产耐热蛋白酶乳酸菌的筛选、产酶条件及其酶学性质的研究

从内蒙古部分传统发酵乳样品以及酸菜汤中分离到105株乳酸菌,用检测蛋白酶产生水解圈和福林酚蛋白酶活性测定相结合的方法,从中筛选出一株耐热蛋白酶产生菌株WH29-3-1,该菌株经初步鉴定为Enterococcus faecium.同时,对其产酶条件及酶学性质进行研究.结果表明,菌株WH29-3-1是在以葡萄糖为碳源、蛋白胨 牛肉膏 酵母粉为氮源、碳氮比为0.8、pH7.0的最适产酶培养基中45℃、接种量为4%的条件下发酵培养30h,具有最大产酶量13.13U/ml.且K2HPO4、MgSO4有促进蛋白酶产生的作用.由菌株WH29-3-1产生的耐热蛋白酶的最适作用pH值为7,最适作用温度为50℃.结果表明,该菌是一株具有进一步改造利用价值的产蛋白酶菌株.     

产中性蛋白酶菌株发酵条件的研究

本文对一株产中性蛋白酶枯草芽孢杆菌的发酵条件进行了研究,考察不同因素条件下对产酶的影响.结果表明:该菌株发酵产酶的最适条件:碳源为2%玉米粉,氮源为1%牛肉膏,添加0.2%NaH2PO4、发酵初始pH＝6、接种量为6%、250ml三角瓶装液量为50ml.     

酒醅中产纤溶酶细菌的分离及发酵产酶研究

该研究从酒醅中筛选高产纤溶酶的细菌。经过初筛和复筛得到1株高产纤溶酶的菌株,命名为DL-1。通过菌株形态学和生理生化试验初步鉴定菌株DL-1为芽孢杆菌（Bacillus sp.）。菌株DL-1产纤溶酶发酵试验结果表明,最适菌龄为4 h,最适碳源为牛肉膏,最适氮源为豆饼粉。在此条件下,所产的纤溶酶在血纤维蛋白平板上形成的溶圈面积可达379.79 mm2。     

鱼露产蛋白酶菌产酶条件优化

从鱼露中筛选出高产蛋白菌株,研究不同发酵条件对产蛋白酶菌所产蛋白酶的酶活力的影响,以得到蛋白酶菌产酶的最佳发酵工艺条件。采用酪蛋白溶解圈法,从鱼露中筛选出活性较大的蛋白酶菌,以酶活力为指标,通过单因素试验和正交试验,研究该菌产蛋白酶的最佳发酵工艺。研究结果表明,鱼露中产蛋白酶菌最佳产酶条件为:碳源为葡萄糖,碳源添加量为1%,氮源为牛肉膏,温度为37℃,p H值为8,蛋白酶的酶活为(36.6±2.1)U/m L。     

产低温碱性蛋白酶菌株QD-1的鉴定及产酶条件和酶学性质

目的:对来自裙带菜的1株产低温碱性蛋白酶内生菌株QD-1进行菌种鉴定,产酶条件和粗酶性质研究。方法:选取菌株性状优良、产蛋白酶活力较高的菌株QD-1,对其进行形态学及分子生物学16S rDNA鉴定,并研究其最适发酵条件。考察了碳源、氮源、发酵时间、培养温度、起始pH值等因素对菌株产蛋白酶的影响,并对其酶学性质进行研究。结果:经鉴定该菌株为芽孢杆菌属,命名为Bacillus sp.QD-1;该菌株在以蔗糖为碳源,蛋白胨为氮源,培养基初始pH 9.0,培养温度25℃,接种量10%的条件下150 r/min振荡培养48 h,所产蛋白酶活性最高达995 U/m L。该蛋白酶的最适作用温度20℃,最适作用pH 9.0,Mn~(2+)对该酶有较强的激活作用,Zn~(2+),EDTA和PMSF对该酶有抑制作用。结论 :从裙带菜内生菌QD-1发酵液中获得的蛋白酶是一种酶活较高的低温碱性蛋白酶。     

一株产蛋白酶不动杆菌的分离与酶学性质

以脱脂奶粉或羊毛粉为唯一碳氮源,从环境样品中筛选蛋白酶产生菌,首次获得一株高产蛋白酶的醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)E9,初步发酵优化显示,该菌株的最适发酵产酶温度35℃,培养基初始p H 6.0,接种量为质量分数4%,培养时间30 h;发酵培养基:蔗糖10 g/L,牛肉膏15 g/L,K_2HPO_4·3H_2O 7 g/L,KH_2PO_4 3 g/L,MgCl_2·6H_2O 1 g/L。酶学性质初步研究表明,不动杆菌E9所产的蛋白酶属于中性蛋白酶,最适作用温度50℃,最适pH 8.0,在p H5.0~8.0及40℃以下时具有良好的稳定性,酶反应动力学参数Km为7.067 mg/m L,Vmax为966.7μg/(m L·min)。     

菌株BWL232产蛋白酶特性及生物被膜形成能力研究

蛋白酶是一类重要的水解酶,被广泛应用于皮革加工、洗涤剂等多个领域。分离到一株蛋白酶高产菌株BWL232,经16S r RNA序列分析发现其与Pseudomonas aeruginosa具有99%的同源性。发酵条件优化表明其最适产酶时间为48 h,最适发酵起始p H值为5.08,最适碳源为酵母膏和牛肉膏的复合碳源,最适氮源为胰蛋白胨,蛋白酶活最高可达到245 U/m L,同时该菌株还可以形成生物被膜,在全细胞固定化连续发酵或生物膜法处理含蛋白质类污染物的废水中具有很好的应用前景。     

毕赤酵母产耐热木聚糖酶发酵工艺的研究

对毕赤酵母产木聚糖酶的发酵条件进行优化.单因素实验结果表明,该菌产木聚糖酶的最佳碳源为麸皮,最佳麸皮颗粒大小为超微粉碎,实际发酵选择麸皮颗粒直径0.5mm左右;最佳氮源为酵母膏,最佳种龄为24h,最佳初始培养基pH为5.5;添加吐温-80能有效提高产酶水平.经优化后,木聚糖酶酶活达到1800IU/mL.该酶最适反应温度为70℃.     

弹性蛋白酶高产菌株摇瓶发酵条件优化及弹性蛋白酶性质的初涉研究

运用响应面法对一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵培养条件进行了优化,这株枯草芽孢杆菌产弹性蛋白酶的最适发酵条件为:1.5%葡萄糖、1.5%酵母膏,起始pH为6.5,最适发酵温度为36.5℃,并对由这株枯草芽孢杆菌发酵生产的弹性蛋白酶进行了研究,发现由该株菌发酵得到的弹性蛋白酶在碱性条件下活性较好;在37℃以下时稳定性较好.     

竹黄菌液态发酵产漆酶培养条件的优化

分离筛选到一株产漆酶的竹黄菌,采用单因子相互比较法,研究了该菌株的最适发酵产酶条件。确定了最适的碳源为2 g/dL可溶性淀粉、最适的氮源为0.8 g/dL的酵母膏,以及最适铜离子浓度为2.4 mmol/L,在自然pH 5.0,装液量为50 mL,30℃、200 r/min摇瓶振荡培养64 h下,产漆酶酶活水平达120 000 U/L,比优化前提高近17倍。该竹黄菌株与已报道的白腐真菌相比,具有发酵周期短且产漆酶酶活较高的优点。     

一株产胶原蛋白酶嗜虫沙雷氏菌的分离与鉴定

以明胶为诱导物,从海洋混合菌中筛选出一株有效产生胞外胶原蛋白酶的菌株,其发酵上清液中的酶活达到22.46U/mL。通过形态学特征、生理生化特征测定对菌株进行常规鉴定,并结合菌株16SrDNA序列测定进行分析验证。结果表明,该菌株为嗜虫沙雷氏菌。     

ANTIOXIDANT ACTIVITY OF FERMENTED BERRY JUICES AND THEIR EFFECTS ON NITRIC OXIDE AND TUMOR NECROSIS FACTOR-ALPHA PRODUCTION IN MACROPHAGES 264.7 GAMMA NO(–) CELL LINE

Serratia vaccinii, a novel bacterium isolated from blueberry microflora, increased the phenolic content of berry juices, and thus increased antioxidant activities. The fermentation capacity of Serratia was investigated with Saskatoon berries, cranberries, strawberries and grapes in both aerobic and anaerobic conditions. It was shown to be compatible with wine yeast in anaerobic fermentations, producing wine with high antioxidant activity. The effects of fermented berry juices were tested on lipopolysaccharide/inferon‐gamma‐activated macrophages 264.7 NO(–). Data indicated that fermented berry juices strongly inhibited activated‐macrophage NO production but induced tumor necrosis factor‐alpha production.     

Characterization of a new keratin-degrading bacterium isolated from deer fur

A keratin-degrading bacterium was isolated from soil containing deer fur. An axenic culture of the keratin-degrading bacterium was obtained in liquid culture using a keratin enrichment technique. The isolated bacterium was gram negative and catalase- and oxidase-positive. Transmission electron microscopic observations showed that the bacterium was rod-shaped, 1.0-1.3 microm long and 0.7 microm in diameter. Phylogenetic analysis of 16S rDNA revealed that the new isolate has only 90.6% homology with Stenotrophomonas nitritireducens. Hence, this new bacterium was designated as Stenotrophomonas sp. D-1. The optimum temperature was determined to be 20 degrees C for maximum growth and keratinolytic enzyme production. Amino acid data, obtained after treating keratin powder with the supernatant culture, suggest that the major free amino acids resulting from keratin degradation are phenylalanine, tyrosine and valine. In addition, native chicken feather was degraded completely at 20 degrees C in 2.5 d by this bacterium.     

玉米浆粉预处理对粘质沙雷氏菌发酵产2-酮基-D-葡萄糖酸的影响

通过比较不同预处理方法获得的玉米浆粉在粘质沙雷氏菌SD136作用下产2-酮基-D-葡萄糖酸的影响,组合复配玉米浆粉,结果表明:最佳玉米浆粉复配比为玉米原浆粉和酶解玉米浆粉3∶1,2-酮基-D-葡萄糖酸产量达到(171.39±4.5) g/L,发酵时间由40 h缩短至37 h,对糖转化率达到95.22%。玉米原浆粉和酶解玉米浆粉的组合复配能够提高粘质沙雷氏菌SD136的发酵效率和2-酮基-D-葡萄糖酸的产量。     

珠江沉积物中硫酸盐还原菌的分离筛选及其性质鉴定

由于能够形成可以与重金属反应形成沉淀的硫化物,硫酸盐还原菌对于改善水体质量、确保食品和饮水安全上有着重要意义。从珠江沉积物中分离出一株硫酸盐还原菌SCUT-3,该细菌呈杆状、革兰氏染色为阴性,能够以乳酸、乙酸、丙酸作为唯一碳源,以硫酸盐作为电子受体进行生长,不能以葡萄糖、乙醇等作为唯一碳源,硫代硫酸盐和亚硫酸盐为电子受体进行生长。对该细菌的16S rRNA基因和aprA基因序列进行分析,发现其16S rRNA基因与Desulfovibrio acrylicus的16S rRNA基因的一致性最高,达到87%,其aprA基因与Desulfovibrio vulgaris str.Hildenborough的aprA基因一致性最高(通过blastx比对),达到90%。因此可判断其属于脱硫弧菌属(Desulfovibrio),但两基因的序列与已知序列同源性均不超过91%,判断该细菌属于脱硫弧菌属中的一个新种。     

棉酚降解菌的筛选、鉴定及棉粕固态发酵效果研究

目的:筛选分离出棉酚降解菌株,研究其生长降解特性和对棉粕中棉酚脱毒效果,为深入研究微生物降解棉酚的机制提供依据。方法:从山东棉花产地采集土壤样本,以醋酸棉酚为唯一碳源,稀释涂布法分离筛选出一株具有棉酚降解能力的菌株,通过16S rRNA基因序列系统发育分析以及生理生化特征对菌株进行初步鉴定,确定菌属。用高效液相色谱测定其对棉酚的降解和棉粕固态发酵脱毒效果。结果:筛选到一株可以降解棉酚的细菌,命名为YL01,初步鉴定为拉乌尔菌属Raoultella sp.。该菌株除利用棉酚外,还可以邻苯二酚、原儿茶酸和对苯醌为唯一碳源生长。YL01在以棉酚为唯一碳源的无机盐液体培养基中生长10 d后,棉酚的降解率为48%;接种该菌株到棉粕中,通过固态发酵,8 d内棉粕中棉酚含量下降43%,蛋白含量增加10%。结论:本研究分离筛选到一株棉酚降解菌Raoultella sp. YL01,为进一步深入研究棉酚的微生物降解机制奠定了基础,其对运用生物处理技术消除棉粕中棉酚具有潜在的应用前景。     

β-甘露聚糖酶产生菌HDYM-04的分离鉴定及产酶条件优化

从实验室温水沤麻液中分离并筛选到了一株产β-甘露聚糖酶的细菌HDYM-04,经生理生化试验及16S rDNA序列分析鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。研究了HDYM-04菌株72h连续发酵过程中产酶及生长的动态变化,通过单因素及序贯正交试验优化得到其摇瓶发酵产酶的最佳培养基组分及条件：碳源60g/L魔芋粉,氮源30g/L蛋白胨,MgSO4•7H2O 0.2g/L,K2HPO4 5g/L,初始pH 8.0,装液量100ml/250ml三角瓶,接种量2%,37℃振荡培养48h。在研究条件下发酵液酶活力4890U/ml,比优化前提高了3.2倍。     

Increase of antioxidant capacity of the lowbush blueberry (Vaccinium angustifolium) during fermentation by a novel bacterium from the fruit microflora

Members of the genus Vaccinium, such as blueberry and cranberry, are known to be excellent sources of antioxidant phenolic compounds, for example anthocyanins, flavonols and phenolic acids. The fruit also provides a natural habitat for numerous microorganisms. Interaction between the fruit and the microflora might affect the antioxidant phenolic compounds. The aim of this study was to investigate the effects on phenolic content and antioxidant capacity of wild blueberry fermented by a newly identified bacterium isolated from blueberry‐fruit surface microflora, Serratia vaccinii. Increase in the antioxidant capacity following fermentation of blueberries by the novel bacterium, as determined with the 2,2′‐diphenyl‐1‐picrylhydrazyl method, was attributed not only to an increase in total phenolics, but also to a change in the phenolic profile, as demonstrated by the production of gallic acid and of a novel compound of phenolic or phenylpropanoic structure. Copyright © 2005 Society of Chemical Industry     

产红色素海洋细菌SS04的分离鉴定及其发酵条件的优化

从威海近海采得的藻类植物经过破碎和分离筛选,得到1株红色素的高产海洋细菌,编号为SS04.经基因克隆得到16S rRNA基因序列,16SrRNA基因序列测定和分析结果显示该菌株为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens).对该菌株进行发酵条件的优化探究.结果表明,海洋细菌SS04产胞内红色素的最佳碳源、氮源分别为蛋白胨和酵母粉,培养基初始pH值为7.65,胞内红色素积累最佳时间为14h,最适温度、转速分别为28℃和11or/min.     

基于高通量测序与培养方法分析新鲜佛手与老香黄中的细菌多样性

老香黄为植物佛手的腌制品。为了解其加工前后微生物组成及其与老香黄品质之间的联系,采用高通量测序技术分析加工前后的样品中的细菌菌群组成,并结合纯培养和16S rRNA基因测序方法对菌株进行分离鉴定。结果显示,在门水平上,佛手鲜果的优势菌群为变形菌门(Proteobacteria)、蓝细菌门(Cyanobacteria);老香黄的为变形菌门、厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)。属水平上,鲜果的优势菌群为unidentified Cyanobacteria、泛菌属(Pantoea)、肠杆菌属(Enterobacter);老香黄的为Ignatzschineria、漫游球菌属(Vagococcus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、乳杆菌属(Lactobacillus)。采用纯培养方法从鲜果中分离出枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、产气克雷伯氏菌(Klebsiella aerogenes)和粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)等,但未从老香黄中分离出有害细菌。结果显示,佛手经加工制成老香黄后,其中的有益菌双歧杆菌属、乳杆菌属的丰度增加,但其生产和食用的微生物安全需加以重视。