人参皂苷Rg_3与Rg_5的分离及Rg_3异构体的拆分

主要进行了从红参稀有皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rg5和Rk1混合物中分离单体皂苷的研究。根据混合物在甲醇中各组分的溶解度不同,先分离出20(R)-Rg3,然后采用硅胶柱层析法分离20(S)-Rg3、Rg5和Rk1。从30 g红参稀有皂苷混合物中得到7.40 g纯度为64.0%的20(R)-Rg3粗品;10.9 g纯度为75.3%的20(S)-Rg3粗品;6.05 g的Rg5与Rk1的混合物。采用重结晶法分别对已分离出的20(S)-Rg3、20(R)-Rg3粗品各3 g进行精制,得到1.98 g纯度为94.6%的20(R)-Rg3和0.850 g纯度为95.1%的20(S)-Rg3。     

制备色谱技术对人参皂苷Rg2(组)的分离效果

人参皂苷Rg2(组)是红参中含有的稀有皂苷,由20(S)-Rg2、20(R)-Rg2、Rg6及Rg4等4种异构体组成。本实验采用制备色谱技术对4种混合皂苷进行分离,应用高效液相色谱技术对分离产品进行检测分析。从50mg Rg2(组)皂苷中获得20(S)-Rg2、20(R)-Rg2、Rg6及Rg4等4种皂苷分别为2.6、2.8、1.5及3.9mg,纯度分别为95.3%、96.4%、96.3%及98.3%。     

酶转化人参皂苷中间产品Rg3皂苷的分析

酶法改变Rb1、Rb2、Rc、Rd等人参二醇类皂苷制备低糖基次生皂苷,中间产品的主要成分除Rh2皂苷之外,还含有Rh3、Rh1、Rg3等稀有皂苷.以人参皂苷Rg3为目标,采用柱层析的方法来分离其中间产品,从43 g样品中分离得到Rh2组分19.2 g,Rh3组分2.42 g,Rg3组分4 g,并用沉淀方法提纯Rg3.通过HPLC检测,人参皂苷Rg3有20-R型和20-S型异构体,54%为20（R）-Rg3,46%为20（S）-Rg3.     

酶转化人参皂苷中间产品Rg_3皂苷的分析

酶法改变Rb1、Rb2、Rc、Rd等人参二醇类皂苷制备低糖基次生皂苷,中间产品的主要成分除Rh2皂苷之外,还含有Rh3、Rh1、Rg3等稀有皂苷。以人参皂苷Rg3为目标,采用柱层析的方法来分离其中间产品,从43 g样品中分离得到Rh2组分19.2 g,Rh3组分2.42 g,Rg3组分4 g,并用沉淀方法提纯Rg3。通过HPLC检测,人参皂苷Rg3有20-R型和20-S型异构体,54%为20(R)-Rg3,46%为20(S)-Rg3。     

两种林下参各部位皂苷的组成成分

对两种林下参的芦头、主根、须根等各部位皂苷组成与分布进行研究。利用正丁醇萃取法提取总皂苷,桓仁产的15年林下参的芦头、主根、须根的总皂苷质量分数分别为7.68%、3.47%、6.48%;抚松产的25年林下参的芦头、主根、须根的总皂苷质量分数分别为6.67%、2.88%、4.93%;两种林下参芦头中总皂苷质量分数是主根总皂苷质量分数的2倍。经TLC和HPLC检测,25年林下参芦头与主根中Rb1、Rg1、Re质量分数较高,分别占总皂苷的54%、52%,须根中Rb1、Rc、Rg1、Re质量分数较高,占总皂苷的52%;15年林下参芦头中Rb1、Rg1、Re质量分数较高,占总皂苷的48%,主根和须根中Re、Rb1、Rc质量分数较高,分别占总皂苷的40%、45%。从两种林下参中检测到8种高活性稀有皂苷20(S)-Rg2、20(S)-Rh1、20(R)-Rh1、20(R)-Rg3、20(S)-Rh2、20(R)-Rh2、Rk2、Rh3。林下参各部位中人参主要皂苷及主根中稀有皂苷的质量分数,随生长年限增加而增加,但芦头和须根中稀有皂苷含量,随生长年限增加而减少。     

人参皂甙Rg3的分离提纯

研究了人参皂甙Rh2生产过程中所生成的副产品Rg3的分离提纯。用硅胶柱层析法从人参皂甙混合中分离出单体Rg3的得率为样品的16%。再用化学法对Rg3进行拆分。20（S）-和20（R）-Rg3异构体，通过乙酰化反应生成极性相差较大的异构体，经硅胶柱层析得到两种产物，分别脱乙酰化后得到20（S）-Rg3和20（R）-Rg3。20（R）-Rg3收率为55%。     

人参皂甙Rg3的分离提纯

研究了人参皂甙Rh2生产过程中所生成的副产品Rg3的分离提纯。用硅胶柱层析法从人参皂甙混合物中分离出单体Rg3的得率为样品的 16 %。再用化学法对Rg3进行拆分。 2 0 (S) 和2 0 (R) Rg3异构体 ,通过乙酰化反应生成极性相差较大的异构体 ,经硅胶柱层析得到两种产物 ,分别脱乙酰化后得到 2 0 (S) Rg3和 2 0 (R) Rg3。 2 0 (R) Rg3收率为 5 5 %。     

酶解产物人参皂苷Rh2、Rh3的二氯甲烷层析分离

人参皂苷Rh2、Rh3具有一定的抗癌作用,而这些稀有皂苷在传统红参中的含量甚微.为了获得纯度较高的人参皂苷单体,将人参二醇类皂苷经酶转化等方法处理,得到以人参皂苷Rh2和Rh3为主的混合物.常压下,用二氯甲烷-甲醇作为洗脱液变换梯度进行硅胶柱分离,分别采用流动相V(二氯甲烷)∶V(甲醇)= 7∶0.10、7∶0.13、7∶0.15、7∶0.18、7∶0.2、7∶0.3渐变梯度进行洗脱,当流动相V(二氯甲烷)∶V(甲醇)=7∶0.3时,成功分离出人参皂苷Rh2和Rh3.经高效液相色谱检测,为反式的二十、二十二碳烯Rh3和顺式的二十、二十二碳烯Rh3(即Rk2)混合物,纯度达到95%以上;也得到较纯的Rh2,经高效液相色谱检测为20(S)-Rh2和20(R)-Rh2异构体的混合物,纯度达到85%以上.     

生物转化制备红参Rh1皂苷组及成分分析

利用TLC和超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)分析已制备的Rh1组异构体,利用HPLC分析其异构体的质量比。Rh1组在TLC图谱中显2个斑点,经UPLC-MS的分析,确认红参皂苷Rh1组含有4种异构体,分别是20(S)-Rh1、20(R)-Rh1、Rk3和Rh4;高效液相色谱检测结果表明红参皂苷Rh1组中4种异构体20(S)-Rh1、20(R)-Rh1、Rk3、Rh4的质量比为25.0∶18.8∶15.5∶40.7,4种异构体总质量分数在90%以上。     

酶解产物人参皂苷Rh_2、Rh_3的二氯甲烷层析分离

人参皂苷Rh2、Rh3具有一定的抗癌作用,而这些稀有皂苷在传统红参中的含量甚微。为了获得纯度较高的人参皂苷单体,将人参二醇类皂苷经酶转化等方法处理,得到以人参皂苷Rh2和Rh3为主的混合物。常压下,用二氯甲烷-甲醇作为洗脱液变换梯度进行硅胶柱分离,分别采用流动相V(二氯甲烷)∶V(甲醇)=7∶0.10、7∶0.13、7∶0.15、7∶0.18、7∶0.2、7∶0.3渐变梯度进行洗脱,当流动相V(二氯甲烷)∶V(甲醇)=7∶0.3时,成功分离出人参皂苷Rh2和Rh3。经高效液相色谱检测,为反式的二十、二十二碳烯Rh3和顺式的二十、二十二碳烯Rh3(即Rk2)混合物,纯度达到95%以上;也得到较纯的Rh2,经高效液相色谱检测为20(S)-Rh2和20(R)-Rh2异构体的混合物,纯度达到85%以上。     

人参皂苷Re酶转化的F1皂苷等产品的分离提纯

利用大孔吸附树脂和硅胶层析相结合的方法,对人参皂苷Re的酶解产物进行分离提纯。结果表明,65.0g的Re酶解产物经大孔吸附树脂AB-8和D-296脱糖、脱色处理后,共得干燥粗产品37.0g,得率为56.9%。采用硅胶层析柱进一步分离纯化后,共得到纯度为96.0%的Rg1皂苷11.2g,在粗产品中的得率为30.2%;得到纯度为98.0%的稀有人参皂苷F1皂苷4.75g,在粗产品中的得率为12.8%。Re经人参皂苷酶转化得到Rg1皂苷的得率为17.2%,F1皂苷的得率为7.31%。     

基于葡萄有机酸的稀有人参皂苷20(S,R)-Rg3和Rg5的绿色

以人参须根粉为原料,天然葡萄汁作为酸催化剂,自制改良索氏提取器作为提取装置,研究了从人参须根粉直接提取制备富含稀有人参皂苷Rg3、Rg5的人参提取物的方法,并通过单因素实验和正交实验进行了工艺优化。实验结果表明：当乙醇浓度为20%,提取筒温度为60 ℃,油浴温度为145 ℃,葡萄汁用量为10 mL,提取转化时间为5 h时,所得的人参皂苷Rg3、Rg5总得率为2.29%。该方法将人参皂苷提取和结构修饰并在一步操作中,固液可直接分离、溶剂用量少,可以快捷、绿色制备高活性稀有人参皂苷。     

Arthrobacter sp.No.3细菌酶转化三醇类人参皂苷Rg1生成Rh1的反应条件

为了提高Arthrobacter sp.No.3 GS 0202新细菌所产人参皂苷糖苷酶水解人参三醇类皂苷Rg1生成人参三醇类皂苷Rh1的能力,采用薄层层析法和高效液相色谱法,对该菌的发酵条件及所产糖苷酶的反应条件进行了研究.结果表明,在30 ℃发酵条件下,人参皂苷酶的诱导物人参茎叶总皂苷存在下,该细菌产生较好.其粗酶...     

分子筛辅助人参须根粉快速制备人参皂苷Rg5的工艺研究

利用多功能改进型索氏提取器为提取工具,以人参须根粉为原料,盐酸为催化剂,分子筛辅助下高效制备了稀有人参皂苷Rg5,并通过单因素实验优化了工艺条件。实验结果表明：当以30 mL的甲醇为溶剂、加入0.3 g 4 A分子筛、于65 ℃提取4 h时,人参总皂苷的提取率达到10.2%,稀有人参皂苷Rg5的得率达到3.20%,与传统索氏提取器相比可以显著提高人参皂苷Rg5的制备效率。分子筛辅助下利用多功能改进型索氏提取器从人参须根粉提取制备稀有人参皂苷Rg5,不仅得率较高,而且操作简单快捷,是一种快速制备人参皂苷Rg5的工艺方法。     

人参皂苷Rf的分离提纯

以人参根须为原料,采用甲醇浸提法提取人参根须中总皂苷,再用硅胶柱层析法对总皂苷进行分离,得到较纯净的人参皂苷单体Rf.结果表明,500 g人参根须中提取得到总皂苷20.5 g,提取率为4.10%.总皂苷中主要含Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd等成分.20.5 g人参根须总皂苷经硅胶柱层析法分离,得到较纯人...