龟肉蛋白肽延缓果蝇衰老的作用及机制研究

目的:探究龟肉蛋白肽（pond turtle protein-derived peptides,PTPDP）延缓果蝇衰老的作用和机制。方法:酶解乌龟肉得到PTPDP,测定其营养成分、分子质量分布以及氨基酸组成;分别以0.2%、0.4%和0.8%的PTPDP喂养果蝇,通过生存实验和测定体内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）活性和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量来分析其抗衰老功能;通过测定0.8% PTPDP喂养的雌性果蝇抗氧化相关基因Sod1、Sod2、Cat和寿命相关基因mth、Rpn11的表达来探究其抗衰老机制。结果:龟肉酶解产物以1000 Da以下的小分子肽段为主,富含甘氨酸、谷氨酸和脯氨酸等具有抗氧化活性的氨基酸。生存实验和抗氧化活性实验中,0.8% PTPDP组雌雄果蝇的平均寿命分别显著延长了18.92%和9.37%（P<0.01);SOD活性分别显著提高了7.13%和7.37%（P<0.05）;CAT活性分别极显著提高了42.14%和84.66%（P<0.01）;MDA含量分别显著下降了22.22%和23.08%（P<0.05）。基因表达结果显示,0.8% PTPDP喂养显著上调了抗氧化相关基因Sod1,Sod2（P<0.05）和Cat（P<0.01）的表达,同时对寿命相关基因mth和Rpn11（P<0.01）的表达也表现出显著的调节作用。结论:PTPDP通过影响果蝇抗氧化和寿命相关基因的表达,提高其体内抗氧化活性,延长果蝇寿命,有潜在的抗衰老功效。     

根皮苷对雌性果蝇寿命的影响及其作用机制

目的：研究根皮苷（phloridzin）对雌性果蝇寿命的影响并探究其延缓果蝇衰老的分子机制。方法：在果蝇寿命实验中,采用2 日龄雌性果蝇作为研究对象,在其培养基中分别加入0、0.5、2.0、5.0 mg/mL根皮苷进行培养,直至果蝇全部死亡,计算果蝇的平均寿命和最长寿命;通过白草枯和双氧水急性实验测定根皮苷对果蝇氧化应激损伤的影响;试剂盒法测定果蝇体内抗氧化酶活力;实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time polymerasechain reaction,real-time PCR）检测抗氧化基因表达水平。结果：2.0、5.0 mg/mL根皮苷可以显著延长果蝇的平均寿命和最长寿命（P＜0.05）;根皮苷能够对百草枯和双氧水造成的雌性果蝇氧化应激损伤起到有效保护作用;添加 5.0 mg/mL根皮苷可以极显著提高Cu/Zn-超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和过氧化氢酶（catalase,CAT）活力（P＜0.01）,极显著降低丙二醛（malonaldehyde,MDA）含量（P＜0.01）;添加5.0 mg/mL根皮苷可以极显著上调Cu/Zn-SOD及CAT mRNA表达水平（P＜0.01）。结论：根皮苷能够延缓雌性果蝇衰老,且具有抗氧化作用,这可能与其调控抗氧化基因的表达水平相关。     

迷迭香提取物抗氧化作用及其对果蝇寿命的影响

目的:探究迷迭香提取物(RE)的抗氧化能力及其作用机制。方法:以2 d龄Oregon K野生型雄性果蝇为试验模式生物,饲喂添加不同质量浓度(0,0.2,0.5,1.5 mg/m L)迷迭香提取物的培养基,采用生存试验与急性试验研究迷迭香提取物对果蝇寿命的影响;测定果蝇体内超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化氢酶(CAT)活力及氧化产物丙二醛(MDA)的含量;用Real time-PCR法测定果蝇体内抗氧化基因SOD、CAT、MTH(Methuselah)m RNA表达量的变化。结果 :给予迷迭香提取物后,果蝇的平均寿命及最高寿命较空白对照组均明显延长,SOD、CAT酶活力及其基因m RNA表达水平显著升高(0.5,1.5 mg/m L,P0.05),MDA含量极显著下降(P0.01),同时MTH m RNA表达水平呈下调趋势(P0.05)。结论 :迷迭香提取物延缓衰老与抗氧化的作用可能通过上调内源性抗氧化酶来实现。     

紫薯提取物对雌性果蝇寿命的影响及其作用机制

目的:研究紫薯提取物(Purple Sweet Potato Extract,PSPE)对雌性果蝇寿命的影响并探讨其延缓衰老的作用机制。方法:采用2天龄果蝇作为研究对象,培养于分别添加0、0.5、2.0、5.0 mg/m L PSPE的培养基,统计果蝇寿命,计算果蝇平均寿命和最高寿命。测定果蝇体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力及丙二醛(malonaldehyde,MDA)的含量。Real TimePCR法测定果蝇体内SOD、CAT及MTH的mRNA表达水平。结果:添加PSPE可以显著延长果蝇的平均寿命(2.0、5.0mg/m L,P<0.05);5.0mg/m L PSPE可以极显著升高Cu-Zn-SOD和CAT酶活力(P<0.01),显著降低MDA含量(P<0.05)。Real Time-PCR结果显示,给予5.0mg/m L PSPE能够显著上调Cu-ZnSOD、Mn-SOD mRNA表达水平(P<0.05)且极显著上调CAT mRNA表达水平(P<0.01)。结论:紫薯提取物对果蝇具有延缓衰老和抗氧化作用。     

山楂提取物对高脂损伤果蝇的保护作用

研究山楂提取物(Hawthorn Fruit Extract,HFE)对高脂致氧化损伤的雄性果蝇寿命的影响并探究其延缓果蝇衰老的分子机制。将2 d龄雄性果蝇随机分组,在高脂培养基中饲喂不同剂量(0.5、1.5、4.5 mg/m L)山楂提取物,研究山楂提取物对果蝇生存寿命及果蝇体内抗氧化酶活性(铜锌超氧化物歧化酶,Copper-zinc-containing superoxide dismutase,Cu/Zn-SOD;锰超氧化物歧化酶Manganese-containing superoxide dismutase,Mn-SOD;过氧化氢酶,Catalase,CAT)、脂质过氧化产物丙二醛(Malonaldehyde,MDA)含量、蛋白质羰基(Protein Carbonyl,PCO)含量及抗氧化相关基因表达水平的影响。HFE可以显著延长果蝇的平均寿命和最高寿命(4.5 mg/m L,P0.05);4.5 mg/m L HFE可以显著提高果蝇体内SOD和CAT活性(P0.05),显著降低MDA(P0.01)和PCO含量(P0.05);同时显著上调果蝇体内Cu/Zn-SOD及Nrf2 m RNA表达水平(P0.05)并且极显著上调Mn-SOD和CAT m RNA表达水平(P0.01)。HFE对高脂膳食所导致的果蝇氧化损伤具有保护作用,HFE延缓果蝇衰老和抗氧化作用可能与其调控抗氧化基因的表达水平相关。     

褐变黑枸杞抗氧化作用的研究

为探究褐变黑枸杞对果蝇抗氧化作用,以果蝇为动物模型,在果蝇培养基中分别加入3mg/mL、12mg/mL褐变黑枸杞和红枸杞,检测其对果蝇寿命,超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)等抗氧化酶活力及抗氧化相关基因表达的影响。结果表明:与正常组相比,褐变黑枸杞高剂量组果蝇的寿命明显延长(P<0.01),SOD和GSH-Px酶活力显著提高(P<0.05),MDA的含量显著降低(P<0.05),且和红枸杞组相比存在显著性差异(P<0.05);实时定量PCR结果显示:褐变黑枸杞能显著上调Cu-Zn SOD(SOD1)、Mn-SOD(SOD2)和CAT mRNA表达水平(P<0.05),MTH mRNA表达水平显著下调(P<0.05)。综上所述,褐变黑枸杞在体内具有很强的抗氧化活性,其作用机制可能是通过上调内源性抗氧化酶的表达,从而增强果蝇抗氧化能力,延缓果蝇衰老。     

黑豆皮提取物升高内源抗氧化酶延长果蝇寿命

黑豆因富含高含量的花青素而被作为天然食品抗氧化剂。本研究探讨黑豆皮提取物(Black Soybean Coat Extract,BSCE)对果蝇寿命的影响及其作用机制。拟以雄性黑腹果蝇为动物模型,饲喂添加0、0.5、1.5、4.5 mg/mL BSCE的培养基,统计果蝇寿命,测定果蝇体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力,丙二醛(malondialdehyde,MDA)及蛋白质羰基的含量。Real Time-PCR法测定果蝇体内SOD、CAT、Nrf2及MTH的mRNA表达水平。结果显示饲喂BSCE可以显著延长果蝇的平均寿命(1.5、4.5 mg/mL,P0.05);饲喂4.5 mg/mL BSCE可以显著升高果蝇体内Cu-Zn-SOD、Mn-SOD和CAT酶活力(P0.05)并极显著降低蛋白质羰基含量和MDA含量(P0.01)。Real Time-PCR结果显示,给予4.5 mg/mL BSCE能够显著上调Mn-SOD、CAT mRNA表达水平(P0.05)且极显著上调CuZn-SOD、Nrf2 mRNA表达水平(P0.01)。因此,黑豆皮提取物可以通过升高内源性抗氧化酶SOD和CAT活性延长果蝇寿命,且其调节机制与MTH基因有一定联系。     

根皮素延缓雌性果蝇的衰老作用

本文探究了根皮素(phloretin,PT)对雌性果蝇延缓衰老作用的影响及其潜在机制。雌性果蝇干预根皮素后(1.15 mM、2.3 mM、4.6 mM),观察对寿命、爬行能力、抗应激能力、肠道屏障功能、肠道菌落总数、肠道前体细胞数目、内源抗氧化酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-PX)活力、脂质过氧化产物丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量以及相关抗氧化基因SOD2、CAT、玛士撒拉(methuselah,MTH)和叉头蛋白(forkhead box o,foxo)的m RNA表达水平的影响。结果显示,雌性果蝇干预根皮素浓度为4.6 mM时,与空白组相比,平均寿命延长了23.98%,30d时爬行能力上调了44.96%,对双氧水和十二烷基硫酸钠损伤后的寿命延长了24.35%和23.94%,肠道前体细胞减少了15.59%,肠道微生物乳酸杆菌(lactobacilli,LMRS)、肠杆菌(enterobacteria,ENT)、醋酸杆菌(acetobacteria,ACE)及其他细菌(nutrientrichmedium,NR)分别下调了23.73%、33.33%、43.24%和27.50%,Mn-SOD、Cu/Zn-SOD、CAT、GSH-PX酶活性分别提高了17.85%、31.03%、32.07%和25.57%,MDA生成量降低了23.55%,foxo、CAT和SOD2 mRNA表达水平分别上调了67.21%、32.54%和36.27%,MTH mRNA表达量降低了27.16%。根皮素可以提高雌性果蝇抗氧化酶活力和抗氧化基因表达水平,提高机体抗应激能力,维持肠道稳态,延长果蝇寿命。     

鳙鱼抗氧化肽延缓衰老的研究

为研究鳙鱼抗氧化肽是否有延缓衰老的作用,利用果蝇寿命实验和D-半乳糖致衰小鼠模型,观察了鳙鱼抗氧化肽对雌雄分养果蝇最高寿命和平均寿命的影响以及对衰老模型小鼠血清、肝脑组织中MDA、GSH-Px、SOD、MAO-B及线粒体中Ca2+泵和Na+泵等指标的影响。结果表明:鳙鱼抗氧化肽可显著延长果蝇的平均寿命和最高寿命,降低致衰小鼠肝脑组织中MDA的含量及脑组织中MAO-B的活性(p<0.01),提高抗氧化酶SOD和GSH-Px的活性,对线粒体中Na+泵和Ca2+泵的活力也有显著影响,从而证明了鳙鱼抗氧化肽具有延缓衰老的作用。     

黑果腺肋花楸水提物对果蝇抗衰老活性的研究

探讨黑果腺肋花楸水提物对雄性果蝇的抗衰老作用机制。采用pH示差法计算黑果腺肋花楸水提物指标性成分花青素含量。以Oregon K雄性黑腹果蝇为研究对象,以果蝇平均寿命和平均最高寿命为评价指标,考察药物对雄性果蝇寿命的影响。测定氧化损伤下黑果腺肋花楸水提物对果蝇存活时间以及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)活力和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量的影响,了解黑果腺肋花楸水提物抗衰老作用机制。实验测得黑果腺肋花楸中花青素含量为(3.4±0.2)mg/g。在果蝇实验中,与对照组相比,黑果腺肋花楸各剂量组能显著延长雄性果蝇平均寿命及平均最高寿命(p0.05或p0.01)。各剂量组均可在一定程度上延长氧化损伤状态下果蝇的存活时间(p0.05),提高SOD和CAT酶活力(p0.05或p0.01),降低MDA含量(p0.05)。因此,黑果腺肋花楸水提物可提高果蝇抗氧化能力,延缓果蝇衰老。     

甲鱼肽对果蝇寿命及其抗氧化活性的影响

目的:探讨甲鱼肽（soft-shelled turtle peptide,STP）对果蝇寿命及其抗氧化活性的影响。方法:通过酶解甲鱼肉得到甲鱼肽,测定其分子量和氨基酸组成。以不同剂量（0.2%、0.4%和0.8%）的甲鱼肽饲喂果蝇,通过生存试验以及测定果蝇体内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力、过氧化氢酶（catalase,CAT）活力和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,评价甲鱼肽的抗氧化作用。结果:甲鱼肽以相对分子质量介于180~500 Da的肽段为主,含有较为丰富的脯氨酸、赖氨酸和亮氨酸等。以甲鱼肽饲喂果蝇,与对照组相比,高剂量组雌、雄果蝇的平均寿命分别显著延长了10.80%（P<0.05）和14.01%（P<0.01）,平均最高寿命分别显著延长了6.35%（P<0.01）和13.22%（P<0.01）。抗氧化实验结果表明,高剂量组雌、雄果蝇的SOD活力分别显著提高了28.40%（P<0.01）和15.08%（P<0.01）,CAT活力分别显著提高了33.50%（P<0.05）和38.05%（P<0.01）,MDA含量分别显著下降了33.33%（P<0.01）和34.62%（P<0.01）。结论:甲鱼肽可以提高雌、雄果蝇体内抗氧化酶活力,缓解脂质过氧化作用,从而延长果蝇寿命,具有潜在抗衰老作用。     

山楂对果蝇抗氧化相关调控基因表达的影响

以果蝇为动物模型,研究给予不同剂量山楂提取物（0、0.8、4 mg/mL）对果蝇寿命、抗氧化酶活力及抗氧化相关调控基因表达的影响。结果表明：添加山楂提取物可以延长果蝇寿命;体内抗氧化酶活力测定结果显示,添加0.8 mg/mL山楂提取物可以显著升高铜锌超氧化物歧化酶（CuZn-superoxide dismutase,CuZn-SOD）酶活力（P＜0.05）,给予4 mg/mL山楂提取物可以极显著升高CuZn-SOD酶活力（P＜0.01）和显著升高过氧化氢酶（catalase,CAT）酶活力（P＜0.05）,且降低丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平。实时定量PCR（real timepolymerasechain reaction,real time-PCR）,结果显示,给予4 mg/mL山楂提取物显著上调CuZn-SOD、CAT mRNA表达水平（P＜0.05）;给予0.8 mg/mL山楂提取物磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶（phospholipid hydroperoxideglutathione peroxidase,PHGSH-Px） mRNA表达水平显著升高（P＜0.05）,4 mg/mL组表达水平极显著升高（P＜0.01）。综上,山楂在机体内抗氧化活性可能是通过上调内源性抗氧化酶来实现的。     

高糖饮食对果蝇发育和抗氧化能力的影响及其机理研究

为探究高糖饮食对果蝇发育、寿命及抗氧化能力的影响,以果蝇为研究对象,将含有高蔗糖的培养基喂养果蝇,并测定果蝇的寿命、运动能力与抗氧化能力;同时,对高糖组果蝇进行转录组测序,尝试从基因转录水平上探索高糖饮食影响果蝇发育的机理。结果表明,与对照组相比,高糖组雌性、雄性果蝇和雌雄混养果蝇的平均寿命分别缩短了35.01%、43.01%和34.15%,雄性果蝇和雌雄混养果蝇的生存曲线显著低于对照组（P<0.05）。高糖饮食降低了果蝇的化蛹率、羽化率和攀爬能力。高糖组雄性果蝇在生命后期体内T-SOD酶和CAT酶有不同程度的降低,而MDA含量均有所增加。通过转录组测序,发现高糖组果蝇的差异表达基因富集在果蝇发育过程、机体代谢活动调控及应激反应等方面。本研究表明高糖饮食显著降低果蝇的寿命、发育、运动能力及抗氧化能力,为健康饮食提供参考。     

酸枣提取物的抗氧化及抗衰老作用

目的:研究酸枣提取物体外和体内抗氧化及抗衰老作用.方法:对不同质量浓度酸枣提取物(0.05、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 mg/mL)进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率、羟自由基清除率及Fe3+还原能力测定,评价酸枣提取物体外抗氧化活性;以不同质量分数(0.1％、0...     

纹党多糖提高果蝇生命力和抗氧化活性

以纹党多糖（Codonopisis pilosula polysaccharide,CPP）为材料,研究多糖对黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）生育力和寿命及抗氧化活力的影响。将黑腹果蝇随机分为50、100、200和400 mg/L剂量处理组,以生理盐水为对照组,连续培养四代,考查不同浓度的纹党多糖对果蝇生存能力的影响,包括果蝇子一代到子四代（F1~F4）生育力和寿命的变化,雌、雄果蝇数量的变化,测定百草枯急性氧化损伤下的存活时间、抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）的活力及丙二醛（MDA）含量的变化。结果显示,400 mg/L剂量的CPP能显著提高F1~F4代雌、雄果蝇世代生育力,与对照相比后代果蝇数量增加了150%（p<0.01）,延长F1~F4代雌、雄果蝇寿命,与对照相比后代果蝇寿命增加了34.07%（p<0.01）,延长百草枯急性氧化损伤下F1~F4代雌、雄果蝇的平均存活时间,与对照相比存活时间延长了7.06 h和6.28 h（p<0.01）,同时提高了果蝇体内SOD和CAT活性（p<0.01）,降低了果蝇体内的MDA含量（p<0.01）。研究结果表明,CPP能显著提高F1~F4代雌、雄果蝇世代生育力,延长寿命,延长百草枯急性氧化损伤下果蝇的存活时间,提高了果蝇的抗氧化能力和生命力,促进了生殖能力,表现出剂量效应,果蝇世代总量雌、雄果性别比接近1:1。     

人参提取物延缓果蝇衰老的作用及机制研究

目的:基于果蝇模式生物,探讨人参提取物对果蝇衰老的延缓作用及其机制。方法:通过高效液相色谱法分析人参提取物中人参皂苷成分组成;将野生型Canton-S果蝇随机分成对照组及人参提取物组,通过寿命实验及检测摄食量、甘油三酯水平、繁殖能力、运动能力,以及在饥饿、热应激以及氧化应激条件下果蝇的存活时间来分析人参提取物的抗衰老能力;通过聚合酶链式反应测定腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)通路及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路相关基因转录水平。结果:人参提取物中含13种人参皂苷成分。与对照组相比,7.5 mg/mL人参提取物对果蝇的延寿率达9.72%,且不显著影响其摄食量、甘油三酯水平以及产卵量(P>0.05),能够显著提高果蝇的攀爬能力(P<0.05或P<0.01),可显著增加果蝇抵抗压力应激能力(P<0.05或P<0.01)。与对照组相比,人参提取物的摄入显著提高了AMPKα、FoxO、 Sirt1、 LKB1和CaMKII的转录水平(P<...     

甘薯汁对果蝇寿命及抗氧化能力的影响

为探讨甘薯汁抗氧化及防衰老的功效,选取果蝇为动物模型,在培养基中分别添加低、中、高剂量（分别为0.10、0.15、0.20 mg/mL）甘薯汁饲喂8 h内羽化未交配的雌、雄果蝇,通过果蝇生存实验及测定不同饲养时间果蝇体内的超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力、总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,评价甘薯汁对果蝇寿命和抗氧化酶活性的影响。结果表明：与对照组相比,不同剂量甘薯汁组均能显著延长雌、雄果蝇的平均寿命（P＜0.05或P＜0.01）,且呈剂量依赖性。果蝇SOD活力、T-AOC在低、中、高剂量组中均显著增加（P＜0.05或P＜0.01）,中、高剂量组果蝇体内MDA含量显著降低（P＜0.05或P＜0.01）。其中,与对照组相比,高剂量组可使雌、雄果蝇平均寿命分别延长17.93%和16.00%,SOD活力分别提高50.51%、58.61%,T-AOC分别提高79.73%、62.67%,MDA含量分别下降35.59%、37.14%。结论：甘薯汁可以提高果蝇体内的抗氧化能力,具有一定的延缓衰老作用。