水中诺如病毒富集效果及核酸提取方法的比较

目的比较诺如病毒检测时3种核酸提取方法的效率,并对水中诺如病毒的检测方法进行初步研究。方法采用Trizol法、硅胶柱法及磁珠法分别提取含有诺如病毒的粪便样本的核酸,Real-time PCR检测其Ct值,比较3种方法提取核酸的效率。将含有诺如病毒的粪便加入纯水中,采用MCE-PEG法富集后,Real-time PCR检测其Ct值,评价MCE-PEG法富集病毒的效果。结果硅胶柱法的Ct平均值最小,在3种方法中提取诺如病毒RNA效率最高,磁珠法提取效果次之,Trizol法效果最差;MCE-PEG法富集病毒效果良好。结论磁珠法提取诺如病毒RNA效率虽不是最高,但可实现自动化,节省工作时间,降低了人力成本,是3种方法中基层实验室提取诺如病毒RNA最适合的一种;MCE-PEG法可以用来富集水中的诺如病毒。     

碳酸钙沉淀法检测混浊原水中“两虫”的研究

对于混浊水源水中"两虫"的检测,选定有效的浓缩富集及分离纯化方法尤为重要。滤囊/滤芯富集—免疫磁分离(IMS)组合方法对混浊水源水的预处理效果较好,但成本过高。为此,研究了碳酸钙沉淀法对某混浊河水中"两虫"的浓缩富集效果,并对浓缩后样品比较了密度梯度离心法和免疫磁分离法的分离纯化效果。结果发现,利用碳酸钙沉淀法可有效实现水中"两虫"的富集;从分离纯化效果来看,Percoll—蔗糖密度梯度离心方法对贾第鞭毛虫和隐孢子虫的平均回收率分别可达72.3%和39.5%,相对标准偏差分别为10.8%和11.9%;与国标方法中免疫磁分离方法的效果相当,但可显著降低分析成本。因此,碳酸钙沉淀—密度梯度离心组合技术用于混浊水源水中"两虫"的检测具有较好的应用前景。     

2015-2017年营口市诺如病毒腹泻病例检测结果分析

目的:了解2015-2017年营口市腹泻患者中诺如病毒的感染情况和流行趋势。方法:收集2015-2017年每年的5-10月份营口市54家食源性疾病哨点医院腹泻患者的粪便标本363份,采用实时荧光PCR方法进行核酸检测。结果:共检出阳性标本29份,阳性率为7.99%;检出GⅠ型诺如病毒4份,检出率为1.10%,GⅡ型诺如病毒28份,检出率为7.71%;不同性别、年龄患者的阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);可疑原因食品中,粮食类及其制品的病例阳性率最高(11.11%),其次是果蔬及其制品(10.61%)、肉与肉制品(10.53%)、水产品动物及其制品(8.85%)、混合食品(5.71%),乳制品阳性率最低(5.00%)。结论:营口市食源性疾病中存在诺如病毒的感染,以GⅡ型为主,3年检测提示诺如病毒已成为营口病毒性腹泻的病原之一,相关部门应及早应对,加强监测,以减少疾病的暴发与流行。     

清丰县鸡肠道寄生虫感染情况调查

为了解清丰县鸡肠道寄生虫流行情况,应用饱和盐水漂浮法和沉淀法对5个集约化鸡场和6个散养鸡场采集的319份粪便样品进行检测。结果显示,阳性样品为145份,阳性率为45.45%,其中样品中存在球虫卵囊、异刺线虫卵、蛔虫卵和赖利绦虫卵,其感染率分别为31.66%、19.43%、8.15%和2.19%,少部分阳性样品存在混合感染。结果表明清丰县鸡肠道寄生虫感染较为严重,其中以球虫、线虫较为普遍。     

纳米TiO_2-光催化灭活污水厂出水病毒的研究

选取宁波市两个污水处理厂消毒前后出水,以噬菌体MS2作为模式病毒,探讨纳米TiO_2-光催化灭活水中病毒的可行性。试验分别考察了TiO_2浓度、紫外光作用时间对病毒的灭活效果,评价了太阳光代替紫外光对出水中MS2的灭活能力。结果表明,TiO_2-光催化灭活污水处理厂出水MS2的效果因污水处理厂水质而异。低浓度TiO_2的灭活效果不佳,当TiO_2浓度为200mg/L时,紫外光照射6 h,A厂消毒后出水中MS2的灭活率为4.76-lg;照射10 h后,MS2的灭活率为6.94-lg;若使用太阳光代替紫外光照射6 h,则A厂消毒后出水中MS2灭活率可以达到7.88-lg,优于紫外光的灭活效果,表明在纳米TiO_2-光催化灭活污水厂出水病毒过程中以太阳光代替紫外光具有可行性。     

固相萃取高效液相色谱/串联质谱优化测定水中EF2

不少研究表明,17α-乙炔基雌二醇(EE2)是雌情活力最强的类固醇雌激素.通过响应曲面法(RSM)优化EE2的高效液相色谱/串联质谱联用(HPLC/MS/MS)检测中的多离子检测反应(MRM)条件,获得EE2的最优碎片电压为182.0 V,最优碰撞能为54.0 V.配合固相萃取(SPE)预处理技术,采用HPLC/MS/MS内标检测法检测了重庆主城区嘉陵江表面水与污水水样中的EE2浓度,方法检测限为0.1 ng/L;线性范围为0.51～99.37 ng/mL;精密度试验中RSD为0.276%;重复性试验中RSD为8.788%;加标回收试验结果良好;单个混合样品分析周期为28.0min.     

诺如病毒污染供水系统引发感染性腹泻的调查

目的通过对一起诺如病毒污染供水系统引发感染性腹泻的调查研究,查明其暴发的原因,并提出针对性防控措施,加强对生活饮用水的监管,防止类似事件再次发生。方法对发病者进行流行病学调查,采集生物样品(呕吐物、粪便),对污染环境进行卫生学调查,采集相关环境样品(蓄水池水、末梢水)。所有样品快速送实验室检测。根据病例临床表现,现场调查,实验室检测结果,分析所得数据,及时确定事件暴发原因进而提出控制措施。结果该次事件95例患者均为同一小区居民,且无共同进餐史。临床表现主要以发热、恶心、呕吐、腹痛为主。水样和呕吐物、便标本中检测出同型诺如病毒。结论这是一起诺如病毒污染供水系统引发的感染性腹泻事件,建议加强对供水管道的监测和管理,确保饮用水安全。     

固相萃取高效液相色谱/串联质谱优化测定水中EE2

不少研究表明,17α-乙炔基雌二醇(EE2)是雌情活力最强的类固醇雌激素。通过响应曲面法(RSM)优化EE2的高效液相色谱/串联质谱联用(HPLC/MS/MS)检测中的多离子检测反应(MRM)条件,获得EE2的最优碎片电压为182.0V,最优碰撞能为54.0V。配合固相萃取(SPE)预处理技术,采用HPLC/MS/MS内标检测法检测了重庆主城区嘉陵江表面水与污水水样中的EE2浓度,方法检测限为0.1ng/L;线性范围为0.51～99.37ng/mL;精密度试验中RSD为0.276%;重复性试验中RSD为8.788%;加标回收试验结果良好;单个混合样品分析周期为28.0min。     

环境水体中肠道病毒浓缩方法的比较

向水样中接种已知量的脊髓灰质炎病毒，然后利用微孔滤膜吸附-洗脱法、滑石粉-硅藻土吸附层吸附-洗脱法、化学絮凝沉淀法和滑石粉-硅藻土絮凝沉淀法等4种不同的浓缩方法对水样中的病毒进行浓缩，并采用实时定量RT—PCR技术对各方法浓缩后样品中的病毒进行扩增和检测。综合考虑病毒回收率和浓缩方法的可靠性与简便性等因素，确定微孔滤膜吸附-洗脱法为最优的浓缩方案。此外，还比较了三种洗脱液和两种二次浓缩方法的效果，并对各步骤的回收率进行了分析。     

高级氧化+SBR工艺处理聚乙二醇废水试验研究

研究了高级氧化+SBR组合工艺处理高浓度聚乙二醇(PEG)废水的效果及其影响因素。结果表明,采用芬顿试剂作为高级氧化剂,当FeSO4.7H2O投加量为800 mg/L,H2O2投加量为30 mL/L,反应时间为3.5 h时,CODCr去除率可达到50.5%;生化处理阶段所需采用两级SBR工艺,污泥浓度均为4 000 mg/L,一、二级厌氧及好氧反应时间分别为12和10 h;芬顿试剂氧化和厌氧处理对提高PEG废水的可生化性有明显效果;该组合工艺的出水水质可以达到《污水综合排放标准》(GB 8978—1996)中的二级排放标准。