微拟球藻活性成分分离及抑菌活性研究

海洋微藻因其特殊的生存环境使其可以合成高附加值的代谢产物而成为天然抗菌素筛选的重要途径。采用纸片法对微拟球藻的不同极性提取物及其分离组分进行抗4种病原菌活性研究,并采用柱层析和薄层层析方法对石油醚提取物进行进一步的分离纯化及成分分析,结果显示:6种提取物在较高的受试浓度下对大肠杆菌都呈现出较强的抑菌活性,此外,乙醇相提取物对其它3种受试菌都表现出明显的抑制效果,而石油醚相对铜绿假单胞菌有一定的抑菌活性,乙酸乙酯相和正丁醇相提取物对白色念珠菌有明显的抑菌效果。石油醚相提取物进一步分离获得3个纯度较高的组分,成分分析结果显示PEⅢ-5-1为叶绿素类化合物;PEⅤ-1中酮类物质含量最多,占55.74%,其次是酯类;PEⅤ-2中含量最多的是酯类,占50.54%;其次是酮类和有机酸类。     

蛹拟青霉液体深层发酵菌丝体抗氧化活性和抑菌活性分析

采用二苯代苦味肼基自由基(DPPH)酶标仪法和FOX试剂法对蛹拟青霉液体深层发酵菌丝体进行抗氧化活性研究;用滤纸片法和牛津杯法对菌丝体提取物进行抑菌活性分析。研究结果显示,菌丝体水相提取物具有较强的抗氧化活性,在样品浓度为2 mg/mL时,它对0.2 mg/mL的DPPH自由基的清除率达到92.35%,在FOX试剂法中活性达到了90.24%,明显高于其他溶剂提取物;抑菌试验结果表明,菌丝体水相提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉、绿色木霉的抑制效果优于其他溶剂提取物,乙酸乙酯相提取物对枯草芽孢杆菌的抑制作用最强,牛津杯法测定其抑菌圈直径达到17.86 mm。     

蛹拟青霉不同菌株液体发酵代谢产物的抑菌活性研究

以大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌,黑曲霉为指示菌,采用杯碟法对蛹拟青霉不同菌株的液体发酵液及菌丝体甲醇提取物进行抑菌试验。结果表明:蛹拟青霉各菌株液体发酵菌丝体的甲醇提取物对4种指示菌均无抑制活性。当各菌株发酵液甲醇提取物样品浓度为5 mg/mL时,PM27菌株的发酵液样品对大肠杆菌抑制效果最好,PM38菌株发酵液样品对金黄色葡萄球菌抑制效果最好,PM33菌株发酵液样品对枯草芽孢杆菌抑制效果最好,PM27菌株发酵液样品对黑曲霉抑制效果最好,其最小抑菌浓度MIC分别为0.32 mg/mL,0.32 mg/mL,0.64 mg/mL,0.16 mg/mL。     

蛹拟青霉发酵金针菇菇柄过程中主要活性物质及抗氧化活性的动态变化

以金针菇废菇柄为研究材料,利用蛹拟青霉为发酵菌种,对金针菇废菇柄进行了双向固体发酵。研究了金针菇菇柄发酵菌质多糖、虫草素、虫草酸、蛋白质、氨基酸等活性物质和发酵菌质总还原力和对自由基的清除能力随发酵时间的变化。试验结果表明,发酵菌质中活性物质出现了峰谷变化,在发酵中期随着时间的增加物质含量逐渐增加,与对照组相比,主要成分和抗氧化能力均有大幅度增加,两者具有显著差异。各种活性物质达到最大的发酵时间略有不同,蛹拟青霉发酵金针菇菌质多糖、虫草素、虫草酸含量在发酵28 d时达到最高,分别为:717.68 mg/g、90.9μg/g和25.6 mg/g,分别是对照组的1.92倍、90.9倍和2.34倍;蛋白质和氨基酸含量分别在21 d和24 d达到最高,分别为396.6 mg/g和230.88 mg/g,分别是对照组的2.39倍和4.52倍。发酵菌质的总还原力在21 d^28 d达到最高,且基本稳定。金针菇菇柄发酵菌质的清除DPPH自由基能力在28 d最高,达到72.37%,比未发酵菌质清除DPPH自由基的能力提高了59.5%。     

不同干燥方式对蛹拟青霉发酵豆粉活性成分及品质的影响

为探究蛹拟青霉发酵大豆粉适当的干燥方式,采用热风干燥、微波真空干燥和冷冻真空干燥3种干燥方式对蛹拟青霉发酵豆粉进行了干燥处理,并测定了多糖、蛋白质、虫草素、多酚等主要活性成分和干燥发酵豆粉的堆积密度、复水性、感官指标和微生物数量.结果表明:不同的干燥方式对发酵豆粉的活性成分含量和堆积密度、复水性、微生物数量、感官指标等...     

发酵液中透明质酸的分离纯化

考察分离纯化条件对发酵液中透明质酸(HA)提取率的影响。结果表明,采用乙醇和十六烷基吡啶(CPC)相结合的办法来提取HA,提取率较高;适宜的提取条件为温度30℃p,H为7。提取物和HA标准品有着相同的吸收峰,说明该发酵产物呈极为典型的HA红外吸收谱图,证明该提取物即为透明质酸。     

核酸发酵液抑菌成分的分离提取

对核酸发酵液的抗菌活性进行了初步研究 ,发现核酸发酵液有一定抗菌活性。将发酵液在 pH 7条件下浓缩后调节到酸性 ,用石油醚萃取 ,分离出一种不易溶于冷水 ,易溶于乙醇、石油醚及碱溶液的结晶 ,该结晶的抗菌活性比发酵原液提高 3 4倍。     

蛹虫草子实体中抗氧化活性化合物的分离纯化

以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除活性为指导对蛹虫草子实体中的抗氧化活性化合物进行了分离纯化。对蛹虫草子实体经甲醇浸提后获得的甲醇提取物,再进行硅胶柱色谱分离得到一个具有较强抗氧化活性的组分CM9,组分CM9利用反相高效液相色谱法进行活性指导下的分离得到抗氧化活性化合物CM9-1。该化合物采用薄层色谱和高效液相色谱法进行纯度检测发现此为纯品化合物,液相色谱-质谱分析结果表明该化合物相对分子质量为430,分子式为C22H22O9。该物质在质量浓度为1.0 mg/m L时对0.4 mg/m L的DPPH自由基试剂的清除率为(73.67±0.29)%。     

蛹拟青霉发酵菌丝体中虫草酸的提取与测定

虫草酸,即D-甘露醇,是虫草类真菌中的主要有效成分之一。为更好开发蛹虫草资源,研究了蛹拟青霉发酵菌丝体中虫草酸的提取工艺。依据大量单因素实验以及正交实验得出最佳提取条件为:微波时间80s,微波功率200W,料液比1:100,乙醇浓度70%。在此条件下,对实验室20株蛹拟青霉进行了虫草酸的测定,结果表明22号菌株虫草酸含量高达160.39mg/g,有一定的生产应用价值。      

蛹拟青霉代谢产物清除自由基和抑制单胺氧化酶活性的研究

用二苯代苦味肼基自由基(DPPH)—TLC法和酶标仪法对1株蛹拟青霉RCEF0892摇瓶发酵菌丝体及发酵液甲醇-乙酸乙酯[V(甲醇)∶V(乙酸乙酯)=1∶1]提取物清除自由基活性进行了定性和定量分析,发现该菌株发酵液提取物具有较强的清除自由基活性,在浓度为5.0mg/mL,于37℃下保温10min时,它对0.4mg/mL的DPPH自由基的清除率可达79.92%。同时,以大鼠肝脏线粒体单胺氧化酶为靶标的体外实验发现,RCEF0892菌株菌丝体提取物具有较强的抑制单胺氧化酶活性,且其活性和浓度呈量效关系,其对大鼠肝脏线粒体单胺氧化酶的半数抑制浓度IC50为81.39μg/mL。     

古尼拟青霉小孢变种的主要有效成分分析

对古尼拟青霉小孢变种RCEF0864的深层发酵产物进行了有效成分分析,结果表明,菌丝体和发酵液中氨基酸总量明显高于冬虫夏草生药;菌丝体中粗蛋白、总糖、麦角甾醇、甘露醇及腺苷等多种物质的含量亦高于冬虫夏草生药;RCEF0864深层发酵菌丝体和发酵液中均含有丰富的对人体健康非常重要的Zn、Fe、Ca等元素,尤以Ca的含量最高;用二苯代苦味肼基自由基(DPPH)-TLC法和酶标仪法对RCEF0864菌丝体和发酵液冻干粉甲醇提取物中的清除自由基活性物质进行了分析,发现2种提取物均具有较强的清除自由基活性,在浓度为5.0 mg/mL,37℃下保温10 min时,2种提取物对0.4 mg/mL的DPPH自由基的清除率分别为53.86%和59.66%。     

榆耳发酵液抑菌成分的初步研究

榆耳发酵液对多种致病菌具有抑制作用。文中以枯草杆菌和大肠杆菌为指示菌,采用杯碟法研究了温度和 pH 对发酵液抑菌活性的影响,考察了发酵液中多糖和蛋白质的抑菌活性以及抑菌成分分子量的大小,比较了不同溶剂对抑菌成分的提取效果。结果显示,发酵液抑菌成分具有良好的热稳定性并能在 pH1～9的范围内较好地保持其抑菌活性,多糖和蛋白等大分子物质不具有抑菌活性,抑菌成分分子量小于1000 u,乙酸乙酯对其提取效果最好。采用试管法、薄层层析预试法对发酵液抑菌成分进行了(有效化学成分的)初步分析,结果表明,发酵液抑菌成分的组成为挥发油倍半萜类、酚和有机酸等化合物。     

裂褶菌发酵液化学成分分析及其抗缺氧效果研究

本实验对裂褶菌发酵液的抗缺氧作用进行了研究。研究表明,裂褶菌发酵液具有显著的抗缺氧效果(p<0.01)。对其化学成分的定性和定量分析结果显示,裂褶菌发酵液中总糖含量为13.3%,其主要成分葡萄糖的含量为10.08%,其次为麦芽糖以及微量的果糖与乳糖。总酸含量为1.38%,其主要成分乳酸的含量为0.96%,其次为酒石酸以及微量的柠檬酸和苹果酸等有机酸成分。蛋白质含量为2.98%;发酵液中14种游离氨基酸的总含量为320.7mg/100ml;总氨基酸含量为641.0mg/100ml,蛋白水解液中含16种氨基酸,包括7种人体必需氨基酸。裂褶菌发酵液中还含有酚性物和微量油脂等化学物质,不含皂甙类、黄酮类和生物碱类物质。发酵液用乙醇进行提取,其乙醇提取物和乙醇不溶物均具有抗缺氧功能(p<0.01),而乙醇提取物的抗缺氧效果明显高于原发酵液(p<0.05)。初步判断,裂褶菌发酵液中的抗缺氧有效成分为一类具有一定极性的醇溶性代谢物质。     

番茄自然发酵液中酵母菌的分离鉴定及其特性研究

为研究番茄自然发酵液中的酵母菌及其特性,对发酵30 d番茄发酵液中的酵母菌分离纯化,通过菌落形态、镜检特征和26S rDNA序列对分离的菌株进行鉴定,并对该菌的生长特性和耐受性进行评价。结果表明,从番茄发酵液中分离出TY-1、TY-2和TY-3 3株酵母菌均为毕赤酵母属（Pichia）中的库德毕赤酵母种（P.kudriavzevii）;其中TY-1和TY-2亲缘关系较近,且与P.kudriavzevii strain SLDY-035菌株的同源性为99%,故选取TY-1进行后续实验;TY-3与P.kudriavzevii small subunit ribosomal菌株的同源性为100%。TY-1和TY-3的最佳生长温度为29℃、pH5.5,对10%~30%葡萄糖和6%~9%酒精具有一定的耐受能力。结果表明,从番茄发酵液中分离得到的酵母菌株具有良好的生长性能,可为果蔬发酵剂的开发奠定基础。     

药用真菌蝉拟青霉生物活性物质的研究进展

蝉拟青霉为虫草属真菌,是中药蝉花的无性型时期,具有较高的食用、营养和药用价值,被认为是和冬虫夏草相近的最具开发利用前景的珍贵菌类之一。作者在总结前人研究成果的基础上,综述了蝉拟青霉各种代谢产物、生物活性及发酵生产研究现状,探讨了在该研究领域存在的问题及今后的发展方向。