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《中国生物制品学杂志》2013,(9)
目的联合运用荧光定量PCR和焦磷酸测序技术快速检测异烟肼、利福平耐药性结核分枝杆菌。方法收集结核病疑似患者痰液样本,提取样本总DNA,运用Taqman荧光定量PCR对结核分枝杆菌的感染进行快速筛查。对检测结果为阳性的样本,采用焦磷酸测序法分别对异烟肼、利福平耐药结核分枝杆菌相关基因katG、rpoB的突变热点进行测序分析,与标准菌株序列比对,判断结核分支杆菌异烟肼、利福平的药敏性。采取Bactec 960药敏法鉴定结核分枝杆菌耐药性,并与焦磷酸测序法药敏检测结果进行比较,评估焦磷酸测序法的可靠性。结果荧光定量PCR技术检测痰液样本结核分枝杆菌的准确率达98.95%,检测时间约3 h;以Bactec 960药敏法鉴定结果为标准,焦磷酸测序法对结核分枝杆菌异烟肼、利福平的药敏鉴定结果准确性分别达93.75%和96.15%,其中,对耐药菌株判断,两种方法的一致性高达98%。结论采用荧光定量PCR检测技术可快速、准确地进行结核分枝杆菌感染筛查,运用焦磷酸测序技术则可快速准确地筛查出耐药样本,从痰液样本采集到结核分枝杆菌感染筛查以及药敏报告发布,全程仅需7 h;耐药菌株的检测可靠性达98%。 相似文献
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黄龙病是柑橘生产上的一种毁灭性病害,由韧皮部限制性细菌Candidatus Liberibacter导致。感染黄龙病的柑橘树的叶片有异常高淀粉积累,因此开发出了基于碘-淀粉显色法的黄龙病快速检测试剂盒。将不同浓度的可溶性淀粉溶液进行碘-淀粉显色反应,制作成快速检测试剂盒配套的比色卡,用来快速确认叶片淀粉值区间。根据不同采样时间的健康树和黄龙病树的叶片淀粉值差异进行统计数据分析,确定了7—10月为黄龙病快速检测试剂盒的适宜采样检测时间。根据显色易辨性和检测准确率将淀粉质量浓度3 000 ppm确定为适宜的黄龙病阳性叶片淀粉值界限,即检测叶片淀粉值≥3 000 ppm判定为黄龙病阳性。通过田间随机取样发现,快速检测试剂盒与实时荧光定量PCR检测方法的一致性约为80%。该黄龙病快速检测试剂盒对田间黄龙病的快速筛查具有重要意义,可作为实时荧光定量PCR检测方法的前序筛查辅助手段。 相似文献
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碳酸锂生产过程及最终产品中,微量镁的掺杂会直接影响碳酸锂的产品品质及其下游产品的加工应用,而高纯碳酸锂中微量镁的快速检测仍是一个难点。研究提出利用水溶性荧光探针检测碳酸锂中微量镁的方法,以水溶性极强的三(羟甲基)氨基甲烷对2-(2-羟基苯基)苯并噁唑进行修饰,构建了具有高灵敏度和高选择性的水溶性Mg2+荧光探针A。该方法可实现对碳酸锂溶液中Mg2+的快速荧光检测,并确定了探针A被Mg2+所激发的荧光信号强度与Mg2+浓度之间的定量关系。结果表明在水溶条件下检测含镁杂质的碳酸锂时,该方法对微量镁的检出限为2.014 9μmol/L,检测工作曲线相关系数达到0.991 5,检测灵敏度高,对高纯碳酸锂中微量镁的检测时间为3.666 s,可实现对Mg2+的快速质检。 相似文献
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《化工之友》2008,(13)
目的通过对桃源县新生儿苯丙酮尿症(pku)、甲状腺功能低下症(CH)的筛查结果进行分析,探讨影响新生儿疾病筛查开展的因素,以促进新生儿疾病筛查工作。方法新生儿出生后72h,至少哺乳6次后采足跟内侧或外侧血,制成滤纸干血斑,应用时间分辨荧光仪荧光定量法测定血苯丙氨酸(phe)浓度,应用时间分辨荧光免疫法TRFIA检测新生儿促甲状腺素(TSH)的浓度,将7SH>10uu/mL,phe>2mg/dL者判为筛查阳性,并召回确诊。结果桃源县自2005年5月至2007年12月共筛查新生儿3357例,确诊CH患者2例,CH发病率为0.596‰,pku初筛阳性4例,均未复查确诊。结论桃源县新生儿疾病筛查覆盖率虽在逐年增高,但整体水平很低,且召回率仅53.8%。 相似文献
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《化学试剂》2021,43(8):1102-1106
建立了高效液相色谱法快速准确定量微量植物体中重要植物色素(叶绿素a、叶绿素b和叶黄素)的分析方法。微量植物叶片以95%乙醇匀浆超声提取色素4 h,过滤膜后直接分析。色谱分离选用COSMOSIL氰基柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),以甲醇-水进行洗脱,流速为1.0 mL/min,用二极管阵列检测器检测,可在15 min内对植物中3种重要色素的快速分离分析。结果表明,3种色素在0.05~50 mg/L范围内线性关系良好(相关系数均为0.999 9);平均加标回收率为90%~110%;相对标准偏差(RSD)5%;日内及日间精密度均小于5%,满足定量要求。与目前检测植物色素的方法相比,该方法前处理简单快速,且采用简单的甲醇-水体系快速分离植物色素,结果可靠,重现性好,可为植物体的生理研究提供基础。 相似文献
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声发射检测是储罐底板腐蚀状态的在线定性检测技术,具有快捷、简便、费用低廉的特点,适用于腐蚀状态的快速筛查;漏磁检测结果直观,定位定量准确,是储罐底板腐蚀状态检测的有效手段。将声发射在线检测与漏磁检测技术联合检测,可以根据声发射检测结果,确定储罐的开罐检测计划,即可以保证储罐运行安全,又可以节约大量的维修费用,对于实现储罐检维修的科学化、高效化,减少和避免环境污染以及安全事故具有非常重要的意义。 相似文献
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目的建立微量滴定板上的弹性蛋白酶动态显色法(以下简称微量滴定板法),用于α1-蛋白酶抑制剂(α1-Pro-teinase inhibitor,α1-PI)的活性检测。方法以微量滴定板为载体,将不同量的α1-PI样品与定量的弹性蛋白酶混合,通过适宜的显色底物对剩余的弹性蛋白酶活性进行测定。用酶标仪测定405 nm处A值的变化,分析试验的有效性,并计算α1-PI样品的活性。优化微量滴定板法的实验条件。用BCS凝集分析仪检测α1-PI的活性,确认样品的工作浓度。采用两种方法检测19份样品的α1-PI活性,分析二者的相关性。结果微量滴定板法的最优实验条件为:样品加样体积50μl,标准曲线范围为(2~14)μg/ml;弹性蛋白酶稀释度为1∶1 400,体积100μl;孵育时间15 min;底物稀释度为1∶10,体积50μl;连续监测A405值10 min。微量滴定板法和BCS法检测19份样品的相关系数大于0.99。结论微量滴定板法检测α1-PI活性的时间更短,同一样品不同稀释度之间检测结果的变异率更低,且检测结果与BCS法相关性良好,可替代全自动的BCS法,降低检测成本。 相似文献
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为探讨ELISA在血液中筛查梅毒的可行性 ,我们以OlympusPK72 0 0全自动分析仪微量血凝集试验Serodia TPPA作为参考方法 ,选用 2种国产ELISA试剂 (双抗原夹心 )在献血者中筛查梅毒特异性抗体 ,以了解其灵敏度和特异性 ,现将结果报告如下。1 标本为 2 0 0 1年 7月至 2 0 0 2年 4月共 15 0 90份无偿献血者标本。2 ELISA试剂盒A和B分别购自国内 2个公司 ,均经中国药品生物制品检定所批批检 ;Serodia TPPA试剂盒购自日本富士株式会社。3 ELISA双抗原夹心一步法 ,用FAME检测 ;TPPA… 相似文献
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为了快速筛查和定量检测天然香精中的农药残留,建立了香精中3种农药的气相色谱-负化学电离源-飞行时间质谱(GC-NCI-TOFMS)分析方法。优化了样品萃取、净化条件以及气相色谱和飞行时间质谱分析条件。样品以V(正己烷)∶V(乙酸乙酯)=1∶1为溶液,超声萃取30 min,萃取液经弗罗里硅土固相萃取柱净化后,进行检测分析。根据特征离子的精确质量数、氯同位素离子峰簇、碎片离子丰度比、保留时间对目标物进行定性鉴定,内标法进行定量测定。3种农药的线性相关系数均大于0.998 6,相对标准偏差4.5%,检出限为0.14~0.21μg/kg,3种农药的加标回收率为87%~107%。该方法简单快速、准确性高、灵敏度好,适用于香精中农药残留的快速筛查和定量检测。 相似文献
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采用功能化聚苯乙烯/苯聚合物为填料的快速过滤净化柱萃取畜禽肉中的兽药,再结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)高通量分析,建立了一种可同时测定12种兽药残留的方法。通过正交试验设计筛选前处理的最佳条件,样品经pH 4.0的EDTA-Mcllvaine缓冲液提取,按压式固相过滤柱快速净化,UPLC-MS/MS检测,外标法定量。结果表明,12种兽药在较宽的线性范围内拟合良好,相关系数均大于0.99,方法检出限0.3~3μg/kg,定量限1.0~10μg/kg。在3个不同添加水平下,猪肉、鸡肉、牛肉样品中的回收率分别为82.8%~110.4%、80.2%~108.4%、75.8%~107.1%,RSDs为0.51%~10.23%。该方法用于市售猪肉中的兽药检测,其中恩诺沙星、环丙沙星、金霉素、土霉素、四环素和强力霉素被检测出,与国标方法的测定结果相一致。该方法简单、快速、准确,适合多种兽药残留的同步筛查和准确定量。 相似文献