进行灵敏度、特异性、假阴性率与假阳性率等技术指标测试,提出基于质量评价的试剂盒快速筛选策略。结果 5个品牌的孔雀石绿检测试剂盒质量参差不齐,品牌A、B与C的灵敏度99%,特异性≥85%、假阴性率 1%,假阳性率≤15%,不符合试剂盒评价标准;品牌D与品牌E的灵敏度≥99%、特异性≥85%、假阴性率≤1%,假阳性率≤15%,符合试剂盒评价标准。结论对市场销售的水产品中孔雀石绿残留检测试剂盒要进行采购前、采购中的质量评价,在评价时综合考虑操作步骤的简便性、时效性、评价批次、样品来源等,同时兼顾灵敏度、特异性、假阴性率与假阳性率技术指标,快速筛选出符合标准的试剂盒。     

胶体金免疫层析法检测水产品中孔雀石绿总量残留

目的建立胶体金免疫层析法快速检测水产品中孔雀石绿总量的残留。方法用柠檬酸三钠还原法制备胶体金并标记孔雀石绿单克隆抗体。基于竞争抑制反应原理,在优化条件下建立胶体金免疫层析法。结果水产品中孔雀石绿总量的检测限为2μg/mL,与结构类似物结晶紫的交叉反应不明显。实际样本检测结果与液相色谱-串联质谱法检测结果的差异较小。结论该方法快速、有效,可满足现场检测水产品中隐性孔雀石绿及孔雀石绿的残留。     

液相色谱紫外／荧光检测法测定水产品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿

试验旨在建立一种检测水产品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的液相色谱-紫外/荧光检测方法,并对样品前处理方法进行简化。在乙腈作为溶剂提取步骤中同时加入酸性氧化铝吸附,提取液离心分离后采用串联的丙磺酸阳离子固相萃取柱(PRS)和酸性氧化铝柱净化,0.05 mol/L的乙酸铵/乙腈(20∶80,V/V)为流动相,采用液相色谱-紫外/荧光检测法同时分析孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量,外标法定量。结果表明:孔雀石绿和隐性孔雀石绿在0.05~1.0 mg/L范围内线性良好,相关系数分别为为0.9999和0.9996,最低检出限分别为0.002 mg/L和0.5μg/L。当加标量分别为10、25、50μg时,空白鱼样的加标回收率在72.0%~91.4%之间,RSD均小于7.5%。该方法准确度高,适于水产品中孔雀石绿及其代谢残留产物—隐性孔雀石绿的分析检测。     

免疫分析法检测无色孔雀石绿研究 Ⅰ人工抗原的合成

目的用免疫分析法检测水产品中无色孔雀石绿残留,研究无色孔雀石绿人工抗原的制备及其鉴定。方法用混酸法对无色孔雀石绿进行衍生化,连接上氨基基团,再经重氮化法与载体蛋白相结合,制备人工抗原。结果对无色孔雀石绿中间合成产物的液质联用分析结果表明,氨基产物中,无色孔雀石绿占51.83%,单氨基加成的无色孔雀石绿产物占40.48%,二氨基加成的无色孔雀石绿产物占7.69%。采用紫外法和Bradford法测定,人工抗原中无色孔雀石绿与载体蛋白的结合比为18∶1~23∶1。结论合成的人工抗原属于高质量的人工抗原。     

水产品中孔雀石绿和结晶紫残留检测技术的研究进展

三苯甲烷类染料孔雀石绿和结晶紫因具有抗菌等活性,常被违法用于水产养殖业。但孔雀石绿、结晶紫及其代谢产物隐性孔雀石绿、隐性结晶紫均具有致癌性,所以水产品中这4种碱性染料的残留检测是食品安全分析的重要问题之一。本文就孔雀石绿、结晶紫及其代谢物的化学性质、危害性、使用状况、现有的前处理方法和仪器分析方法等进行了综述。由于水产品基质复杂,样品前处理尤为重要。基于固相萃取技术、Qu ECh ERS技术的高效液相色谱法、高效液相色谱-串联质谱法等方法,适合于水产品中孔雀石绿和结晶紫及其代谢物的快速同时检测,在实际检测中得到广泛应用。同位素稀释质谱法和混合模式色谱法等新型检测技术与新型净化材料将是检测孔雀石绿和结晶紫的发展新方向。     

广州市市售水产品氯霉素、孔雀石绿、呋喃唑酮和甲醛残留量分析

目的调查2018～2019年广州市市售水产品质量与安全现状,分析水产品氯霉素、孔雀石绿、呋喃唑酮和甲醛残留量。方法依据胶体金快速检测法对水产品氯霉素、孔雀石绿、呋喃唑酮残留量进行定性检测,依据SC/T 3025-2006《中华人民共和国水产行业标准水产品中甲醛的测定》(第一法分光光度法)并结合文献方法对水产品中甲醛进行定性和定量检测。结果 200件水产品共有30件的样品检出有违禁药物的残留,总检出率为15.0%,其中氯霉素检出5件,检出率为2.5%,孔雀石绿检出3件,检出率为1.5%,呋喃唑酮检出10件,检出率为5.0%,甲醛检出13件,检出率为6.5%,另外,有1件的样品同时检出氯霉素与孔雀石绿的残留量,其中呋喃唑酮检出率最高的主要集中在鱼类和虾类。结论部分水产品存在氯霉素、孔雀石绿、呋喃唑酮和甲醛污染现象,有关部门应该加强对水产品养殖、运输和销售过程中的监督管理。     

胶体金免疫检测水产品中孔雀石绿残留的前处理方法优化

目的优化胶体金免疫检测水产品中孔雀石绿残留的前处理方法。方法采用超静音可调节式气泵代替氮吹仪或空气吹干仪,对商品化孔雀石绿胶体金免疫层析试剂盒前处理方法中的样品用量、提取剂用量、吹干体积量及吹干温度等条件进行优化,并将优化后的前处理方法在10种水产品中进行应用验证。结果在保证原有试剂盒检出限2μg/kg的前提下,减少样品用量和提取剂用量,节约检测成本;不需用大型仪器,降低检测人员操作要求;样品前处理步骤更加简便,单个样品前处理和检测总时间少于15 min;在10种水产品中具有较好的实际适用性。结论优化后的孔雀石绿免疫胶体金层析试剂盒前处理方法更加简便、快捷,可实现水产品中孔雀石绿的基层现场快速检测。     

不同水产品中有色和无色孔雀石绿的降解动力学研究

目的 研究不同水产品基质中有色和无色孔雀石绿的降解规律。方法 样品经提取净化后, 用HPLC进行检测, 结果用SPSS软件、降解动力学软件进行分析。结果 三种基质中有色和无色孔雀石绿降解反应均符合准一级反应动力学。在10、50、100 μg/kg三个添加水平下, 三种基质中有色孔雀石绿平均降解率分别为57.9%、48.0%、23.0%, 无色孔雀石绿平均降解率分别为46.6%、43.4%、19.8%。添加浓度为50 μg/kg的鲤鱼基质, 采用自然解冻时有色和无色孔雀石绿降解速率常数分别为K(50 μg/kg)=0.00338 d?1, K(50 μg/kg)=0.00268 d-1, 采用微波解冻方式时有色和无色孔雀石绿降解速率常数分别为K(50 μg/kg)=0.00359 d?1, K(50 μg/kg)=0.00321 d?1。实际样品中无色孔雀石绿降解速率常数K(111.2 μg/kg无色, 鲤鱼)=0.000614 d?1, K(50 μg/kg无色, 鲤鱼)=0.00125 d?1。结论 有色孔雀石绿较无色孔雀石绿降解快, 低浓度比高浓度降解快; 两种解冻方式对有色和无色孔雀石绿降解影响较小; 实际样品中无色孔雀石绿降解速率常数均比空白基质中添加无色孔雀石绿降解慢。     

免疫胶体金快速检测水产品中孔雀石绿残留的 质量分析和评价

目的为推动免疫胶体金类现场快速检测技术在水产品药物残留监管领域中的应用。方法本研究采用一套"盲样式"免疫胶体金类快速检测产品质量评价方法,对10种市售的用于检测水产品中孔雀石绿残留的国产胶体金快速检测产品的假阳性率、假阴性率、检出率及稳定性等指标进行验证。结果结果显示,有3种产品能100%准确检测出84个鱼糜样品中是否残留孔雀石绿,且2个不同批次产品的检测结果一致;另外7种产品检出假阳性或假阴性样品,且2个不同批次间产品的稳定性有差异。结论将此类产品应用于水产品质量安全监管之前,有必要对其最低检出限、假阳性率、假阴性率、稳定性等参数进行验证,以确保检测结果的科学性和公正性。     

高效液相色谱法对绿茶中茶多酚含量的测定

采用高效液相色谱法测定绿茶中茶多酚的含量。在色谱柱为Kromasil C18、流动相为乙酸:甲醇:N,N- 二甲基甲酰胺:水=1:1:40:58(V/V) 、色谱柱温30℃、进样量10μL、检测器为紫外检测器、检测波长280.0nm 的色谱条件下对绿茶中茶多酚含量进行测定。结果表明：回归方程为Y=1 × 10-7X － 0.0036(r=0.9995),方法变异系数小于3.04%,回收率为99.16%～100.60%;6 种绿茶样品茶多酚含量为62.07～110.86mg/g,说明产地不同,绿茶中茶多酚的含量相差较大。本方法简便、准确,适合绿茶中茶多酚含量的分析。     

青萝卜真空薄层干燥动力学模型研究

研究了青萝卜在不同温度、真空度条件下的真空干燥特性。选取3个常用的薄层干燥数学模型,并采用非线性回归法对实验数据进行拟合,建立青萝卜薄层干燥数学模型。结果表明：青萝卜的干燥过程可以分为2个阶段,加速期和降速期,没有出现恒速期;比较各模型的相关系数R2,结果表明Page 模型拟合效果最好,并考察了温度和真空度对Page模型常数k和n的影响。经验证,该模型能准确地描述和预测青萝卜真空干燥过程中水分的变化规律。     

绿茶微粉对染料亚甲基蓝和孔雀石绿的吸附研究

亚甲基蓝和孔雀石绿是造成水体污染的偶氨工业染料.本文研究在不同的颗粒、pH、吸附剂量、吸附时间条件下绿茶微粉对亚甲基蓝和孔雀石绿的吸附效果,并分析其吸附速率曲线和吸附等温线.结果表明,常温下绿茶微粉能够较好地吸附亚甲基蓝和孔雀石绿,且颗粒越小吸附效果越佳;亚甲基蓝和孔雀石绿最佳吸附pH分别是7和5,吸附饱和量分别是19.37 mg/g和16.50 mg/g.在初始染料质量浓度20 mg/L条件下,240 min左右可达到吸附平衡.吸附动力学分析表明,绿茶微粉对亚甲基蓝和孔雀石绿的生物吸附平衡数据均与拟二级速率方程拟合度较好,吸附规律分别符合Langmuir和Freundlich等温式.     

绿豆、绿茶冰淇淋的研制

以绿豆、绿茶、鲜鸡蛋、无水奶油等为主要原料，利用L9(3^4)正交试验方法，得出绿豆、绿茶冰淇淋主要成分的最佳含量为乳脂肪质量分数8％，甜味剂质量分数16％，总固形物质量分数32％。该产品风味独特、口感细腻、色泽均匀、质地坚实、营养丰富、清爽解暑，是值得开发的冰淇淋新品。     

隐性孔雀石绿多克隆抗体的制备及鉴定

研究制备孔雀石绿(MG)代谢物隐性孔雀石绿(LMG)多克隆抗体进而间接鉴定鱼体中孔雀石绿的残留。首先利用化学方法合成含羧基的隐性孔雀石绿衍生物(CLMG),然后采用碳化二亚胺法偶联牛血清白蛋白(BSA)合成免疫抗原隐性孔雀石绿-BSA,按照常规免疫程序免疫新西兰大白兔制备抗隐性孔雀石绿多克隆抗体。采用间接酶联免疫吸附实验(iELISA)测定抗血清中抗隐性孔雀石绿多克隆抗体效价。结果表明：抗隐性孔雀石绿的抗体效价为1: 32000,可用于隐性孔雀石绿的免疫学检测。     

核桃青皮提取物的抑真菌活性研究

核桃青皮中含有种类较为丰富对供试真菌具有抑菌活性的次生代谢物质。以核桃青皮为原料,乙醇、石油醚、正丁醇、乙酸乙酯以作为提取剂进行浸提,得到核桃青皮的提取液,选取酵母菌、青霉、木霉、马拉色菌、脚气真菌作为供试菌种,通过实验观察不同溶剂提取液对供试菌种的抑制作用,研究核桃青皮提取物对真菌的抑制作用。核桃青皮中含有胡桃醌、多糖、黄酮等多种活性成分,利用分光光度法测定黄酮、胡桃醌、多糖的吸光值,通过吸光值计算提取物中各成分的质量浓度。结果表明：核桃青皮不同极性溶剂的浸提液对酵母菌、青霉、木霉均有抑制效果。核桃青皮95%乙醇浸提液对脚气真菌的抑制效果显著,抑菌率为59.64%;正丁醇核桃青皮浸提液对脚气真菌、马拉色菌有抑制效果。通过核桃青皮不同极性溶剂浸提液抑菌率的比较,和核桃青皮中所含三种活性物质的浓度与抑菌机制可知,核桃青皮不同极性溶剂的浸提液中主要起抑菌作用的是胡桃醌。     

陕西省不同产地绿茶中6种活性成分含量的比较

目的：采用高效液相色谱法HPLC,对陕西不同产区(安康、汉中和商洛)绿茶中茶氨酸(theanine)、没食子酸(gallic acid,GA)、咖啡碱(caffeine,CAF)、表没食子儿茶素(epicatechin gallate,EGC)、表儿茶素没食子酸(epicatechin gallate,ECG)及表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)的含量进行分析比较。方法：绿茶经热水提取后采用HPLC测定上述6种活性成分的含量,色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为0.05%三氟乙酸溶液(A)、乙腈(B)梯度洗脱,流速为1mL/min,柱温25℃,检测波长：190nm和280nm。结果：3个产区中6种组分的含量在0.325～47.061mg/g之间,产区间各组分含量存在显著性差异(P＜0.05),其中汉中绿茶中GA的平均含量最高,安康绿茶中茶氨酸、CAF、ECG、EGC、EGCG的平均含量最高。     

Retaining Green Pigments on Thermally Processed Peels-on Green Pears

ABSTRACT: The interest in developing peels-on thermally processed (canned) green pears has prompted the investigation of retaining green pigments during thermal processes. Use of zinc ions as a processing aid for the retention of green pigment and surface pretreatment to remove waxy layer and a part of the top cuticle layer of the peels for enhancing reactions of zinc ions with chlorophylls in peel tissues were studied. Whole pears or pear chunks were subjected to zinc treatment during presoaking in 5200 ppm Zn²⁺ solutions for 60 min or blanching at 94 °C for 6, 12, and 18 min in a 1300, 2600, or 5200 ppm Zn²⁺ solution for identifying the most appropriate procedures for retaining green peel pigments. Pears were then thermally processed in glass jars at 94 °C for 20 min after commercial canning. Canned pears were subjected to an accelerated shelf life test in rooms set at 10 °C, 21 °C, and 38 °C under fluorescent light. CIELAB L *, a *, and b * color values of pear samples were monitored during storage up to 35 wk. Results showed that surface pretreatment is essential for ensuring the reactions of zinc ions with green pigments, thus retaining green pigment during thermal treatment. Blanching pears in zinc solution containing about 1300 ppm Zn²⁺ was effective in obtaining attractive green-colored canned pears. Hue angle and - a * (greenness) values of canned pears were significantly ( P < 0.05) associated with blanching time and zinc concentration in blanching solutions, and remained stable over 19 wk of storage under intensive illumination at all 3 temperatures. The technology used zinc ions as a processing aid, thus significantly minimizing the zinc content in the final processed pears.