各种微生物碱性脂肪酶特性的比较

对各种不同来源的微生物碱性脂肪酶的酶学性质进行了系统研究和比较，以便能更深入全面地了解环境条件对碱性脂肪酶的影响，为碱性脂肪酸在洗涤剂中的广泛应用提供理论基础。     

α-淀粉酶中某些氨基酸含量与其最适pH的关系

针对生产中大多数α 淀粉酶不能适应高酸性和高温条件,需要改进才能适应工业生产的实际,研究了α 淀粉酶的最适pH与各种氨基酸含量的关系,构建了α 淀粉酶序列库和pH序列库.通过对α 淀粉酶pH序列库统计分析,发现α 淀粉酶的最适pH与某些氨基酸含量有一定的关系,当丙氨酸(A)质量分数大于5.8%并谷氨酸(E)质量分数大于5.0%,苏氨酸(T)质量分数大于6.5%并酪氨酸(Y)质量分数在4.3%～6.3%时,α 淀粉酶的耐酸性能力较好.     

压力—温度协同作用下华根霉脂肪酶的催化行为研究

研究了高压处理中压力和温度对华根霉脂肪酶的活力和稳定性的影响,并利用活性酶变性酶的双态模型考察了酶的热变性,并构建压力—温度二元相图。研究结果表明:在0.1~200.0 MPa时,华根霉脂肪酶活力随压力提升而增加,其中在压力200 MPa时酶活达到最高值,是常压下初始酶活的116%;当压力超过200 MPa时,酶活开始降低,尤其在400~600MPa范围内迅速降低。压力—温度协同作用下华根霉脂肪酶的加工稳定性数据显示,在200 MPa、40℃下酶热稳定性最佳,压力超350 MPa时酶热稳定性显著降低。     

绿茶氨基酸对滋味的影响

对绿茶17种氨基酸与滋味进行了简单相关、多元逐步回归和主成分分析。结果表明：应用多元逐步回归分析建立的氨基酸与绿茶滋味数学模型,在本试验条件下,模型拟会非常有效。还就绿茶滋味的化学评价进行了讨论。     

纤维素酶热稳定机制的计算分析

对水解糖苷酶第45家族的纤维素酶系进行计算分析,计算结果表明,与此家族酶系的热稳定性呈负相关的氨基酸对为:丙氧酸-谷氨酸(AE)、苯丙氨酸-赖氨酸(FK)和丙氨酸-异亮氨酸(AI);呈正相关的氨基酸对:甲硫氨酸-脯氨酸(MP)和甲硫氨酸-甘氨酸(MG),并引入氨基酸热稳定常量计算验证其相关性,发现呈负相关的氨基酸对均为显著相关,而呈正相关的氨基酸对显著性不明显.这个结果可以为此家族纤维素酶的基因工程改造提供一定参考.     

低温碱性脂肪酶型时间-温度指示剂的研究

利用碱性脂肪酶催化三乙酸甘油酯分解导致p H降低,以酸碱指示剂显示颜色变化,研究并确定低温环境的TTI（时间温度指示剂）的反应体系及基本特性。该时间温度指示剂（25 m L）的反应体系为:5 m L三乙酸甘油酯∶20 g/L聚乙烯醇乳化液（v∶v=1∶19,均质10000 r/min,每次3 min,间隔5 min,共两次）、19.50 m L 0.05 mol/L p H10.60Gly-Na OH缓冲液、0.05 m L 1 g/L碱性脂肪酶液、0.25 m L 0.10 mol/L CaCl₂溶液、0.20 m L百里香酚蓝-酚酞-百里酚酞混合指示剂。通过测定反应体系在不同温度下的p H下降速率,最终确定该反应体系的Ea为60.14 k J/mol。该反应体系可应用于监测低温环境下食品中酶反应或脂肪分解的程度,间接判断对应食品的品质状况。      

主流烟气氨释放量与烟叶中蛋白质和氨基酸含量相关性研究

摘要:运用方差分析法研究了不同产区、不同部位的烟叶中蛋白质、氨基酸的含量和主流烟气中氨的含量的差异。采用描述统计、逐步回归分析、偏相关分析和通径分析研究了烟叶中蛋白质、氨基酸含量与主流烟气中氨含量的关系,建立了多元逐步回归方程。结果表明:烟叶中蛋白质、脯氨酸与主流烟气中氨呈极显著相关;烟叶中蛋白质、脯氨酸与主流烟气中氨含量的相关主要取决于直接作用。      

炒制温度对酱油游离氨基酸变化规律的影响

研究了100,160,220℃3种常用炒制温度对酱油游离氨基酸变化规律的影响。结果表明:随着炒制温度的升高,酱油中的鲜味氨基酸浓度逐渐增加。未处理和100℃炒制处理酱油中TAV>1的游离氨基酸均有9种,而160,220℃炒制处理酱油中TAV>1的游离氨基酸均有12种。100,160,220℃炒制处理后,分别有15,12,9种游离氨基酸含量增多,1,4,6种游离氨基酸含量减少。100,160℃炒制处理后酱油中游离氨基酸总量均增多,220℃炒制处理后酱油中游离氨基酸总量减少。100,160,220℃炒制处理后酱油中必需氨基酸总量均增多。100,160,220℃炒制处理后酱油中杂环氨基酸、非极性氨基酸、碱性氨基酸和疏水性氨基酸总量均增多,而脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸、极性氨基酸、酸性氨基酸和亲水性氨基酸总量在100,160℃炒制处理后均增多,但在220℃炒制处理后其总量均减少。     

分子动力学模拟与热稳定性实验相结合分析乙酰氨基葡萄糖与脂肪酶的相互作用机制

该研究采用分子动力学模拟方法研究南极假丝酵母脂肪酶B（CaLB）与乙酰氨基葡萄糖（GlcNAc）的相互作用,以及通过热稳定性实验论证GlcNAc对CaLB的保护效果。结果表明：在323.15 K下,CaLB与GlcNAc的静电势能与Lennard-Jones（L-J）在前20 ns模拟时间中显著下降,CaLB-250 mmol/L-GlcNAc模型在0~100 ns时,静电势能和L-J势能分别下降了3350 kJ/mol和2791 kJ/mol,二者间的氢键数从0增加到115左右,CaLB与GlcNAc的可及面积（SASA）接近于50 nm2。均方根偏差（RMSD）和均方根波动（RMSF）数据表明：游离酶（Free-CaLB）模型在323.15 K和353.15 K下的RMSD分别为0.2617 nm和0.3473 nm,而不同浓度CaLB-GlcNAc模型的RMSD均小于Free-CaLB的数值,且CaLB-GlcNAc组装体模型区域（Val 147-Leu 155）波动明显小于Free-CaLB模型,说明GlcNAc可以减弱Free-CaLB的韧性而有效维持脂肪酶的原始结构。热稳定性实验表明：Free-CaLB及CaLB-GlcNAc在60 ℃下处理2.0 h,Free-CaLB的残余酶活力仅为22.26%,而CaLB-GlcNAc的残余酶活力为52.11%。综上,乙酰氨基葡萄糖可以提高游离脂肪酶的热稳定性。     

脂肪酶生产菌株的筛选及其发酵条件优化

为获得具有高产脂肪酶能力的菌株,以橄榄油为唯一碳源进行富集,再经过维多利亚蓝B平板初筛和两次摇瓶复筛,从自然界中筛选得到一株具有较高酶活的革兰氏阴性短杆菌G1。通过提取16S r DNA进行同源比对,确定该菌属于伯克霍尔德氏菌属。该菌经紫外和ARTP复合诱变得诱变株G1-7-4,酶活较原始菌株提高了51.87%。在单因素试验考察各因素对脂肪酶酶活的影响的基础上采用响应面法对影响酶活的重要因素进一步优化,得到最佳发酵条件:玉米油33.09 m L/L,酵母膏31.90 g/L,初始p H 6.67。该条件下酶活最高达到80.62 U/m L,为初始条件下的24.81倍。该脂肪酶的最适p H为8.0,在30~80℃范围内均具有较高酶活,最适反应温度为50℃。     

TVB-N与肉品储藏温度的关系研究

挥发性盐基氮(TVB-N)是动物性食品新鲜程度的重要指标。本实验通过测定在不同温度下的挥发性盐基氮的值,得到其与肉品腐败的关系。挥发性盐基氮的值与保藏温度成正比,即温度越高,TVB-N的值越大,食品越容易腐败。     

脂肪酶产生菌的优化培养及应用

以橄榄油为唯一碳源,在含维多利亚兰的培养基上筛选来自油菜地土壤的样品。筛选到1株活力较高的菌种,经鉴定为成团肠杆菌(Enterobacter agglomerans),在优化的产酶条件(2.0%的乳糖作为碳源,1.5%的牛肉浸膏和1.0%的酵母膏作为复合氮源,0.1%MgSO4.7H2O,初始pH7.0,30℃)下培养48h,酶活为39.09U/mL。在反应温度为30℃,振荡速率为180r/min时催化能力较强。其粗发酵液可催化含水量在91%以上的橄榄油、芝麻油、茶油生产生物柴油。     

用硅藻土固定化脂肪酶及酶法合成单甘油酯

本文研究了一种简单的用硅藻土固定猪胰脂肪酶的方法。选择合适的pH、酶量及温度 ,脂肪酶固定量可达 10 2 0U/g。用于棕榈油甘油解合成单甘油酯时 ,固定化酶热稳定性比游离酶好 ,使用寿命长 ,具有一定的应用潜力     

氨基酸甜味与分子结构关系研究

采用全略微分重叠法（CNDO）对13种呈味氨基酸的分子结构参数进行了计算，并对氨基酸分子结构特征与甜味的关系进行了相关分析。结果表明：氨基酸α－H、羰基-O以及氨基上的一个氢原子与甜度极显著相关（P＜0．01），氨基酸可能以氢供给基（α－H）和氢接受基（羰基-O），与甜味接受体上的氢接受基（B）、氢供给基（AH）结合形成氢键；氨基上的一个氢原子与甜味接受体上第三点结合形成氢键，其强度决定甜味的强弱。     

Interaction Between Phenolic Compounds and Lipase: The Influence of Solubility and Presence of Particles in the IC50 Value

Obesity is one of the principal human health problems and one of the main treatments against it is the inhibition of pancreatic lipase, the main responsible enzyme of lipid digestion. For that purpose, previous studies have tested several phenolic compounds against lipase, without considering their aggregation behavior in aqueous solutions. Because of this, the present study focuses on understanding how the solubility and the presence of particles affect the IC₅₀ value of the interaction between lipase and phenolic compounds present in beverages like fruit juices and teas. Therefore, the inhibitory capacity against pancreatic lipase and the aggregate formation of 9 phenolic compounds (quercetin, rutin, myricetin, catechin, epigallocatechin gallate, cyanidin, caffeic acid, chlorogenic acid, and vanillic acid) were analyzed. The results obtained together with the solubility data from literature were treated by principal component analysis and indicate that the IC₅₀ value does not correlate with the solubility or aggregate formation of the phenolic compounds. However, the IC₅₀ values of phenolic compounds which aggregate during the assay conditions have low reproducibility. This study shows that the aggregate formation of phenolic compounds plays an important role during in vitro assays for pancreatic lipase inhibition and should be considered in future experiments as it can lead to false positive results. In terms of particle formation, the flavonoids investigated in this study are more prone to aggregation compared to the phenolic acids.     

庚烷中微生物脂肪酶催化酯化反应动力学的研究

对国产解脂假丝酵母脂肪酶Ｃａｎｄｉｄａｌｉｐｏｌｙｔｉｃａｌｌｉｐａｓｅ在庚烷中催化丁醇与月桂酸酯化反应的动力学进行了研究。结果发现反应不存在扩散限制，仅为动力学控制，符合米氏方程。虽然存在丁醇抑制现象，但底物浓度对反应速率的影响符合Ｐｉｎｇ－Ｐｏｎｇ反应机理，由此推导了反应动力学模型并由实验数据求得了各模型参数。     

葡聚糖修饰米根霉脂肪酶条件优化及其稳定性研究

采用经高碘酸钠活化的葡聚糖修饰米根霉脂肪酶,以获得具有较高酸解催化活性的脂肪酶。研究反应时间、反应pH值、还原剂浓度及葡聚糖质量分数对化学修饰效果的影响,并利用Box-Behnken设计法及响应面优化法对米根霉脂肪酶的化学修饰条件进行优化,当反应pH值为7.63、反应时间为15.53 h、还原剂浓度为0.20 mol/L、葡聚糖质量分数为0.3%时,脂肪酶酸解率可达到最高值37.28%。在40 ℃最适温度条件下,修饰酶的活性是原酶的2.2 倍,且经化学修饰后脂肪酶的稳定性有显著提高。     

粮层深度与粮层阻力关系的试验分析

粮层阻力是粮食干燥,储粮机械通风等工艺设计中的关键参数,本文主要分析了粮层深度与粮层阻力之间的非线性关系,对糙米,小麦和玉米通风实验实测数据进行了多元回归,结果表明三种粮食的粮层深层深度h的指数均大于1,这对新型高大房仓,浅圆仓和立筒仓的通风系统设计有实际意义。     

新疆酸奶中高产蛋白酶与产脂肪酶乳酸菌的筛选

从新疆传统酸奶中,利用透明圈法筛选出一株高产蛋白酶的乳酸菌RA3,其蛋白酶活力为38.87 U/mL;利用铜皂法筛选出产脂肪酶的乳酸菌菌株RC4,其酶活力为8.54 U/mL。经API 50CHL生理生化实验和16S rRNA序列比对鉴定RA3为发酵乳杆菌,RC4为植物乳杆菌,为我国发酵食品提供了新的乳酸菌资源。     

脂肪酶的基因克隆、序列分析、高效表达及其催化特性

分别以R. miehei 3.4960基因组和总RNA为模板,通过PCR和RT-PCR扩增得到脂肪酶全长基因和脂肪酶cDNA碱基序列,两碱基序列测序结果比对表明：脂肪酶DNA碱基序列由5个内含子和6个外显子组成,5个内含子大小分别为75、58、64、73、59bp,位于DNA序列(以起始密码子ATG的碱基A为1)的600～674位、929～986位、1076～1139位、1227～1299位、1382～1440位碱基处。脂肪酶RML mRNA碱基序列与已公布的R. miehei脂肪酶基因mRNA(EMBL Nucleotide Sequence Database Accession No. A02536)碱基序列有5个碱基的差异,其编码的氨基酸序列有1个发生了改变。利用酿酒酵母表达质粒pICAS1,实现了脂肪酶RML基因在酿酒酵母中的高效分泌表达,并对重组脂肪酶RML进行了相关酶学性质分析。酶学性质研究表明：重组酶的最适反应温度为45℃,最适pH值为8.6;该酶偏爱中链长的酯(C8～C12),对12个碳的酯具有最佳活性,对C16长链酯也有较高的活性,对短链酯的活性较弱;金属离子Cu2+、Fe2+对酶活性有显著抑制作用,Ca2+和Mg2+对酶活有部激活作用。